RhoA、CD4^(+)CD25^(+)调节性T细胞、MYBL2在胃癌患者中的表达及对预后和生存时间的影响

目的:探讨RhoA、CD4^(+)CD25^(+)调节性T细胞、成髓细胞瘤转录因子第2亚型(MYBL2)在胃癌患者中的表达及对预后和生存时间的影响。方法:选取2017年1月至2019年1月于本院就诊的134例胃癌患者术后癌组织标本作为研究对象,另选取其中62例胃癌患者相应的癌旁组织标本及40例同期非胃癌患者正常胃黏膜组织标本进行对照,检测癌组织、癌旁组织、正常胃黏膜组织中RhoA、CD4^(+)CD25^(+)调节性T细胞、MYBL2的表达情况,分析其对胃癌预后及生存时间的影响。结果:RhoA,CD4^(+)CD25^(+)调节性T细胞、MYBL2在癌组织中的阳性率均明显高于癌旁组织和正常胃黏膜组织(P<0.05)。胃癌患者术后平均生存时间为(28.61±1.34)个月,其中RhoA、CD4^(+)CD25^(+)调节性T细胞、MYBL2阳性患者的生存时间均短于阴性患者(P<0.05)。RhoA(+)、CD4^(+)CD25^(+)调节性T细胞(+)、MYBL2(+)是胃癌患者预后的危险因素(P<0.05)。结论:检测RhoA,CD4^(+)CD25^(+)调节性T细胞、MYBL2的表达可作为胃癌病情严重程度、预后及生存时间评估的重要补充手段。

外周血CD4^(+)CD25^(+)、CD8^(+)CD28^(+)调节性T细胞水平对早期宫颈癌患者腹腔镜根治术后预后的预测价值

目的分析外周血CD4^(+)CD25^(+)、CD8^(+)CD28^(+)调节性T细胞水平对早期宫颈癌(CC)患者腹腔镜根治术后预后的预测价值。方法招募2018年9月至2020年9月于儋州市人民医院接受腹腔镜根治术治疗的早期CC患者204例,根据患者术后随访期间预后情况分为预后不良组(43例)和预后良好组(161例)。比较两组临床资料。采用Spearman秩相关分析外周血CD4^(+)CD25^(+)调节性T细胞水平与CD8^(+)CD28^(+)调节性T细胞水平的相关性。采用多因素logistic回归分析早期CC患者腹腔镜根治术后预后不良的影响因素。采用受试者工作特征(ROC)曲线评估外周血CD4^(+)CD25^(+)、CD8^(+)CD28^(+)调节性T细胞水平对早期CC患者腹腔镜根治术后预后不良的预测价值。结果预后不良组CD4^(+)CD25^(+)调节性T细胞、癌胚抗原(CEA)、糖类抗原125(CA125)水平,术后切缘阳性占比以及术中宫旁浸润占比高于预后良好组,CD8^(+)CD28^(+)调节性T细胞水平低于预后良好组,差异有统计学意义(P<0.05)。Spearman秩相关分析结果显示,早期CC患者外周血CD4^(+)CD25^(+)调节性T细胞水平与CD8^(+)CD28^(+)调节性T细胞水平呈负相关(r_(s)=-0.478,P<0.05)。多因素logistic回归分析结果显示,较高的CEA、CA125、CD4^(+)CD25^(+)调节性T细胞水平是促进早期CC患者腹腔镜根治术后预后不良发生的独立危险因素(P<0.05),较高的CD8^(+)CD28^(+)调节性T细胞水平是抑制早期CC患者腹腔镜根治术后预后不良发生的独立保护因素(P<0.05)。ROC曲线分析结果显示,外周血CD4^(+)CD25^(+)、CD8^(+)CD28^(+)调节性T细胞水平能有效预测早期CC患者腹腔镜根治术后预后不良(P<0.05),两项指标联合可进一步提高预测效能[AUC(95%CI)=0.939(0.898~0.979),P<0.001],灵敏度和特异度分别为86.00%、88.20%。结论外周血CD4^(+)CD25^(+)、CD8^(+)CD28^(+)调节性T细胞水平与早期CC患者腹腔镜根治术后预后不良有关,二者能有效预测早期CC患者腹腔镜根治术后预后不良。

类风湿性关节炎患者抗环瓜氨酸肽抗体、CD4^(+)CD25^(+)调节性T细胞与类风湿因子的检验价值分析

目的探讨抗环瓜氨酸肽抗体(Anti-CCP)、CD4^(+)CD25^(+)调节性T细胞与类风湿因子(RF)在类风湿性关节炎患者中的检出结果及意义。方法选取2019年1月至2021年5月的昆明市延安医院的130例疑似类风湿性关节炎患者作为研究对象,进行Anti-CCP、CD4^(+)CD25^(+)调节性T细胞与RF水平进行检测,以晨僵持续1 h以上、3组关节肿胀与特异性抗体检测阳性作为金标准,分析上述指标的诊断效能,并对比类风湿性关节炎患者和非类风湿性关节炎患者的上述指标水平、不同活动度的类风湿性关节炎患者的指标水平。结果RF、Anti-CCP与CD4^(+)CD25^(+)调节性T细胞检测对类风湿性关节炎的诊断准确率为97.69%、特异度为98.11%、敏感度为97.70%、阳性预测值为98.84%、阴性预测值为96.30%。类风湿性关节炎患者的RF平均值、Anti-CCP平均值指标高于非类风湿性关节炎患者,且CD4^(+)CD25^(+)调节性T细胞低于非类风湿性关节炎患者,差异有统计学意义(P<0.05)。高度活动组患者RF平均值、Anti-CCP平均值高于低中度活动组,且CD4^(+)CD25^(+)调节性T细胞低于低中度活动组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论Anti-CCP、CD4^(+)CD25^(+)调节性T细胞与RF指标检测有助于对类风湿性关节炎患者进行鉴别,并判断患者的疾病活动情况。

肺癌患者CD4^+ CD25^(high) Foxp3^+调节性T细胞的格局变化及意义

目的:研究肺癌患者外周血(PBMC)及肿瘤浸润淋巴细胞(TIL)中CD4+CD25h ighFoxp3+调节性T细胞(Treg)的比例改变,探讨其在抗肿瘤免疫中的调节作用。方法:分离肺癌患者PBMC及TIL,FACS分析CD4+/CD8+T细胞的比值及CD4+CD25h ighT细胞占CD4+T细胞的比例。Real-tim e PCR检测Treg特异性转录因子Foxp3基因在PBMC及TIL中的表达。结果:肺癌患者PBMC及TIL中CD4+/CD8+比值降低;而CD4+CD25h ighT细胞在CD4+T细胞中所占比例升高;Foxp3基因仅在TIL中高表达,而在PBMC中低或不表达,表明肿瘤局部的CD4+CD25h ighT细胞主要是CD4+CD25h ighFoxp3+Treg。结合临床资料分析显示Treg在肺腺癌比例较高。结论:CD4+CD25h ighFoxp3+Treg在肺癌患者肿瘤浸润淋巴细胞中明显升高,可能与其通过细胞与细胞间接触抑制CD8+T细胞的杀伤效应,最终发挥免疫抑制效应相关。

非霍奇金淋巴瘤患者外周血CD4^+CD25^(high)调节性T细胞研究

本研究分析B细胞非霍奇金淋巴瘤(B-NHL)患者外周血T细胞亚群及CD4+CD25high调节T(Tr)细胞比例及其变化规律,初步探讨B-NHL免疫抑制机制,以及化疗对此免疫抑制功能的影响。采用流式细胞术检测42例初治B-NHL患者、36例化疗后达CR/PR患者及15例正常健康者(对照组)外周血CD3+、CD4+、CD8+和CD4+CD25highT细胞的比例。结果显示:B-NHL患者CD3+及CD4+T细胞比例、CD4/CD8比值均低于正常对照组,它们依次为(68.33±15.27)%,对照(72.06±9.26)%;(34.47±12.84)%,对照(42.45±9.2)%;1.36±0.26,对照1.92±0.20,但CD4+CD25highTr细胞比例明显高于正常对照组,为(4.10±1.21)%,对照(2.04±1.03)%,(P<0.001)。化疗后组CD4/CD8比值低于化疗前组(P<0.05);而外周血CD4+CD25highTr细胞比例,显著高于化疗前组和对照组(P<0.01)。结论:B-NHL初治化疗前及化疗后患者外周血CD4+CD25highTr细胞比例都显著升高,提示CD4+CD25highTr细胞可能是B-NHL患者免疫抑制的重要原因之一。

慢性丙型肝炎患者外周血CD4^+ CD25^(high)调节性T细胞与抗病毒疗效的关系

目的探讨慢性丙型肝炎患者外周血CD4+CD25high调节性T细胞(Treg)与抗病毒疗效的关系。方法选取83例完成抗病毒治疗和随访的慢性丙型肝炎患者作为研究对象(慢性丙型肝炎组)。分别在治疗前和治疗12、48周及随访24周时,采用流式细胞术检测外周血中CD4+CD25highTreg百分比,并进行血清丙型肝炎病毒核糖核酸(HCV-RNA)定量和肝功能指标丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)等指标的检测。设立正常对照组(n=32)。结果与正常对照组比较,治疗前慢性丙型肝炎组外周血中的CD4+CD25highTreg百分比和血清ALT、AST均显著升高(P<0.05)。在治疗12周时,32例患者获得早期病毒学应答(EVR),外周血CD4+CD25highTreg百分比和HCV-RNA定量结果与治疗前和未获得EVR患者比较,差异均有统计学意义(P<0.01),但血清ALT无明显变化。在治疗48周时,慢性丙型肝炎病毒学应答组(HCV-RNA定量结果低于最低检测限)(n=51)患者外周血中CD4+CD25highTreg百分比、HCV-RNA定量结果和血清ALT均显著低于治疗前和无病毒学应答组(n=32)(P<0.01),慢性丙型肝炎无病毒学应答组患者各项检测指标治疗前后比较差异无统计学意义(P>0.05)。治疗后随访24周时,病毒学应答组中有39例患者获得了持续病毒学应答(SVR),外周血中的CD4+CD25highTreg百分比、HCV-RNA定量及血清ALT均显著低于治疗前和未获得SVR患者(P<0.01);而未获得SVR患者的各项检测指标均较治疗结束时(48周末)明显升高(P<0.05)。结论慢性丙型肝炎患者抗病毒治疗及随访过程中外周血中CD4+CD25highTreg百分比的变化对预测疗效和复发有一定的价值。

淋巴结核患者外周血CD4^+CD25^(high)FoxP3^+调节性T淋巴细胞以及血浆IFN-γ和IL-10水平及其临床意义

目的研究淋巴结核患者外周血CD4+CD25highFoxP3+调节性T淋巴细胞(Treg)和干扰素γ(IFN-γ)、白细胞介素10(IL-10)水平的变化及临床意义。方法采用流式细胞仪对100例淋巴结核患者及30名正常人外周血CD4+CD25highFoxP3+Treg和IFN-γ、IL-10水平进行检测。结果淋巴结核患者组与正常对照组比较,外周血CD4+CD25highFoxP3+Treg和IL-10水平均升高(P<0.05),而IFN-γ水平则降低(P<0.05)。在干酪样型、增殖型和混合型3种类型的淋巴结核病之间各指标差异均无统计学意义(P>0.05)。结论淋巴结核患者细胞免疫功能明显异常。CD4+CD25highFoxP3+Treg和IFN-γ、IL-10在淋巴结核的发病过程中发挥了重要作用。

不同病程寻常型银屑病患者外周血中CD4^+CD25^(high)调节性T细胞的比较与分析

目的:检测和分析不同病程寻常型银屑病患者外周血CD4+CD25high调节性T细胞(CD4+CD25highTreg)水平特点和意义。方法:选取进行期(70例)、稳定期(64例)和消退期(38例)寻常型银屑病患者,知情同意后,取外周抗凝全血,分离单一核细胞,采用流式细胞术检测不同病程寻常型银屑病患者外周血CD4+CD25highTreg的水平,并统计分析其特点与意义。结果:进行期、稳定期和消退期寻常型银屑病患者组外周血CD4+CD25highTreg与CD4+淋巴细胞的百分比分别为(2.86±0.9)%、(3.95±0.6)%和(4.77±0.1)%。稳定期和消退期寻常型银屑病患者组明显高于进行期组(t’=8.312,P<0.01;t=10.126,P=0.000),而消退期组明显高于稳定期组(t’=4.588,P<0.01)。值得注意的是,消退期寻常型银屑病患者组与正常对照组比较,差异显著,消退期组仍低于正常对照组(t=2.281,P=0.0264)。结论:不同病程寻常型银屑病患者外周血CD4+CD25highTreg水平存在显著差异,提示CD4+CD25highTreg与寻常型银屑病发生和病程发展关系密切。本研究为深入研究寻常型银屑病免疫学发病机制做出了初步的尝试与探索。

抗CD25单克隆抗体对肾移植受者CD4^+CD25^(high)调节性T细胞的影响

目的评价抗CD25单克隆抗体对肾移植受者术后早期CD4+CD25high调节性T细胞(CD4+CD25 high Treg)的影响。方法2007年2-9月接受初次亲属活体供肾移植的受者41例,根据是否使用抗CD25单克隆抗体(商品名daclizumab)分为抗体组(21例)和对照组(20例)。其中抗体组在肾移植术前2h及术后第14天分别给予抗CD25单抗各50mg。在移植前及移植后第13、17、60天分别留取肝素抗凝外周血15ml。应用流式细胞仪测定两组受者外周血CD4+T细胞和CD4+CD25 high Treg比例的变化,半定量RT-PCR检测CD25 mRNA的表达变化。结果肾移植术后13、17、60d抗体组的CD25+T细胞占CD4+T细胞的比例(20%±8%、13%±7%、24%±9%)低于对照组(45%±6%、41%±5%、40%±6%),差异有统计学意义(P<0.05)。抗体组术后第17天CD4+CD25 high Treg占CD4+T细胞的比例为4.40%±0.26%,明显低于对照组(8.56%±0.36%,P<0.01);而术后13、60d抗体组CD4+CD25 high Treg所占比例分别为7.00%±0.47%、3.75%±0.19%,与对照组(分别为8.04%±0.32%、3.66%±0.31%)比较差异无统计学意义(P>0.05)。抗体组CD25 mRNA相对表达水平在给予第二次抗体前(术后第13天)为1.65±0.22,术后第17天为1.84±0.27,两者间差异无统计学意义(P>0.05)。对照组术后第17天CD25 mRNA相对表达水平为1.70±0.23,与抗体组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论两剂共100mg抗CD25单抗仅一过性地降低CD4+CD25 high Treg,不会影响其活化扩增,无损于术后早期的免疫耐受诱导及维持。

脐带血、成人外周血中CD4^+CD25^(high)调节性T细胞分布的比较

目的比较成人外周血及新生儿脐带血中CD4+CD25+调节性T细胞(Tr细胞)的数量。方法采集成年人外周血和新生儿的脐带血,以荧光素分别标记的抗CD4/抗CD25/抗CD3和抗CD4/抗CD8/抗CD3mAb染色后,流式细胞术进行分析。结果成人外周血中CD4+CD25highTr细胞的数量为(9.09±3.05)个/μL,占CD3+CD4+T细胞的(1.40±0.37)%。新生儿脐带血中CD4+CD25-T细胞和CD4+CD25highTr细胞的绝对数及其占CD3+CD4+T细胞的百分率,均明显高于成人外周血(P<0.01);而CD4+CD25intT细胞的绝对数及其占CD3+CD4+T细胞的百分率,则明显低于成人外周血(P<0.01)。结论新生儿脐带血中CD4+CD25highTr细胞、CD4+CD25intT细胞及CD4+CD25-T细胞的数量明显有异于成人外周血。

慢性乙型肝炎患者外周血CD4^+CD25^(+high)调节性T细胞对免疫状态的影响

目的探讨CD4+ CD25+high调节性T(Tr)细胞在慢性乙型肝炎(CHB)患者外周血的变化及其对免疫状态的影响。方法用流式细胞仪技术分析比较42例CHB患者及20例正常健康人外周血中CD4+CD25+highTr细胞,同时检测CD4+T细胞和CD8+T细胞。结果与健康对照组相比,CHB组CD4+CD25+highTr细胞百分率显著升高(P<0.05),而CD4+T细胞显著下降(P<0.05);CD8+T细胞虽有增加趋势,但无差异(P>0.05)。CHB组CD4+CD25+highTr细胞百分率与HBV DNA载量有一定的关系,但与血清ALT水平无相关(P>0.05)。结论CHB患者外周血CD4+CD25+highTr细胞升高可能是导致机体免疫功能下降的原因之一。

抗CD25单克隆抗体对CD^4+CD25^(high)调节性T细胞的影响

目的评价抗CD25单克隆抗体对活体肾移植受者外周血CD4+CD25high调节性T细胞(Treg)的影响。方法观察14例活体肾移植受者外周血CD4+CD25highT细胞百分比和FoxP3mRNA表达水平的变化,应用流式细胞仪FACSCalibur和CellQuest软件行双色流式细胞计数和结果分析,半定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)对肾移植受者外周血单个核细胞(MNC)的FoxP3基因水平进行检测。结果在移植术后3d、13d,CD4+CD25highT细胞占CD4+比例显著升高;在移植后1个月内,CD4+CD25highT细胞比例升高约至原来的3倍。移植术后13d、17d、27d时外周血FoxP3mRNA表达明显高于移植术后3d。在肾移植术后的不同时间抗CD25单克隆抗体使用组受者的CD25+T细胞百分比明显低于对照组(未使用抗CD25单克隆抗体)。抗CD25单克隆抗体使用组与对照组两组间比较,术后3d、13d,抗CD25单克隆抗体组CD4+CD25highT细胞占CD4+的比例明显降低,术后3d对照组、抗CD25单克隆抗体使用组分别为1.24%±0.15%、2.25%±0.24%,P=0.00;术后13d为3.75%±0.38%、7.28%±0.51%,P=0.00。然而,术后17d、27d后,抗CD25单克隆抗体使用组的CD4+CD25highT恢复到对照组水平,两组间CD4+CD25highT细胞占CD4+的比例无统计学差异,即第17d为3.72%、0.26%、4.43%、0.44%,P=0.17,27d为9.00%±0.30%、8.31%±0.33%,P=0.16。在肾移植术后不同时间,受者外周血FoxP3mRNA表达水平在两组之间相似,无统计学差异,说明FoxP3mRNA表达水平并没有受到体内注射抗CD25单克隆抗体影响。结论抗CD25单克隆抗体的使用对活体肾移植受者外周血CD4+CD25high调节性T细胞在一定时间具有暂时性的影响,而FoxP3mRNA表达水平没有受到影响。

雷公藤多苷对IgA肾病CD_4～+CD_(25)～(high)调节性T细胞及Th1、Th2影响

目的:探讨CD4+CD25high调节性T细胞(Treg)及辅助性T细胞亚群(Th1、Th2)比例失衡在IgA肾病(IgAN)免疫发病机制中的作用,以及使用雷公藤多苷(tripterygium wilfordii glycoside,TW)治疗后对IgAN的Treg、Th1、Th2及Th1/Th2的比例影响。方法:用流式细胞分析仪检测30例IgAN患者,使用雷公藤多苷治疗前后的外周血Treg、Th1、Th2及Th1/Th2的比例。并与健康对照组进行比较,两组间比较采用t检验。结果:IgA N患者外周血Treg的比例明显高于健康人(P<0.01);IgAN患者外周血中,Th2细胞比例显著高于健康对照组(P<0.01);IgAN患者Th1/Th2比值显著低于健康对照组(P<0.01)。使用TW(1 mg·kg-1·d-1)治疗IgAN 3个月后,可显著降低IgAN患者外周血Treg(P<0.01),但治疗后Treg仍高于健康对照组(P<0.05);显著降低Th2细胞比例(P<0.05),显著升高Th1/Th2比值(P<0.01);且治疗后IgAN的尿蛋白明显降低(P<0.01),血清白蛋白升高(P<0.05)。结论:TW可改善IgAN患者体内存在T细胞亚群表达紊乱,对IgAN治疗具有一定作用。

CD4^+ CD25^(high)调节性T细胞在异基因造血干细胞移植后的重建及其与aGVHD的相关性

目的:研究CD4+CD25high调节性T细胞在异基因造血干细胞移植后的重建情况及其与aGVHD相关性。方法:应用流式细胞技术及实时定量PCR技术检测22例异基因造血干细胞移植物中及移植后不同时期外周血中CD4+CD25+T细胞和CD4+CD25highT细胞占CD4+T细胞的比例(CD4+CD25+/CD4+、CD4+CD25high/CD4+)、CD4+CD25highT细胞与CD4+CD25+T细胞之比(CD4+CD25high/CD4+CD25+)以及FOXP3基因的表达。结果:①aGVHD组移植物中CD4+CD25high/CD4+及CD4+CD25high/CD4+CD25+比例均显著低于无aGVHD组(P<0.05)。②移植后早期,两组外周血中的CD4+CD25+/CD4+比例均较移植物中者显著升高,在aGVHD组CD4+CD25high/CD4+及CD4+CD25high/CD4+CD25+比例亦较移植物中者显著升高,而在无aGVHD组两者无显著升高,且低于aGVHD组。③移植后两组的FOXP3的表达均逐渐升高,但至移植后6个月仍低于健康对照组(P<0.05)。aGVHD组移植后外周血FOXP3的表达低于无aGVHD组(P<0.05)。结论:①移植后早期外周血CD4+CD25high调节性T细胞发生活化和增殖,有利于维持免疫稳态和控制aGVHD;②移植物中CD4+CD25high调节性T细胞的比例及其与活化的CD4+效应性T细胞之比可能影响aGVHD的发生;③aGVHD可影响CD4+CD25high调节性T细胞的数量或FOXP3的表达。

乳腺癌患者CD4^+CD25^(high)CCR6^+调节性T细胞的变化

目的检测临床乳腺癌患者肿瘤浸润淋巴细胞(TILs)和外周血单个核细胞(PBMCs)中CD4+CD25highCCR6+调节性T细胞的变化,并探讨其意义。方法分离22例乳腺癌患者PBMCs和TILs,用流式细胞仪检测CD4+CD25highCCR6+调节性T细胞的比例,同时检测其Foxp3的表达;进一步用流式细胞仪检测CD4+CD25highCCR6+调节性T细胞记忆分子CD45RO、CD44和CD62L的表达水平;用3H-TdR增殖实验观察CD4+CD25highCCR6+调节性T细胞对CD4+CD25-T细胞增殖的抑制作用。结果乳腺癌患者PBMCs和TILs中CD4+CD25highCCR6+调节性T细胞的比例明显增加,并在肿瘤局部存在显著的富集;CD4+CD25highCCR6+调节性T细胞高表达Foxp3,在体外能有效抑制CD4+CD25-T细胞的增殖,并高表达记忆分子CD45RO、CD44,低表达CD62L,显示了效应/记忆样表型。结论 CD4+CD25highCCR6+调节性T细胞在乳腺癌患者肿瘤局部有明显富集,这可能是肿瘤长期免疫逃逸的重要原因。

CD4^+ CD25^(high) CD127^(low/-)调节性T细胞在多发性骨髓瘤患者外周血的表达

目的探讨多发性骨髓瘤(MM)患者外周血CD4+CD25highCD127low/-调节性T(Tregs)细胞表达水平及临床意义。方法采用流式细胞术(FCM)检测30例MM患者和20例健康对照者外周静脉血CD4+CD25highCD127low/-Tregs细胞水平。结果 1 MM组CD4+CD25high CD127low/-Tregs细胞表达明显高于正常对照组(P<0.05)。2MM组不同国际分期系统(ISS)分期CD4+CD25highCD127low/-Treg细胞水平均高于正常对照组,随着疾病进展,Ⅲ期明显高于Ⅱ期(P<0.05)。3MM组化疗后外周血CD4+CD25highCD127low/-Tregs细胞水平较化疗前显著下降(P<0.05)。结论 MM患者外周血CD4+CD25highCD127low/-Treg细胞比例明显升高,可能是MM免疫逃逸的一个重要机制;进展期Tregs的变化为MM患者及时进行临床干预提供实验依据。

乳腺癌CD4^+ CD25^(high) Foxp^(3+)调节性T细胞数量和分布及Foxp3mRNA表达与肿瘤分期的相关性研究

目的研究乳腺癌患者CD4+CD25high Foxp3+调节性T细胞(T regulatory cell,Treg)的存在数量、分布情况,及其功能基因Foxp3mRNA的表达变化与国际抗癌联盟(UICC)乳腺癌的TNM分期的关系。方法用四色流式细胞术以Foxp3-FITC/CD25-PE/CD4-PerCP/CD3-PC7抗体组合分析40名健康对照者及40例乳腺癌患者(临床TNM分期T1期9例、T2期10例、T3期12例、T4期9例)外周血、肿瘤组织浸润淋巴细胞(TIL)及癌旁淋巴结中CD4+CD25high Foxp3+Treg的数量及分布情况。实时荧光定量PCR技术检测TregFoxp3mRNA表达水平。结果乳腺癌患者外周血CD4+CD25high Foxp3+Treg占CD4T细胞的百分比为(8.91±3.06)%,高于正常健康对照组(5.84±2.63)%,差异具有统计学意义(P<0.05)。乳腺癌患者TIL、癌旁淋巴结中Treg占CD4+T淋巴细胞比例均高于外周血,差异有统计学意义(P均<0.01)。乳腺癌组织TIL和癌旁淋巴结中Treg的Foxp3平均荧光强度(MFI)显著高于外周血(P<0.05)。T1、T2、T3、T4期乳腺癌患者Treg比例分别为(5.81±1.89)%、(6.52±2.15)%、(9.65±3.14)%、(11.86±2.43)%。乳腺癌患者外周血单个核细胞Foxp3mRNA表达水平明显高于健康对照组(P<0.01)。相关分析显示,Treg数量与肿瘤TNM分期显著相关(r=0.7 576,P<0.01);Foxp3基因mRNA表达水平与乳腺癌TNM各分期呈显著相关性(r=0.6 129,P<0.05)。结论乳腺癌患者CD4+CD25high Foxp3+Treg的数量升高,其增高程度与肿瘤临床分期呈显著正相关。乳腺癌患者外周血和癌组织局部Treg的数量、分布情况及特异性转录因子Foxp3mRNA的表达强度均有所不同,提示这可能是产生肿瘤免疫抑制的重要机制,CD4+CD25high Foxp3+Treg将来可作为乳腺癌患者病情进展的重要判断指标之一。

恶性肿瘤患者CD4^+CD25^+/CD4^+CD25^(high)调节性T细胞的研究

目的:探讨恶性肿瘤患者外周血CD4+CD25+/CD4+CD25high调节性T细胞(Regulatory T cell,Treg)水平的特点及其临床意义。方法:采用流式细胞术检测Treg水平,并进行分层分析。结果:62例恶性肿瘤患者外周血中CD4+CD25+Treg、CD4+CD25high Treg占T细胞的百分比分别为19.61%±8.17%和4.20%±1.90%,高于正常对照组(分别为P<0.05和P<0.001),它们与NK细胞呈负相关(r分别为-0.2361和-0.306)。随疾病进展,CD4+ CD25+Treg水平升高,肿瘤进展期(IV期)与前3期比较有极显著差异(P<0.001)。CD4+CD25high Treg占CD4+T细胞的百分比率逐渐升高,中期(Ⅲ期)患者与早期患者、正常对照组比较有极显著差异(P<0.001);晚期患者与中期患者比较有极显著差异(P<0.001)。结论:恶性肿瘤患者外周血CD4+CD25+/CD4+CD25high Treg水平的升高,与恶性肿瘤免疫功能低下及肿瘤的发生发展密切相关。

自身免疫性肝病相关抗体与CD_4^+ CD_(25)^(+high)调节性T细胞的临床意义探讨

目的探讨自身免疫性肝炎(AIH)患者外周血CD4+CD25+high调节性T细胞的作用。方法抗核抗体酶联免疫分析法检测(ANA)。自身免疫性肝病谱线性免疫分析法(LIVER-LIA)测定抗肝肾微粒体1(LKM-1)、抗肝细胞溶质抗原1(LC-1)、抗线粒体-2(AMA-M2)、抗可溶性肝抗原/抗肝胰抗原(SLA/LP)。用流式细胞仪技术比较分析AIH患者51例、慢性乙型肝炎(CHB)30例及键康正常人20例外周血中的CD4+CD25+high调节性T细胞,用免疫组织化学法检测AIH和CHB患者肝组织Foxp3的表达情况。结果AIH占51%(51/100),AIH组外周血中CD4+CD25+high/CD4+百分率显著低于正常组(P<0.05)和CHB组(P<0.01),并且CHB组显著高于正常组(P<0.05);同时AIH组外周血中CD4+T细胞也显著高于CHB组(P<0.01);肝组织Foxp3+细胞主要分布于肝小叶内窦周隙、汇管区,AIH组肝组织Foxp3+表达显著低于CHB组(P<0.01)。结论CD4+CD25+high调节性T细胞下降可能是自身免疫性肝炎发病的原因之一。

老年消化道肿瘤患者外周血CD4^+ CD25^(high)调节性T细胞的表达及其临床意义

目的:通过对CD4+CD25high调节性T细胞(CD4+CD25high Treg)在老年消化道肿瘤患者外周血中表达情况的研究,探讨其与肿瘤发生、发展的关系。方法:采用流式细胞术检测26例健康青年人、26例健康老年人及41例老年消化道肿瘤患者外周血CD4+CD25high Treg的水平,并进行统计学分析。结果:与健康青年人相比,健康老年人外周血CD4+CD25high Treg水平升高[(1.98±0.50)%vs(1.73±0.22)%,P<0.05];而老年消化道肿瘤患者外周血CD4+CD25high Treg水平比健康老年人显著升高[(3.53±1.83)%vs(1.98±0.50)%,P<0.01];进一步的分层分析显示:随着疾病的进展,外周血CD4+CD25high Treg水平升高,在肿瘤进展期(Ⅲ～Ⅳ期)尤其明显,与Ⅰ～Ⅱ期比较,差异有统计学意义[(4.06±1.24)%vs(2.82±0.76)%,P<0.05]。结论:老年消化道肿瘤患者外周血CD4+CD25high Treg比率升高,可能在老年消化道肿瘤的发生、发展中起重要作用。