江苏地区汉族人群血小板CD36抗原表达差异的研究

目的了解江苏地区汉族人群血小板上CD36抗原表达的差异。方法应用流式细胞技术检测江苏地区140位汉族献血者血小板上CD36抗原的表达,并分析其表达量。结果本组江苏汉族献血者中,血小板上CD36抗原表达缺失型占比2.86%(4/140);非缺失型占比97.14%(136/140),其中低表达29例、中表达93例,高表达14例,三者的平均荧光强度(MFI)分别为1 821.4±21.8 vs 3 920.4±10.0 vs 8 787.4±63.7(P<0.05)。在CD36抗原表达的非缺失型中,男性127例、女性9例,其血小板上CD36抗原的MFI分别为3 678.36±13.5 vs 5 296.0±314.4。结论江苏地区汉族人群血小板CD36抗原表达具有多样性。

血单个核白细胞中CD36抗原基因表达的测定方法及其意义

为建立外周血单个核白细胞ＣＤ３６抗原基因表达的测定方法，本文采用反转录聚合酶链反应技术定量测定ＣＤ３６抗原基因的表达，用β－肌动蛋白作为内标物，用凝胶扫描技术进行定量。结果发现，反转录聚合酶链反应后电泳发现ＣＤ３６抗原ｃＤＮＡ片段为３９０碱基对，β－肌动蛋白ｃＤＮＡ片段为５４０碱基对，以ＣＤ３６抗原／β－肌动蛋白表示ＣＤ３６抗原基因表达量是一个稳定的方法，颈动脉粥样硬化病人ＣＤ３６抗原基因表达增加。结果提示，反转录聚合酶链反应是测定ＣＤ３６抗原基因表达的理想方法，可以用于动脉粥样硬化的研究。

CD36抗原与动脉粥样硬化

ＣＤ３６抗原是一种细胞膜糖蛋白；它既是粘附分子，又是清道夫受体，参与包括动脉粥样硬化在内的许多生理和病理过程。本文介绍ＣＤ３６抗原的生物学特性及其在动脉粥样硬化发生中的作用。

舒洛地特对高糖环境中大鼠肾小球系膜细胞CD36抗原表达的抑制作用研究

目的:观察舒洛地特对高糖培养基中大鼠肾小球系膜细胞CD36抗原表达的抑制作用,探讨舒洛地特对肾脏的保护作用。方法:培养大鼠肾小球系膜细胞24 h后,将培养的细胞分为对照组(C组,普通培养基,含5.6 mmol·L^(-1)葡萄糖),甘露醇组(M组,24.2 mmol·L^(-1)甘露醇+C组),高糖组(H组,30 mmol·L^(-1)高糖MEM培养基)、舒洛地特干预组(S组,H组+1.0 LRU·ml^(-1)舒洛地特)。培养24 h后,RT-PCR和Western blotting法检测各组CD36 mRNA及蛋白的表达。结果:对照组和甘露醇组CD36mRNA(0.24±0.07和0.21±0.06)及蛋白(0.26±0.08和0.22±0.07)的表达差异无统计学意义(P>0.05),高糖组CD36 mRNA(0.62±0.11和0.24±0.07)及蛋白(0.83±0.23和0.26±0.08)表达显著高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05),舒洛地特干预组CD36 mRNA(0.36±0.13和0.62±0.11)及蛋白(0.42±0.15和0.83±0.23)表达显著低于高糖组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:舒洛地特可抑制高糖环境中大鼠肾小球系膜细胞CD36抗原的表达,可能是舒洛地特发挥肾脏保护作用的机制之一。

苏州地区献血者血小板CD36抗原表型筛查及基因突变分析

目的了解苏州地区血小板CD36抗原表达情况及其抗原缺失频率和基因多态性特征,为建立血小板CD36阴性表型资料库提供参考依据。方法随机选取805例苏州市中心血站无偿献血者抗凝全血,流式细胞术筛查血小板和单核细胞表面CD36抗原的表达,分析抗原缺失类型,并结合基因组DNA测序,检测导致CD36抗原缺失的基因突变类型。结果对805例无偿献血者标本CD36抗原筛查发现,苏州地区血小板表面CD36抗原缺失频率为2.48%(20/805),其中Ⅰ型缺失(血小板和单核细胞均不表达CD36)占比10%(2/20),Ⅱ型缺失(仅血小板不表达CD36)占比90%(18/20)。基因测序共发现10例标本的CD36基因发生突变,突变类型为7种,包括3例329330 d^(el)AC、1例12281239 d^(el)ATTGTGCCTATT、2例1163 A>T,329330 d^(el)AC+11721183 d^(el)TATTGGTCAAGC和287 G>C+329330 d^(el)AC复合突变各1例,另外还发现745 A>G,806 C>T新型基因突变各1例。结论苏州地区血小板CD36抗原缺失频率与已报道国内南方地区相近,但基因突变位点稍有区别。在此基础上建立血小板CD36阴性者表型资料库,可为由CD36抗体引起输血反应的患者提供阴性血小板,以提高临床血小板输注效果。

合肥地区无偿献血人群CD36抗原缺失的调查

目的研究合肥地区无偿献血人群CD36抗原的缺失频率。方法随机留取合肥市中心血站2020年3月~2020年7月血小板无偿捐献者血样973例,流式细胞术检测CD36抗原。EDTA抗凝全血离心制备富血小板血浆,进行血小板CD36抗原检测,下层细胞经红细胞裂解液处理后,进行单核细胞CD36抗原检测。结果973例血小板无偿捐献者中检出CD36抗原缺失者16例,缺失频率为1.64%;其中Ⅰ型缺失2例,Ⅱ型缺失14例,缺失频率分别为0.20%和1.44%。结论合肥地区无偿献血人群存在一定的CD36抗原缺失。

江苏地区汉族人群血小板CD36抗原缺失型表型的分析

目的探索江苏地区汉族人群血小板表面CD36抗原缺失型表型的多态性。方法应用流式细胞技术检测江苏地区140位献血者血小板表面CD36抗原的表达,以及对血小板表面CD36抗原缺失的标本,进一步检测其单核细胞表面CD36的表达。结果 140名献血者中,血小板表面CD36抗原表达缺失的有4例,缺失型频率为2.86%,其中I型缺失占0.71%(1/140),Ⅱ型缺失占2.14%(3/140)。结论江苏地区汉族人群中,CD36抗原表型具有多态性,血小板表面CD36抗原缺失型个体的频率略低于亚洲其他国家人群;其中CD36抗原Ⅱ型缺失比例高于Ⅰ型缺失。

CD36抗原缺失与输血相关免疫的研究进展

CD36抗原作为一种模式识别受体,参与机体一系列的病理生理过程,其在输血医学中也一直备受关注。本文将从CD36的发现、结构及其表达情况,CD36抗原缺失的类型及频率,抗-CD36与输血相关免疫性疾病的关系等作一简要综述。

血小板CD36抗原Ⅱ型缺失与内含子序列多态性的相关性

目的研究分析血小板CD36抗原Ⅱ型缺失与内含子序列多态性的相关性。方法随机抽取辽宁省血液中心健康血小板捐献者516名,其中241例分别进行CD36抗原检测和CD36基因序列分析;剩余275例只进行CD36基因序列分析。CD36抗原检测采用流式细胞术法,基因序列分析采用PCR-SBT法。结果在241例标本中检测到Ⅰ型缺失1例和Ⅱ型缺失4例,频率分别为0.41%和1.66%。3例Ⅱ型缺失者编码区无突变。所有Ⅱ型缺失个体在内含子3区域具有共同的多态性特征,即同时携带(TG)11和12个串联突变,且两者位于同一等位基因。(TG)11在516例随机人群中的基因频率仅为11.72%,远低于(TG)13的30.43%。12个串联突变在516例随机人群中的基因频率为8.81%。96.7%的12个串联突变都与(TG)11同时出现,但只有72.7%的(TG)11携带12个串联突变。流式细胞术检测发现,只携带(TG)11的标本,其血小板CD36抗原表达水平与正常标本相当,而93.1%的同时携带(TG)11和12个串联突变的标本血小板CD36抗原水平明显降低。结论内含子3区域内的(TG)11不是血小板特异性沉默因子,但它们之间存在某种间接的相关性。(TG)11与12个串联突变具有较强连锁关系。血小板特异性沉默因子可能有多个。

血浆可溶性CD36与冠状动脉粥样硬化性心脏病发病相关性分析

目的测定可溶性CD36(sCD36)在冠状动脉粥样硬化性心脏病(CHD)血浆中的变化,探讨其在CHD发生、发展中的作用。方法回顾性分析浙江省杭州市第三人民医院收治35例CHD患者资料作为CHD组,35名健康体检人员作为对照组,分析2组血浆sCD36、炎症指标[高敏C反应蛋白(hs-CRP)、肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-6]、空腹血糖、血脂等指标,比较2组的差异,并以sCD36为因变量,以上述各项指标为自变量行线性相关与回归分析。结果CHD组三酰甘油(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDLC)、血浆sCD36、hs-CRP、TNF-α、IL-6均高于对照组(P均<0.05),sCD36与hs-CRP、TNF-α、IL-6呈正相关(r=0.923,0.815,0.831,P均<0.05)。结论sCD36在CHD组升高,并伴有血脂代谢异常,sCD36可能为CHD的血浆标志物,通过炎症机制参与CHD的发生发展。

贵州省毕节地区献血人群CD36抗原筛查和基因型鉴定

目的筛查贵州省毕节地区献血者CD36抗原频率并对缺失型的基因型进行鉴定。方法收集2017年由毕节血站提供的934例献血者标本,其中包括汉族、彝族、穿青人、白族等16个民族。应用流式法对血小板和单核细胞上CD36抗原进行检测。提取CD36抗原缺失者DNA,采用PCR-SBT法对3-14外显子进行测序检测并分析。结果毕节献血人群中CD36抗原表达异常频率为5.56%(52/934),其中36例血小板上的CD36抗原表达量较低;16例在血小板上无表达,缺失频率为1.71%(16/934),其中汉族13例,缺失频率为1.84%(13/708),彝族1例,缺失频率为1.52%(1/66),穿青人1例,缺失频率为1.61%(1/62),仡佬族1例,缺失频率为9.1%(1/11)。其中6例为Ⅱ型缺失(即仅在血小板上无表达),2例为Ⅰ型缺失(即血小板和单核细胞上均无表达),Ⅰ型、Ⅱ型缺失表达的频率分别约为0.42%、1.28%。PCR-SBT法分析显示,16例血小板CD36抗原缺失标本的CD36基因型中,5例未发现异常,5例为329-330 del AC,2例为1228-1239 del ATTGTGCCTATT,2例为C681A,发现的突变还有C380T、771delT、T879C、C1123T、C1156A。结论毕节为多民族地区,献血人群中血小板CD36抗原表达具有多样性,且具有民族差异性。

新疆地区母源CD36抗原缺失型表型的分析

目的调查新疆地区母源CD36抗原缺失情况,并分析母源CD36抗原缺失与新生儿发生同种免疫血小板减少症(NAIT)的关系。方法选取2019年5月至2020年6月我院产科门诊就诊的610例孕妇作为研究对象,于就诊当天检测孕妇CD36抗原、血小板抗体,统计新疆地区主要民族[维吾尔族、汉族]孕妇CD36抗原缺失情况及血小板抗体阳性率;于新生儿出生24h内检测其血小板计数(PLT),统计NAIT发生情况。结果纳入的610例孕妇,经检测CD36抗原阳性占98.69%,CD36抗原缺失占1.31%,均为Ⅱ型抗原缺失,无Ⅰ型抗原缺失;汉族、维吾尔族孕妇CD36抗原缺失情况比较,差异无统计学意义(P>0.05)。汉族、维吾尔族孕妇血小板抗体阳性率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。汉族新生儿出生24 h内PLT高于维吾尔族,差异有统计学意义(P<0.05);两族新生儿其他资料比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论新疆地区孕妇存在Ⅱ型CD36抗原缺失,且汉族、维吾尔族孕妇CD36抗原缺失率无显著性差异,血小板抗体、CD36抗体阳性率无显著性差异。

CD36抗原缺失与血小板输注无效关系的研究进展

随着输血技术的发展及成分输血的出现,资源匮乏的血液得到充分利用同时也减少了输血不良反应的发生,成分输血在我国得到全面推广。血小板是血液凝固中的重要成分,血小板输注是防止大出血和提高血小板减少患者生存率的主要措施,目前多用于外伤大出血患者及血液和肿瘤患者。但是反复输注血小板会刺激免疫系统产生血小板特异性抗体或血小板表面相关抗体,

苏州地区献血者血小板HPA基因分型与CD36表型的研究

目的:进一步研究苏州地区单采血小板献血者HPA基因分型及其CD36抗原表型,为建立本地区血小板资料库及提高临床血小板输注有效性提供依据。方法:采用多重荧光PCR法对564例单采血小板献血者抗凝全血标本进行HPA-1~6,10,15,21基因分型检测,酶联免疫吸附试验检测血小板CD36抗原表达,借助流式细胞术对CD36阴性标本进行确认和表型分型。结果:564份标本中HPA-3、15基因型的杂合程度最高,其等位基因频率分别为HPA-3a 0.594、3b 0.406、15a 0.5275、15b 0.4725。苏州地区HPA-1a基因频率与英国白人、美国黑人差异有统计学意义(P<0.05),与南京、广州、黑龙江差异无统计学意义(P>0.05);HPA-2基因频率与广州、美国黑人差异有统计学意义(P<0.05);HPA-3和HPA-15基因频率与广州、黑龙江差异有统计学意义(P<0.05)。HPA-5基因频率与南京、广州、黑龙江差异无统计学意义(P>0.05),与英国白人、美国黑人差异有统计学意义(P<0.05)。CD36阴性标本12例(2.13%),其中1例为Ⅰ型CD36缺失,11例为II型CD36缺失。结论:苏州地区单采血小板献血者HPA基因型分布具有高度多态性,并存在种族和区域差异。

2型糖尿病大鼠心肌脂肪酸转运体FAT/CD36的表达变化及其对脂肪酸代谢的影响

在心血管疾病的众多危险因素中,糖尿病日益受到人们的重视。糖尿病时高血糖、高胰岛素及血脂异常可加重冠状动脉硬化的程度,增高冠心病的发病率,同时糖尿病亦是非缺血性心力衰竭的重要病因。

抗磷脂抗体对巨噬细胞摄取氧化型低密度脂蛋白及CD36表达的影响

为了探讨抗磷脂抗体对巨噬细胞摄入氧化型低密度脂蛋白的影响及其主要清道夫受体CD36抗原表达的调节 ,将培养的U937细胞与氧化型低密度脂蛋白 (80mg L)和抗磷脂抗体 (10 0mg L)孵育 ,用酶荧光法观察人类单核细胞株U937内脂质的变化、逆转录—聚合酶链反应和流式细胞术观察CD36抗原mRNA和蛋白水平表达的改变。结果发现氧化型低密度脂蛋白存在时细胞内胆固醇和胆固醇酯含量分别为 2 4 3± 9mg g细胞和 2 89± 12mg g细胞 ,流式细胞仪测CD36抗原为 2 5 % ,凝胶电泳分析CD36mRNA β actionmRNA为 1.0 5 ;在加入抗磷脂抗体后 ,胞浆内胆固醇和胆固醇酯明显增加 ,分别为 2 76± 10mg g细胞和 4 78± 13mg g细胞 ,流式细胞仪测CD36抗原为 37% ,凝胶电泳分析CD36mRNA β actionmRNA为 1.90 ;两组相比差异有显著性 (P <0 .0 5 )。以上提示抗磷脂抗体有促进U937细胞摄取氧化型低密度脂蛋白的作用 。

重组人血小板CD36基因真核表达载体的构建及蛋白表达

目的制备具有功能活性的重组人血小板表面CD36抗原的纯化表达蛋白胞外区30～439氨基酸残基段。方法提取人肝细胞组织总RNA,经RT-PCR扩增编码人血小板CD36抗原胞外区(Gly30～Asn439)氨基酸残基cDNA,构建于原核表达载体pMD18并转化大肠杆菌DH5α,筛选获得阳性重组子pMD18-CD36,提取质粒。经序列测定后,将该基因插入到真核细胞瞬时表达载体pTE2上,构建成为pTE2-s-CD36-10 his真核瞬时表达载体。采用lipofectamine 2000(invitrogen)转染法,将重组质粒转染HEK-293细胞,表达产物经Ni2+2NTA柱层析纯化。结果 RT-PCR扩增获得了1.4 kb的片段。invitrogen测序,该序列分析结果与Genebank中的NM_001001547.2完全一致。SDS-PAGE证实转染的HEK-293细胞表达了人CD36抗原胞外区蛋白片段。结论利用构建的真核载体pTE2-s-CD36转染人胚肾细胞(HEK293)可高效表达CD36 Gly30～Asn439,得到纯化蛋白,为人血小板CD36表面抗原对血小板输注无效影响的深入研究奠定基础。

氧化型低密度脂蛋白抗体对单个核细胞CD36 mRNA表达的影响

目的:通过观察氧化型低密度脂蛋白(OX-LDL)抗体对单个核细胞CD36 mRNA表达的影响,探讨OX-LDL抗体影响泡沫细胞形成的可能机制。方法:U937细胞和新西兰兔外周血单个核细胞分别被分成4组:空白对照组(普通培养基孵育)、OX-LDL刺激组(培养基中添加50μg/L的兔抗人OX-LDL多克隆抗体)、抗体干预组(培养基中添加50μg/L的兔抗人OX-LDL多克隆抗体及100μg/L的纯化人OX-LDL)及单纯抗体组(培养基中添加100μg/L的纯化人OX-LDL),经培养24 h后,利用半定量RT-PCR技术分析CD36的mRNA表达水平。结果:无论在U937细胞或兔单个核细胞中,OX-LDL刺激组及抗体干预组CD36 mRNA的表达量均显著高于对照组,而经抗体干预后,CD36 mRNA表达量在U937细胞和在兔单个核细胞分别降低了约64.80%和35.18%,种属间差异有统计学意义。结论:抗OX-LDL抗体可以抑制单个核细胞CD36抗原的表达,从而抑制泡沫细胞形成过程中OX-LDL向细胞内的聚集。

广州地区伊朗献血人群CD36表型筛查及基因型鉴定

目的了解广州地区伊朗籍献血者CD36表型及基因型。方法对2016年在广州血液中心捐献机采血小板的53例伊朗人献血者标本,应用流式细胞仪分别检测血小板和单核细胞上CD36抗原的表达。对CD36抗原表达异常者提取DNA,采用PCR-SBT测序做CD36的基因型鉴定并做基因突变分析。结果本组伊朗人群的CD36抗原表达异常率7.55%(4/53),其中2例的CD36抗原在血小板上表达含量低,1例为血小板和单核细胞上均无表达(即CD36Ⅰ型缺失),1例为单核细胞上CD36表达量低,由此得出CD36缺失表达的频率为1.89%(1/53)。PCRSBT法分析:CD36抗原表达异常4例的CD36基因型中,血小板上低表达CD36抗原的2例发生基因突变,分别是exon 10-975T/G和exon11 del CTA,且均为新的基因突变;2例CD36基因型正常。结论本组伊朗献血人群里CD36抗原表达异常者中存在新的基因突变,其对CD36抗原表达的影响尚需进一步认证。

CD_(36)在慢性肾脏疾病中的作用

CD36抗原是一个多配体清道夫受体，广泛分布于多种不同的细胞表面，如血小板、单核／巨噬细胞、内皮细胞和平滑肌细胞等[1]；它的配体范围十分广泛，包括经化学修饰的脂蛋白，如c—LDL、长链脂肪酸、多聚阴离子磷脂、Ⅰ型和Ⅳ型胶原、糖基化终末产物（advancedg]ycationendproducts，AGEs）等[2]。已有研究表明，CD36抗原在动脉硬化、高血压、糖尿病等疾病的发病机制中发挥着重要作用。由于上述疾病均可导致肾脏慢性损伤，因此，CD36在慢性肾脏病中的作用越来越受到广泛关注。本文将结合近几年国内外的最新研究结果及我们在此领域的相关研究对CD36抗原在慢性肾脏病中的作用作一介绍。