RhoA、CD4^(+)CD25^(+)调节性T细胞、MYBL2在胃癌患者中的表达及对预后和生存时间的影响

目的:探讨RhoA、CD4^(+)CD25^(+)调节性T细胞、成髓细胞瘤转录因子第2亚型(MYBL2)在胃癌患者中的表达及对预后和生存时间的影响。方法:选取2017年1月至2019年1月于本院就诊的134例胃癌患者术后癌组织标本作为研究对象,另选取其中62例胃癌患者相应的癌旁组织标本及40例同期非胃癌患者正常胃黏膜组织标本进行对照,检测癌组织、癌旁组织、正常胃黏膜组织中RhoA、CD4^(+)CD25^(+)调节性T细胞、MYBL2的表达情况,分析其对胃癌预后及生存时间的影响。结果:RhoA,CD4^(+)CD25^(+)调节性T细胞、MYBL2在癌组织中的阳性率均明显高于癌旁组织和正常胃黏膜组织(P<0.05)。胃癌患者术后平均生存时间为(28.61±1.34)个月,其中RhoA、CD4^(+)CD25^(+)调节性T细胞、MYBL2阳性患者的生存时间均短于阴性患者(P<0.05)。RhoA(+)、CD4^(+)CD25^(+)调节性T细胞(+)、MYBL2(+)是胃癌患者预后的危险因素(P<0.05)。结论:检测RhoA,CD4^(+)CD25^(+)调节性T细胞、MYBL2的表达可作为胃癌病情严重程度、预后及生存时间评估的重要补充手段。

NSUN2通过m^(5)C修饰介导系统性红斑狼疮患者中CD4^(+)T细胞的活化

目的:探究mRNA的m^(5)C甲基转移酶NSUN2对系统性红斑狼疮(SLE)患者CD4^(+)T细胞活化的影响。方法:通过慢病毒感染和有限稀释法构建NSUN2稳定敲除的Jurkat细胞单克隆株,Western blot和免疫荧光检测Jurkat细胞中NSUN2的敲除效果,Dot blot检测NSUN2敲除后m^(5)C的修饰水平变化。使用抗人CD3/CD28抗体刺激Jurkat细胞活化,分别在24 h和48 h使用流式细胞术检测Jurkat细胞活化标志物CD69和CD25的表达水平,RT-qPCR检测Jurkat细胞活化后IL-2和TNF-α的转录水平;建立NSUN2^(+/-)小鼠模型,使用磁珠分离CD4^(+)T细胞,通过体外诱导细胞活化,进一步评价NSUN2的敲低对CD4^(+)T细胞活化的影响。使用Arraystar mRNA表观转录组芯片检测NSUN2敲除后Jurkat细胞中基因m^(5)C修饰水平和表达水平,获得受NSUN2调控的m^(5)C修饰的靶基因,利用GO和KEGG富集分析获得NSUN2调控的重要信号通路,结合SLE患者CD4^(+)T细胞中差异的m^(5)C修饰基因集,筛选获得受NSUN2调控的且与SLE疾病相关的靶基因,并进一步利用GO和KEGG等分析NSUN2调控系统性红斑狼疮CD4^(+)T细胞功能的潜在通路。结果:采用CRISPR-Cas9技术,成功获得NSUN2敲除的Jurkat细胞单克隆株,与NSUN2-NC组相比,NSUN2-KO组m^(5)C修饰水平下调,Jurkat细胞的活化标志物CD69和CD25表达水平上调,活化相关细胞因子IL-2和TNF-α表达水平上调(P<0.05);与野生型小鼠相比,NSUN2^(+/-)小鼠Naive CD4^(+)T细胞的活化标志物CD69的表达水平上调。机制上发现,Jurkat细胞中存在受NSUN2调控的基因集,GO和KEGG富集显示这些基因与T细胞活化过程相关。结合SLE患者CD4^(+)T细胞中差异的m^(5)C修饰基因集,筛选获得受NSUN2调控且与SLE疾病相关的靶基因集,GO和KEGG富集分析证实这些基因集与CD4^(+)T细胞功能相关。结论:NSUN2的敲除/敲低促进了Jurkat细胞和小鼠Naive CD4^(+)T细胞的活化,初步筛选出NSUN2调控SLE患者CD4^(+)T细胞活化的靶基因集及其潜在信号通路。

CD4^+CD25^+CD127^(low/-)调节性T细胞在晚期胃癌中的表达及意义

目的研究CD4^+CD25^+CD127low/-调节性T细胞(Treg)在晚期胃癌患者外周血中的表达水平及其对化疗疗效判断的意义。方法采用流式细胞术(FCM)检测30例晚期胃癌患者和10例健康体检者外周血中CD4^+CD25^+CD127low/-Treg的表达水平。结果晚期胃癌患者外周血中CD4^+CD25^+CD127low/-Treg占CD4^+T淋巴细胞的百分比为(10.41±2.85)%,明显高于健康体检者(5.05±1.32)%(t=8.04,P<0.01),也明显高于化疗2周期后(7.07±1.45)%,(t=5.72,P<0.01)和化疗4周期后(7.30±1.65)%(t=5.17,P<0.01)。晚期胃癌患者化疗2周期后外周血中CD4^+CD25^+CD127low/-Treg占CD4^+T淋巴细胞的百分比为(7.07±1.45)%,与化疗4周期后(7.30±1.65)%比较,差异无统计学意义(t=0.57,P>0.05)。晚期胃癌患者外周血中CD4^+CD25^+CD127low/-Treg表达水平与患者性别、年龄、胃癌相关肿瘤抗原及肿瘤部位无相关性(P>0.05),低分化程度与中分化程度差异无统计学意义(P>0.05)。晚期胃癌患者化疗2周期后缓解组(完全缓解^+部分缓解)外周血CD4^+T细胞中CD4^+CD25^+CD127low/-Treg的水平为(6.25±1.08)%与化疗2周期后未缓解组(病变稳定^+疾病进展)的(7.98±1.27)%比较,差异有统计学意义(t=4.02,P<0.01)。结论晚期胃癌患者外周血中CD4^+CD25^+CD127low/-Treg的表达水平与肿瘤缓解情况有关。

结核性胸膜炎患者外周血及胸水中CD4^+ CD25^+ CD127^-调节性T细胞表达水平的临床意义

目的:探讨结核性胸膜炎外周血和胸水中CD4+ CD25+ CD127-调节性T细胞表达水平及其临床意义。方法:收集住院收治的初治结核性胸膜炎患者30例和非结核性胸膜炎患者20例,另选择健康体检人员20例为正常对照组。流式细胞术检测外周血及胸水中CD4+ CD25+ CD127-调节性T细胞的百分率。结果:结核性胸膜炎组外周血中CD4+ CD25+ CD127- Treg细胞占CD4+T细胞总数的百分比显著高于正常对照组和非结核性胸膜炎组(P<0.05)。结核性胸膜炎组胸水中CD4+ CD25+ CD127- Treg细胞占CD4+T细胞总数的百分比明显高于非结核性胸膜炎组(P<0.05)。结核性胸膜炎组患者在规则治疗1、3、7、14 d时,外周血和胸水中CD4+ CD25+ CD127- Treg细胞占CD4+T细胞总数的百分比均逐渐下降,外周血中CD4+ CD25+ CD127- Treg细胞占CD4+ T细胞总数的百分比于治疗3 d时显著低于入院时水平(P<0.05),胸水中CD4+ CD25+ CD127- Treg细胞占CD4+ T细胞总数的百分比于治疗7 d时显著低于入院时水平(P<0.05)。结论:CD4+ CD25+ CD127-调节性T细胞参与了结核性胸膜炎的发病机制,且可作为判断肺结核患者的免疫状态、指导用药、疗效观察的指标。

CD4^+CD25^+CD127^(low/-)调节性T细胞在寻常型银屑病发病机制中的作用

目的:探讨CD4^+CD25^+CD127^(low/-)调节性T细胞(Treg)在寻常型银屑病(PV)发病机制中的作用。方法:利用流式细胞仪检测外周血Treg细胞的数量;MTT法检测Treg细胞对自身CD4^+CD25-T细胞增殖的抑制作用;采用酶联免疫吸附试验法检测血清中白介素-10(IL-10)、转化生长因子-β1(TGF-β1)的含量。结果:PV患者外周血Treg细胞数量与正常对照组差异无统计学意义(P>0.05),但对自身CD4^+CD25-T细胞增殖的抑制百分率降低(P<0.01);PV患者血清IL-10含量较正常对照组低(P<0.01),血清TGF-β1的含量较正常对照组高(P<0.01)。结论:PV患者Treg细胞的功能缺陷及分泌IL-10的降低可能参与PV的发病机制。

HIV感染者外周血CD4^+ CD25^+ Foxp3^+ /CD127^(low/-)调节性T细胞表达水平对疾病进展的影响

目的:探讨HIV感染者外周血中CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞(Treg)、CD4+CD25+CD127low/-Treg的水平及其与其他免疫指标的关系。方法:采集68例未经抗HIV治疗的HIV/AIDS患者(长期不进展组即LTNP组29例、典型进展的HIV感染组27例、AIDS组12例)及20例健康成人的外周抗凝全血,经免疫荧光染色,应用流式细胞仪分析CD4+T细胞、CD8+T细胞、NK细胞及CD4+CD25+Foxp3+/CD127low/-Treg的含量,并进行统计学分析。结果:除CD8+T细胞外,HIV/AIDS患者外周血中CD4+T细胞、NK细胞、CD4+/CD8+结果均明显低于健康对照组(P<0.05);随着疾病的进展,LTNP组、HIV组、AIDS组CD4+T细胞百分比、绝对值计数,CD8+T细胞绝对计数,NK细胞绝对计数,CD4+/CD8+比值逐渐下降,而CD8+T细胞百分比逐渐上升。对CD4+CD25+Foxp3+Treg与CD4+CD25+CD127low/-Treg百分含量、绝对计数进行多重比较发现,各组间CD4+CD25+Foxp3+Treg与CD4+CD25+CD127low/-Treg所占CD4+T细胞百分含量的差异均有统计学意义(P<0.05),并且随着疾病的发展,CD4+CD25+Foxp3+/CD127low/-Treg细胞百分含量逐渐上升,LTNP组与健康对照组之间、HIV组和AIDS组之间CD4+CD25+Foxp3+/CD127low/-Treg绝对计数差异无统计学意义(P>0.05),其余各组间的差异均有统计学意义(P<0.05),并且随着疾病的发展,CD4+CD25+Foxp3+/CD127low/-Treg绝对计数逐渐下降。结论:CD4+CD25+Foxp3+/CD127low/-Treg在HIV持续感染的免疫发病机制中有一定作用。

卵巢癌患者外周血CD4^＋ CD25^＋ CD127^-调节性T细胞的检测及其临床意义

目的探讨卵巢癌患者外周血CD4+CD25+CD127-调节性T细胞数量的变化。方法采集30例卵巢癌患者和10例健康人的外周抗凝血,应用CD4(PE-CY5),CD25(FITC),CD127(PE)等特异性荧光抗体标记后,通过流式细胞仪对CD4+CD25+CD127-调节性T细胞进行三色荧光抗体检测。结果卵巢癌患者的外周血中CD4+CD25+CD127-调节性T细胞的百分比明显高于正常人(P<0.05),其中卵巢癌患者外周血调节性T细胞的比例高达4.39%±1.36%,而正常人仅为0.77%±0.09%。结论CD4+CD25+CD127-调节性T细胞的比例增加可能引起卵巢癌免疫逃逸,并可能在卵巢癌的发生发展中起了重要作用。

CD4^+ CD25^(high) CD127^(low/-)调节性T细胞在多发性骨髓瘤患者外周血的表达

目的探讨多发性骨髓瘤(MM)患者外周血CD4+CD25highCD127low/-调节性T(Tregs)细胞表达水平及临床意义。方法采用流式细胞术(FCM)检测30例MM患者和20例健康对照者外周静脉血CD4+CD25highCD127low/-Tregs细胞水平。结果 1 MM组CD4+CD25high CD127low/-Tregs细胞表达明显高于正常对照组(P<0.05)。2MM组不同国际分期系统(ISS)分期CD4+CD25highCD127low/-Treg细胞水平均高于正常对照组,随着疾病进展,Ⅲ期明显高于Ⅱ期(P<0.05)。3MM组化疗后外周血CD4+CD25highCD127low/-Tregs细胞水平较化疗前显著下降(P<0.05)。结论 MM患者外周血CD4+CD25highCD127low/-Treg细胞比例明显升高,可能是MM免疫逃逸的一个重要机制;进展期Tregs的变化为MM患者及时进行临床干预提供实验依据。

类风湿关节炎患者CD4^+CD25^+CD127^(LOW/-)调节性T细胞检测及意义

目的研究CD4+CD25+CD127 LOW/-调节性T细胞(Tregs)在类风湿关节炎患者(RA)外周血中的比例改变,并探讨其在疾病进程中的意义。方法选取活动期及稳定期RA患者,采用流式细胞术,检测外周血中CD4+CD25+CD127 LOW/-Treg细胞占CD4+细胞的比例,并与健康者进行比较。结果 RA患者CD4+CD25+细胞所占比例与健康对照组差异无统计学意义;而活动期患者外周血CD4+CD25+CD127 LOW/-Treg细胞明显低于稳定期组和健康对照组(P<0.05)。结论类风湿性关节炎活动期时CD4+CD25+CD127 LOW/-Treg细胞明显减少,这群调节性T细胞可能参与了类风湿性关节炎的疾病进程。

黄芪注射液对NOD小鼠CD4^+CD25^+CD127^(-/low)调节性T细胞的影响

目的通过对NOD小鼠应用大剂量的黄芪注射液,观察黄芪对于CD^4+CD25^+CD127^-调节性T细胞及相关细胞因子的影响情况。方法随机将20只NOD小鼠分成4组,每组5只,分别给予生理盐水、环磷酰胺注射液、黄芪注射液、黄芪联合环磷酰胺注射液各0.6 ml,连续给药2周后,取小鼠脾脏制成脾细胞悬液上流式细胞仪检测CD4^+CD25^+CD127^(-/low)调节性T细胞水平,取小鼠外周血采用酶联免疫吸附实验法(ELISA)、检测小鼠血液中的IL-10、IL-6的变化情况。结果调节性T细胞的检测结果为黄芪注射液组及联合用药组较空白对照组和环磷酰胺组有显著差别(P<0.05),而环磷酰胺组与空白对照组比较没有显著差别(P>0.05)。IL-10的检测结果为,黄芪注射液组与联合用药组较空白对照组和环磷酰胺组有统计学意义(P<0.05)。IL-6的检测结果为,其余3组均与空白对照组比较明显降低IL-6的含量(P<0.05)。结论大剂量的黄芪注射液产生免疫调节作用,可能是通过提高Treg细胞的水平而达到抑制自身反应性T细胞的增殖和分化,以及同时提高细胞因子IL-10的水平,降低IL-6的水平,抑制炎症反应,共同达到免疫调节的作用。

半乳凝素-10在CD4^+ CD25^+ CD127^(low/-)调节性T细胞中的表达与意义

目的探讨半乳凝素-10(galectin-10)在CD4+CD25+CD127low/-调节性T细胞(regulatory T cell,Treg)中的表达及其与Foxp3的相关性。方法通过流式细胞术分选健康人外周血和胃癌患者癌旁淋巴结中Treg细胞与CD4+CD25-CD127+T细胞,经微量抽提RNA后,用RT-PCR检测galectin-10和Foxp3的mRNA表达水平。结果galectin-10和Foxp3的mRNA显著表达于Treg细胞,几乎不表达于CD4+CD25-CD127+T细胞。健康人外周血和胃癌患者癌旁淋巴结中的结果一致。结论ga-lectin-10基因高表达于Treg细胞中,可以作为Treg细胞一项新的标志物。

CD4^+CD25^+CD127^-调节性T细胞在维吾尔族和汉族晚期非小细胞肺癌患者外周血中的表达及其临床意义

目的探讨维吾尔族和汉族晚期非小细胞肺癌患者外周血中CD4^+CD25^+CD127^-调节性T细胞(Treg)的表达及临床意义。方法采用流式细胞术测定58例Ⅲb、Ⅳ期非小细胞肺癌患者和20例健康人外周血中CD4^+CD25^+CD127^-Treg的水平并进行比较,并进一步比较分析维吾尔族和汉族肺癌患者间外周血中CD4^+CD25^+CD127^-Treg的水平。结果肺癌患者外周血中CD4^+CD25^+CD127^-Treg占CD4^+T细胞的百分率显著高于健康人(P<0.05)。维吾尔族与汉族肺癌患者外周血中CD4^+CD25^+CD127^-Treg占CD4^+T细胞的百分率比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论肺癌患者中异常增高的Treg细胞抑制了机体正常的抗肿瘤免疫效应,并与肺癌的进展有关,但在不同民族的晚期非小细胞肺癌患者中尚未观察到Treg细胞水平存在差异。

慢性丙型肝炎患者中CD4^+CD25^+CD127^-调节性T细胞的表达及意义

目的探讨CD4^+CD25^+CD127^-调节性T细胞在慢性丙型肝炎(HCV)患者中的表达及其临床意义。方法收集HCV患者67例,并根据是否吸毒分为吸毒丙肝组35例和非吸毒丙肝组32例;健康体检人员32例作为对照。采用流式细胞仪检测患者外周血中CD^4+CD25^+CD127^-调节性T细胞的表达;应用实时荧光定量PCR的方法检测其HCV RNA含量。结果慢性HCV患者中的吸毒感染组与非吸毒感染组的外周血中CD4+CD25+CD127-调节性T细胞在CD4+T细胞中所占比率分别为:3.84±1.95%、4.44±1.67%,明显低于对照组6.10±1.65%(P<0.01);而吸毒组与非吸毒组慢性HCV患者血液CD4^+CD25^+CD127^-调节性T细胞的表达值相比差异无统计学意义;HCV患者抗病毒治疗前血液CD4^+CD25^+CD127^-调节性T细胞的表达值明显低于治疗后和正常对照组(P<0.01)。结论 HCV患者治疗前患者外周血CD4^+CD25^+CD127^-调节性T细胞的表达值较正常对照组明显降低,而在治疗有效后升高,说明CD4^+CD25^+CD127^-调节性T细胞参与了HCV患者的机体免疫过程,而CD4^+CD25^+CD127^-调节性T细胞在外周血中的表达水平可能成为监测HCV患者体内细胞免疫状态和机体抗病毒免疫应答的指标。

肾移植患者外周血中的CD4~＋ CD25~＋ CD127^(low/-)调节性T细胞

背景:越来越多的实验在分析免疫耐受标志,以期能够更好地辅助患者进行移植后免疫抑制治疗。目的:分析肾移植后患者外周血中CD4+CD25+CD127low/-调节性T细胞在肾移植免疫耐受中的作用。方法:采集62例肾移植后患者(急性排斥反应组22例,移植稳定组40例)及20例健康对照者的外周抗凝血,经免疫染色,应用流式细胞仪分析CD4+CD25+CD127low/-调节性T细胞所占CD4+T细胞百分含量,同时采用ELISA方法检测患者血清中白细胞介素2和白细胞介素10的质量浓度。结果与结论:移植稳定组中CD4+CD25+CD127low/-调节性T细胞所占CD4+T细胞百分含量显著高于健康对照组和急性反应排斥组(P<0.01);CD4+CD25+CD127low/-调节性T细胞百分含量与白细胞介素2呈显著负相关(P<0.05),与白细胞介素10呈显著正相关(P<0.01)。提示CD4+CD25+CD127low/-调节性T细胞在肾移植后免疫耐受的机制中发挥了一定作用。

SLE患者外周血中CD4^+CD25^+CD127^(low/-)标记的调节性T细胞与临床表现和实验室指标相关性研究

目的:探讨CD4+CD25+CD127low/-标记的调节性T细胞(Treg)在系统性红斑狼疮发病机制中的作用。方法:用流式细胞仪检测45例系统性红斑狼疮(SLE)患者和45例年龄、性别相匹配的健康志愿者外周血CD4+T细胞中Treg的百分比,同时分析SLE患者外周血中的CD4+CD25+CD127low/-标记的Treg与其临床表现、实验室指标的相关性。结果:SLE患者外周血CD4+T细胞中Treg百分比与健康对照组比较差异无统计学意义。在SLE患者中,Treg的百分比与抗核小体抗体呈正相关(r=0.299,P=0.046),有光敏感的SLE患者中Treg较无光敏感组增高(P=0.017),余均无统计学差异。结论:SLE患者外周血中以CD4+CD25+CD127low/-标记的Treg中可能因含有部分无免疫抑制活性的效应性T细胞而特异性差,因此可能不适合用于临床免疫抑制治疗。

CD4^＋CD25^＋CD127^low识别人外周血CD4^＋CD25^＋调节性T细胞的优势

目的:探索可用于检测人外周血中CD4+CD25+Treg细胞的最佳标记物。方法:以52名健康人和47名非血液系统肿瘤患者为研究对象,采用多色免疫荧光素标记和多参数流式细胞术同时检测外周血中CD4+CD25high、CD4+CD25+FoxP3+和CD4+CD25+CD127lowT细胞,并以经典指标CD4+CD25high和CD4+CD25+FoxP3+为标准,分析和比较CD4+CD25+CD127low作为识别CD4+CD25+Treg细胞的可行性及其优势。结果:健康人和肿瘤患者外周血CD4+CD25high、CD4+CD25+FoxP3+和CD4+CD25+CD127lowT细胞占CD4+T细胞百分比分别为(1.769±0.682)和(2.958±1.392);(2.905±1.772)和(5.128±2.227)以及(5.396±1.306)和(7.175±2.565)。三者呈相同的趋势,即肿瘤患者组>健康人组,且三者之间呈显著正相关(P<0.05)。用两种不同标记法高纯度分选CD4+CD25high和CD4+CD25+CD127lowT细胞群后,FoxP3阳性率分别为90.9和92.7。结论:CD4+CD25+CD127low三标记法可以帮助识别CD4+CD25+Treg和部分激活的CD4+T细胞,提高CD4+CD25+Treg细胞的可检出数量,并且不影响细胞活性度,是反映CD4+CD25+Treg细胞更理想的指标。

中国健康人外周血中具有CD4^+CD25^(nt/hi)CD127^(lo)特征的调节性T细胞频率

目的:初步确定健康人外周血中具有CD4+CD25nt/hiCD127lo特征的调节性T细胞(Treg)频率,为临床相关疾病的研究及Treg的分选提供参考。方法:采集312名8~60岁(5个年龄组)、不同性别健康人的静脉血,经三重免疫荧光染色,用流式细胞术分析CD4+CD25nt/hiCD127loTreg细胞频率,并观察细胞内Foxp3转录因子的表达。结果:健康人CD4+CD25nt/hiCD127loTreg细胞在外周血中约占CD4+T细胞的(6.55±0.11)%,各年龄组之间有差异(P=0.015),组内性别之间也存在统计学意义(P<0.05);CD25nt/hiCD127lo细胞特异性地表达Foxp3转录因子。结论:初步确定了中国健康人外周血中具有CD4+CD25nt/hiCD127lo表达特征的细胞频率,为Treg细胞的临床研究奠定了基础;CD25nt/hiCD127lo作为CD4+CD25+Treg细胞表面的特征性标志,可在分选时排除其他细胞干扰,获得较完整的Treg细胞。

HIV-1感染者CD4＋CD25^nt/hi CD127^lo调节性T细胞PD-1表达水平与疾病进展的关系

目的:阐明HIV-1感染者外周血中具有CD4+CD25nt/hiCD127lo特征的调节性T细胞(Treg)表面PD-1的表达水平与疾病进展的关系。方法:选取108名未经治疗的不同进展期的HIV-1感染者和27名健康人对照,采集静脉血,用Ficoll-Hypaque密度梯度离心法分离获得PBMC,加入PerCP-CD4抗体、FITC-CD25抗体、PE-CD127抗体和APC-PD-1抗体,经细胞表面四色染色、流式细胞术(FCM)分析Treg表面PD-1的表达;另将50 L全血加入Trucount绝对计数管,采用Multitest CD3/CD8/CD45/CD4试剂盒检测CD4+T细胞绝对数;分离静脉血血浆,NucliSens EasyQ测定血浆HIV-1病毒载量;实验数据采用SPSS14.0统计学软件分析处理。结果:HIV-1感染者Treg表面PD-1表达水平显著高于健康人(5.33%±2.24%vs1.72%±0.65%,P<0.01);AIDS期(7.87%±2.23%)明显高于进展期(5.21%±1.72%,P<0.05)和新近感染者(3.22%±1.01%,P<0.05);HIV-1感染者Treg表面PD-1表达水平与血浆中的HIV-1病毒载量和CD4+T细胞绝对数密切相关。结论:首次证实HIV-1感染者外周血中Treg表面PD-1表达增加,且表达水平与病程进展相关。该结果为进一步揭示HIV-1感染中Treg的效应机制、探索新的免疫治疗方案提供了理论及实验依据。

TF3-H4对CD4^+CD25^+调节性T细胞和CD4^+CD25^-效应性T细胞早期活化的影响

目的观察1',2',3',7'-四氢茶黄素-3,3'-双没食子酸酯(TF3-H4)对CD4+CD25+调节性T细胞和CD4+CD25-效应性T细胞早期活化的影响,分析TF3-H4对两群功能相反的CD4+T细胞的作用。方法免疫磁珠分离BALB/c小鼠脾脏CD4+CD25+调节性T细胞和CD4+CD25-效应性T细胞,加入ConA或PDB,和TF3-H4共同孵育12 h后收集细胞,流式细胞仪分析细胞表面早期活化标志CD69的表达。结果在ConA和PDB的作用下,两群细胞早期活化标志CD69的表达均升高。TF3-H4(20 mg.L-1)不能抑制PKC激动剂PDB激活的CD4+CD25-效应性T细胞CD69的表达,却能抑制ConA激活的CD4+CD25-效应性T细胞CD69表达;同时,TF3-H4也能明显抑制ConA激活的CD4+CD25+调节性T细胞的CD69表达。结论茶黄素衍生物TF3-H4可能经由TCR活化途径的上游抑制CD4+CD25-效应性T细胞活化;TF3-H4对CD4+CD25+调节性T细胞和CD4+CD25-效应性T细胞早期活化的抑制作用,可能是该类化合物发挥抗炎、抗肿瘤作用的机制之一。

多耐药肺结核患者特异性细胞免疫失衡与调节性T细胞CD4^+CD25^+CD127^(low)有关

目的:探讨调节性T细胞CD4+CD25+CD127low、CD4+及CD8+T细胞在多耐药结核患者中的免疫调节作用。方法:采取30例健康体检者(HD)、30例非耐药初治肺结核(S-TB)患者及30例多耐药结核病(MDR-TB)患者2 ml肝素抗凝外周静脉血,经CD3、CD4、CD8、CD25、CD127流式抗体标记后Beckman流式细胞仪计数各组CD4+CD25+CD127low、CD3+、CD4+、CD8+百分比含量,计算CD4/CD8值。结果:MDR-TB组CD4+CD25+CD127low调节性T细胞百分比含量明显高于HD组与S-TB组(P=0.000),MDR-TB组CD4+T细胞百分比含量明显低于HD组与S-TB组(P<0.05),MDR-TB组CD8+T细胞百分比含量与HD组与STB组相比明显上升(P<0.05),MDR-TB组CD4/CD8值明显低于HD组与S-TB组(P<0.001);线性回归分析发现:HD组中CD4+CD25+CD127low调节性T细胞百分比含量与CD3+、CD4+、CD8+T细胞及CD4/CD8值均无相关性(P>0.05),非耐药初治肺结核患者CD4+CD25+CD127low调节性T细胞百分比含量与CD3+、CD4+T细胞无相关性(P>0.05)、与CD8+T细胞存在正相关(r=0.419,P=0.011)、与CD4/CD8值存在负相关(r=-0.519,P=0.002),耐药结核病患者CD4+CD25+CD127low调节性T细胞百分比含量与CD3+T细胞无相关性(P>0.05)、与CD4+存在负相关(r=-0.476,P=0.004)、与CD8+T细胞存在正相关(r=0.638,P=0.000)、与CD4/CD8值存在负相关(r=-0.776,P=0.000)。结论:随着肺结核病程的发展,外周血中CD4+CD25+CD127low调节性T细胞逐渐上调,特异性细胞免疫水平下调,二者之间存在相关性,调节性T细胞可能通过抑制结核患者特异性细胞免疫应答来影响肺结核病的进程。