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CD34^(+)细胞数对单倍体造血干细胞移植治疗恶性血液病的影响
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作者 彭英楠 边志磊 +3 位作者 张素平 李丽 曹伟杰 万鼎铭 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2024年第1期1-6,共6页
背景:单倍体造血干细胞移植与较高的植入功能不良相关,因此经常要求更高的CD34^(+)细胞数量,但现有研究关于异基因造血干细胞移植CD34+细胞剂量和研究终点关系的结论是有争议的。目的:探究CD34^(+)细胞数对单倍体造血干细胞移植治疗恶... 背景:单倍体造血干细胞移植与较高的植入功能不良相关,因此经常要求更高的CD34^(+)细胞数量,但现有研究关于异基因造血干细胞移植CD34+细胞剂量和研究终点关系的结论是有争议的。目的:探究CD34^(+)细胞数对单倍体造血干细胞移植治疗恶性血液疾病临床结果的影响。方法:纳入2019年1月至2021年12月期间于郑州大学第一附属医院造血干细胞移植中心行单倍体造血干细胞移植的恶性血液病患者,总计135例。结合既往研究结果及移植中心经验,以CD34+细胞数5.0×10^(6)/kg为截止点,将队列分为2组。评估两组的移植物植入情况、复发率及非复发死亡率、总生存期和无进展生存期等相关临床指标。结果与结论:①CD34+细胞剂量与血小板的植入相关,高剂量组血小板的植入时间早于低剂量组(14 d vs.16 d,P=0.013)。②两组患者3年总生存期无显著差异(67.5%vs.53.8%,P=0.257);两组间的无进展生存期也无显著性差异(65.6%vs.44.2%,P=0.106),但根据疾病风险指数(DRI)进行分层分析后发现低危患者高剂量组的3年无进展生存期较低剂量组升高(72.0%vs.49.3%,P=0.036)。③高剂量组3年累积复发率小于低剂量组(16.0%vs.33.5%,P=0.05)。④两组100 d内非复发死亡率高剂量组大于低剂量组,但无显著差异(17.3%vs.6.7%,P=0.070);进行分层分析发现,高危患者中高剂量组100 d内非复发死亡率明显高于低剂量组(20.0%vs.3.3%,P=0.046)。⑤综上所述,输注>5.0×10^(6)/kg的CD34^(+)细胞可促进血小板早期植入,可改善移植中低危风险患者的3年无进展生存期,并且降低移植后累积复发率;但在高危患者中,高剂量CD34+细胞导致移植后100 d内的非复发死亡率增高,考虑可能与移植后早期重度急性移植物抗宿主病的发生增多相关,因此考虑对回输高剂量CD34+细胞的患者应加强移植物抗宿主病的监测。 展开更多
关键词 ^cd34^(+)细胞 单倍体造血细胞移植 恶性血液病 总生存 无进展生存 复发 非复发死亡
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CD34^+造血细胞免疫磁性高效富集仪CMSI-100的研制及应用 被引量:2
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作者 奚永志 张双喜 +4 位作者 孙玉英 郭斯启 刘楠 屠敏 孔繁华 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第3期275-276,共2页
根据免疫磁性分离原理 ,选用能产生高磁场强的磁性材料钕铁硼 ,其核心是将其设计成由低碳钢间隔的 4块钕铁硼 ,并且使每块钕铁硼的规格必须限制在 3.5cm× 2 .0cm× 0 .3cm ,以确保每块钕铁硼平面所具有的磁场强度平均可达 2 7... 根据免疫磁性分离原理 ,选用能产生高磁场强的磁性材料钕铁硼 ,其核心是将其设计成由低碳钢间隔的 4块钕铁硼 ,并且使每块钕铁硼的规格必须限制在 3.5cm× 2 .0cm× 0 .3cm ,以确保每块钕铁硼平面所具有的磁场强度平均可达 2 70 0高斯。当所切磨的钕铁硼规格达不到该标准时 ,由此产生的磁场强度 >2 70 0高斯或 <2 70 0高斯 ,对CD34+造血细胞的分离效果均不理想。经对人正常骨髓CD34+ 造血细胞的免疫磁性分离证实 ,采用CMSI 10 0富集后的CD34+ 造血细胞纯度平均 >90 % ,细胞活力 >95 % ,达到国际上最好水平 ,其性能完全可与国际通用先进的IsolexTM5 展开更多
关键词 免疫磁性分离 钕铁硼 磁场强度 ^cd34^+造血细胞 CMSI-100
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人骨髓CD34^+造血细胞体外扩增形成HPP-CFC造血祖细胞的能力 被引量:1
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作者 奚永志 张双喜 +5 位作者 孔繁华 金荔 陈兴国 魏文 张志欣 唐佩弦 《中国应用生理学杂志》 CAS CSCD 1999年第1期66-69,共4页
目的和方法:高增殖潜能集落形成细胞(HPPCFC)是表达CD34+DRLin-的最早期造血祖细胞之一,它在体外的增殖分化能力可反映造血干细胞的某些特征。结果:本文研究了人正常骨髓CD34+造血细胞在体外扩增和形成... 目的和方法:高增殖潜能集落形成细胞(HPPCFC)是表达CD34+DRLin-的最早期造血祖细胞之一,它在体外的增殖分化能力可反映造血干细胞的某些特征。结果:本文研究了人正常骨髓CD34+造血细胞在体外扩增和形成HPPCFC的能力。利用CIMS100免疫磁性分离术首先获得>90%的CD34+造血细胞以富集HPPCFC。在含有Epo+GMCSF+IL3+IL6+SCF(简EGIIS)的无基质液培条件下,CD34+造血细胞在四周内可持续产生单个核细胞和HPPCFC,并使其总量最高可达1770倍和8倍,以第2和3周为最佳时期,但不同个体CD34+造血细胞的这种能力差别较大。结论:高度纯化的人骨髓CD34+造血细胞能够在含有最佳组合造血生长因子的无基质液培条件下持续扩增,为临床应用提供了重要依据。 展开更多
关键词 造血细胞 ^cd34^+造血细胞 HPP-CFC 骨髓
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造血细胞生长因子对脐血CD_(34)^+细胞短期体外扩增的作用 被引量:8
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作者 叶韵斌 徐莉敏 +4 位作者 陈志哲 林建银 陈强 周智锋 李洁羽 《福建医科大学学报》 2003年第2期147-150,共4页
目的 探讨造血细胞生长因子 (HGF)的不同组合对脐血 CD34 + 细胞短期体外扩增的作用。 方法 用免疫磁珠法分离纯化脐血 CD34 +细胞 ,培养于无血清培养液中。加入不同的细胞因子 ,于第 4 ,7,10 ,14天检测 CD34 +细胞百分率和有核细胞 ... 目的 探讨造血细胞生长因子 (HGF)的不同组合对脐血 CD34 + 细胞短期体外扩增的作用。 方法 用免疫磁珠法分离纯化脐血 CD34 +细胞 ,培养于无血清培养液中。加入不同的细胞因子 ,于第 4 ,7,10 ,14天检测 CD34 +细胞百分率和有核细胞 (NC)总数。 结果 和对照组相比 ,各组的 NC扩增倍数随着培养时间的延长呈不同程度的增加 ,干细胞在 FL、TPO、GM- CSF、SCF、IL - 6、G- CSF、EPO和 IL - 3等因子作用下 ,NC扩增倍数在培养第 14天达高峰 ,为32 8.96倍 ;而 CD34 +细胞扩增倍数在培养第 7天达最高峰 ,但在 FL、TPO、GM- CSF、SCF、IL- 6、G- CSF等因子作用下 ,CD34 + 细胞扩增倍数最大 ,7d后达 2 5 .2 3倍 ,而后随着培养时间的延长而逐渐下降。 结论 脐血 CD34 + 细胞在HGF作用下 ,扩增时间以 7~ 10 展开更多
关键词 基因扩增 抗原 cd34 造血细胞生长因子 胎血
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人正常骨髓CD34^+造血细胞体外扩增形成红系及混合系造血祖细胞的能力 被引量:2
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作者 奚永志 孔繁华 +4 位作者 张双喜 金荔 陈兴国 唐佩弦 魏文 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1997年第4期253-255,共3页
根据阳性选择策略,采用CIMS-100免疫磁性无菌分离系统富集人正常骨髓CD34+造血细胞,然后将其在含Epo+GM-CSF+IL-3+IL-6+SCF(简EGIS)组合造血生长因子的无基质液培体系中扩增4周,定期进... 根据阳性选择策略,采用CIMS-100免疫磁性无菌分离系统富集人正常骨髓CD34+造血细胞,然后将其在含Epo+GM-CSF+IL-3+IL-6+SCF(简EGIS)组合造血生长因子的无基质液培体系中扩增4周,定期进行单个核细胞计数、BFU-E及CFU-Mix的培养。经FACS鉴定所富集的CD34+造血细胞纯度平均>90%。人正常骨髓CD34+造血细胞在该条件下均可持续产生大量单个核细胞,最高可扩增1770倍。与HPP-CFC和CFU-GM相反,BFU-E和CFU-Mix扩增量较低,最高仅为2.36和2.4倍,且仅在第1周出现,随后迅速减少至停止。 展开更多
关键词 cd34 造血细胞 体外扩增 造血细胞
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不同来源的人CD34^+造血细胞形态学与细胞化学研究 被引量:4
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作者 熊玉宁 杨科 +1 位作者 刘抗援 王景文 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第11期1059-1059,1080,共2页
目的 :探讨不同来源的人CD34 + 造血细胞形态学与细胞化学。方法 :采用CD34MultisortKit免疫磁珠分离系统 ,分离纯化出CD34 + 造血细胞 ,流式细胞仪检测纯度 ,涂片进行瑞氏 -姬姆萨染色。观察细胞形态学 :细胞化学染色观察过氧化物酶 (P... 目的 :探讨不同来源的人CD34 + 造血细胞形态学与细胞化学。方法 :采用CD34MultisortKit免疫磁珠分离系统 ,分离纯化出CD34 + 造血细胞 ,流式细胞仪检测纯度 ,涂片进行瑞氏 -姬姆萨染色。观察细胞形态学 :细胞化学染色观察过氧化物酶 (POX)、糖原 (PAS)、苏丹黑 (SB)及萘酚AS -D氯乙酸酯酶 (CE)。结果 :CD34 + 造血细胞的纯度≥ 98.8%,形态大小略大于正常淋巴细胞 ,PAS、CE、SB及POX均呈阴性。结论 :不同来源的人CD34 + 造血细胞形态学与细胞化学相似。 展开更多
关键词 造血细胞 组织细胞化学 ^cd34^+ 免疫磁珠分离系统
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人造血干/祖细胞多态性的研究:Ⅷ.人正常骨髓 CD34^+造血细胞体视学的特征 被引量:2
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作者 奚永志 张志欣 +3 位作者 张双喜 孔繁华 唐佩弦 魏文 《实验生物学报》 CSCD 1997年第3期273-283,共11页
人CD34^+造血细胞是具有高度自我更新、多向分化及重建长期造血与免疫学功能的独特体细胞。为系统探索CD34^+造血细胞的形态、细胞化学及超微结构特征,新近我们设计组合并建立了CIMS-100-FACS 440无菌二次分选术,可使所获CD34^+造血细... 人CD34^+造血细胞是具有高度自我更新、多向分化及重建长期造血与免疫学功能的独特体细胞。为系统探索CD34^+造血细胞的形态、细胞化学及超微结构特征,新近我们设计组合并建立了CIMS-100-FACS 440无菌二次分选术,可使所获CD34^+造血细胞的纯度达100%。在此基础上,本研究采用Cambri-dge Quantimet 970全自动图像分析仪对光学显微镜、扫描电镜及透射电镜下的CD34^+造血细胞进行了体视学方面的某些探讨,进一步从三维结构信息中深刻揭示CD34^+造血细胞的形态计量学特征。经扫描→模数转换←阴影校正→图像暂存←统计分析等检测,结果表明:CD34^+造血细胞的直径3.490—6.741μm,周长11.776—26.240μm,面积9.565—35.686μm^2,形状因子1.048—1.840,核浆比0.58—0.72,平均光密度0.17675—0.65100,积分光密度2717.217—9870.643。由此可见CD34^+造血细胞的确为非均一细胞群,这可能与CD34^+造血细胞的功能亚群与分化阶段密切相关。据我们所知,这是国际上首次有关人CD34^+造血细胞体视学特征的报道。 展开更多
关键词 造血细胞 细胞 cd34+造血细胞 多态性
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脐血中造血细胞CD34^+CD29^+细胞含量对移植造血重建的影响
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作者 辜少玲 廖灿 +3 位作者 吴韶清 陈劲松 许遵鹏 刘斌 《临床儿科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第2期86-87,共2页
关键词 脐血 造血细胞 ^cd34^+ ^cd29^+ 细胞含量 HSCT 造血细胞移植 血液学
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霉酚酸酯对哮喘小鼠骨髓CD_(34)^+造血细胞的干预作用
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作者 毛辉 殷凯生 +2 位作者 张希龙 李梅梅 王曾礼 《南京医科大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2005年第12期861-864,F0002,共5页
目的:研究新型免疫抑制剂霉酚酸酯对哮喘小鼠骨髓CD34+造血细胞生物活性的影响,并与糖皮质激素比较,探讨其潜在的治疗哮喘的机制及可能性。方法:以卵白蛋白(OVA)致敏并激发BALB/c小鼠建立哮喘模型。连续激发2周期间分为3组,每组6只,分... 目的:研究新型免疫抑制剂霉酚酸酯对哮喘小鼠骨髓CD34+造血细胞生物活性的影响,并与糖皮质激素比较,探讨其潜在的治疗哮喘的机制及可能性。方法:以卵白蛋白(OVA)致敏并激发BALB/c小鼠建立哮喘模型。连续激发2周期间分为3组,每组6只,分别给予生理盐水(对照,A组)、泼尼松(B组)及霉酚酸酯(C组)灌胃,末次激发后24h分别取支气管肺泡灌洗液(BALF)、外周血及骨髓,测定BALF、外周血中有核细胞的分类计数及骨髓中有核细胞总数;ELISA方法测定外周血中IL-5水平;流式细胞仪测定外周血及骨髓中CD34+造血细胞、CD4+T淋巴细胞占有核细胞的比例;免疫组化结合原位杂交法检测骨髓内表达白细胞介素5(IL-5)受体α链mRNA的CD34+造血细胞(CD34+IL-5RαmRNA+细胞)计数。结果:B、C组哮喘小鼠BALF中细胞总数、EOS计数、外周血中CD34+造血细胞计数及外周血中IL-5水平均低于A组相应指标,且差异有显著性(均P<0.05);C组BALF及外周血中EOS计数、骨髓中CD34+造血细胞计数及CD34+IL-5RαmRNA+细胞计数与B组相应指标比较,差异有显著性(均P<0.05)。结论:霉酚酯酸(MMF)可能抑制嗜酸粒细胞(EOS)、T淋巴细胞的肺内浸润,抑制CD34+造血细胞从骨髓迁移至外周血,它可能主要通过抑制淋巴细胞增殖,减少IL-5的产生,来影响骨髓EOS祖细胞的分化。 展开更多
关键词 哮喘 气道炎症 ^cd34^+ 造血细胞 霉酚酸酯
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以逆转病毒介导对人脐血CD_(34)^+造血细胞进行人MDR1基因转染的实验研究
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作者 邵晓枫 熊冬生 +7 位作者 罗梅华 卓家才 姜蓉 韩明哲 许元富 杨铭 杨天楹 杨纯正 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 2002年第10期689-693,共5页
探讨逆转录病毒介导的MDR1基因转导入脐血CD34+细胞的最佳方法,为MDR1基因转导的临床应用打基础。方法:用磷酸钙沉淀法将含有人全长MDR1cDNA的逆转录病毒载体pHaMDR1/A转到包装细胞PA317中,建立产病毒细胞系,以人脐血中分离的CD34+造血... 探讨逆转录病毒介导的MDR1基因转导入脐血CD34+细胞的最佳方法,为MDR1基因转导的临床应用打基础。方法:用磷酸钙沉淀法将含有人全长MDR1cDNA的逆转录病毒载体pHaMDR1/A转到包装细胞PA317中,建立产病毒细胞系,以人脐血中分离的CD34+造血干/祖细胞为靶细胞,在体外进行基因转染,转导的条件为:与含病毒的上清液共培养12天,每天更换病毒上清液,上清液中加入IL-3,IL-6和SCF三种造血生长因子(HGF),转染后用集落培养法测定对COL的耐药性,用PCR检测14~17天所形成集落的MDR1cDNA,计算转染率,用免疫组化法检测P170的阳性程度,并观察不同时间间隔加HGF对脐血CD34+细胞的扩增和转染的影响。结果:脐血CD34+细胞转染阳性为86.4%,P170的阳性率为77.0%,77.1%的集落对6ng/ml的COL耐受,57.4%的集落对7ng/ml的COL耐受。结论:此转染系统既能有较好的转导效果,也有较好的扩增效果,有一定的临床实用价值。 展开更多
关键词 逆转病毒介导 脐血 ^cd34^+ 造血细胞 MDR1基因 实验研究 基因转染
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妊娠及围产因素对子代脐带血CD34^(+)造血干细胞的影响分析
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作者 仝晓鑫 李惠敏 +2 位作者 翟青梅 张璐涵 丁桂凤 《生物医学工程与临床》 CAS 2023年第6期759-763,共5页
目的分析妊娠及围产因素对子代CD34^(+)造血干细胞数量和脐带血有核细胞总数的影响。方法选择乌鲁木齐市妇幼保健院2021年5月至2022年5月收集的120例健康产妇的新生儿脐带血标本,其中男性60例,女性60例;新生儿体质量2500~4000 g。采用XE... 目的分析妊娠及围产因素对子代CD34^(+)造血干细胞数量和脐带血有核细胞总数的影响。方法选择乌鲁木齐市妇幼保健院2021年5月至2022年5月收集的120例健康产妇的新生儿脐带血标本,其中男性60例,女性60例;新生儿体质量2500~4000 g。采用XE-2100全自动血液分析仪对子代脐带血中的有核细胞进行计数。采用流式细胞分析仪分析CD34^(+)造血干细胞。收集新生儿及相应产妇的临床资料,主要包括孕母年龄、孕母血型、孕母身体质量指数(BMI)、孕母过敏史、妊娠期糖尿病、妊娠期高血压、分娩方式、产次、孕周、新生儿性别、新生儿体质量、胎盘质量、是否胎膜早破、是否羊水污染、是否脐带绕颈等信息,分析其对脐带血CD34^(+)造血干细胞影响。结果妊娠期因素主要有孕母年龄、孕母血型、孕母BMI、孕母过敏史、妊娠期糖尿病、妊娠期高血压、分娩方式、产次和孕周。围产期因素主要包括新生儿性别、新生儿体质量、胎盘质量、胎膜早破、羊水污染、脐带绕颈。根据临床信息分组进行组间比较发现,孕母血型、孕母BMI、孕母过敏史、妊娠期糖尿病、妊娠期高血压、分娩方式、产次、新生儿性别、新生儿体质量、胎盘质量、是否胎膜早破、是否羊水污染、是否脐带绕颈等因素与脐带血有核细胞总数和CD34^(+)造血干细胞数量无相关性(P>0.05),而孕母年龄和孕周均与CD34^(+)造血干细胞数量呈正相关(P<0.05)。结论子代脐带血中CD34^(+)造血干细胞数量与孕母年龄和孕周密切相关,孕母的年龄越大或孕周越大则CD34^(+)造血干细胞数量越多,这为脐血库筛选脐带血入库时提供了更多的理论依据。 展开更多
关键词 妊娠因素 围产因素 子代脐带血 ^cd34^(+)造血细胞
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银屑病患者造血细胞定向分化的CD4^+CD25^+调节性T细胞活性研究 被引量:1
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作者 董峰 李新华 +1 位作者 张开明 尹国华 《临床皮肤科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第4期207-209,共3页
目的:探讨造血细胞与银屑病患者CD4+ CD25+调节性T细胞活性异常的关系。方法:在胸腺基质细胞支持下,将骨髓CD34+细胞向T细胞定向分化,免疫磁珠法分离CD4+ CD25+调节性T细胞,分别在自然增殖状态及链球菌超抗原刺激下,采用四甲基偶氮唑蓝(... 目的:探讨造血细胞与银屑病患者CD4+ CD25+调节性T细胞活性异常的关系。方法:在胸腺基质细胞支持下,将骨髓CD34+细胞向T细胞定向分化,免疫磁珠法分离CD4+ CD25+调节性T细胞,分别在自然增殖状态及链球菌超抗原刺激下,采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法和ELISA法测定定向分化的CD4+ CD25+ T细胞增殖活性及分泌细胞因子水平。结果:在自然增殖状态下,银屑病患者CD34+细胞定向分化的CD4+ CD25+ T细胞显示与正常对照相似的增殖活性及白介素(IL)-2、IL-4、IL-8、IL-10、干扰素(IFN)-γ等细胞因子分泌水平,然而,在受到A族链球菌超抗原刺激后,银屑病患者定向分化的CD4+ CD25+ T细胞较正常对照显示相对低的增殖活性及分泌IL-2、IL-10能力。结论:银屑病患者CD34+细胞定向分化的CD4+ CD25+ T细胞功能异常,提示银屑病患者调节性T细胞功能异常可能源自遗传背景决定的骨髓造血细胞活性。 展开更多
关键词 银屑病 ^cd34^+细胞 造血细胞 T淋巴细胞 调节性T细胞
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血小板生成素对CD34^+造血祖细胞的协同扩增作用 被引量:11
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作者 裴雪涛 王立生 +3 位作者 徐黎 龙红 冯凯 吴祖泽 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 1997年第3期229-235,共7页
血小板生成素(Tpo)是巨核细胞增殖分化和血小板形成的主要调控因子。为了探讨Tpo对CD34^+造血祖细胞的协同扩增作用,我们利用免疫磁珠分离系统(MACS)分选出90.11%-97.57%纯度的脐带血CD34^+细胞,在周的体外液体培养体系中,观察了Tpo... 血小板生成素(Tpo)是巨核细胞增殖分化和血小板形成的主要调控因子。为了探讨Tpo对CD34^+造血祖细胞的协同扩增作用,我们利用免疫磁珠分离系统(MACS)分选出90.11%-97.57%纯度的脐带血CD34^+细胞,在周的体外液体培养体系中,观察了Tpo与干细胞因子(SCF),IL-3,IL-6,红细胞生成素(Epo),粒-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)和粒细胞集落刺激因子(G-CSF)不同组合的扩增效率。结果表明,Tpo具有明显的协同扩增作用,细胞总数、集落形成细胞(CFC)和CD34^+细胞可分别被新增329.50±25.20倍,16.09±3.38倍和11.77±4.78倍,SCF+IL-3+IL-6+Tpo组的扩增作用最强,含Tpo实验组的扩增效率明显高于不含Tpo组;同时,含Tpo的组合还使CFU-MK,CD41a^+细胞,BFU-E和CFU-GM分别扩增了34.67±4.62倍,17.29±2.34倍,14.97±2.89倍和14.46±3.19倍。表明Tpo具有明显的扩增造血细胞的作用和刺激多系造血的活性。 展开更多
关键词 血小板生成素 ^cd34^+细胞 体外扩增
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人参总皂甙协同造血生长因子体外诱导CD34^+造血干/祖细胞扩增与分化的作用 被引量:16
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作者 王建伟 王亚平 +1 位作者 王莎莉 姜蓉 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2006年第5期959-963,共5页
为探讨人参总皂甙(totalsaponins of panaxginseng,TSPG)协同造血生长因子体外诱导CD34+造血干/祖细胞(HSC/HPC)扩增与分化的作用,收集人脐血、骨髓细胞并采用StemsepTM干细胞分选系统分离纯化CD34+HSC/HPC,用不同剂量TSPG加入不同组合... 为探讨人参总皂甙(totalsaponins of panaxginseng,TSPG)协同造血生长因子体外诱导CD34+造血干/祖细胞(HSC/HPC)扩增与分化的作用,收集人脐血、骨髓细胞并采用StemsepTM干细胞分选系统分离纯化CD34+HSC/HPC,用不同剂量TSPG加入不同组合的造血生长因子进行培养,检测细胞总数、CD34+细胞和CD33+细胞比例及集落形成细胞总数(CFC)、粒系祖细胞(CFU-GM)数量变化。结果显示:10-70μg/mlTSPG均可不同程度地提高脐血细胞总数、CFC数和CD34+细胞数,50μg/ml是最佳刺激浓度,可使细胞总数、CFC数和CD34+细胞数分别增至(2470.5±79.96)×103、(53.96±4.29)×100%和(21.86±3.09)×100%;20μg/ml是液体培养诱导骨髓CD34+细胞向粒系分化的最佳浓度,可使细胞总数、CFU-GM和CD33+细胞分别增至(133.2±9.03)×103、(26.78±1.91)×100%和(16.98±1.73)×100%;甲基纤维素半固体培养检测显示,TSPG(10-50μg/ml)均能提高CD34+细胞形成CFU-GM的集落产率,以TSPG20μg/ml效果最为明显。结论:合适剂量的TSPG能够促进CD34+造血干/祖细胞体外扩增与定向诱导分化。 展开更多
关键词 人参总皂甙 ^cd34^+造血干/祖细胞 细胞扩增 细胞分化
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人脐带间充质干细胞对脐血CD34^+细胞在NOD/SCID小鼠体内造血重建的影响 被引量:6
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作者 郝牧 漆佩静 +5 位作者 李刚 孟恒星 徐燕 李长虹 王亚非 邱录贵 《中国医学科学院学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第1期71-75,共5页
目的探讨人脐带间充质干细胞对脐血CD34^+细胞在NOD/SCID小鼠体内造血重建的影响。方法将3.5×10~5个脐血CD34^+细胞单独(单移植组)或与5.0×10~6个人脐带间充质干细胞共同(共移植组)输入经^(137)Cs 3.0Gy照射后的NOD/SCID小鼠... 目的探讨人脐带间充质干细胞对脐血CD34^+细胞在NOD/SCID小鼠体内造血重建的影响。方法将3.5×10~5个脐血CD34^+细胞单独(单移植组)或与5.0×10~6个人脐带间充质干细胞共同(共移植组)输入经^(137)Cs 3.0Gy照射后的NOD/SCID小鼠体内,观察移植后6周内小鼠外周血象的变化情况。于移植后第6周处死小鼠,采用流式细胞术检测小鼠骨髓、脾脏及外周血人源细胞(hCD45^+)含量,并分别检测小鼠骨髓中人源淋巴系(CD3/CD19)、粒系(CD33)、单核系(CD14)、血小板(CD61)、红系(CD235a)等各系血细胞比例,比较间充质干细胞共移植对CD34^+细胞植入率的影响。结果移植后3周,两组小鼠外周血象开始有不同程度恢复;移植后6周,共移植组外周血白细胞和血小板计数均已达高峰,明显高于单移植组(P<0.05),两组小鼠的红细胞计数差异无统计学意义(P>0.05)。移植后6周,共移植组骨髓及外周血中人源细胞hCD45^+CD34^+比例分别为(42.66±2.57)%和(4.74±1.02)%,明显高于单移植组的(25.27±1.67)%和(1.19±0.54)%(P=0.006)。移植后6周,共移植组小鼠骨髓内的CD19^+、CD33^+、CD14^+、CD61^+和CD235a^+细胞比例均明显高于单移植组(P<0.05),CD3^+T淋巴细胞比例明显低于单移植组(P=0.003);CD19^+ B淋巴细胞得到优势扩增,明显高于其他各系血细胞比例(P<0.05)。结论脐带间充质干细胞与脐血CD34^+细胞共移植可促进造血干细胞的植入,缩短CD34^+细胞移植后造血恢复时间。 展开更多
关键词 人脐带间充质干细胞 ^cd34^+细胞 造血重建 造血细胞移植
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增殖细胞核抗原在脐血CD34^+造血干/祖细胞中的表达及意义 被引量:5
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作者 张冬清 吴映娥 +2 位作者 罗丽莉 曾宇然 刘元生 《广东医学》 CAS CSCD 2004年第9期1014-1016,共3页
目的 探讨增殖细胞核抗原 (PCNA)在脐血造血干 /祖细胞中的表达及意义。方法 采用流式细胞仪技术对不同培养时间和不同培养条件下脐血CD34+ 细胞中PCNA的表达水平和细胞周期进行了测定。结果 新鲜分离的脐血中CD34+ 细胞低表达PCNA ... 目的 探讨增殖细胞核抗原 (PCNA)在脐血造血干 /祖细胞中的表达及意义。方法 采用流式细胞仪技术对不同培养时间和不同培养条件下脐血CD34+ 细胞中PCNA的表达水平和细胞周期进行了测定。结果 新鲜分离的脐血中CD34+ 细胞低表达PCNA ,阳性率为 (11 6± 5 2 ) % ,在体外短期培养 ,无细胞因子的组合PCNA表达逐渐下降 ,而在含有各细胞因子组合的培养体系中 ,PCNA表达水平明显增高 ,其中以SCF ,IL - 3,IL - 6 ,FL ,Tpo组合作用最显著 ,在培养第 7天时 ,PCNA蛋白表达率为 (78 2± 8 7) % ,且S/G2 /M期的细胞占 (5 9 8± 6 7) % ,明显高于培养前。结论 脐血CD34+ 细胞低水平表达PCNA ,造血生长因子对CD34+ 细胞的促增殖作用与上调PCNA蛋白的表达有关。 展开更多
关键词 增殖细胞核抗原 脐血 ^cd34^+ 造血细胞 造血细胞 细胞周期
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脐血CD34^+造血干细胞来源的树突状细胞体外培养体系的优化 被引量:4
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作者 顾镭 邢美芬 +4 位作者 季晓辉 孙志达 杨晓帆 王慧娟 张明顺 《南京医科大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2006年第10期913-917,F0002,共6页
目的:优化脐血CD34+造血干细胞(HPC)来源的树突状细胞(DCs)诱导培养方法,为体外研究CD34+HPC诱导产生功能性树突状细胞(DCs)的影响因素奠定基础。方法:淋巴细胞分离液(Ficoll)分离获得脐血单个核细胞,免疫磁珠阳性分选CD34+HPC,并用流... 目的:优化脐血CD34+造血干细胞(HPC)来源的树突状细胞(DCs)诱导培养方法,为体外研究CD34+HPC诱导产生功能性树突状细胞(DCs)的影响因素奠定基础。方法:淋巴细胞分离液(Ficoll)分离获得脐血单个核细胞,免疫磁珠阳性分选CD34+HPC,并用流式细胞术鉴定CD34+HPC纯度;比较GT(GM-CSF+TNF-α)方案和GTI(GM-CSF+TNF-α+IL-4)方案及GTI方案中TNF-α和IL-4不同时段加入对诱导培养产生的DCs成熟的影响;通过激光共聚焦显微镜观察细胞形态,流式细胞仪分析细胞表型及3H-TdR检测DCs激发异体T细胞增殖能力。结果:免疫磁珠阳性分选CD34+HPC纯度可达90%以上;将CD34+HPC按GT方案和GTI方案进行培养,均可诱导产生DCs,但经GT方案诱导的DCsCD14表达较高,CD80、CD86、CD83、CD1a表达不如经GTI方案诱导的高;而GTI方案中,以TNF-α0h加入、IL-448h加入诱导培养的DCs各表型表达相对较佳,并具有激发异体T细胞增殖能力。结论:CD34+HPC经过合适的培养体系能够诱导分化为功能性DCs,以GM-CSF与TNF-α0h加入、IL-448h加入的GM-CSF+TNF-α+IL-4方案更为可取。 展开更多
关键词 脐血 ^cd34^+HPC 树突状细胞 体外培养
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外周血CD34^+造血干细胞加适量T细胞输注进行HLA半相合的异体移植 被引量:4
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作者 梁辉 王昀 +3 位作者 郭若冰 程志英 薛惠良 顾龙君 《临床儿科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第1期28-30,53,共4页
对1例Ph+染色体的急淋患儿进行母子间HLA半相合的异体外周血造血干细胞移植 ,为避免由于HLA不相合所产生的由T细胞介导的严重移植物抗宿主病(GVHD) ,采用了CD34+细胞正性分离去除淋巴细胞 ;同时为避免由于T细胞过度去除而引起宿主抗移... 对1例Ph+染色体的急淋患儿进行母子间HLA半相合的异体外周血造血干细胞移植 ,为避免由于HLA不相合所产生的由T细胞介导的严重移植物抗宿主病(GVHD) ,采用了CD34+细胞正性分离去除淋巴细胞 ;同时为避免由于T细胞过度去除而引起宿主抗移植物反应(HVG)导致植入失败 ,在移植次日又加入部分T细胞 ,使病儿接受CD34 +细胞6×106/kg 和CD3 +细胞1.05×107/kg。结果 :随访1年来 ,红系、粒系和巨核系均恢复正常 ,临床上仅出现一过性的IIOaGVHD以及轻微的局限于口唇粘膜的cGVHD。STR位点DNA检验以及染色体检查 :移植后 +180天受体已从供体型嵌合体转为完全供体型 ,病儿获得植入成功。结果表明 ,常规剂量的CD34 +细胞移植加以适量CD3 +T细胞 ,可克服HLA部分不相配的难点 ,减轻GVHD ,同时也可避免由于过度的T细胞去除而出现的HVG。 展开更多
关键词 母子HLA半相合PBSCT ^cd34^+细胞纯化移植 ^部份cd3^+细胞同时回输 异体造血细胞移植
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两步法从CD34^+造血干细胞诱导树突状细胞 被引量:3
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作者 徐莉 康自珍 +2 位作者 王斌 蔡海波 谭文松 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第5期393-396,共4页
目的 研究如何从有限的造血干细胞获得大量的树突状细胞 (DC) ,为进一步研究树突状细胞的生化特性及临床应用提供技术支持。方法 利用免疫磁珠法 (MACS)富集CD34+ 细胞 ,先在培养体系中加入FLT3配体 (FL)、血小板生成素(TPO)及干细胞... 目的 研究如何从有限的造血干细胞获得大量的树突状细胞 (DC) ,为进一步研究树突状细胞的生化特性及临床应用提供技术支持。方法 利用免疫磁珠法 (MACS)富集CD34+ 细胞 ,先在培养体系中加入FLT3配体 (FL)、血小板生成素(TPO)及干细胞因子 (SCF)等细胞因子 ,然后对富集的细胞进行扩增 ,扩增后的细胞在GM CSF和IL 4的作用下诱导 7d ,诱导后的细胞用流式细胞仪分析树突状细胞特征性表面标记CD1a。结果 两步法能够获得大量的DC ,在第一步中用TPO/FL/SCF/IL 3/IL 6来扩增CD34+ 细胞能获得最多的DC。在相同的培养时间下 (3周 ) ,两步法能扩增出 2 74倍的DC ,大大的超过了直接诱导的扩增倍数 (2 4倍 )。并且 ,随着培养时间的增长 ,DC的扩增倍数不断上升。结论 两步法能从少量的脐血CD34+ 前体细胞诱导扩增出大量的DC ,为从病人动员的CD34+ 展开更多
关键词 两步法 造血细胞 树突状细胞 ^cd34^+细胞 诱导分化 扩增时间
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2型重组腺相关病毒对人脐血CD34^+造血干/祖细胞的转导效率研究 被引量:3
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作者 陈焱 陈方平 +3 位作者 彭建强 吴小兵 吴新华 傅敢 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2003年第6期576-578,共3页
为探讨 2型重组腺相关病毒 (rAAV 2 )载体能否有效地转导脐血CD34+造血干 /祖细胞 ,采用rAAV 2 /GFP感染经免疫磁珠法分离的脐血CD34+造血干 /祖细胞 ,在荧光显微镜下观察GFP的表达。结果显示 ,转导 19小时后感染复数 (MOI)为 2× 1... 为探讨 2型重组腺相关病毒 (rAAV 2 )载体能否有效地转导脐血CD34+造血干 /祖细胞 ,采用rAAV 2 /GFP感染经免疫磁珠法分离的脐血CD34+造血干 /祖细胞 ,在荧光显微镜下观察GFP的表达。结果显示 ,转导 19小时后感染复数 (MOI)为 2× 10 5时 ,CD34+细胞GFP基因的表达率为 4 3%。结论 :rAAV 2能有效地转导脐血CD34+造血干 /祖细胞。 展开更多
关键词 2型重组腺相关病毒 脐血 造血细胞 细胞 ^cd34^+细胞 AAV-2
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