脂肪酸移位酶CD36/SR-B2及其介导的长链脂肪酸跨膜转运

长链脂肪酸是维持机体正常代谢的重要营养素,其吸收、转运和代谢对动物的健康、生长和生产具有重要意义。近年来,研究发现一些脂肪酸转运蛋白介导长链脂肪酸的跨膜转运。脂肪酸移位酶CD36/SR-B2是一种整合膜蛋白,能特异性介导脂肪酸在多种细胞中的跨膜转运。本文对CD36/SR-B2的由来、亚细胞定位、功能调控及其介导的长链脂肪酸跨膜转运进行概述,探讨其对脂质代谢的调控机制。

血清可溶性CD36、抵抗素、能量平衡相关蛋白联合预测2型糖尿病合并非酒精性脂肪性肝病的价值探讨

目的探讨血清可溶性CD36(sCD36)、抵抗素、能量平衡相关蛋白(Adropin)联合对2型糖尿病(T2DM)合并非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)的预测价值。方法前瞻性选取石家庄市第二医院2018年5月至2021年5月收治的90例T2DM合并NAFLD病人(A组)、90例单纯T2DM病人(B组),同期选取90例体检健康者(对照组)作为研究对象。通过酶联免疫吸附测定检测研究对象血清sCD36、抵抗素、Adropin表达水平,对比分析三组sCD36、抵抗素、Adropin表达水平差异;分析sCD36、抵抗素、Adropin表达相关性;logistic回归分析T2DM合并NAFLD的影响因素;受试者操作特征曲线(ROC曲线)分析sCD36、抵抗素、Adropin三者联合对T2DM合并NAFLD的预测价值。结果A组病人血清sCD36(63.7±15.6)ng/L、抵抗素(3.15±0.46)μg/L水平均高于B组[(43.8±14.2)ng/L、(2.72±0.68)μg/L]和对照组[(22.9±5.7)ng/L、(2.58±0.39)μg/L](P<0.05),血清Adropin水平(66.28±27.62)ng/L均低于B组(86.73±25.46)ng/L和对照组(128.59±45.22)ng/L,差异有统计学意义(P<0.05)。sCD36与抵抗素表达水平呈正相关(r=0.29,P<0.05),Adropin与sCD36表达呈负相关(r=−0.57,P<0.05)。logistic回归分析显示,sCD36,抵抗素,总胆固醇(TC)是T2DM合并NAFLD的影响因素(P<0.05)。ROC曲线分析显示,sCD36、抵抗素、Adropin单独及三者联合预测T2DM合并NAFLD的曲线下面积(AUC)分别为0.81、0.74、0.72、0.89,三者联合对T2DM合并NAFLD的预测效能显著高于单指标独立预测(P<0.05)。结论T2DM合并NAFLD病人血清sCD36、抵抗素水平升高,Adropin水平降低,三者联合对预测T2DM合并NAFLD具有较高效能。

鹅Apo A1,CD36和DGAT2基因的cDNA克隆与序列分析

利用RACE技术,克隆获得了鹅Apolipoprotein A-1(Apo A1),Fatty acid translocase(CD36)和Diacylglycerol O-acyltransferase 2(DGAT2)基因的c DNA序列,包括全长的编码区序列(coding sequence,CDS)。结果表明,获得的鹅Apo A1基因的c DNA序列长度为1 106 bp(Gen Bank accession:KF460562),包括135 bp的5’UTR(untranslated region,UTR)序列,795 bp编码区和176 bp的3’UTR序列,编码265个氨基酸。获得的鹅CD36基因的c DNA序列长度为2 262 bp(Gen Bank accession:KF460563),包括196 bp的5’UTR序列,1 416bp编码区和650 bp的3’UTR序列,编码472个氨基酸。获得的鹅DGAT2基因的c DNA序列长度为1 341 bp(Gen Bank accession:KF460564),包括93 bp的5’UTR序列,1 077 bp编码区和171 bp的3’UTR序列,编码359个氨基酸。同源性分析结果表明,鹅这3个基因c DNA与鸭的同源性最高,达到90%以上,与人等哺乳动物的同源性均较低。

2型糖尿病大鼠心肌脂肪酸转运体FAT/CD36的表达变化及其对脂肪酸代谢的影响

在心血管疾病的众多危险因素中,糖尿病日益受到人们的重视。糖尿病时高血糖、高胰岛素及血脂异常可加重冠状动脉硬化的程度,增高冠心病的发病率,同时糖尿病亦是非缺血性心力衰竭的重要病因。

血浆sCD36与2型糖尿病非酒精性脂肪肝的关系

目的研究血浆可溶性CD36(s CD36)与2型糖尿病(T2DM)合并非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)的关系。方法检测正常对照组(A组,39例)、T2DM未合并NAFLD组(B组,39例)和T2DM合并NAFLD组(C组,59例)患者的血浆s CD36水平,计算C组的肝脏脂肪含量(LFC)及NAFLD纤维化评分(NFS),测定上述3组糖脂代谢指标、肝功能指标及炎症指标。方差分析法比较上述指标在3组中的差异;相关分析法分析C组患者上述各项指标与s CD36的相关性;多元逐步回归法分析C组s CD36的影响因素。结果血浆s CD36(μg/L)水平在B组(3.87±1.16)、C组(5.72±1.79)均高于A组(2.57±0.93),且C组高于B组(均P<0.01);相关分析示C组的s CD36水平与体质量指数(BMI)、腰围、内脏脂肪面积、空腹胰岛素(FINS)、胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)、游离脂肪酸(FFA)、丙氨酸转氨酶(ALT)、肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-6、LFC、NFS呈正相关(均P<0.05),多元逐步回归分析示FFA、LFC、TNF-α、IL-6是s CD36的影响因素。结论血浆s CD36与脂肪肝严重程度、肝脏损伤以及脂肪性肝纤维化有关,可能成为T2DM合并NAFLD的血浆标志物,CD36可能通过炎症机制参与T2DM合并NAFLD的发生发展。

CD36基因多态性与皖北地区汉族2型糖尿病合并颈动脉粥样硬化的关系

目的:探讨CD36基因rs1761667和rs10499859位点单核苷酸多态性与皖北地区汉族人群2型糖尿病(T2DM)合并颈动脉粥样硬化(CA)的相关性。方法:选取2017年12月至2018年12月于蚌埠医学院第一附属医院内分泌科住院的T2DM患者101例,按有无CA分为T2DM合并CA组(n=56)和单纯T2DM组(n=45)。另选择同期在本院行体格检查的健康志愿者80例为对照组。采用聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)技术对3组患者rs1761667和rs10499859的基因型进行检测;Logistic回归分析方法分析T2DM及T2DM合并CA发生的危险因素。结果:3组rs1761667位点和rs10499859位点的等位基因频率及基因型比较,差异无统计学意义(P>0.05);T2DM合并CA组和单纯T2DM组体重指数、糖化血红蛋白(HbA1c)和低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)水平均高于对照组,高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)水平低于对照组(均P<0.05)。Logistic回归分析显示:体重指数为T2DM发生的危险因素,HDL-C为T2DM的保护因素(P<0.05)。结论:皖北地区汉族人群CD36基因rs1761667和rs10499859多态性可能与T2DM合并CA的发生无关。

棕榈酸上调FAT/CD36表达致HepG2细胞脂质积聚的机制研究

目的观察脂肪酸转位酶FAT/CD36在棕榈酸诱导的HepG2细胞内脂质积聚中的作用,并探讨其分子机制。方法 HepG2细胞分对照组和棕榈酸组,用Western blot、双荧光素酶报告基因、荧光定量PCR、多聚核糖体分析检测棕榈酸对CD36表达、启动子活性和蛋白翻译效率的影响;油红O染色和FFA定量测定反映细胞内脂质含量;荧光显微镜实时观察细胞对FFA的动态摄入。然后将小干扰RNA转染到HepG2细胞,构建低表达CD36的HepG2细胞和阴性对照HepG2。用油红O染色,FFA定量和荧光显微镜观测棕榈酸负荷的转染细胞内脂质积聚和FFA摄取。结果棕榈酸能促进HepG2细胞CD36的表达,增强其启动子活性,增加蛋白翻译效率;棕榈酸组细胞内脂滴增多,FFA含量(240.17±19.83)ng/mg明显高于对照组(144.60±53.52)ng/mg(P<0.05),脂肪酸摄取速度也明显快于对照组;低表达CD36的HepG2细胞中CD36的mRNA和蛋白含量仅为阴性对照细胞的58%和50%。低表达CD36的HepG2细胞内脂滴明显少于阴性对照,FFA水平(98.38±14.18)ng/mg较阴性对照组(240.17±21.12)ng/mg明显减低(P<0.05),细胞对FFA的摄取也减慢。结论棕榈酸在转录和翻译水平促进HepG2的CD36表达,导致细胞内脂质积聚。

葛根芩连祛浊方联合西药治疗2型糖尿病合并非酒精性脂肪性肝炎的疗效及对血浆可溶性CD36、脂肪分化相关蛋白的影响

目的:探讨葛根芩连祛浊方联合西药治疗2型糖尿病(T2DM)合并非酒精性脂肪性肝炎(NASH)患者的疗效及对血浆可溶性CD36(sCD36)、脂肪分化相关蛋白(ADRP)水平的影响。方法:选取2019年5月至2020年5月我院内分泌科收治住院的T2DM合并NASH患者62例,随机分为两组,各31例。对照组患者在常规治疗基础上加服二甲双胍肠溶胶囊和阿托伐他汀钙片;中药组患者,在对照组患者治疗基础上加服自拟葛根芩连祛浊方汤剂。比较两组患者治疗前后血糖、血脂、蛋白、促炎性因子相关指标的变化及临床疗效。结果:治疗后两组患者的FPG、2 hPG、FINS、HOMA-IR、TG、Chol、FFA、sCD36、ADRP、CRP、IL-6、TNF-α水平均比治疗前下降,且中药组患者各指标下降更明显(P<0.05);治疗后两组患者的症状积分均比治疗前降低,且中药组患者降低更显著(P<0.05);中药组患者NASH的治疗总有效率为90.32%,明显高于对照组的70.97%。两组患者不良反应事件发生率比较,无统计学意义(P>0.05)。结论:葛根芩连祛浊方联合西药治疗T2DM合并NASH临床疗效显著,能改善HOMA-IR,达到降糖调脂,纠正炎症状态的目的。

CD_(36)基因多态性对2型糖尿病患者血脂和CRP的影响

目的观察2型糖尿病(T2DM)患者CD36内含子3[TG]重复序列基因多态性分布,探讨该基因多态性对T2DM患者血脂、C反应蛋白(CRP)的影响。方法应用PCR直接测序法对193例T2DM患者(T2DM组)及80例正常健康体检者(对照组)的CD36内含子3[TG]重复序列基因多态性进行分析,并观察该基因多态性对血脂、CRP的影响。结果两组CD36内含子3全部为杂合子,且存在[TG]重复序列,但其重复频数在11/>11、12/>12、>12/>12中均无统计学差异。在T2DM患者中HDL-C异常组与HDL-C正常组、LDL-C异常组与LDL-C正常组、CRP异常组和CRP正常组CD36内含子3[TG]重复序列基因多态性分布比较均有统计学意义(P均<0.05)。结论 CD36内含子3[TG]重复序列基因多态性与T2DM患者HDL-C、LDL-C、CRP水平有关。

2型糖尿病患者单核细胞亚群CD36水平与Lp-PLA2表达的研究

目的探讨2型糖尿病(T2DM)患者单核细胞亚群CD36在促进脂蛋白相关磷脂酶A2(Lp-PLA2)分泌中的作用。方法选择2018年1—11月在盐城市第三人民医院就诊的T2DM患者50例作为T2DM组。T2DM组包括T2DM合并动脉粥样硬化(As)24例和无As 26例,健康对照组26例(HC组)。流式细胞术(FCM)检测外周血单核细胞亚群CD36平均荧光强度(MFI);分选单核细胞亚群,诱导成巨噬细胞,FCM检测其摄取Dil-氧化低密度脂蛋白(ox-LDL);oxLDL刺激24 h,化学发光法检测上清液Lp-PLA2浓度。结果与HC组相比,T2DM患者中间型单核细胞CD36 MFI升高,且与血清Lp-PLA2浓度呈正相关(P<0.05),合并As患者升高更显著(P<0.05)。T2DM患者中间型单核细胞诱导的巨噬细胞摄取Dil-ox-LDL和分泌Lp-PLA2高于HC组(P<0.05),此作用被CD36阻断性抗体抑制。结论T2DM患者中间型单核细胞高表达CD36,摄取较多的ox-LDL,促进细胞分泌Lp-PLA2,参与动脉粥样硬化(As)的形成。

血浆可溶性CD36与2型糖尿病及亚临床大血管病变的关系

目的 比较糖耐量正常人群、2型糖尿病及亚临床大血管病变患者血浆可溶性CD36（sCD36）的水平.方法 收集2型糖尿病患者196例及社区糖耐量正常人群135例,根据颈动脉超声分为糖尿病合并亚临床大血管病变组（SMDM组,118例）、单纯糖尿病组（DM组,78例）、亚临床大血管病变组（SMD组,42例）和对照组（NC组,93例）,比较4组sCD36水平及其他临床和理化参数.结果 SM组、DM组及SMDM组的sCD36水平显著高于NC组（P＜0.05）,糖尿病与亚临床大血管病变对sCD36水平有正交互作用（F =5.741,P＜0.05）.Logistic回归显示,血浆sCD36是单纯亚临床大血管病变（OR =2.444,95％ CI：1.449 ～4.125,P=0.001）及糖尿病患者合并亚临床大血管病变（OR=1.248,95％ CI：1.038～1.499,P=0.018）和发生2型糖尿病的危险因素（OR=1.206,95％ CI：1.026～1.418,P=0.024）.结论 血浆sCD36水平可能是2型糖尿病与亚临床大血管病变的风险标志物.

冠心病2型糖尿病患者血浆sCD36水平与炎症指标的相关性研究

目的探讨冠心病2型糖尿病患者血浆可溶性CD36(sCD36)水平与炎症指标的关系。方法回顾性分析杭州市第三人民医院2018年1月至2021年5月收治的冠心病2型糖尿病35例(冠心病2型糖尿病组)、冠心病35例(冠心病组),选择同期体检正常者35例为对照组。冠心病2型糖尿病组根据随访期间是否发生不良心血管事件分为预后良好亚组23例和预后不良亚组12例。分析sCD36与超敏C反应蛋白(hs-CRP)、白细胞介素-6(IL-6)及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的关系。结果冠心病2型糖尿病组糖化血红蛋白(HbA1C)、sCD36水平均高于冠心病组、对照组(均P<0.05);预后不良亚组HbA1C、sCD36水平均高于预后良好亚组(均P<0.05)。冠心病2型糖尿病sCD36与hs-CRP、IL-6、TNF-α均呈正相关(r=0.918、0.782、0.793,均P<0.05)。多重线性回归分析显示,hs-CRP、IL-6、TNF-α均为冠心病2型糖尿病患者sCD36水平的影响因素(均P<0.05)。结论冠心病2型糖尿病患者血浆sCD36水平与hs-CRP、IL-6和TNF-α及预后相关。

罗格列酮对2型糖尿病患者外周血单核细胞CD36表达的影响

目的:观察2型糖尿病患者外周血单核细胞CD36的表达及罗格列酮对其表达的影响,探讨其可能的作用机制。方法:采用流式细胞仪测定2型糖尿病患者外周血单核细胞CD36的表达,并观察罗格列酮治疗后的变化;分析CD36与2型糖尿病各临床指标间的关系。结果:2型糖尿病组患者单核细胞CD36表达明显高于正常对照组(745.9±281.3vs406.3±80.2,P<0.01);动脉粥样硬化组CD36表达明显高于无动脉粥样硬化组(878.2±296.1vs584.2±148.3,P<0.01)。罗格列酮治疗后,患者单核细胞CD36表达、空腹血糖(FBG)、餐后血糖(PBG)、HbA1c、空腹胰岛素(FIN)、餐后胰岛素(PIN)、胰岛素抵抗程度(HOMA-IR)均降低,与治疗前、安慰剂组均有统计学差异(P<0.05或P<0.01)。糖尿病患者单核细胞CD36表达与FBG(r=0.55,P<0.05)、HbA1c(r=0.62,P<0.01)、HOMA-IR(r=0.64,P<0.01)正相关,与PBG、FIN、PIN无明显相关。结论:罗格列酮可能通过有效控制血糖、降低胰岛素抵抗等途径来降低2型糖尿病患者外周血单核细胞CD36的表达。

2型糖尿病并发血管病变患者血清中sCD36和hs—CRP相关性分析

目的：血管病变是2型糖尿病（T2DM）常见并发症之一，通过检测患者血清sCD36和超敏c反应蛋白（hs—CRP），来探讨T2DM并发血管病变患者血清sCD36和hs—CRP的相关性。方法：采用酶联免疫吸附试验（ELISA法）测定sCD36；采用胶乳增强免疫比浊法测定hs-CRP。结果：单纯T2DM组sCD36及hs-CRP水平分别是（2．15±0．65）ng／L和（3．45±1．52）mg／L，T2DM并发心血管病变患者组分别是（3．35±0．35）ng／L和（5．02±2．15）mg／L，健康对照组分别是（1．41±0．31）ng／L和（1．31±0．89）mg／L。以上结果显示T2DM并发血管病变组sCD36及hs—CRP水平高于单纯T2DM组，并且明显高于健康对照组，组间差异有统计学意义（P〈0．01），且sCD36及hs—CRP水平呈正相关（P〈0．05）。结论：T2DM并发心血管病变原因与患者血清sCD36和hsCRP的水平密切相关。动态测定这两项指标，对于早期预测T2DM血管并发症的发生，改善胰岛素抵抗，积极干预血管炎症过程，对发生T2DM并发血管疾病控制和治疗有积极意义。

广西地区人群CD36基因rs17154181和rs1761667位点多态性与2型糖尿病大血管病变的关系

目的探讨CD36基因rs17154181、rs1761667位点多态性与2型糖尿病患者发生大血管病变的关系。方法选取2012年12月—2014年6月于广西医科大学第一附属医院内分泌代谢科住院治疗的2型糖尿病患者112例为病例组,并选取同期于本院体检健康者65例为对照组。记录两组一般资料,并检测相关生化指标。提取外周血DNA,CD36基因rs17154181和rs1761667经PCR扩增后分析基因型。结果两组CD36基因rs17154181、rs1761667位点基因型和等位基因频率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。病例组不同程度糖尿病大血管病变患者年龄、总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)水平比较,差异有统计学意义(P<0.05);其中,临床动脉粥样硬化和亚临床动脉粥样硬化患者年龄大于无大血管病变患者,TC水平低于无大血管病变患者;亚临床动脉粥样硬化患者TG水平低于无大血管病变患者(P<0.05)。病例组不同程度糖尿病大血管病变患者CD36基因rs17154181、rs1761667位点基因型及等位基因频率比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。病例组rs17154181位点不同基因型患者收缩压比较,差异有统计学意义(P<0.05),其中,基因型AG患者收缩压高于基因型AA患者(P<0.05)。多因素Logistic回归分析显示,年龄、合并高血压、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)进入回归方程,是2型糖尿病患者发生糖尿病大血管病变的影响因素(P<0.05),而rs17154181、rs1761667位点基因型未进入回归方程(P>0.05)。结论本研究未发现CD36基因rs17154181、rs1761667位点多态性与广西地区2型糖尿病患者发生大血管病变有关,其多态性可能不是CD36与糖脂代谢有关的功能性多态位点。

吉林松原地区CD36基因单体型与2型糖尿病的相关性研究

目的对吉林松原郭尔罗斯自治县蒙古族和汉族人群中2型糖尿病(T2MD)患者CD36内含子3(intron 3)[TG]重复序列基因多态性分布情况进行研究,探讨该基因多态性与2型糖尿病的相关性。方法应用PCR和直接测序法对40例正常组和193例2型糖尿病患者CD36内含子3[TG]重复序列基因多态性进行分析。结果①CD36内含子3[TG]重复序列有5种单体型,即[TG]重复次数为11、12、13、15、16次。②正常组与2型糖尿病患者之间CD36内含子3[TG]重复序列各种单体型及基因型分布差异无统计学意义(P>0.05)。③蒙古族与汉族之间CD36内含子3[TG]重复序列各种单体型及基因型分布差异无统计学意义(P>0.05)。④CD36内含子3[TG]重复序列13次的单体型及基因型在蒙古族人群中正常组与2型糖尿病患者之间分布差异具有统计学意义(P<0.05)。结论 CD36内含子3[TG]重复次数13次的单体型是松原蒙古族发生2型糖尿病的危险基因。

CD36在棕榈酸诱导的HepG2细胞炎症反应中的作用

目的:探讨白细胞分化抗原36(cluster of differentiation 36,CD36)是否参与了棕榈酸诱导的HepG2细胞炎症反应。方法:给予HepG2细胞不同浓度的棕榈酸(0.00、0.08、0.16、0.32、0.64 mmol/L)处理24 h,使用实时荧光定量PCR方法检测CD36和炎症因子的mRNA表达水平,Western blot检测CD36蛋白表达水平。然后利用小RNA干扰技术,构建低表达CD36的HepG2细胞(CD36RNAi HepG2)和对照细胞(NCi HepG2)模型。通过实时荧光定量PCR检测棕榈酸负荷的NCi HepG2和CD36RNAi HepG2中炎症因子的表达情况,荧光探针DCFH DA法检测细胞内活性氧含量,Western blot检测细胞核内的核转录因子-κB的蛋白表达水平。结果:棕榈酸能够上调HepG2细胞中CD36及炎症因子——肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)和白介素-6(interleukin-6,IL-6)的表达。棕榈酸浓度分别为0.00、0.08、0.16、0.32及0.64 mmol/L时,CD36的mRNA表达相对值分别为(1.001±0.078)、(1.510±0.341)(q=4.763,P=0.007)、(1.780±0.070)(q=7.301,P=0.000)、(2.510±0.141)(q=14.16,P=0.000)及(2.103±0.150)(q=10.34,P=0.000)。TNF-α的mRNA表达相对值分别为(1.000±0.098)、(1.571±0.177)(q=1.598,P=0.141)、(1.725±0.274)(q=2.016,P=0.071)、(2.113±0.341)(q=3.102,P=0.011)及(5.282±0.855)(q=11.940,P=0.000)。IL-6的mRNA表达相对值分别为(0.999±0.047)、(1.791±0.596)(q=1.486,P=0.168)、(2.119±0.294)(q=2.107,P=0.061)、(2.808±0.147)(q=3.398,P=0.007)及(6.916±1.284)(q=11.130,P=0.000)。抑制HepG2细胞中CD36表达,可以显著降低棕榈酸所诱导的细胞内活性氧(reactive oxygen species,ROS)增加和核转录因子-κB在核内分布的增强,降低HepG2细胞内炎症因子表达水平。NCi HepG2、NCi HepG2+棕榈酸组及CD36 RNAi HepG2+棕榈酸组的ROS相对含量分别为(1.000±0.113)、(1.968±0.293)(与NCi组相比,t=6.888,P=0.000)、(0.519±0.129)(与NCi+棕榈酸组相比,t=10.106,P=0.000)。NCi HepG2、NCi HepG2+棕榈酸组及CD36 RNAi HepG2+棕榈酸组的核转录因子-κB的蛋白相对值分别为(0.997±0.093)、(2.443±0.085)(与NC相比,t=19.892,P=0.000)、(1.607±0.107)(与NCi+棕榈酸组相比,t=10.607,P=0.000)。抑制HepG2细胞中CD36表达后,棕榈酸浓度分别为0.08、0.16、0.32及0.64 mmol/L时,NCi HepG2及CD36 RNAi HepG2组的TNF-α的表达水平分别为(1.004±0.113)和(0.185±0.071)(t=10.716,P=0.000);(1.009±0.160)和(0.221±0.028)(t=8.389,P=0.001);(1.008±0.163)和(0.173±0.011)(t=8.780,P=0.001);(1.009±0.163)和(0.147±0.013)(t=9.013,P=0.000)。抑制HepG2细胞中CD36表达后,棕榈酸浓度分别为0.08、0.16、0.32及0.64 mmol/L时,NCi HepG2及CD36 RNAi HepG2组的IL-6的表达水平分别为(1.044±0.347)和(0.207±0.033)(t=4.121,P=0.015);(1.006±0.139)和(0.198±0.007)(t=10.110,P=0.001);(1.001±0.052)和(0.125±0.006)(t=28.443,P=0.000);(1.012±0.188)和(0.114±0.015)(t=8.367,P=0.001)。结论:棕榈酸能够上调HepG2细胞CD36表达,促进HepG2炎症反应;抑制CD36可能通过减少氧化应激、抑制核转录因子-κB信号通路,进而改善棕榈酸诱导的HepG2细胞炎症。

炎症对脂肪酸负荷的HepG2细胞FAT/CD36表达的影响

目的:观察炎症是否干扰脂肪酸负荷的人肝癌细胞系HepG2细胞脂肪酸转运蛋白/CD36(fatty acid transporter/CD36,FAT/CD36)的表达及脂质代谢。方法:分别给予不同浓度软脂酸(0.00、0.04、0.08、0.16、0.32 mmol/L)处理HepG2细胞24 h。采用Western blot和real-time PCR的方法检测HepG2细胞FAT/CD36的蛋白及mRNA的表达水平,再用油红O的方法观察细胞的脂质积聚情况。然后进一步选取0.04 mmol/L的软脂酸联合炎症因子[25 ng/ml的肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor,TNF-α)或20 ng/ml的白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)]处理HepG2细胞24 h后,观察细胞FAT/CD36的蛋白表达情况,再用油红O和酶法检测细胞内的甘油三酯(triglyceride,TG)水平,ELISA检测细胞内游离脂肪酸(free fatty acid,FFA)含量。结果:软脂酸呈浓度依赖性上调HepG2细胞FAT/CD36的蛋白(r=0.873,P=0.000)和mRNA表达(r=0.884,P=0.000)及细胞内脂质积聚。炎症因子TNF-α和IL-6能明显刺激脂肪酸负荷的HepG2细胞FAT/CD36的蛋白表达进一步增加(P值分别为0.001和0.000)。油红O染色显示炎症因子TNF-α和IL-6能明显促进HepG2细胞的脂质积聚,胞内TG定量检测也显示炎症因子能促进HepG2细胞的脂质积聚,其中软脂酸联合TNF-α组与对照组及软脂酸组相比,P值分别为0.009和0.037,软脂酸联合IL-6组与对照组及软脂酸组相比,P值均为0.000。胞内FFA定量检测结果与油红O染色和TG检测结果一致,也显示炎症因子能促进HepG2细胞的脂质积聚,其中软脂酸联合TNF-α组与对照组及软脂酸组相比,P值分别为0.001和0.002,软脂酸联合IL-6组与对照组及软脂酸组相比,P值均为0.000。结论:炎症因子可以上调HepG2细胞FAT/CD36的表达并加重细胞内的脂质积聚。

CD36对炎症因子TNF-α和IL-6诱发HepG2细胞胞内脂质聚集的影响

目的探讨炎症因子是否通过上调脂肪酸转运导致HepG2细胞脂质积聚及脂毒性。方法分别给予HepG2细胞肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor-α,TNF-α组:0. 04 mmol/L软脂酸+25 ng/mL TNF-α)和白介素-6 (interleukin-6,IL-6组:0. 04 mmol/L软脂酸+20 ng/mL IL-6)刺激处理24 h,酶法检测HepG2细胞内的甘油三酯(triglycercide,TG)水平,ELISA检测细胞内游离脂肪酸(free fatty acid,FFA)含量。利用荧光标记的软脂酸,动态监测细胞对外源性脂肪酸的摄取速率。然后利用小RNA干扰技术,构建低表达脂肪酸转运酶(cluster of differentiation,CD36)的HepG2细胞(CD36 KD HepG2)和对照细胞(NC HepG2)模型,检测CD36低表达时细胞对脂肪酸的摄取速率变化,并检测细胞内活性氧(reactive oxygen species,ROS)及过氧化氢(hydrogen peroxide,H_2O_2)的含量。结果炎症因子能够刺激HepG2细胞TG及FFA的累积,其中TNF-α处理组及IL-6处理组的FFA含量及TG含量都明显增加(P <0. 05),并且能够引起HepG2细胞对脂肪酸的摄取增加(P <0. 05)。抑制HepG2细胞中CD36表达,可以减轻胞内脂质积聚(P <0. 05),削弱炎症状态下HepG2细胞对脂肪酸的摄取(P <0. 05),并且能够显著降低细胞内ROS及H_2O_2含量(P <0. 05)。结论在肝脏细胞中,抑制CD36的表达能够减少炎症因子TNF-α和IL-6引起的脂肪酸摄取增加,减轻脂质积聚,改善细胞脂毒性;提示CD36可作为脂肪肝等代谢性疾病的潜在治疗靶点。

sCD36预测2型糖尿病发生血管病变的实验研究

目的 探讨可溶性CD36（sCD36）对预测2型糖尿病发生血管病变患者血浆中的含量及其临床意义.方法 选取2008年8月～2012年5月中西医结合科收治的2型糖尿病患者92例,其中2型糖尿病并发血管病变组（A组）45例,无血管病变组（B组）47例,另选45例健康者为对照组（C组）.分别采用ELISA、免疫荧光法和酶化学法测定三组患者血浆sCD36、胰岛素抵抗指数、三酰甘油和低密度脂蛋白胆固醇水平.统计分析四种指标在2型糖尿病血管病变患者、2型糖尿病非血管病变患者和健康人群的临床变化情况.结果 2型糖尿病并发血管病变组sCD36水平与健康对照组比较差异有统计学显著性意义（3.25±0.3,1.55±0.31,t=11.23,P〈0.05）;2型糖尿病并发血管病变组sCD36也显著高于非血管病变组（3.25±0.3,2.37±0.68,t=3.44,P〈0.05）.sCD36与各指标的相关性分析：sCD36与胰岛素抵抗指数、三酰甘油和低密度脂蛋白胆固醇呈正相关（r=0.332～0.447,P〈0.05）.结论 2型糖尿病患者血浆sCD36水平有助于脂质代谢障碍和血管病变的监测.