血竭提取物对ApoE基因敲除小鼠主动脉粥样硬化斑块稳定性及清道夫受体CD36表达的影响

目的观察血竭提取物对ApoE基因敲除(ApoE-/-)小鼠主动脉粥样硬化斑块成分、血脂及清道夫受体CD36 mRNA表达的影响,探讨血竭提取物稳定斑块的作用及可能机制。方法33只6～8周龄ApoE-/-小鼠予高脂饮食喂养13周后,随机分为3组:模型组、血竭提取物(450.5 mg/kg)组、辛伐他汀(9.01 mg/kg)组(阳性对照组),每组11只。继续高脂喂养并给予相应药物治疗13周后,检测血脂,取主动脉根部4个切面,分别行HE染色和Movat染色,采用易损指数[(细胞外脂质成分+泡沫细胞)/(平滑肌细胞+胶原成分)]综合评价药物对小鼠主动脉斑块稳定性的影响。实时荧光定量PCR法检测主动脉内CD36 mRNA的表达。结果给药13周后,血竭提取物组和辛伐他汀组的斑块易损指数较模型组均有不同程度的降低(P<0.01),两组间比较无显著差异(P>0.05)。血竭提取物组血清总胆固醇(TC)和甘油三酯(TG)水平与模型组比较显著降低(P<0.05、0.01),而主动脉内CD36 mRNA的表达与模型组比较亦显著降低(P<0.01)。结论血竭提取物可通过改善斑块内部成分来稳定易损斑块,其机制与调节血脂、抑制清道夫受体CD36 mRNA的表达有关。

普罗布考抑制氧化低密度脂蛋白上调巨噬细胞清道夫受体CD36的表达

背景普罗布考是一降脂药,同时具有抗氧化特性,近年来的研究表明其可以通过多种机制抑制动脉粥样硬化的形成,降低经皮冠状动脉成形术后再狭窄的发生。目的探讨普罗布考对氧化低密度脂蛋白(Ox-LDL)刺激巨噬细胞后清道夫受体CD36表达的抑制效应。方法用不同浓度的Ox-LDL刺激人单核细胞系THP-1源性巨噬细胞及用不同浓度普罗布考和核因子κBp65(NF-κBp65)特异性抑制剂(PDTC)预处理细胞后再用氧化低密度脂蛋白刺激,半定量RT-PCR方法检测CD36和NF-κBp65的mRNA的表达,Western-blot检测CD36和细胞核NF-κBp65蛋白表达水平。结果THP-1单核细胞分化成巨噬细胞后,CD36和NF-κBp65 mRNA和蛋白的表达上调;不同浓度的Ox-LDL刺激后,CD36 mRNA和蛋白的表达呈浓度依赖性增加,同时伴NF-κBp65 mRNA和蛋白的表达增加;PDTC和普罗布考干预后,NF-κBp65和CD36的mRNA和蛋白表达下调。结论Ox-LDL可以通过NF-κBp65途径上调巨噬细胞CD36的表达;而普罗布考则可以抑制CD36的表达,这种作用与抑制NF-κBp65有关。

高糖对HDL调节THP-1巨噬细胞CD36和过氧化体增殖物激活型受体γ表达的影响

目的观察高糖对HDL调节THP-1巨噬细胞清道夫受体CD36和过氧化体增殖物激活型受体γ(PPARγ)表达的影响。方法用50 mg/L ox-LDL、50 mg/L ox-LDL+50 mg/L HDL、50 mg/L ox-LDL+50 mg/L HDL+20 mmol/L D-葡萄糖、50 mg/L HDL、50 mg/L HDL+20 mmol/L D-葡萄糖孵育THP-1巨噬细胞24 h,采用油红O染色观察细胞内脂质蓄积情况,RT-PCR和Western Blot分别检测CD36、PPARγ、p-PPARγmRNA和蛋白的表达。结果加用HDL组明显减少脂质蓄积,加用HDL组的CD36 mRNA和蛋白的表达下调,PPARγ的mRNA和蛋白及p-PPARγ的蛋白表达上调;而同时加用50 mg/L HDL和20 mmol/L葡萄糖组CD36和PPARγ的mRNA及蛋白表达上调,而p-PPARγ的表达下调(P<0.05),并促进脂质蓄积。结论高糖可使HDL抑制CD36表达及脂质蓄积的作用减弱。

地拉卓对THP-1由来巨噬细胞清道夫受体-B(CD36) mRNA表达的影响

目的探讨地拉卓(dilazep,DZ)是否影响巨噬细胞清道夫受体(ScR)-B(CD36)mRNA表达过程。方法利用人类单核细胞株(THP-1)由来巨噬细胞,通过Northern印迹方法观察DZ对巨噬细胞ScR-B(CD36)mRNA表达过程以及表达后的影响。结果巨噬细胞ScR-B(CD36)mRNA表达随DZ浓度的增加而减弱;DZ对巨噬细胞ScR-B(CD36)mRNA表达后水平并无影响。结论DZ的这种对巨噬细胞ScR-B(CD36)mRNA的表达过程具有抑制作用但对ScR-B(CD36)mRNA表达后水平并无影响的机制可能对动脉粥样硬化的形成早期具有保护作用而无治疗作用。

B类清道夫受体CD36在脂代谢中的作用

CD36于1976年首次被发现并被归属于抗蛋白酶血小板膜表面糖蛋白[1]。CD36参与脂质代谢、长链脂肪酸吸附、细胞凋亡残物清理和巨噬细胞吞噬等过程,过去集中研究其表达调节作用可能是巨噬细胞泡沫化和动脉粥样硬化形成的关键因素[2]。迄今为止,发现CD36与角膜炎、肿瘤和肥胖等疾病均有关[3]。本文就CD36的特征,

PPARγ对高糖诱导THP-1巨噬细胞CD36表达及脂质蓄积的调节

目的观察PPARγ对高糖诱导THP-1巨噬细胞CD36表达及脂质蓄积的调节。方法联合或单独使用50 mg/L Ox-LDL,20 mM D-葡萄糖,10 mM GW9662孵育THP-1巨噬细胞24 h。采用逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)检测CD36、PPARγmRNA的表达;采用Western印迹法检测CD36蛋白质;用油红O染色观测细胞内脂质蓄积情况。结果 PPARγ拮抗剂(GW9662)明显地抑制了高糖所诱导的脂质蓄积及CD36的表达,油红O染色可见细胞内脂滴明显地减少。CD36、PPARγmRNA,CD36蛋白质的表达明显下降(P<0.05)。结论提示高糖所诱导的CD36表达可能是由PPARγ所介导的。本实验的研究将对糖尿病性As病变的防治具有重要意义。

ApoAI模拟肽D4F通过下调内质网应激抑制OX—LDL介导的CD36上调作用

目的研究载脂蛋白AI（ApoAI）模拟肽D4F是否可通过内质网应激反应途径调节氧化型低密度脂蛋白（oxidizedlow—densitylipoprotein，OX-LDL）介导的清道夫受体CD36上调作用，以探讨D4F对巨噬细胞泡沫化抑制作用的分子机制。

干扰素γ对巨噬细胞CD36表达的影响

目的探讨干扰素γ对Ox-LDL刺激的巨噬细胞清道夫受体CD36表达的影响。方法收集小鼠腹腔巨噬细胞,培养后将贴壁细胞分为5组:1、正常对照组,用生理盐水刺激培养的巨噬细胞;2、Ox-LDL处理组,Ox-LDL 50mg/L刺激培养的巨噬细胞;3、4、5组为不同剂量的干扰素γ处理组,分别用不同剂量的重组INFγ(终末浓度分别为50、100、200ng/mL)刺激培养的巨噬细胞,然后加入Ox-LDL 50mg/L。24h后收集培养的细胞,用流式细胞仪测定巨噬细胞清道夫受体CD36的表达。结果Ox-LDL处理组与对照组比较,巨噬细胞清道夫受体CD36表达水平显著增高(P<0.01),干扰素γ各剂量组与Ox-LDL处理组比较,CD36表达显著减少(P<0.05)。结论Ox-LDL能明显刺激巨噬细胞清道夫受体CD36表达,干扰素γ抑制Ox-LDL引起的巨噬细胞清道夫受体CD36表达。

法科学家发现导致人体喜爱油腻食品的受体

《食品科学》讯，法国科学家最近发现，动物对油腻食品的偏好来自舌头味觉感应组织中的一个受体，它专门负责感应脂类食物。据最新法国《科学与未来》杂志报道，法国国家农艺研究所和勃艮第大学的科学家日前发现，老鼠舌头感应组织上的受体CD36有感应脂类味道的特殊作用。由于与过去知道的感应“酸、甜、苦、咸”等味道的受体不同，它将成为一个新的味道感受体。受体CD36又称“脂肪或脂肪酸运输器”，它是一种糖蛋白，身体其他组织中也有它的身影，主要功能县储存脂肪．

慢病毒介导CD36基因沉默细胞株的构建及其对caveolin-1蛋白表达的影响

CD36作为重要的清道夫受体密切参与了巨噬细胞对氧化低密度脂蛋白的摄取作用,为了进一步研究CD36的功能,本文利用慢病毒介导的shRNA干扰技术,构建了CD36基因沉默巨噬细胞(J774A.1)株,并以此为模型分析了CD36在caveolin-1蛋白表达过程中的作用。首先,针对CD36基因序列设计合成5条shRNA片段,并构建得到pLKO.1-CD36-shRNA慢病毒干扰载体,测序鉴定后与psiCHECK-Ⅱ-CD36载体共转染入293T细胞中,筛选出有效的CD36-shRNA。将慢病毒干扰载体与病毒包装质粒共转染入293T细胞,包装得到慢病毒颗粒,之后感染J774A.1细胞,经嘌呤霉素筛选后得到CD36基因沉默稳转细胞株。Western blotting及激光共聚焦检测结果表明CD36基因沉默效率达90%,并且伴随着CD36的基因沉默,与之结合的DiI-oxLDL也随之大幅降低,证明构建成功具有良好生物学活性的CD36基因沉默细胞株。最后,抑制剂处理及oxLDL给药刺激实验结果表明,CD36的基因沉默能够显著降低JNK及ERK的磷酸化水平,进而抑制了caveolin-1的蛋白表达,表明CD36能够经由JNK及EKR信号传导调节caveolin-1的蛋白表达。

CD36与代谢性炎症疾病

清道夫受体CD36是一种表达于单核细胞、巨噬细胞、微血管内皮细胞、平滑肌细胞、血小板等多种细胞表面的跨膜蛋白模式受体,近年来研究发现CD36在2型糖尿病、动脉粥样硬化、非酒精性脂肪肝、肥胖等疾病中表达增加。该文通过整理清道夫受体CD36相关研究的最新进展,阐明了CD36受体通过炎症调控、内质网应激、巨噬细胞表型转化以及胰岛素抵抗等途径在代谢性炎症疾病中的作用,同时简述了CD36可成为代谢性炎症疾病的相关血清标志物,以期为治疗代谢性炎症疾病提供潜在的治疗靶点。