循环CD4^(+)CD45RA^(+)CD62L^(+)T细胞与接受EGFR-TKI治疗的转移性非小细胞肺癌预后相关

目的探索外周血循环淋巴细胞的基线水平及动态变化与接受表皮生长因子受体酪氨酸激酶抑制剂(EGFR-TKI)治疗的EGFR突变阳性的转移性非小细胞肺癌患者预后之间的相关性。方法设计一个回顾性队列,包括在北京协和医院接受EGFR-TKI治疗的40例非小细胞肺癌患者。在EGFR-TKI治疗期间,使用流式细胞仪测量术收集外周血循环淋巴细胞亚群进行动态监测,并通过电话随访每位患者的生存情况,分别比较基线以及治疗1月后外周血循环淋巴细胞亚群与无进展生存期(PFS)和总生存期(OS)的关系。结果在接受EGFR-TKI治疗的患者中,更高的基线循环CD4^(+)CD45RA^(+)CD62L^(+)T细胞计数与更高的肿瘤治疗应答相关(P<0.001)。整个人群的PFS为27.1个月,而OS未达到。然而,基线CD4^(+)CD45RA^(+)CD62L^(+)T细胞计数与中位PFS无相关性。此外,在EGFR-TKI治疗期间,CD4^(+)CD45RA^(+)CD62L^(+)T细胞计数稳定或升高的患者的PFS明显长于CD4^(+)CD45RA^(+)CD62L^(+)T细胞计数降低的患者(29.1个月对比9.4个月;P<0.001)。结论更高的基线循环CD4^(+)CD45RA^(+)CD62L^(+)T细胞计数与更好的EGFR-TKI治疗应答相关,CD4^(+)CD45RA^(+)CD62L^(+)T细胞计数的动态变化与PFS延长有关。

补肾益气扶正汤联合化疗对肾癌根治性切除术后外周血CD4^+CD45RA^+和CD4^+CD45RO^+T细胞的影响

目的观察补肾益气扶正汤联合化疗对肾癌根治性切除术后外周血CD4^+CD45RA^+和CD4^+CD45RO^+T细胞及不良反应发生情况的影响。方法将146例肾癌根治性切除术后患者随机分为2组,对照组73例给予化疗治疗,研究组73例给予补肾益气扶正汤联合化疗治疗,2组均持续治疗3个化疗疗程。记录2组治疗前后中医症状积分及KPS评分,检测2组治疗前后外周血CD4^+CD45RA^+和CD4^+CD45RO^+T细胞水平,统计2组治疗后临床疗效及治疗期间不良反应发生情况。结果治疗后,2组中医症状积分均较治疗前显著降低(P均<0.05),且研究组显著低于对照组(P<0.05);研究组临床治疗总有效率显著高于对照组(P<0.05);2组CD4^+CD45RA^+T细胞均较治疗前显著降低(P均<0.05)、CD4^+CD45RO^+T细胞均较治疗前显著升高(P均<0.05),且研究组CD4^+CD45RA^+T细胞均显著低于对照组(P均<0.05)、CD4^+CD45RO^+T细胞均显著高于对照组(P均<0.05);2组KPS评分均较治疗前显著升高(P均<0.05),且研究组显著高于对照组(P<0.05)。治疗期间,研究组消化道反应、感冒样症状、神经系统症状以及白细胞降低发生率均显著低于对照组(P均<0.05)。结论补肾益气扶正汤联合化疗可明显减轻肾癌根治性切除术后患者症状体征,调节外周血CD4^+CD45RA^+和CD4^+CD45RO^+T细胞水平,减少不良反应,且疗效更好。

系统性红斑狼疮患者CD4^+CD25^+CD45RA^-T细胞中转录因子Bach2的表达及其影响

目的·研究系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosus,SLE)患者CD4^+CD25^+CD45RA^-T细胞中转录因子BTB与CNC同源基因2(BTB and CNC homology 2,Bach2)的表达及其对细胞功能的影响。方法·采用流式细胞仪分选获得活动期SLE患者(SLE组)和健康对照者(对照组)外周血CD4^+CD25^+CD45RA^-T细胞,荧光定量PCR和Western blotting检测该类细胞中Bach2的表达;分析SLE患者该类细胞中Bach2的平均荧光强度(median fluorescence intensity,MFI)与SLE疾病活动指数(systemic lupus erythematosus disease activity index,SLEDAI)的相关性。采用流式细胞术比较SLE患者IL-17+CD4^+CD25^+CD45RA^-T细胞和IL-17-CD4^+CD25^+CD45RA^-T细胞中Bach2的MFI。在Bach2过表达体系中,采用流式细胞术检测CD4^+CD25^+CD45RA^-T细胞表达IL-17的细胞比例,采用ELISA方法检测细胞培养上清液中IL-17的含量。结果·与对照组相比,SLE组CD4^+CD25^+CD45RA^-T细胞Bach2的m RNA和蛋白表达水平均显著降低(均P<0.01);SLE组Bach2的MFI与SLEDAI呈显著负相关(R2=0.433,P=0.001)。SLE患者IL-17+CD4^+CD25^+CD45RA^-T细胞Bach2的MFI显著低于IL-17-CD4^+CD25^+CD45RA^-T细胞(P=0.013)。当Bach2过表达时,SLE患者CD4^+CD25^+CD45RA^-T细胞表达炎症因子IL-17的细胞比例明显下降(P=0.032),细胞培养上清液中IL-17含量显著降低(P=0.008)。结论·SLE患者CD4^+CD25^+CD45RA^-T细胞Bach2表达下降,在该类细胞中过表达Bach2可使IL-17表达下降。

AHZ和PHN患者CD4^+CD45RO^+、CD4^+CD45RA^+T细胞的表达及其意义

目的探讨急性期带状疱疹和带状疱疹后遗神经痛患者外周血CD4^+CD45RO^+、CD4^+CD45RA^+T细胞的表达及其意义。方法收集带状疱疹患者47例(其中急性期带状疱疹患者35例,带状疱疹后遗神经痛患者12例)、健康对照者20例,采用流式细胞术检测研究对象外周血中CD4^+CD45RA^+、CD4^+CD45RO^+T细胞水平并进行比较。结果急性期带状疱疹患者CD4^+CD45RA^+T细胞水平明显低于带状疱疹后遗神经痛患者及健康对照者(P<0.05);急性期带状疱疹患者CD4^+CD45RO^+/CD4^+CD45RA^+比值均明显高于带状疱疹后遗神经痛患者及健康对照者(P<0.05)。结论CD4^+CD45RA^+T细胞的减少可能与急性期带状疱疹的发病相关。

CD4^(+)TIM-3^(+)T细胞、CD4^(+)CD45RA^(+)T细胞水平与ACS患者GRACE评分的关系

目的探讨CD4^(+)TIM-3^(+)T细胞、CD4^(+)CD45RA^(+)T细胞水平与急性冠状动脉综合征(ACS)患者全球急性冠状动脉事件注册(GRACE)评分之间的关系。方法选取2018年3月至2020年3月武警特色医学中心收治的212例ACS患者作为研究组,并以同期168例非冠心病检查者作为对照组,根据GRACE评分结果对ACS组患者病情进行分级,分为低危组(GRACE<109分,68例)、中危组(109分≤GRACE≤140分,62例)以及高危组(GRACE>140分,82例)。检测各组CD4^(+)TIM-3^(+)T细胞、CD4^(+)CD45RA^(+)T细胞水平。应用Pearson相关性分析CD4^(+)TIM-3^(+)T细胞、CD4^(+)CD45RA^(+)T细胞水平与ACS患者GRACE评分之间相关性,并应用受试者工作特征(ROC)曲线分析CD4^(+)TIM-3^(+)T细胞、CD4^(+)CD45RA^(+)T细胞水平诊断ACS患者的价值。结果研究组ACS患者生化检查指标总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、低密度脂蛋白(LDL)、心肌肌钙蛋白I(cTnI)、脑利钠肽前体(Pro-BNP)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)以及CD4^(+)CD45RA^(+)T细胞、CD4^(+)TIM-3^(+)T细胞水平较对照组均明显升高,高密度脂蛋白水平(HDL)较对照组降低(P<0.05);且高、中、低危组3组ACS患者间生化指标和CD4^(+)TIM-3^(+)T细胞、CD4^(+)CD45RA^(+)T细胞水平差异均有统计学意义(P<0.05)。Pearson相关分析显示,ACS患者的CD4^(+)TIM-3^(+)T细胞水平、CD4^(+)CD45RA^(+)T细胞水平均与GRACE评分呈正相关(r=0.644、0.518,P<0.05)。ROC曲线分析显示,CD4^(+)TIM-3^(+)T细胞诊断高危ACS患者最佳截断值为0.129,曲线下面积为0.856(95%CI:0.790~0.910),灵敏度、特异度分别为79.27%、78.46%。CD4^(+)CD45RA^(+)T诊断诊断高危ACS患者最佳截断值为0.165,曲线下面积分别为0.837(95%CI:0.874~0.901),灵敏度、特异度分别为75.61%、80.77%。且低CD4^(+)TIM-3^(+)T细胞组和低CD4^(+)CD45RA^(+)T细胞组患者发生院内心脏不良事件发生率分别明显高于高CD4^(+)TIM-3^(+)T细胞组和高CD4^(+)CD45RA^(+)T细胞组(P<0.05)。结论ACS患者CD4^(+)CD45RA^(+)T细胞、CD4^(+)TIM-3^(+)T细胞水平均显著高于健康人群,且二者均与ACS患者GRACE评分呈正相关,并对预测高危ACS和患者预后情况具有较高诊断价值。

人CD4^+CD25^-CD45RA^+T细胞和CD4^+CD25^-T细胞诱导获得iTreg细胞的方法学研究

目的:分析比较CD4^+CD25 ^-CD45RA^+T细胞和CD4^+CD25^-T细胞在普通/炎性(加入IL-1β和IL-6)条件下,由TGF-β、IL-2和CD3/CD28磁珠共刺激诱导生成iTreg细胞的效率,并对比各组iTreg细胞相关蛋白和细胞因子表达水平变化及其免疫抑制能力的差异。方法:通过Ficoll细胞分离液分离出淋巴细胞,利用MACS分选机,结合CD4阴选磁珠筛出CD4阳性的T细胞,最后再提取其中CD45RA ^+和CD25 ^-T细胞。体外实验中,在普通/炎性条件下诱导iTreg生成,3、6 d通过流式观察各组iTreg细胞的诱导情况及相关分子的表达变化趋势。体内实验分为:CD4 +CD25^-CD45RA ^+T细胞诱导的iTreg组、CD4^+CD25 ^-T细胞诱导的iTreg组和空白对照组,通过观察iTreg对GVHD小鼠模型的免疫调节,分析其免疫抑制能力的差异。结果: CD4^+CD25 -CD45RA +T细胞组和CD4 +CD25 -T细胞组普通条件下iTreg产率分别为(96.00±0.21)%和(60.23±0.50)%,炎性环境下为(81.97±1.29)%和(56.80±0.43)%,前者都显著高于后者( P <0.001)。各组iTreg细胞中CTLA-4、TGF-β和IL-10的表达未见明显差异,而炎性因子IL-2、IL-17前者均低于后者( P <0.001),前者IFN-γ也低于后者( P <0.05)。体内实验表明iTreg均具有免疫调节能力,但CD4^+CD25 ^-CD45RA^+T细胞组诱导的iTreg能力强于后者。结论: CD4^+CD25 ^-CD45RA^+T细胞组和CD4^+CD25^-T细胞组都可以成功诱导iTreg细胞,但是前者在普通和炎性微环境下诱导效率高于后者,免疫调节能力也优于后者。

腔镜手术对直肠癌患者免疫平衡及CD_4^+CD_(45)RA^+T和CD_4^+CD_(45)RO^+T细胞的影响

目的探讨腔镜手术对直肠癌患者免疫平衡及CD4+CD45RA+T细胞和CD4+CD45RO+T细胞表达的影响。方法67例直肠癌患者中,33例拟进行腹腔镜手术,设为L组,34例拟进行开腹手术,设为O组。观察术前1 d、术后2 d、术后7 d患者Th1、Th2、CD4+CD45RA+T、CD4+CD45RO+T细胞表达水平。结果 L组患者术前和术后Th1、Th2、CD4+CD45RA+T、CD4+CD45RO+T细胞表达无显著差异(P>0.05)。O组术后2 d、术后7 d患者Th1细胞表达水平显著下降(P<0.01),Th2细胞表达显著升高(P<0.01);CD4+CD45RA+T细胞的表达显著升高(P<0.01),CD4+CD45RO+T细胞的表达显著降低(P<0.05)。结论腹腔镜手术较开腹手术对直肠癌患者的免疫平衡、CD4+CD45RA+T细胞和CD4+CD45RO+T细胞表达的影响小,对机体细胞免疫功能干扰较轻。

结直肠癌患者外周血中CD4^+CD45RA^+ T和CD4^+CD45RO^+ T细胞的变化及其意义

目的 探讨外周血中CD4 + CD4 5RA+ T细胞和CD4 + CD4 5RO+ T细胞在结直肠癌中的变化及其临床意义。方法 采用流式细胞术检测 6 0例结直肠癌患者手术前、术后 1个月和 3个月时 ,外周血的CD4 + T细胞、CD4 + CD4 5RA+ T细胞和CD4 + CD4 5RO+ T细胞的比例。选取健康查体人群 10例作为对照。结果 结直肠癌患者的CD4 + T细胞与健康人群相比无差异。CD4 + CD4 5RO+ T细胞比例明显增高 ,术后有显著下降 ,DukesA、B期患者尤其明显 ;而CD4 + CD4 5RA+ T细胞比例正好相反。结论 CD4 + CD4 5RA+ T细胞和CD4 + CD4 5RO+ T细胞在肿瘤免疫中起重要作用 ,其表达同结直肠癌的分期和预后有密切关系。

左金丸对结肠炎小鼠外周血CD45RA^+CD62L^+CCR7^+T细胞及其CD4^+、CD8^+亚群的影响

目的:探讨左金丸对葡聚糖硫酸钠(DSS)诱导小鼠结肠炎外周血中CD45RA+CD62L+CCR7+T细胞及其亚群的影响。方法:将40只雄性BALB/c小鼠随机平均分为正常组、模型组、左金丸组、美沙拉嗪组。除正常组外,其余各组均用3%DSS自由饮水7d诱导小鼠结肠炎,第8天开始予左金丸、美沙拉唑肠溶片治疗7d。观察小鼠一般情况及结肠病理损伤变化,采用流式细胞术测定外周血中CD45RA+CD62L+CCR7+T细胞及其CD4+、CD8+亚群水平,Western blotting检测结肠组织中磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)、蛋白激酶B(Akt)和磷酸化蛋白激酶B(p-Akt)蛋白表达水平并计算p-Akt/Akt值。结果:与模型组比较,左金丸组可有效改善DSS诱导结肠炎小鼠体质量、结肠长度、肠重指数和黏膜镜下评分(P<0.05,P<0.01),显著升高外周血中CD45RA+CD62L+CCR7+T细胞及其CD4+、CD8+亚群水平(P<0.01,P<0.05),同时伴见结肠组织中PI3K、p-Akt蛋白表达量显著降低(P<0.01,P<0.05)和p-Akt/Akt比值显著下降(P<0.01)。结论:左金丸可通过抑制PI3K/Akt信号活化调节CD45RA+CD62L+CCR7+T细胞及其CD4+、CD8+亚群水平而达到治疗DSS诱导小鼠结肠炎的目的。

急性冠脉综合征患者外周血CD4+CD45RA+T细胞和CD4+CD45RO+T细胞的表达及意义

目的探讨急性冠脉综合征(ACS)患者外周血CD4+CD45RA+T细胞及CD4+CD45RO+T细胞的表达情况及意义。方法采用病例对照研究方法,选择2018年3月5日至4月27日天津市胸科医院收治的94例接受冠状动脉(冠脉)造影的患者,根据患者的症状、心电图、肌钙蛋白化验及造影结果分为非冠心病组(12例)、不稳定型心绞痛(UAP)组(27例)、急性非ST段抬高型心肌梗死(NSTEMI)组(27例)和急性ST段抬高型心肌梗死(STEMI)组(28例)。收集患者一般资料、血常规指标及生化指标,应用流式细胞仪检测各组患者外周血CD4+CD45RA+T细胞及CD4+CD45RO+T细胞的比例。采用多因素Logistic回归分析评价CD4+CD45RA+T细胞及CD4+CD45RO+T细胞是否与STEMI的发生相关。结果94例患者中,排除研究期间死亡1例,最终93例纳入分析,其中非冠心病组12例,UAP组、NSTEMI组、STEMI组各27例。与非冠心病组比较,UAP组患者白细胞计数(WBC)略降低(×109/L:6.03±1.30比6.60±1.30,P>0.05),淋巴细胞比例略升高(0.273±0.059比0.269±0.070,P>0.05);而NSTEMI组和STEMI组患者则表现为WBC升高(×109/L:8.29±2.28、9.86±2.76比6.60±1.30,均P<0.05),淋巴细胞比例降低(0.236±0.076、0.173±0.094比0.269±0.070,P>0.05和P<0.05),以STEMI组的变化更为显著〔WBC(×109/L):9.86±2.76比6.60±1.30,淋巴细胞比例:0.173±0.094比0.269±0.070,均P<0.05〕。各组患者生化指标比较差异均无统计学意义。流式细胞仪结果显示,与非冠心病组比较,UAP组和NSTEMI组患者CD4+CD45RO+T细胞比例均略升高(0.323±0.074、0.319±0.078比0.314±0.058,均P>0.05);但STEMI组患者CD4+CD45RO+T细胞比例则呈下降趋势(0.270±0.057比0.314±0.058,P>0.05),且明显低于UAP组和NSTEMI组(0.270±0.057比0.323±0.074、0.319±0.078,均P<0.05)。各组CD4+CD45RA+T细胞比例差异均无统计学意义。多因素Logistic回归分析显示,未发现CD4+CD45RA+T细胞比例与STEMI的发生相关〔优势比(OR)=0.976,95%可信区间(95%CI)为0.907~1.050,P=0.518〕,但CD4+CD45RO+T细胞比例则与STEMI的发生明显相关(OR=0.888,95%CI为0.821~0.961,P=0.003)。结论CD4+CD45RA+T细胞比例在UAP、NSTEMI、STEMI患者间无明显差异,STEMI患者CD4+CD45RO+T细胞比例明显低于UAP和NSTEMI患者;CD4+CD45RO+T细胞可能是STEMI发生的危险因素。

ManLAM对树突状细胞成熟及下游免疫的影响

目的:研究结核分枝杆菌(MTB)成分带甘露聚糖帽的脂阿拉伯甘露聚糖(mannose-capped lipoarabinomannan,ManLAM)对树突状细胞(dendriticcells,DCs)成熟及下游免疫的影响。方法:分离健康人外周血单个核细胞,用GM-CSF和IL-4诱导DCs生长,培养至第五天换液加细胞因子,第六天分三组,按实验设计加ManLAM和LPS。第七天收集细胞送流式检测DC-SIGN、HLA-DR、CD86、CD83表达水平;ELISA检测DCs培养上清液中IL-12和IL-10水平;混合淋巴细胞反应检测DCs诱导CD4+T淋巴细胞增值能力;DCs与初始CD4+CD45RA+T细胞共培养48小时后,ELISA检测培养上清液中IFN-γ水平。结果:(1)ManLAM组DCs表达CD86、CD83等成熟标志物较成熟DCs组下降,差异有统计学意义(P<0.05);(2)ManLAM组DCs培养上清液中IL-10水平较成熟组升高,IL-12水平较成熟组下降,差异有统计学意义(P<0.05);ManLAM组DCs刺激淋巴细胞增殖能力及刺激初始CD4+CD45RA+T细胞向Th1细胞分化能力较成熟组下调,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:ManLAM干扰DCs成熟,下调DCs诱导的淋巴细胞增殖能力和激活初始CD4+CD45RA+T细胞向Th1细胞分化能力。

CD45RA／CD45RO临床研究进展

目的：探讨CD45RA／CD45RO的研究现状从而有效的指导临床工作。方法：查阅近年来国内外CD45RA／CIM5RO的相关文献，对其最新研究进行总结。结果：作为跨膜酪氨酸磷酸蛋白酶，CIM5RA／CD45RO在哺乳动物淋巴细胞信号传导、增殖和活化中有重要作用，是区分初始和记忆T细胞的重要标志。结论：CD45RA／CD45RO的检测在人类自身免疫疾病和病毒感染性疾病的诊断方面有重要意义。