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白藜芦醇对CD34^+CD38^- KG-1a白血病细胞凋亡的诱导作用 被引量:1
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作者 胡亮杉 杨华文 +3 位作者 李丽华 张知洪 方晓琳 曹东林 《广东医学》 CAS CSCD 北大核心 2014年第11期1650-1653,共4页
目的观察白藜芦醇(RES)诱导CD34+CD38-KG-1a白血病细胞凋亡的效应,初步探讨其作用机制。方法流式细胞术检测急性髓系白血病KG-1a细胞CD34和CD38的表达。以未加药物为对照,台盼蓝计数检测不同浓度(12.5、25.0、50.0、100、200μmol/L)RES... 目的观察白藜芦醇(RES)诱导CD34+CD38-KG-1a白血病细胞凋亡的效应,初步探讨其作用机制。方法流式细胞术检测急性髓系白血病KG-1a细胞CD34和CD38的表达。以未加药物为对照,台盼蓝计数检测不同浓度(12.5、25.0、50.0、100、200μmol/L)RES对KG-1a细胞和外周血单个核细胞增殖的影响。选择KG-1a细胞抑制率约为50%的RES浓度作为后续实验的干预因素。AnnexinV-FITC/PI染色流式细胞术检测RES诱导KG-1a细胞的凋亡效应,real-time RT-PCR检测RES对KG-1a白血病细胞Bcl家族抗凋亡Bcl-2/Bcl-xl基因和促凋亡基因Bid/Bax表达的影响,分光光度法检测RES对KG-1a细胞Caspase-3活性的影响。结果 KG-1a细胞中CD34+CD38-细胞比例占(90.23±2.57)%。RES能抑制KG-1a白血病细胞生长,呈浓度依赖性。25.0μmol/L RES对KG-1a细胞的抑制率约为50%,而该浓度对正常单个核细胞增殖无抑制作用。25.0μmol/L RES能诱导KG-1a细胞发生早期凋亡(AnnexinV-FITC+PI-)和晚期凋亡(AnnexinV-FITC+PI+)。25.0μmol/L RES作用后的KG-1a细胞,抗凋亡基因Bcl-2和Bcl-xl表达下调,促凋亡基因Bid和Bax表达升高,Caspase-3活性增强。结论 RES能调节Bcl-2家族,诱导CD34+CD38-KG-1a白血病细胞凋亡。 展开更多
关键词 白藜芦醇 BCL-2家族 ^^cd34^+ ^^cd38^- 白血病细胞 Caspase-3 凋亡
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microRNA在人脐血CD34^+CD38^-、CD34^+CD38^+细胞中的差异性表达
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作者 李欣 李小青 +4 位作者 张佳华 陈万新 刘隽 郭天南 黄士昂 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2008年第3期589-592,共4页
为进一步探讨microRNA(miRNA)在造血调控中的作用奠定基础,比较了miRNA在人脐血CD34+CD38-、CD34+CD38+细胞中的差异性表达。从人脐血中分离单个核细胞(MNC),应用FACSVantage分选流式细胞仪分选CD34+CD38-、CD34+CD38+细胞;抽提miRNA后... 为进一步探讨microRNA(miRNA)在造血调控中的作用奠定基础,比较了miRNA在人脐血CD34+CD38-、CD34+CD38+细胞中的差异性表达。从人脐血中分离单个核细胞(MNC),应用FACSVantage分选流式细胞仪分选CD34+CD38-、CD34+CD38+细胞;抽提miRNA后与miRNA芯片杂交,应用生物信息学技术分析miRNA芯片的表达结果。结果发现,miRNA在人脐血CD34+CD38+细胞的表达水平比在CD34+CD38-细胞的表达水平降低至1/2以下者共11个,表达水平升高至2倍以上者共73个,以上84个miRNA被称为"干细胞性"miRNA。经比较Georgantas等和芯片表达结果,发现有12个(14.29%,12/84)相同的miRNA。部分miRNA经历了类似于CD34在造血细胞表面的发展历程。应用生物信息学技术可寻找到新的与造血调控相关的miRNA簇及miRNA的下游靶基因。结论:"干细胞性"miRNA在正常造血中发挥着重要作用,即miRNA的系统表达模式→造血干/祖细胞基因表达谱→造血干/祖细胞的自我更新和系列定向分化。 展开更多
关键词 MICRORNA 造血 脐血 ^^cd34^+cd38^-细胞 ^^cd34^+cd38^+细胞 干细胞性miRNA
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脐血CD34^+CD38^-早期造血祖细胞的体外增殖和凋亡
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作者 田虹 黄士昂 +4 位作者 龚非力 郑金娥 贺艳丽 杨晶 陈忠 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2005年第2期229-234,共6页
为了从适龄产妇脐血中分离出CD34+CD38-细胞,在体外较长时间培养后观察分析CD34+CD38-细胞分 裂增殖、凋亡以及干细胞因子对CD34+CD38-细胞增殖的影响,用流式细胞仪从10例健康产妇脐血中分选出 CD34+和CD38-标记的脐血原始细胞,在添加I... 为了从适龄产妇脐血中分离出CD34+CD38-细胞,在体外较长时间培养后观察分析CD34+CD38-细胞分 裂增殖、凋亡以及干细胞因子对CD34+CD38-细胞增殖的影响,用流式细胞仪从10例健康产妇脐血中分选出 CD34+和CD38-标记的脐血原始细胞,在添加IL-3、IL-6、GM-CSF、EPO、IGF-1和SCF 6种混合因子的干细胞培养基 中培养6个月,观察细胞并绘制生长曲线,用单细胞凝胶电泳检测干细胞因子对CD34+CD38-细胞生长的影响和 用流式细胞仪检测CD34+ CD38-细胞凋亡情况。结果表明:脐血CD34+CD38-细胞可在体外较长时间培养增殖, 无异常或过度的细胞凋亡发生。结论:通过控制培养条件,脐血CD34+CD38-早期造血祖细胞可在体外较长时间 培养增殖,以作为大量脐血原始细胞移植的细胞来源。 展开更多
关键词 脐血 ^^cd34^+ ^^cd38^-细胞 体外增殖
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慢性髓系白血病患者CD34^+ CD38^-细胞水平JunB和CDH13基因启动子区域的甲基化状态研究 被引量:3
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作者 王晓娟 李娟 +3 位作者 傅冰洁 郭林林 张佳华 黄士昂 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2009年第6期1405-1408,共4页
慢性髓系白血病(CML)是骨髓造血干细胞恶性增殖的克隆性疾病,在CML患者细胞水平由于JunB和CDH13基因启动子区甲基化而使这2个抑癌基因的表达受损。为了探讨正常人和CML患者CD34+ CD38-细胞水平JunB和CDH13(cadhe rin-13)基因启动子区域... 慢性髓系白血病(CML)是骨髓造血干细胞恶性增殖的克隆性疾病,在CML患者细胞水平由于JunB和CDH13基因启动子区甲基化而使这2个抑癌基因的表达受损。为了探讨正常人和CML患者CD34+ CD38-细胞水平JunB和CDH13(cadhe rin-13)基因启动子区域甲基化状态及表达水平的差异,应用流式细胞仪分选出CD34+ CD38-细胞,采用甲基化特异性聚合酶链反应(MS-PCR)检测5例正常人和8例CML患者骨髓CD34+ CD38-细胞JunB和CDH13基因启动子区域甲基化状态,用实时定量PCR(RT-PCR)检测JunB和CDH13基因的表达情况。结果表明:JUNB和CDH13基因在正常人骨髓CD34+ CD38-细胞中呈完全性非甲基化状态,CML患者骨髓CD34+ CD38-细胞中JunB和CDH13基因启动子区甲基化比例分别为87.5%(7/8)和50%(4/8),明显高于正常人(p<0.05)。CML患者骨髓CD34+ CD38-细胞中JunB和CDH13基因mRNA相对表达水平与正常人的相比明显降低(2-??CT分别为1/5.21和1/10.63)。结论:在CML患者骨髓CD34+ CD38-细胞中JunB和CDH13基因启动子区域都发生了高度的甲基化,它们的mRNA表达水平也明显降低,JunB和CDH13基因启动子区域甲基化在CML的发病机制中起到一定的作用,甲基化检测对CML的靶向治疗及新的治疗方法具有重要意义。 展开更多
关键词 JUNB cdH13 DNA甲基化 慢性髓系白血病 ^^cd34^+cd38^-细胞
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Effect of Homoharringtonine on Bone Morrow CD34^+CD7^+ Cells in Chronic Granulocytic Leukemia
5
作者 李玉峰 邓之奎 +1 位作者 宣衡报 陈宝安 《Chinese Journal of Cancer Research》 SCIE CAS CSCD 2007年第2期141-145,共5页
Objective: To explore the effect of homoharringtonine (HHT) on bone morrow CD34^+CD7^+ cells in chronic granulocytic leukemia (CGL). Methods: The changes of bone morrow CD34^+CD7^+ cells were observed after ... Objective: To explore the effect of homoharringtonine (HHT) on bone morrow CD34^+CD7^+ cells in chronic granulocytic leukemia (CGL). Methods: The changes of bone morrow CD34^+CD7^+ cells were observed after the treatment of HHT in 23 cases with CGL. The proliferation and apoptosis of CD34^+CD7^+ cells treated with HHT in vitro were studied. Results: The proportion of CD34^+CD7^+ cells in CGL (0.145±0.021) was higher than that of normal control (0.052±0.013). The proportion of CD34^+CD7^+ cells in patients who got cytogenetic responses to HHT (0.072±0.020) decreased remarkably, but not in those patients who did not got cytogenetic responses to HHT, (0.137±0.023). the proliferation of CD34^+ cells was inhibited and the proportion of CD34^+CD7^+ cells decreased after cultured with HHT (0.134 in 24 h, 0.126 in 48 h and 0.102 in 72). The apoptosis rate of CD34^+CD7^+ cells was higher than that in CD34^+CDT cells (35.39%±4.39% versus 24.57%±4.01%, P〈0.05) 72 h after culture with HHT. Conclusion: The proportion of CD34^+CD7^+ cells in CGL was higher than that of normal control and HHT may inhibit the proliferation and induce apoptosis of bone marrow CD34^+CD7^+ cells. 展开更多
关键词 HOMOHARRINGTONINE Chronic granulocytic leukemia ^^cd34^+cd7^+ cells
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流式细胞检测术分析胎肝CD_(34)^+细胞成分
6
作者 黄斌 黄宁 +3 位作者 许关怡 王斌 朱玉香 潘欣 《中国输血杂志》 CAS CSCD 2003年第2期90-92,共3页
目的 了解胎肝中CD3 4 + CD3 8+ 和CD3 4 + CD3 8-细胞数量组成。方法 从胎肝中分离细胞 ,制成细胞悬液 ;经淋巴细胞分离液密度梯度离心 ,收集单个核细胞 ;洗涤两次 ,制备细胞母液 ;取约 1× 10 6细胞经CD3 4 CD3 8荧光抗体标记 ... 目的 了解胎肝中CD3 4 + CD3 8+ 和CD3 4 + CD3 8-细胞数量组成。方法 从胎肝中分离细胞 ,制成细胞悬液 ;经淋巴细胞分离液密度梯度离心 ,收集单个核细胞 ;洗涤两次 ,制备细胞母液 ;取约 1× 10 6细胞经CD3 4 CD3 8荧光抗体标记 ,流式细胞仪检测CD3 4 + CD3 8+ 和CD3 4 + CD3 8-细胞含量 ;用红细胞裂解液裂解残留在MNCs中的红细胞 ,统计肝细胞中MNCs的相对总数 ,最终统计出胎肝中CD3 4 + 和CD3 4 + CD3 8-细胞的相对数量。结果  2 2~ 30W胎龄胎肝MNC中CD3 4 + 细胞平均为 12 .0 2 %± 4 .0 0 % ,CD3 4 + CD3 8-细胞平均为 6 .17%± 5 .0 8% ,CD3 4 + CD3 8-细胞在CD3 4 + 细胞中约占 5 1.0 0 %± 32 .5 6 % ;该期胎肝组织中CD3 4 + 细胞和CD3 4 + CD3 8-细胞相对总数和胎龄有一定的相关性 ,30W时明显高于 2 2W。结论  2 2~ 30W胎龄胎肝中的CD3 4 + 细胞和CD3 4 + CD3 8-细胞相对百分率都高于胎儿脐血、新生儿脐血、成人骨髓和外周血的百分率 ;CD3 4 + CD3 8-细胞在CD3 4 + 展开更多
关键词 流式细胞检测术 胎肝 ^^cd34^+细胞 ^^cd34^+cd38^+细胞 ^^cd34^+cd38^-细胞 单个核细胞
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CD7阳性急性髓系白血病骨髓干/祖细胞5个基因表达的研究 被引量:10
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作者 吴红红 曹晖 +10 位作者 王亚哲 王东侠 林海荣 秦亚溱 常艳 郝乐 李玲娣 李金兰 阮国瑞 黄晓军 刘艳荣 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2009年第2期298-303,共6页
本研究探讨abca5、mdr-1、kdr、dapk和irf-15个基因在CD7'急性髓细胞性白血病干/祖细胞的表达。利用实时定量RT-PCR(RQ-PCR)方法检测了15例正常骨髓(NBM)和16例AML患者骨髓单个核细胞(MNC)中5个基因的表达。采用流式细胞仪(FCM)分选... 本研究探讨abca5、mdr-1、kdr、dapk和irf-15个基因在CD7'急性髓细胞性白血病干/祖细胞的表达。利用实时定量RT-PCR(RQ-PCR)方法检测了15例正常骨髓(NBM)和16例AML患者骨髓单个核细胞(MNC)中5个基因的表达。采用流式细胞仪(FCM)分选8例NBM和21例AML患者骨髓CD34'CD38+祖细胞和CD34+CD38-干细胞,利用微量细胞RQ-PCR方法检测分选细胞中5个基因的表达。结果表明:NBMMNC均表达这5个基因,其中irf-1与dapk表达水平最高,相对表达量分别为4.08和3.86;abca5和mdr-1表达水平较低,为0.49和0.84;kdr表达最低为0.02。在经分选的CD34'CD38+祖细胞中,dapk和irf-1表达明显减低(p<0.05),kdr表达明显增加(P<0.05),其余2个基因无明显变化。在CD34'CD38-Lin-干细胞中,5个基因的表达均高于CD34+CD38+祖细胞,普遍增加至近2倍,而kdr增加了3倍,其中kdr和irf-1表达的增加具有统计学差异(P<0.05)。与NBM相比,AMLMNC中5个基因的表达水平均有不同程度减低,以abca5、mdr-1、kdr和dapk最为显著(p<0.05)。与AMLMNC相比,AMLCD34+CD38+细胞中,irf-1和dapk表达明显减低(p<0.05),其余3个基因表达增加,以kdr表达增加有统计学意义(p<0.05)。AMLCD34+CD38+与CD34+CD38-细胞比较,发现5个基因在CD34+CD38-细胞中的表达均增加,尤以kdr和irf-1的表达增加有意义(p<0.05)。AMLCD34+CD38-CD7+细胞与CD34'CD38-CD7-细胞中5个基因的表达均比CD34'CD38'细胞中的高,其中只有CD34'CD38-CD7+细胞中KDR和CD34'CD38-CD7-细胞中KDR和irf-1的表达增加并具有统计学差异(P<0.05)。结论:NBM中kdr主要表达在干/祖细胞中,而dapk和irf-1主要表达在较分化的细胞中。5个基因在干细胞阶段的表达均高于祖细胞阶段。AMLCD34+CD38-CD7+细胞与CD34+CD38-CD7-都具有干/祖细胞的基因表达特点。 展开更多
关键词 急性髓系白血病 白血病干细胞 ^^cd7^+AML细胞 ^^cd34^+cd38-cd7^+细胞 ^^cd34^+cd38-cd7-细胞
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人脐血CD34^+ CD38^-细胞免疫表型和染色体核型特征分析 被引量:1
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作者 田虹 郑金娥 +3 位作者 龚非力 王兴兵 黄士昂 陈忠 《中华血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第5期257-260,共4页
目的分离脐血干/祖细胞(CD34+CD38-)进行体外长期培养,观察分析其增殖、细胞表面分子标志和染色体核型的特征。方法用流式细胞仪分选CD34FITC和CD38PE标记的CD34+CD38-脐血原始细胞,在含细胞生长因子IL3、IL6、GMCSF、EPO、SCF和胰岛素... 目的分离脐血干/祖细胞(CD34+CD38-)进行体外长期培养,观察分析其增殖、细胞表面分子标志和染色体核型的特征。方法用流式细胞仪分选CD34FITC和CD38PE标记的CD34+CD38-脐血原始细胞,在含细胞生长因子IL3、IL6、GMCSF、EPO、SCF和胰岛素样生长因子的干细胞培养基中培养6个月,用流式细胞术检测体外培养30d的干/祖细胞表面标记,并用G显带方法分析其染色体核型。结果在一定培养条件下,经7~12d培养,脐血干/祖细胞(CD34+CD38-)开始增殖。培养6个月后,每孔接种1个细胞,细胞数增殖至250~350个;每孔接种10个细胞,细胞数可增殖至400~500个。每孔接种1个细胞其细胞增殖峰持续时间(8~9代)比接种10个细胞(6~7代)长。经体外长期培养增殖,细胞仍强烈显示干/祖细胞表面分子标记(CD34+CD38-);细胞染色体数目、结构未见异常。结论脐血干/祖细胞(CD34+CD38-)经体外特异性培养增殖,可为大量脐血干/祖细胞移植提供细胞来源。 展开更多
关键词 人脐血 ^^cd34^+cd38^-细胞免疫表型 染色体核型 造血干细胞
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免疫磁珠分选系统在急性髓系白血病干细胞分离中的应用 被引量:5
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作者 徐瑞荣 王敬毅 +3 位作者 崔兴 王琰 胡述博 李丽珍 《浙江中西医结合杂志》 2008年第10期610-612,共3页
目的:采用免疫磁珠分选系统(MACS)分离人白血病骨髓CD34+、CD38-干细胞群。方法:收集人白血病骨髓,Percoll密度梯度离心分离单个核细胞,CD34、38磁性标记,MACS分离纯化CD34+、CD38-干细胞群,流式细胞仪检测其纯度和分选前后CD34+、CD38... 目的:采用免疫磁珠分选系统(MACS)分离人白血病骨髓CD34+、CD38-干细胞群。方法:收集人白血病骨髓,Percoll密度梯度离心分离单个核细胞,CD34、38磁性标记,MACS分离纯化CD34+、CD38-干细胞群,流式细胞仪检测其纯度和分选前后CD34+、CD38-百分比,计算回收率。结果:分选后的CD34+、CD38-细胞纯度达72.6±3.2%,回收率85.8±1.2%。结论:免疫磁珠分选系统是一种有效的白血病干细胞分离提纯方法,所得细胞纯度比较高。 展开更多
关键词 ^^白血病干细胞cd34^+ ^^cd38^- 免疫磁珠分选系统
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