DC-CIK疗法联合细胞因子对老年乳腺癌患者外周血CD4^+CD25^+Tr细胞水平和免疫功能的影响

目的探讨树突细胞-细胞因子诱导的杀伤细胞(DC-CIK)疗法联合细胞因子对老年乳腺癌患者外周血CD4+CD25+Tr细胞水平和免疫功能的影响。方法应用流式细胞仪检测23例老年乳腺癌患者,经DC-CIK细胞治疗联合细胞因子治疗前后外周血中CD4+CD25+Tr细胞水平。结果治疗前CD4+CD25+Tr细胞水平明显高于健康对照组(P<0.05)。治疗后DC-CIK治疗组和DC-CIK疗法联合细胞因子组均明显低于健康对照组和治疗前(P<0.05);DC-CIK疗法联合细胞因子组降低更为明显。随着培养时间的延长,CIK细胞中CD3+CD8+、CD3+CD56+细胞的百分含量明显上升。治疗后,患者外周血T细胞亚群水平均升高,其中CD3+、CD4+、CD19+、CD16+CD56+细胞水平明显高于治疗前(P<0.05)。结论老年乳腺癌患者处于免疫功能的抑制状态,接受DC-CIK细胞联合细胞因子的治疗后,CD4+CD25+Tr细胞水平降低,患者机体的免疫功能明显提升。

CD4^+CD25^+Tr细胞与非小细胞肺癌相关性研究

目的:探讨CD4+CD25+Tr细胞与非小细胞肺癌的相关性。方法:采用流式细胞技术分别检测60例非小细胞肺癌患者和20例健康者外周血中CD4+CD25+Tr细胞数量。结果:非小细胞肺癌患者外周血中CD4+CD25+Tr细胞表达水平明显高于健康者(P<0.05),且与临床分期呈正相关。结论:非小细胞肺癌患者外周血中CD4+CD25+Tr细胞数量的增多与非小细胞肺癌发病有关。

急性ITP患儿外周血CD4^+CD25^+Tr细胞及其与IL-18的相关性研究

目的:探讨外周血CD4+CD25+调节性T(Tr)细胞和IL-18水平在急性特发性血小板减少性紫癜(AITP)患儿中的变化及AITP的发病机制。方法:选择42例AITP患儿(AITP组)和42例健康查体者(对照组),用流式细胞仪检测外周血Tr细胞数量及占CD4+细胞比例,ELISA法检测血浆中IL-18水平。结果:AITP组Tr细胞、Tr细胞/CD4+细胞比值和Foxp3+Tr细胞水平较正常对照组降低,而IL-18水平则显著升高,差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01);AITP组外周血Tr细胞/CD4+细胞水平与IL-18水平呈负相关(r=0.821,P<0.01)。结论:AITP患儿存在细胞免疫功能紊乱,Tr细胞数量的减少可能刺激外周血淋巴细胞IL-18的生成,在AITP发病机制中起一定的作用。

支气管哮喘患者外周血CD4^+CD25^+调节性T细胞变化及其尘螨过敏状态的测定

目的通过对支气管哮喘患者外周血CD4+CD25+调节性T细胞水平变化和尘螨过敏状态的测定,探讨调节性T细胞在过敏性支气管哮喘发病中的作用。方法用流式细胞仪测定CD4+CD25+Tr占CD4+T细胞的比例,采用过敏原皮试点刺方法测定支气管哮喘患者的尘螨过敏状态。结果 25例正常对照组和支气管哮喘发作组患者外周血CD4+CD25+Tr水平分别为8.66%±1.61%和4.81%±2.76%,两组有显著差异(P<0.01)。14例粉尘螨或屋尘螨(+～++)阳性组和11例粉尘螨或屋尘螨(+++)及以上阳性组的CD4+CD25+Tr水平分别为6.45%±2.08%,和2.73%±2.03%,两组有显著差异。结论哮喘患者体内存在Tr细胞免疫功能平衡失调,CD4+CD25+Tr细胞处于低水平,CD4+CD25+Tr数量和抑制功能减弱或呈低反应性可能是导致支气管哮喘发病的原因之一。粉尘螨或屋尘螨重度过敏患者的外周血CD4+CD25+Tr水平明显低于轻度过敏者,提示CD4+CD25+Tr可能与支气管哮喘的过敏状态有关。

乙肝病毒感染者外周血CD4^+CD25^+调节性T细胞的表达及临床意义

目的探讨乙肝病毒感染者外周血CD4+CD25+调节性T细胞(CD4+CD25+Tr)表达水平及其临床意义。方法选择乙肝病毒携带者25例、急性乙肝患者26例、慢性乙肝患者38例,26例正常对照,用流式细胞仪检测外周血中CD4+CD25+Tr表达水平;用PCR法检测患者HBV DNA载量。结果乙肝病毒携带者组与慢性乙肝患者组CD4+CD25+Tr水平(9.93±3.51,11.21±3.29)明显高于对照组(8.12±2.80)(P<0.01或0.05),急性肝炎组与对照组相比,差异没有显著性。结论持续性HBV感染者CD4+CD25+Tr表达增加,提示CD4+CD25+Tr在慢性乙型肝炎中担负着重要的免疫调节作用,可能抑制HBV感染者特异性细胞免疫反应,与乙肝病毒感染的慢性化及肝病的临床发生、发展有关。

非小细胞肺癌外周血CD4^+CD25^(high)调节T细胞分析

目的:分析非小细胞肺癌(NSCLC)患者外周血CD4+CD25high调节T细胞(Tr)比例及变化规律,初步探讨其临床意义。方法:采用流式细胞仪检测61例非小细胞肺癌患者和15例正常健康者(对照组)外周血中CD3+、CD4+、CD8+及CD4+CD25highTr细胞比例,并进行分层分析。结果:NSCLC患者CD4+CD25highTr细胞比例明显高于正常对照组,分别为(4.36±2.07)%、(2.04±1.03)%,(P<0.01)。而且,随疾病进展外周血CD4+CD25highTr细胞比例逐渐升高,分别为Ⅰ+Ⅱ期(2.26±0.6)%;Ⅲ期(3.28±1.38)%,(P<0.05);Ⅳ期(6.06±4.08)%,(P<0.05)。Kaplan-Meier生存分析表明,外周血CD4+CD25highTr细胞比例较高者预后较差(P=0.0026)。结论:NSCLC患者外周血CD4+CD25highTr细胞比例升高,提示与肺癌免疫逃逸有关。去除这群细胞可有效诱导肿瘤免疫,为NSCLC治疗提供一种新的方法。

白塞病患者外周血CD4^+CD25^+调节性T细胞的检测及其临床意义

目的:检测白塞病(BD)患者外周血CD4+CD25+调节性T细胞数量变化并分析其与疾病活动性的关系,探讨其临床意义。方法:利用流式细胞仪和单克隆荧光抗体技术测定31例BD患者和27例健康对照者外周血中CD4+CD25+调节性T细胞在CD3+CD4+细胞中的比例。结果:活动期患者外周血中CD4+CD25+调节性T细胞在CD3+CD4+细胞中的百分率(6.43%±2.54%),低于健康对照者(8.17%±2.87%)(P<0.05)。非活动期患者外周血中CD4+CD25+调节性T细胞在CD3+CD4+细胞中的百分率(8.35%±2.31%),略高于健康对照者(P>0.05)。结论:BD患者外周血中CD4+CD25+调节性T细胞在CD3+CD4+细胞中的比例降低与疾病活动相关。通过检测外周血CD4+CD25+调节性T细胞在CD3+CD4+细胞中的比例来评估机体免疫状态是一个可行的办法。

环孢霉素A对不明原因反复自然流产者CD4+CD25+调节性T细胞作用的体外研究

目的 探讨环孢素A(CsA)对不明原因反复自然流产患者外周血CD4+CD25+调节性T细胞(CD4+CD25+Tr)的体外作用. 方法 以CsA作用反复自然流产患者外周血单个核细胞的体外实验模型,用流式细胞术分析对CD4+CD25+Tr细胞表达频率的变化. 结果 CsA处理外周血后CD4+CD25+Tr细胞占CD4+T细胞的百分比1.0 μmol/L组为(11.78±1.61)%,10.0 μmol/L组为(13,42±1.98)%,与正常生育组(6.52±2.38)%比较,差异均有统计学意义(P【0.05).结论 CsA可提高外周血CD4+CD25+Tr细胞比例.

CD4^+CD25^+调节性T细胞研究进展

一种起源于胸腺的新型免疫调节细胞,即CD4+CD25+调节性T细胞(CD4+CD25+Tr),逐渐引起人们重视。该细胞具有两大特征,即免疫无能性和免疫抑制性,其表达为IL-2Rα链(CD25)。该细胞在移植耐受诱导、自身免疫疾病的治疗以及肿瘤免疫治疗等方面具有潜在的应用价值。

Th/Tr淋巴细胞比值评估乳腺癌患者抗肿瘤免疫状态

目的:探讨用Th/Tr淋巴细胞比值评估乳腺癌患者的抗肿瘤免疫状态。方法:采用流式细胞术检测53例不同分期的乳腺癌患者化疗前外周血中CD4+Th细胞、CD4+CD25+Tr细胞水平,计算Th/Tr比值,并与30例健康志愿者进行比较。结果:有转移与无转移的乳腺癌患者Tr细胞绝对值差异无统计学意义(103±75vs 109±70,P=0.722)。有转移的乳腺癌患者Th/Tr淋巴细胞比值小于无转移者(3.83±1.37 vs 6.11±2.93,P<0.001),无转移患者小于健康志愿者(6.11±2.93 vs 11.24±1.84,P<0.001)。结论:Th/Tr比值对乳腺癌患者抗肿瘤免疫状态的评估优于Tr细胞计数,Th/Tr比值在乳腺癌患者尤其是有转移的乳腺癌患者中显著降低,其水平变化可作为评估乳腺癌患者免疫状态的有效指标。

半成熟树突状细胞和CD_4^+CD_(25)^+Tr在移植免疫耐受中的关系

半成熟树突状细胞(smDC)缺乏炎性细胞因子作为炎性递质,抗原呈递时不引起T细胞向产生干扰素γ的效应性T细胞(Th1)极化,而是激活CD4+CD25+Tr细胞,诱导抗原特异性免疫耐受;同时其高表达主要组织相容性复合体Ⅱ、CD80和CD86等分子,利于抗原呈递和激活Tr细胞诱导免疫耐受。CD4+CD25+Tr细胞通过表面转化生长因子β/转化生长因子β受体、协同刺激分子,抑制细胞表面分子和免疫调节性细胞因子的表达,抑制免疫反应。

CD4^+CD25^+Tr细胞与大鼠肝移植自发免疫耐受关系的研究

目的研究CD4+CD25+Tr细胞及其相关基因Foxp3与大鼠肝移植自发免疫耐受的关系。方法双袖套法建立大鼠原位肝移植模型;密度梯度离心法分离肝内淋巴细胞;免疫磁性分离法(MACS)分选CD4+CD25+T细胞,流式细胞术(FCM)检测所得细胞纯度。体外细胞增殖试验研究CD4+CD25+T细胞的免疫抑制作用。Western蛋白印迹法检测CD4+CD25+T细胞Scurfin蛋白表达。结果自发耐受组大鼠移植肝内CD4+CD25+Tr细胞含量显著高于急性排斥组。混合淋巴细胞反应中,LEW大鼠的脾细胞比DA大鼠自身的脾细胞更能刺激CD4+CD25+T细胞的增殖。CD4+CD25+T细胞能抑制CD4+CD25-T细胞的增殖,当加入外源性IL-2(200U/ml)时,该抑制作用被逆转。结论转录因子Foxp3介导的CD4+CD25+Tr细胞的免疫抑制作用可能是诱导大鼠肝脏移植自发免疫耐受的机制之一。

Graves病患者外周血树突状细胞和CD4＋CD25＋CD127low/-Tr细胞的变化

目的观察Graves病患者外周血树突状细胞（dendritic cells，DC）和CD4＋CD25＋CD127low/-调节性T细胞（rrr）在疾病过程中的水平变化。方法根据临床表现以及血清游离甲功三项（FT3、FT4、TSH），将患者分为治疗前组、临床缓解组和稳定组，并设正常对照组。采用流式细胞术测定研究对象外周血（EDTA—K2抗凝）中DC及髓样DC（myeloid dendritic cell，MDC）和浆细胞样DC（plasmacytoid dendritic cell，PDC）两个亚群以及CD4CD4＋CD25＋CD127low/-Tr细胞占CD4＋T细胞的百分比，观察它们在病程中的变化，再进一步探讨检测指标与游离甲功三项的相关性。结果（1）治疗前组、临床缓解组、稳定组和正常对照组的总DC、MDC和MDC／PDC逐渐下降，各组间比较均有统计学差异；（2）治疗前组、临床缓解组、稳定组和正常对照组的PDC依次呈下降趋势，治疗前组仅与正常对照组有统计学差异；（3）治疗前组、临床缓解组、稳定组和正常对照组的CD4＋CD25＋CD127low/-Tr细胞逐渐升高，治疗前组仅与正常对照组有统计学差异；（4）治疗前组PDC和CD4＋CD25＋CD127low/-Tr细胞有相关性；（5）在治疗前组，Dc及其亚群与游离甲功三项有相关性，而CD4＋CD25＋CD127low/-Tr细胞只与V13和FT4有相关性。结论Graves病患者总DC、MDC、MDC／PDC比值明显增高，抗甲亢治疗随着病情好转而下降，因此DC及其亚群的检测有望用来监测Graves病患者病情；而CD4＋CD25＋CD127low/-Tr细胞可作为Graves病发病的新指标。

CD4^+CD25^+Tr细胞趋化性细胞因子受体表达的生物学意义研究

CD4+CD25+调节性T(Tr)细胞在维持外周自身耐受从而防止自身免疫病的发生、抑制严重的炎症性疾病和下调肿瘤免疫应答中发挥着重要的作用。然而关于它们的免疫抑制机制的分子基础和迁移特性仍不明确。对CD4+CD25+Tr细胞上趋化性细胞因子受体表达的研究将有助于我们更好地了解这群细胞的作用机制。了解CD4+CD25+Tr细胞、趋化性细胞因子、趋化性细胞因子受体和表达于CD4+CD25+Tr细胞上的趋化性细胞因子受体以及它们与不同的抗原提呈细胞(APCs)之间的作用的最新研究进展十分必要。

中西医结合治疗重症肌无力对乙酰胆碱受体抗体和CD_4^+CD_(25)^+T调节免疫细胞的研究

目的:比较中西医结合治疗(包括免疫抑制剂和以补中益气汤为主的辩证加减联合治疗)和单纯免疫抑制剂治疗重症肌无力两种治疗方案的临床疗效和免疫调节细胞CD_4^+CD_(25)^+Tr的影响研究。方法:选择2006年1月—2008年1月在石家庄市第一医院住院治疗的明确诊断220例重症肌无力全身型患者。将患者随机分为两组即A组和B组,各组均有110例患者。A组治疗方法为免疫抑制剂(甲泼尼松龙和硫唑嘌呤)配伍中药重剂补中益气汤治疗;B组治疗方法为单纯免疫抑制剂(甲泼尼松龙冲击配伍硫唑嘌呤)治疗,监测两组患者治疗后6个月和18个月的乙酰胆碱受体抗体(AchRAb)值和免疫调节细胞CD_4^+CD_(25)^+Tr百分比的动态变化,同时用许氏评分法的相对临床计分来判定治疗后6个月和18个月的临床疗效。结果:(1)治疗后6个月:因各种原因没有完成治疗的出组患者A组3例,B组5例;(2)治疗前两组患者乙酰胆碱受体抗体(AchRAb)浓度值和CD_4^+CD_(25)^+Tr百分比比较,差异无统计学意义(P>0.05);(3)分别比较两组患者治疗后6个月的乙酰胆碱受体抗体(AchRAb)浓度值、CD_4^+CD_(25)^+Tr百分比、临床相对计分,其差异无统计学意义(P>0.05);(4)两组患者治疗后18个月,A组患者的乙酰胆碱受体抗体(AchRAb)浓度值明显低于B组,且差异有明显统计学意义(P<0.01);A组患者的CD_4^+CD_(25)^+Tr百分比明显高于B组,且差异具有明显的统计学意义;A组患者的临床相对计分50%以上的患者人数高于B组,两组相比差异有统计学意义(P<0.05)。结论:免疫抑制剂配伍重剂补中益气汤辨证加减治疗重症肌无力可使乙酰胆碱受体抗体(AchRAb)值下降更明显、CD_4^+CD_(25)^+Tr免疫调节细胞值明显升高,患者的临床完全缓解率高,且稳定而不易复发。

鼻咽癌患者放疗前后外周血EBV-DNA和细胞免疫水平的研究

目的比较鼻咽癌(NPC)患者放疗前后抗EBV特异性CTL细胞免疫功能、EBV-DNA、T细胞亚群及CD4+CD25+Tr淋巴细胞水平,为临床选择免疫治疗方案及预测预后提供理论依据及客观指标。方法收集标本105份(NPC患者放疗前35份、NPC患者放疗6月后40份和健康人30份),ELISPOT检测外周血LMP2特异性CTL;荧光定量PCR检测EBV-DNA;流式细胞术检测T细胞亚群及CD4+CD25+Tr淋巴细胞,统计分析各指标变化的特点及相互关系。结果抗EBV-LMP2特异性细胞免疫反应最大频率见于健康对照组,NPC放疗前患者中则仅少数呈阳性反应,NPC放疗后组反应率介于NPC放疗前组和健康对照组之间;NPC放疗前组血清EBV-DNA的阳性率均高于其他两组,对EBV-LMP2特异性细胞免疫反应的阳性率与血清中EBV-DNA病毒载量的阳性率呈负相关;放疗前NPC患者外周血CD3+、CD4+T细胞百分率及CD4+/CD8+比值降低,CD8+T细胞百分率升高,CD4+CD25+Tr细胞水平升高,放疗后情况有所缓解。结论 EBV-LMP2特异性CTL反应在NPC放疗前患者最低,EBV-LMP2特异性CTL反应阳性率与血清中EBV-DNA载量相关,增强CTL应答可改善EBV相关肿瘤的治疗效果,EBV-DNA载量水平一定程度上可反映NPC患者的肿瘤负荷。NPC患者外周血CD3+、CD4+T细胞降低,而CD8+T细胞升高,CD4+CD25+Tr细胞比例升高,监测患者T细胞亚群有助于对NPC患者的治疗及预后的判断。

CD4^＋CD25^＋调节性T细胞对氧化型低密度脂蛋白活化的巨噬细胞功能的影响

目的 研究CD4＋CD25＋调节性T细胞对氧化型低密度脂蛋白（oxLDL）激活的巨噬细胞功能的影响及其机制.方法 磁性细胞分离器（MACS）分离CD4＋CD25＋T细胞及CD4＋CD25-T细胞,在oxLDL作用下,将巨噬细胞分别与CD4＋CD25＋T细胞、CD4＋CD25-T细胞共培养48 h.采用流式细胞术检测巨噬细胞HLA-DR、CD86的表达;ELISA检测上清液MCP-1、MMP-9、TNF-α、TGF-β和IL-10细胞因子的表达;采用Griess反应测定NO生成量,RT-PCR测定iNOS表达.结果 与对照组比较,CD4＋CD25＋T细胞可显著抑制oxLDL激活的巨噬细胞HLA-DR及CD86的表达、减少NO生成、抑制iNOS mRNA表达和促炎细胞因子生成.结论 调节性T细胞可促使oxLDL激活的巨噬细胞由具有促炎表型的M1型向具有抗炎表型的M2型转化.

胸腺切除术后应用免疫抑制剂治疗重症肌无力的分析研究

目的探讨重症肌无力患者胸腺切除术后应用免疫抑制剂治疗的CD4+CD25+Tr细胞百分率和乙酰胆碱受体抗体的变化。方法 A组(n=34)重症肌无力患者胸腺切除术后应用免疫抑制剂组;B组(n=35)重症肌无力患者胸腺切除后未应用免疫抑制剂组;用流式细胞仪计数外周血A、B2组治疗前和治疗后6个月的CD4+CD25+Tr细胞的百分率和酶联免疫吸附法检测乙酰胆碱受体抗体(AchR-Ab),应用许氏临床评分法对病情的严重程度和转归进行评定。结果 A、B2组比较CD4+CD25+Tr细胞百分率、乙酰胆碱受体抗体(AchR-Ab)、临床相对计分在治疗后6个月差异有统计学意义(P<0.01)。结论 HTK胸腺切除后应用免疫抑制剂6个月后,重症肌无力患者的CD4+CD2+5Tr细胞的百分率明显增高和AchR-Ab明显降低,肌无力症状稳定缓解。

胃癌和食管癌外周血CD_4^+CD_(25)^+调节性T细胞检测及其临床意义

目的探讨胃癌和食管癌外周血表达CD_(25)的CD_4^+调节T细胞(CD_4^+CD_(25)^+Tr)比率变化的特点及其临床意义。方法采用流式细胞术检测49例胃癌和28例食管癌患者外周血CD_4^+CD_(25)^+调节T细胞水平,并进行分层分析。结果食管癌患者外周血CD_4^+CD_(25)^+Tr细胞占总CD_4^+T细胞的(24.37±4.82)%(n=28);胃癌患者外周血CD_4^+CD_(25)^+Tr细胞占总CD_4^+T细胞的(17.74±4.24)%(n=49)。与健康对照组比较,外周血CD_4^+CD_(25)^+Tr细胞比率均明显升高,差异有显著统计学意义(P<0.01)。该CD_4^+CD_(25)^+Tr细胞低表达CD_45RA及CD69。分层分析外周血CD_4^+CD_(25)^+Tr细胞比率与肿瘤临床分期的关系显示,胃癌患者Ⅰ￣Ⅲ期,其外周血CD_4^+CD_(25)^+Tr细胞占CD_4^+T细胞的比率为(16.69±5.71)%(n=15);Ⅳ期为(18.08±4.99)%(n=16)。与Ⅰ￣Ⅲ期比较,Ⅳ期患者外周血CD_4^+CD_(25)^+Tr细胞比率升高,但是,差异无统计学意义(P>0.05)。胃癌复发患者18例,其外周血CD_4^+CD_(25)^+Tr细胞占CD_4^+T细胞的比率为(23.32±4.98)%(n=18)。明显高于原发胃癌组(P<0.01)。食管癌患者Ⅰ-Ⅲ期外周血CD_4^+CD_(25)^+Tr细胞占CD_4^+T细胞的(25.17±5.87)%(n=18),Ⅳ期患者外周血CD_4^+CD_(25)^+Tr细胞占CD_4^+T细胞的(26.46±4.84)%(n=10),差异无统计学意义(P>0.05)。结论胃癌和食管癌患者外周血CD_4^+CD_(25)^+Tr细胞比率明显升高。提示祛除人的CD_4^+CD_(25)^+Tr细胞是一种有效的治疗肿瘤的新方法。

CD4^＋CD25%＋FoxP3^＋调节性T细胞在肺癌患者体内检测及其意义

目的研究肺癌患者外周血和肿瘤组织CD4^＋CD25^＋FoxP3^＋调节性T细胞（Treg）的异常聚集，探讨其在肺癌患者体内调节免疫抑制作用。方法采用流式细胞术对28例肺癌患者的癌组织，相应的癌旁组织和外周血及15例正常志愿者外周血中CD4^＋CD25^＋FoxP3^＋调节性T细胞的检测。结果肺癌患者癌组织中CD4^＋CD25^＋FoxP3^＋调节性T细胞在CD4^＋T细胞中所占比例是（10．5±1．6）％；外周血中和癌旁组织表达分别是（5．2±2．1）％和（3．6±1．2）％，癌组织明显高于外周血和癌旁组织（P〈0．05）。肺癌患者外周血中Treg细胞（5．2±2．1）％明显高于志愿者（1．8±1．2）％。结论CD4^＋CD25^＋FoxP3^＋调节性T细胞在肺癌组织及外周血中高表达，促进了肿瘤的进一步恶化，在癌组织学分型上也存在明显差异，肺腺癌表达阳性较高，可以作为肺癌免疫治疗的靶点。