脂肪酸移位酶CD36/SR-B2及其介导的长链脂肪酸跨膜转运

长链脂肪酸是维持机体正常代谢的重要营养素,其吸收、转运和代谢对动物的健康、生长和生产具有重要意义。近年来,研究发现一些脂肪酸转运蛋白介导长链脂肪酸的跨膜转运。脂肪酸移位酶CD36/SR-B2是一种整合膜蛋白,能特异性介导脂肪酸在多种细胞中的跨膜转运。本文对CD36/SR-B2的由来、亚细胞定位、功能调控及其介导的长链脂肪酸跨膜转运进行概述,探讨其对脂质代谢的调控机制。

炎症对脂肪酸负荷的肾细胞FAT/CD36表达的影响

目的:观察炎症是否干扰脂肪酸负荷的肾细胞[人系膜细胞(HMCs)和肾小管上皮细胞HK-2]脂肪酸转运蛋白(FAT/CD36)的表达。方法:分别给予不同浓度软脂酸(0 mmol/L、0.02 mmol/L、0.04 mmol/L、0.08 mmol/L、0.16 mmol/L、0.32 mmol/L)处理HMCs和HK-2细胞24 h。采用实时定量PCR和Western blotting方法检测细胞FAT/CD36的mRNA及蛋白的表达。进一步选取0.04 mmol/L软脂酸联合炎症因子(25μg/L TNF-α或20μg/L IL-6)处理肾细胞24 h后,观察炎症因子对肾细胞FAT/CD36 mRNA及蛋白表达的影响;油红O染色及酶比色法检测细胞甘油三酯(TG)水平;ELISA检测细胞游离脂肪酸(FFA)含量。结果:软脂酸呈浓度依赖性上调HMCs和HK-2细胞FAT/CD36 mRNA和蛋白表达。炎症因子明显刺激脂肪酸负荷的肾细胞FAT/CD36mRNA和蛋白表达进一步增加。油红O染色及胞内TG和FFA含量测定显示炎症因子促进肾细胞脂质积聚。结论:炎症上调脂肪酸负荷的肾细胞FAT/CD36表达,加重胞内脂质积聚。

脂肪酸转运体CD36在肿瘤发展中的研究进展

白细胞分化抗原36(CD36),属于B类清道夫受体家族(SR-B2),也被称为脂肪酸转运体(FAT)。CD36是一种跨膜糖蛋白,在多种细胞类型中广泛表达,因其胞外结构域能与多种配体相互作用,从而在免疫反应、炎症、血管生成、脂质代谢等过程中发挥重要作用。而在肿瘤领域,CD36在肿瘤细胞膜上有高表达现象,且通过不同机制影响了恶性肿瘤的发生、发展等过程。当CD36与其配体[如血小板反应蛋白-1(TSP-1)、长链脂肪酸(LCFA)、Toll样受体、胶原蛋白等]结合后,介导了信号传导,在肿瘤的侵袭转移、免疫调节、耐药等方面起到重要作用。除此之外,CD36还在肿瘤相关基质细胞和免疫细胞上有所表达,在肿瘤发展过程中起了不同的作用。目前,CD36已被提议作为肿瘤的生物标志物和预后不良的指标。基于已有的研究报道,本文将对CD36的结构、组织分布、相关配体进行分析,进一步探讨它在不同类型肿瘤中的影响过程和机制,以期为靶向CD36的抗肿瘤药物研发提供新的视角。

不同生理条件下CD36/LKB1/AMPK信号通路在骨骼肌脂肪酸氧化代谢调控中的作用机制研究

目的:探讨不同生理条件下,脂肪酸转位酶(fatty acid translocase,FAT/CD36)作为信号分子,激活腺苷酸活化蛋白激酶(AMP-activated protein kinase,AMPK)的上游信号通路及其在改善骨骼肌脂肪酸氧化代谢中的作用。方法:利用siRNA干扰技术,在C2C12细胞中进行CD36基因敲低,探讨CD36基因缺乏对骨骼肌细胞AMPK、乙酰辅酶A羧化酶(Acetyl-CoA carboxylaze,ACC)信号通路激活的影响。将17只8周龄C57BL/6雄性小鼠随机分为对照组(control group,CON;n=6)、高脂组(high fat diet group,HFD;n=6)及有氧运动组(exercise group,EX;n=5),分别进行8周干预实验,以探讨不同生理条件对CD36蛋白表达及AMPK、ACC磷酸化水平的影响。Western blotting法检测CD36蛋白表达及AMPK/ACC信号通路磷酸化水平;免疫荧光法检测肝激酶B1(liver kinase B1,LKB1)的胞内转位;透射电镜法检测骨骼肌超微结构变化;比色法检测线粒体呼吸链酶活性的变化。结果:CD36基因缺乏能够激活骨骼肌细胞AMPK/ACC信号通路。与CON组相比,HFD组小鼠骨骼肌CD36蛋白水平显著增加(P<0.01),AMPK、ACC蛋白磷酸化水平显著降低(P<0.05,P<0.05),且诱导LKB1向细胞核的转位;与HFD组相比,EX组小鼠骨骼肌CD36蛋白水平显著降低(P<0.05),AMPK、ACC蛋白磷酸化水平显著增加(P<0.01,P<0.05)。HFD干预导致骨骼肌组织超微结构损伤,CS酶活性显著降低(P<0.05)。结论:CD36作为信号分子,而非脂肪酸转运载体,当siRNA诱导CD36低表达时,激活AMPK;而HFD诱导CD36高表达时,通过诱导LKB1从细胞质向细胞核的转位,抑制AMPK/ACC信号通路激活,从而对骨骼肌脂肪酸氧化代谢进行调控。

炎症对脂肪酸负荷的HepG2细胞FAT/CD36表达的影响

目的:观察炎症是否干扰脂肪酸负荷的人肝癌细胞系HepG2细胞脂肪酸转运蛋白/CD36(fatty acid transporter/CD36,FAT/CD36)的表达及脂质代谢。方法:分别给予不同浓度软脂酸(0.00、0.04、0.08、0.16、0.32 mmol/L)处理HepG2细胞24 h。采用Western blot和real-time PCR的方法检测HepG2细胞FAT/CD36的蛋白及mRNA的表达水平,再用油红O的方法观察细胞的脂质积聚情况。然后进一步选取0.04 mmol/L的软脂酸联合炎症因子[25 ng/ml的肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor,TNF-α)或20 ng/ml的白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)]处理HepG2细胞24 h后,观察细胞FAT/CD36的蛋白表达情况,再用油红O和酶法检测细胞内的甘油三酯(triglyceride,TG)水平,ELISA检测细胞内游离脂肪酸(free fatty acid,FFA)含量。结果:软脂酸呈浓度依赖性上调HepG2细胞FAT/CD36的蛋白(r=0.873,P=0.000)和mRNA表达(r=0.884,P=0.000)及细胞内脂质积聚。炎症因子TNF-α和IL-6能明显刺激脂肪酸负荷的HepG2细胞FAT/CD36的蛋白表达进一步增加(P值分别为0.001和0.000)。油红O染色显示炎症因子TNF-α和IL-6能明显促进HepG2细胞的脂质积聚,胞内TG定量检测也显示炎症因子能促进HepG2细胞的脂质积聚,其中软脂酸联合TNF-α组与对照组及软脂酸组相比,P值分别为0.009和0.037,软脂酸联合IL-6组与对照组及软脂酸组相比,P值均为0.000。胞内FFA定量检测结果与油红O染色和TG检测结果一致,也显示炎症因子能促进HepG2细胞的脂质积聚,其中软脂酸联合TNF-α组与对照组及软脂酸组相比,P值分别为0.001和0.002,软脂酸联合IL-6组与对照组及软脂酸组相比,P值均为0.000。结论:炎症因子可以上调HepG2细胞FAT/CD36的表达并加重细胞内的脂质积聚。

单羧酸转运蛋白:在挥发性脂肪酸转运中的作用及影响基因表达的因素

饲粮在动物消化道内经微生物发酵产生大量的挥发性脂肪酸为动物体供能,单羧酸转运蛋白(MCT)在动物肠道对挥发性脂肪酸的吸收转运中起到重要作用,对MCT进行深入的研究对探明动物挥发性脂肪酸吸收转运的机理有重要意义。本文就挥发性脂肪酸的转运机制、MCT基因表达与组织分布、影响MCT基因表达的因素及作用机制进行综述。

中药虎杖和山楂提取物对载脂蛋白E基因敲除小鼠巨噬细胞PPARγ、ABCA1及CD36 mRNA表达的影响

目的观察中药虎杖、山楂配伍对载脂蛋白E基因敲除小鼠巨噬细胞源性泡沫细胞内过氧化体增殖物激活型受体γ、三磷酸腺苷结合盒转运子A1及CD36 mRNA表达的影响,从基因水平探讨虎杖和山楂配伍对动脉粥样硬化泡沫细胞形成的干预机制。方法培养载脂蛋白E基因敲除小鼠腹腔巨噬细胞,分为空白组、虎杖苷组、山楂提取物组、虎杖苷+山楂提取物组、洛伐他汀组、罗格列酮组及模型组。除空白组外,其他各组均同时加入氧化型低密度脂蛋白及脂多糖。各组细胞在培养箱内共孵育(泡沫化)2天,以逆转录聚合酶链反应法检测0 h、24 h和48 h各组细胞内过氧化体增殖物激活型受体γ、三磷酸腺苷结合盒转运子A1及CD36的mRNA表达。结果与空白组比较,干预24 h和48 h后,模型组及各用药组三个指标的表达均显著增高(P<0.01);与模型组比较,干预24 h后,虎杖苷+山楂提取物组和罗格列酮组过氧化体增殖物激活型受体γmRNA表达显著增高,虎杖苷组、虎杖苷+山楂提取物组和罗格列酮组三磷酸腺苷结合盒转运子A1 mRNA表达显著增高(P<0.05或P<0.01),各用药组CD36 mRNA表达无显著差异(P>0.05);干预48 h后,各用药组过氧化体增殖物激活型受体γ和三磷酸腺苷结合盒转运子A1 mRNA表达均显著增高,CD36 mRNA表达显著降低,且虎杖苷+山楂提取物组优于虎杖苷组、山楂提取物组及洛伐他汀组(P<0.05或P<0.01)。结论虎杖和山楂配伍可能具有与罗格列酮相似的过氧化体增殖物激活型受体γ激动作用,通过上调载脂蛋白E基因敲除小鼠巨噬细胞过氧化体增殖物激活型受体γ和三磷酸腺苷结合盒转运子A1 mRNA表达、下调CD36 mRNA表达的调控途径显著抑制巨噬细胞泡沫化过程,阻止动脉粥样硬化进程。

氧化低密度脂蛋白负荷对巨噬细胞ABCA1及CD36表达的影响

目的:探讨氧化低密度脂蛋白对THP-1巨噬细胞ATP结合盒转运体A1(ABCA1)及CD36表达之间的量效关系.方法:以不同浓度梯度(0,25,50,75,100mg/L)的氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)与1640培养基联合培养THP-1巨噬细胞株,分别应用real-timePCR及激光共聚焦检测THP-1巨噬细胞在不同浓度梯度氧化低密度脂蛋白刺激时的AB-CA1与CD36 mRNA及蛋白质表达水平.结果:THP-1巨噬细胞CD36及ABCA1 mRNA及蛋白质在基础状态下表达水平均为最低.ox-LDL负荷可显著诱导ABCA1 mRNA及蛋白质的表达(均P>0.01),二者在培养基中ox-LDL浓度为50mg/L时表达最强,但随着刺激浓度的进一步增加其表达反而下调;CD36 mRNA及蛋白质的表达亦呈现与ABCA1类似的趋势,但CD36 mRNA表达组间差异缺乏显著性(P>0.05).结论:巨噬细胞ABCA1及CD36 mRNA及蛋白质表达与ox-LDL刺激浓度之间均呈现一种"抛物线"式量效关系.

高脂膳食和跑台运动对雄性大鼠腓肠肌腺苷酸活化蛋白激酶／乙酰辅酶A羧化酶信号通路和膜蛋白脂肪酸转位酶蛋白含量的影响

目的探讨高脂膳食和8周有氧耐力运动对大鼠腓肠肌腺苷酸活化蛋白激酶（AMPK）／乙酰辅酶A羧化酶（ACC）信号通路和膜蛋白脂肪酸转位酶CD36含量的影响。方法建立营养性肥胖大鼠模型，并随机分为肥胖安静组（0c组）和肥胖运动组（OE组），另设普通饲料安静组（Nc组）和普通饲料运动组（NE组）。运动干预结束后检测腓肠肌AMPKα、P—AMPKα、ACC、P．ACC和膜蛋白CD36的蛋白水平。结果1）NE组与NC、OE及oc组相比，P—AMPKct的蛋白水平显著升高（P〈0．01）：OC组P-AMPKα的蛋白水平显著低于NC组（P〈0．01）。2）OC组P—ACC蛋白水平显著低于Nc组（P〈0．01）；OE组P—ACC的蛋白水平显著高于OC组（P〈0．01）。3）NE组与Nc、OE及0C组相比，OC组与NC组相比，膜蛋白CD36含量均无显著性变4-G（P〉0．05）。结论1）运动可改善高脂膳食引起的AMPK／ACC信号通路障碍。2）运动对体质量不同大鼠P-ACC蛋白水平的影响存在差异。3）腓肠肌膜蛋白CD36的含量并没有伴随AMPK／ACC信号通路的激活或抑制而发生显著变化。

B类清道夫受体CD36在脂代谢中的作用

CD36于1976年首次被发现并被归属于抗蛋白酶血小板膜表面糖蛋白[1]。CD36参与脂质代谢、长链脂肪酸吸附、细胞凋亡残物清理和巨噬细胞吞噬等过程,过去集中研究其表达调节作用可能是巨噬细胞泡沫化和动脉粥样硬化形成的关键因素[2]。迄今为止,发现CD36与角膜炎、肿瘤和肥胖等疾病均有关[3]。本文就CD36的特征,

西罗莫司抑制脂肪酸摄取改善小鼠肝脏脂质积聚

目的:研究西罗莫司对小鼠肝脏脂质积聚的影响及机制初探。方法:6~8周龄雄性C57BL/6J小鼠,随机分为3组:A组为普通饮食组(n=12),B组为高脂饮食组(n=9),C组为高脂饮食加隔天注射西罗莫司组(n=7),喂养14周。全自动生化分析仪检测血清生化指标。酶联免疫吸附法和酶偶联比色法分别检测肝脏游离脂肪酸(free fatty acid,FFA)和甘油三酯(triglyceride,TG)的含量。Western blot检测脂肪酸转运酶(fatty acid translocase,FAT/CD36)蛋白的表达水平。荧光显微镜观察原代肝细胞对荧光标记FFA的动态摄取。结果:与A组相比,B组小鼠体质量(q=6.68,P=0.000),血清TG(q=4.88,P=0.045),高密度脂蛋白(high-density lipoprotein,HDL)(q=6.311,P=0.002),谷草转氨酶(aspirate aminotransferase,AST)(q=8.84,P=0.001)水平明显增高,肝脏组织TG(q=14.4,P=0.000),FFA(q=18.0,P=0.000)也明显增高。C组小鼠较B组体质量(q=7.99,P=0.000),血清TG(q=4.636,P=0.050),AST(q=5.16,P=0.016)及肝脏TG(q=8.91,P=0.000)和FFA(q=14.1,P=0.000)都显著降低。Western blot结果显示C组小鼠肝脏CD36的蛋白表达水平较B组明显降低。FFA动态摄取实验通过定量荧光强度显示西罗莫司能明显抑制肝细胞对FFA的摄取速度(各时间点P均<0.05)。结论:西罗莫司能抑制肝细胞对外源性FFA的摄取,减轻肝脏脂质积聚,其作用机制可能与CD36相关。

脂肪酸跨膜转运蛋白及其表达的调控

细胞对长链脂肪酸的吸收主要是依靠脂肪酸跨膜转运蛋白来完成的,其异常表达与多种糖脂代谢疾病密切相关,因此有望成为早期诊断及临床治疗的重要指标。本文将对几种最为重要脂肪酸跨膜转运蛋白的结构、功能及其表达的调控做一综述。

肾脏细胞CD36在炎症因子诱导的脂肪酸摄取及脂质沉积中的作用

慢性炎症和脂质代谢紊乱是慢性肾病的重要特征,炎症因子影响肾脏细胞脂质代谢的作用机制尚不清楚,该研究旨在探讨炎症因子是否通过上调脂肪酸转运酶CD36的表达促进肾脏细胞脂肪酸摄取及脂质沉积。通过给予HMCs及HK2细胞肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor-α,TNF-α)和白介素6(interleukin-6,IL-6)刺激处理24 h,应用qRT-PCR检测CD36的表达量,酶法检测HK2细胞内的甘油三酯(triglycercide,TG)水平。构建CD36过表达的细胞模型,使用荧光标记脂肪酸,观测细胞对外源性脂肪酸的摄取速率。然后利用小RNA干扰技术,构建CD36低表达的细胞模型,检测CD36低表达时细胞脂肪酸摄取速率及胞内甘油三酯、游离脂肪酸(free fatty acid,FFA)含量,葡萄糖调节蛋白78(GRP78)及内质网跨膜激酶(IRE1)的m RNA表达量。结果显示,炎性因子TNF-α和IL-6促进HMCs及HK2细胞TG的累积增加,并刺激细胞CD36的表达;CD36过表达促进HMCs及HK2细胞对FFA的摄取。当CD36表达被干扰后,炎性因子诱导的肾脏细胞TG及FFA的累积增加、FFA的摄取速率、细胞内GRP78、IRE-1的m RNA表达量及ROS含量均受到了抑制。该项研究表明,在HMCs及HK2细胞中,炎症因子可能通过促进CD36表达,导致细胞对FFA摄取增多,进而引起细胞脂质积聚;干预CD36能够改善炎性因子引起的脂质积聚、内质网应激以及细胞损伤,提示CD36可作为慢性肾脏疾病的潜在治疗靶点。

基于CD36探究中医药防治非酒精性脂肪性肝病的研究进展

非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)是全球常见的慢性肝病之一,发病机制复杂。清道夫受体B类蛋白CD36是一种重要的脂肪酸转运体,在NAFLD患者血浆及肝脏中表达升高。文章从肝脏脂质代谢、肠道脂质吸收、胰岛素抵抗、肝脏炎症反应4个方面归纳总结CD36参与脂肪酸摄取、脂质从头合成、β氧化、乳糜微粒形成、胰岛素信号及炎症信号传导在NAFLD中的触发作用及相关机制,并从中药复方、成药、有效成分方面综述中医药针对CD36发挥抗NAFLD作用研究进展,分析CD36在NAFLD疾病中的治疗潜力,为治疗策略提供新思路。

脂质代谢相关基因多态性与动脉粥样硬化

脂质代谢异常是动脉粥样硬化发展的重要因素,受多个脂质代谢相关蛋白的调控。胆固醇酯转运蛋白(CETP)介导血浆脂蛋白之间胆固醇酯的转运,在胆固醇酯逆转运过程中发挥关键作用。氧化低密度脂蛋白受体-1(OLR-1)和CD36参与脂质代谢、巨噬细胞泡沫化及动脉粥样硬化斑块形成。CETP、OLR-1和CD36基因多态性影响编码蛋白的生物活性和脂质代谢,与心血管疾病风险相关,被认为是动脉粥样硬化的易感基因。

丹酚酸B在巨噬细胞胆固醇外排中的作用

目的考察丹酚酸B(SAB)对巨噬细胞胆固醇外排的影响。方法分别采用巨噬细胞RAW264.7和PMA诱导的THP-1细胞,利用流式细胞仪检测丹酚酸B对已摄取DiI-acLDL的细胞外排脂质作用的影响,对RAW264.7细胞表面ABCA1蛋白表达水平的影响。采用ABCA1的抑制剂DIDS及小分子干扰RNA的方法检测ABCA1在丹酚酸B诱导的促进脂质外排过程中的作用。进而利用靶向CD36的小分子干扰RNA,通过抑制CD36的表达,检测CD36在丹酚酸B促进载脂巨噬细胞脂质外排过程中的作用。结果采用DiI荧光标记的脂质检测巨噬细胞对脂质的外排作用,结果显示SAB显著增加了荷脂细胞对DiI-acLDL的外排作用。对脂代谢相关转运蛋白表达的检测结果显示,在荷脂的RAW264.7细胞中,SAB能够以一定剂量依赖的方式增加细胞表面ABCA1蛋白水平的表达。进一步研究显示,上述SAB促进外排的作用可被ABCA1的抑制剂或者siRNA的作用消除,确证了ABCA1在SAB介导的脂质外排过程中的重要作用。同样利用CD36小分子干扰RNA将CD36表达抑制后,SAB促进外排的作用消失,说明SAB介导的细胞脂质的外排作用同样依赖于CD36。结论丹酚酸B通过上调ABCA1的表达,促进巨噬细胞胆固醇或脂质的外排,且该作用依赖于ABCA1及CD36,为SAB抗动脉粥样硬化作用新机制的研究提供了重要依据。

CD36在慢性肾脏病中的作用

CD36是一个多配体清道夫受体，广泛分布于不同细胞表面，如血小板、单核／巨噬细胞、内皮细胞和平滑肌细胞表面。它的配体范围十分广泛，包括经化学修饰的脂蛋白，如低密度脂蛋白、长链脂肪酸、多聚阴离子磷脂、

法科学家发现导致人体喜爱油腻食品的受体

《食品科学》讯，法国科学家最近发现，动物对油腻食品的偏好来自舌头味觉感应组织中的一个受体，它专门负责感应脂类食物。据最新法国《科学与未来》杂志报道，法国国家农艺研究所和勃艮第大学的科学家日前发现，老鼠舌头感应组织上的受体CD36有感应脂类味道的特殊作用。由于与过去知道的感应“酸、甜、苦、咸”等味道的受体不同，它将成为一个新的味道感受体。受体CD36又称“脂肪或脂肪酸运输器”，它是一种糖蛋白，身体其他组织中也有它的身影，主要功能县储存脂肪．

低黏附性胃癌PET/CT影像学特征和脂代谢相关机制研究

目的通过比较非低黏附与低黏附性胃癌在18F FDG-PET/CT摄取率、生化指标及糖脂代谢相关基因表达上的差异,探索低黏附性胃癌存在通过脂肪酸代谢获取能量的可能性。方法回顾性分析2013年1月至2021年12月接受PET/CT检查的94例胃癌患者的临床资料,按照WHO分型分为低黏附性癌(n=28例)和非低黏附性癌(n=66例)。应用SPSS 25.0统计软件进行数据分析,两组间计量资料采用t检验或Mann-Whitney U检验;计数资料采用χ^(2)检验;采用Kaplan-Meier生存曲线分析两组间总生存期(OS)的差异。P<0.05表示差异有统计学意义。结果低黏附癌组患者的标准化摄取平均值(SUVmean)显著低于非低黏附性癌组(P=0.049),载脂蛋白AI和高密度脂蛋白显著高于非低黏附组(P<0.05);Kaplan-Meier曲线显示低黏附性癌组患者OS显著低于非低黏附组(P=0.016)。免疫组织化学染色(IHC)检测低黏附性癌组织中白细胞分化抗原36(CD36)和脂肪酸结合蛋白4(FABP4)表达显著高于非低黏附性癌(P<0.05),葡萄糖转运蛋白1(GLUT1)显著低于非低黏附性癌(P=0.033);单因素和多因素COX回归分析显示SUVmean值低(<3.25 vs.≥3.25,HR=4.7,P=0.004)、低黏附性癌(HR=5.1,P=0.031)、分期晚(IV期,HR=10.7,P=0.010)和肿瘤体积大(≥5 cm vs.<5 cm,HR=5.6,P=0.041)是影响患者OS的独立危险因素。结论低黏附性胃癌患者的糖代谢相关基因表达显著低于非低黏附性胃癌,脂代谢相关基因表达显著高于非低黏附性胃癌,同时伴随血清中载脂蛋白AI以及高密度脂蛋白显著升高。由于SUVmean显著低于非低黏附性癌,往往导致在PET/CT检查过程中不显影。