(1-3)-β-D葡聚糖联合降钙素原、CD4^(+)T淋巴细胞多指标在艾滋病患者马尔尼菲篮状菌感染早期诊断临床研究

目的探讨(1-3)-β-D葡聚糖联合降钙素原(procalcitonin,PCT)、CD4^(+)T淋巴细胞多指标在艾滋病患者马尔尼菲篮状菌感染早期诊断临床研究。方法回顾性选取我院2020年1月—2022年6月住院的120例艾滋病患者为研究对象。依据实验室结果,将其分为马尔尼菲篮状菌感染确诊组(血或组织液培育养出马尔尼菲篮状菌),简称A组(62例),及马尔尼菲篮状菌感染临床诊断组[根据临床症状、体征、血常规及(1-3)-β-D葡聚糖、PCT、CD4^(+)T淋巴细胞多指标诊断],简称B组(58例)。检测患者(1-3)-β-D葡聚糖、PCT、CD4^(+)T淋巴细胞的表达水平,采用受试者工作特征(receiver-operating characteristic,ROC)曲线下面积(area under the curve,AUC)评估上述指标联合检测对艾滋病患者感染马尔尼菲篮状菌的诊断效能。结果A组的(1-3)-β-D葡聚糖和PCT水平均高于B组,CD4^(+)T淋巴细胞个数低于B组(P<0.05);(1-3)-β-D葡聚糖、PCT、CD4^(+)T淋巴细胞联合检测的AUC为0.933,(1-3)-β-D葡聚糖单独检测的AUC是0.812,PCT单独检测的AUC为0.883,CD4^(+)T淋巴细胞单独检测的AUC是0.810,(1-3)-β-D葡聚糖、PCT和CD4^(+)T淋巴细胞联合检测的AUC皆优于三项单独检测,表明(1-3)-β-D葡聚糖、PCT和CD4^(+)T淋巴细胞联合检测的诊断价值皆优于单一指标诊断,且联合检测的特异度、约登指数分别为92.43%和0.580,均高于三项单独检测。结论(1-3)-β-D葡聚糖联合PCT和CD4^(+)T淋巴细胞多指标对艾滋病马尔尼菲篮状菌感染具有非常高的临床诊断价值,能够帮助医生分析出高危风险患者,及时制定治疗方案,同时也承担预后效果的判断依据,对治疗艾滋病马尔尼菲篮状菌感染具有非常重要的研究价值。

RhoA、CD4^(+)CD25^(+)调节性T细胞、MYBL2在胃癌患者中的表达及对预后和生存时间的影响

目的:探讨RhoA、CD4^(+)CD25^(+)调节性T细胞、成髓细胞瘤转录因子第2亚型(MYBL2)在胃癌患者中的表达及对预后和生存时间的影响。方法:选取2017年1月至2019年1月于本院就诊的134例胃癌患者术后癌组织标本作为研究对象,另选取其中62例胃癌患者相应的癌旁组织标本及40例同期非胃癌患者正常胃黏膜组织标本进行对照,检测癌组织、癌旁组织、正常胃黏膜组织中RhoA、CD4^(+)CD25^(+)调节性T细胞、MYBL2的表达情况,分析其对胃癌预后及生存时间的影响。结果:RhoA,CD4^(+)CD25^(+)调节性T细胞、MYBL2在癌组织中的阳性率均明显高于癌旁组织和正常胃黏膜组织(P<0.05)。胃癌患者术后平均生存时间为(28.61±1.34)个月,其中RhoA、CD4^(+)CD25^(+)调节性T细胞、MYBL2阳性患者的生存时间均短于阴性患者(P<0.05)。RhoA(+)、CD4^(+)CD25^(+)调节性T细胞(+)、MYBL2(+)是胃癌患者预后的危险因素(P<0.05)。结论:检测RhoA,CD4^(+)CD25^(+)调节性T细胞、MYBL2的表达可作为胃癌病情严重程度、预后及生存时间评估的重要补充手段。

miR-155/GATA3/CD4^(+)T细胞通路对变应性鼻炎发病机制的调控

变应性鼻炎(AR)指具有特异性体质的个体第二次接触相同致敏原后立即触发由免疫球蛋白E介导的Ⅰ型变态反应,其发病机制尚未明确,与多种基因、免疫细胞、细胞因子等密切相关。随着分子生物学和第二代基因测序技术快速发展,AR发病机制研究逐步深化、精准。研究发现miR-155和转录因子GATA3对AR发生发展有重要调控作用,进而影响CD4^(+)T淋巴细胞的优势分化趋势和ILC2增生。本文主要以miR-155/GATA3通路为中心,探讨相关上游基因和下游调控物质对AR发病机制的影响并进行综述。

外周血CD4^(+)CD25^(+)、CD8^(+)CD28^(+)调节性T细胞水平对早期宫颈癌患者腹腔镜根治术后预后的预测价值

目的分析外周血CD4^(+)CD25^(+)、CD8^(+)CD28^(+)调节性T细胞水平对早期宫颈癌(CC)患者腹腔镜根治术后预后的预测价值。方法招募2018年9月至2020年9月于儋州市人民医院接受腹腔镜根治术治疗的早期CC患者204例,根据患者术后随访期间预后情况分为预后不良组(43例)和预后良好组(161例)。比较两组临床资料。采用Spearman秩相关分析外周血CD4^(+)CD25^(+)调节性T细胞水平与CD8^(+)CD28^(+)调节性T细胞水平的相关性。采用多因素logistic回归分析早期CC患者腹腔镜根治术后预后不良的影响因素。采用受试者工作特征(ROC)曲线评估外周血CD4^(+)CD25^(+)、CD8^(+)CD28^(+)调节性T细胞水平对早期CC患者腹腔镜根治术后预后不良的预测价值。结果预后不良组CD4^(+)CD25^(+)调节性T细胞、癌胚抗原(CEA)、糖类抗原125(CA125)水平,术后切缘阳性占比以及术中宫旁浸润占比高于预后良好组,CD8^(+)CD28^(+)调节性T细胞水平低于预后良好组,差异有统计学意义(P<0.05)。Spearman秩相关分析结果显示,早期CC患者外周血CD4^(+)CD25^(+)调节性T细胞水平与CD8^(+)CD28^(+)调节性T细胞水平呈负相关(r_(s)=-0.478,P<0.05)。多因素logistic回归分析结果显示,较高的CEA、CA125、CD4^(+)CD25^(+)调节性T细胞水平是促进早期CC患者腹腔镜根治术后预后不良发生的独立危险因素(P<0.05),较高的CD8^(+)CD28^(+)调节性T细胞水平是抑制早期CC患者腹腔镜根治术后预后不良发生的独立保护因素(P<0.05)。ROC曲线分析结果显示,外周血CD4^(+)CD25^(+)、CD8^(+)CD28^(+)调节性T细胞水平能有效预测早期CC患者腹腔镜根治术后预后不良(P<0.05),两项指标联合可进一步提高预测效能[AUC(95%CI)=0.939(0.898~0.979),P<0.001],灵敏度和特异度分别为86.00%、88.20%。结论外周血CD4^(+)CD25^(+)、CD8^(+)CD28^(+)调节性T细胞水平与早期CC患者腹腔镜根治术后预后不良有关,二者能有效预测早期CC患者腹腔镜根治术后预后不良。

口腔扁平苔藓组织中IL-35表达水平与外周血CD4^(+)CD25^(+)Treg的相关性

目的探究口腔扁平苔藓(OLP)组织中白介素-35(IL-35)表达水平与外周血CD4^(+)CD25^(+)调节性T细胞(Treg)的相关性。方法收集2016年9月至2018年9月期间我院口腔科收治的口腔扁平苔藓患者38例,设为OLP组,另选同期来我院体检的健康人群20例作为对照组。取两组外周静脉血,荧光定量PCR检测外周血单个核细胞内IL-35两个亚基EB病毒诱导蛋白3(EBI3)、IL-12 p35和CD4^(+)CD25^(+)Treg标志物叉状头转录因子P3(FOXP3)的表达,酶联免疫吸附法检测血清IL-35、白介素-10(IL-10)、白介素-17(IL-17)和转化生长因子β1(TGF-β1)的含量,流式细胞仪检测外周血CD4^(+)CD25^(+)Treg细胞水平,分析IL-35和CD4^(+)CD25^(+)Treg水平与OLP患者临床病理特征之间的关系,Pearson法分析EBI3、IL-35与CD4^(+)CD25^(+)Treg的相关性。结果与对照组相比,OLP组外周血单个核细胞内EBI3、IL-12 p35、FOXP3的mRNA均显著上调(P<0.05)。与对照组相比,OLP组患者血清IL-35、IL-10、IL17、TGF-β1含量显著均上调,差异有统计学意义(P<0.05);与对照组相比,OLP组患者外周血CD4^(+)T细胞和CD4^(+)CD25^(+)Treg细胞水平均显著下降,差异有统计学意义(P<0.05);IL-35和CD4^(+)CD25^(+)Treg水平与患者基底细胞变性程度有关(P<0.05),而与性别、年龄、病程、疾病类型和淋巴细胞浸润无关(P>0.05)。OLP中IL-35与外周血CD4^(+)CD25^(+)Treg的水平呈正相关(r=0.3644,P<0.05)。结论OLP中IL-35与CD4^(+)CD25^(+)Treg表达均显著升高,且二者具有正相关关系。

急性非ST抬高心肌梗死患者外周血CD4^(+)CD25^(+)Foxp3^(+)Treg和IL-27变化的临床意义

目的观察急性非ST抬高心肌梗死患者(Non-STMI)治疗过程中外周血CD4^(+)CD25^(+)T/CD4^(+)T、CD4^(+)CD25highFoxp3^(+)Treg/CD4^(+)CD25high T比例及细胞因子TGF-β1、IL-10、INF-γ、IL-27的浓度变化,阐明Non-STMI患者是否存在调节性T细胞比例及功能异常。方法选取2012年8月至2016年4月入住中山大学附属第一医院急诊病房和CCU的Non-STMI40名,不稳定性心绞痛(UA)患者19名和同龄健康志愿者20名作为对照组(HC)。患者诊断明确后次日清晨和经规范治疗后5~7天,留取空腹外周血标本。流式细胞术检测CD4^(+)CD25^(+)T/CD4^(+)T、CD4^(+)CD25high Foxp3^(+)Treg/CD4^(+)CD25high T细胞。ELISA法检测细胞因子TGF-β1、IL-10、INF-γ和IL-27浓度。结果UA、Non-STMI组CD4^(+)CD25highFoxp3^(+)Treg/CD4^(+)CD25highT比例较HC组减低(P<0.01);Non-STMI明显低于UA组(P<0.05),而治疗后Non-STMI组Foxp3^(+)Treg细胞比例显著升高(P<0.05)。入院时Non-STMI和UA组TGF-β1、IL-10浓度较HC组明显降低(P<0.05),而INF-γ和IL-27浓度明显升高(P<0.05)。治疗后Non-STMI组IL-27迅速下降,而UA组变化不明显。治疗前IL-27浓度与CD4^(+)CD25highFoxp3^(+)Treg/CD4^(+)CD25highT呈线性负相关、与INF-γ浓度呈线性正相关。治疗后只有IL-27和CD4^(+)CD25high Foxp3^(+)Treg/CD4^(+)CD25highT呈线性负相关。结论Non-STMI患者CD4^(+)CD25highFoxp3^(+)Treg比例及功能异常,细胞因子IL-27有助于判断患者的临床疗效。

冷冻消融联合养肺方治疗对Lewis肺癌CD4^(+)CD25^(+)Foxp3^(+)Treg的影响及机制

目的 探讨冷冻消融联合养肺方治疗对Lewis肺癌CD4^(+)CD25^(+)Foxp3^(+)Treg细胞影响及机制。方法 构建C57BL/6小鼠肺癌皮下移植瘤模型,随机分为模型组、冷冻消融组、冷冻消融联合养肺方低、中、高剂量组,每组5只。模型组行假手术,在小鼠移植瘤部位切开缝合,其余各组均行双循环冷冻消融术。术后冷冻消融联合养肺方低、中、高剂量组分别给予1.64、3.28、6.56 g/kg养肺方灌胃,模型组、冷冻消融组分别给予等体积的生理盐水灌胃,均1次/d,连续给药14 d。给药期间观察并记录各组小鼠肿瘤体积,末次给药后剥离脾脏和移植瘤,称取瘤体质量并计算抑瘤率;流式细胞术检测脾脏CD4^(+)T、CD4^(+)CD25^(+)Foxp3^(+)T细胞比例;qRT-PCR和Western blot法检测瘤组织中Foxp3表达。结果 各组小鼠肿瘤体积均逐渐增长,增长速度为模型组>冷冻消融组>冷冻消融联合养肺方低剂量组>冷冻消融联合养肺方中剂量组>冷冻消融联合养肺方高剂量组。手术联合药物干预14 d后,与模型组比较,各治疗组肿瘤体积小(P<0.05);与冷冻消融组比较,冷冻消融联合养肺方低、中、高剂量组肿瘤体积小(P<0.01);冷冻消融联合养肺方高剂量组肿瘤体积小于低剂量组(P<0.01)。与模型组比较,冷冻消融联合养肺方低、中、高剂量组瘤体质量小(P<0.05);与冷冻消融组比较,冷冻消融联合养肺方低、中、高剂量组瘤体质量小(P<0.05)。冷冻消融组、冷冻消融联合养肺方低、中、高剂量组抑瘤率逐渐升高。与模型组比较,各治疗组CD4^(+)T细胞比例低(P<0.05),冷冻消融联合养肺方低、中、高剂量组的CD4^(+)CD25^(+)Foxp3^(+)T%细胞比例低(P<0.05);与冷冻消融组比较,冷冻消融联合养肺方高剂量组CD4^(+)T、CD4^(+)CD25^(+)Foxp3^(+)T细胞比例低(P<0.05);冷冻消融联合养肺方低、中、高剂量组CD4^(+)T、CD4^(+)CD25^(+)Foxp3^(+)T细胞比例逐渐降低。与模型组比较,冷冻消融联合养肺方低、中、高剂量组肿瘤组织中Foxp3 mRNA相对表达量和Foxp3蛋白表达均降低(P<0.01);冷冻消融联合养肺方中、高剂量组Foxp3 mRNA相对表达量和Foxp3蛋白表达均低于冷冻消融组(P<0.01)和冷冻消融联合养肺方低剂量组(P<0.05)。结论冷冻消融联合养肺方通过减少Lewis肺癌小鼠脾脏CD4^(+)CD25^(+)Foxp3^(+)Treg细胞比例,下调肿瘤组织中Foxp3表达,发挥抑制Lewis肺癌增殖作用,其机制可能与增强机体抗肿瘤免疫应答,改善肿瘤免疫抑制有关。

外周血CD4^(+)PD-1^(+)Tcells及CD4^(+)T淋巴细胞ATP含量与复发性卵巢癌疗效的相关性分析

目的 探讨外周血CD4^(+)程序性细胞死亡受体-1(PD-1)^(+)T cells及CD4^(+)T淋巴细胞三磷酸腺苷(ATP)含量与复发性卵巢癌疗效的相关性。方法 选取30例复发性卵巢癌患者为复发组,30例未复发卵巢癌患者为非复发组;另选取30名同期体检健康者作为对照组。评估外周血CD4^(+)PD-1^(+)T cells及CD4^(+)T淋巴细胞ATP含量与复发性卵巢癌疗效的相关性。结果 复发组和非复发组的CD4^(+)PD-1^(+)T cells较对照组明显升高(P<0.05)。复发组和非复发组的CD4^(+)T淋巴细胞ATP含量较对照组明显降低(P<0.05)。复发组治疗后CD4^(+)PD-1^(+)Tcells显著低于治疗前(P<0.05),治疗后CD4^(+)T淋巴细胞ATP含量显著高于治疗前(P<0.05)。CD4^(+)PD-1^(+)T cells与复发性卵巢癌疗效成负相关(r=-0.393,P=0.039),CD4^(+)T淋巴细胞ATP含量与复发性卵巢癌疗效成正相关(r=0.449,P=0.031)。结论 复发性卵巢癌患者外周血CD4^(+)PD-1^(+)T cells及CD4^(+)T淋巴细胞ATP含量与疗效密切相关。

Analysis of CD4^+CD25^+ Regulatory T Cells and Foxp3 mRNA in the Peripheral Blood of Patients with Asthma

The changes of CD4^＋CD25^＋ regulatory T cells （CD4^＋CD25^＋ Treg） and Foxp3 mRNA in peripheral blood mononuclear cells （PBMCs） from patients with asthma were investigated in order to elucidate the possible roles of CD4^＋CD25^＋ Treg in the development of asthma. The peripheral blood samples were collected from 29 healthy controls （normal control group） and 78 patients with asthma which included 30 patients in exacerbation group, 25 patients in persistent group, and 23 patients in remission group. By using flow cytometry and RT-PCR, the CD4^＋CD25^＋ Treg ratio and Foxp3 mRNA in PBMCs were detected. The CD4^＋CD25^＋ Treg ratio and Foxp3 mRNA in PBMCs of exacerbation and persistent groups were lower than that of remission and normal control groups （P〈0.05）. Although the CD4^＋CD25^＋ Treg ratio and Foxp3 mRNA of remission group were also lower than that of normal control group, there was no significant difference between them （P〉0.05）. As compared with persistent group, exacerbation group had lower CD4^＋CD25^＋ Treg ratio and Foxp3 mRNA （P〈0.05）. It was indicated that the decrease of CD4^＋CD25^＋ Treg ratio and its function in PBMCs may be responsible for pathogenesis of asthma.

Peripheral CD4^(+)CD8^(+) double positive T cells:A potential marker to evaluate renal impairment susceptibility during systemic lupus erythematosus

Lupus nephritis(LN) has a high incidence in systemic lupus erythematosus(SLE) patients, but there is a lack of sensitive predictive markers. The purpose of the study was to investigate the association between the CD4^(+)CD8^(+)double positive T(DPT) lymphocytes and LN. The study included patients with SLE without renal impairment(SLE-NRI), LN, nephritic syndrome(NS), or nephritis. Peripheral blood lymphocyte subsets were analyzed by flow cytometry. Biochemical measurements were performed with peripheral blood in accordance with the recommendations proposed by the National Center for Clinical Laboratories. The proportions of DPT cells in the LN group were significantly higher than that in the SLE-NRI group(t=4.012, P<0.001), NS group(t=3.240,P=0.001), and nephritis group(t=2.57, P=0.011). In the LN group, the risk of renal impairment increased significantly in a DPT cells proportion-dependent manner. The risk of LN was 5.136 times(95% confidence interval, 2.115–12.473) higher in cases with a high proportion of DPT cells than those whose proportion of DPT cells within the normal range. These findings indicated that the proportion of DPT cells could be a potential marker to evaluate LN susceptibility, and the interference of NS and nephritis could be effectively excluded when assessing the risk of renal impairment during SLE with DPT cell proportion.

肺癌患者CD4^+ CD25^(high) Foxp3^+调节性T细胞的格局变化及意义

目的:研究肺癌患者外周血(PBMC)及肿瘤浸润淋巴细胞(TIL)中CD4+CD25h ighFoxp3+调节性T细胞(Treg)的比例改变,探讨其在抗肿瘤免疫中的调节作用。方法:分离肺癌患者PBMC及TIL,FACS分析CD4+/CD8+T细胞的比值及CD4+CD25h ighT细胞占CD4+T细胞的比例。Real-tim e PCR检测Treg特异性转录因子Foxp3基因在PBMC及TIL中的表达。结果:肺癌患者PBMC及TIL中CD4+/CD8+比值降低;而CD4+CD25h ighT细胞在CD4+T细胞中所占比例升高;Foxp3基因仅在TIL中高表达,而在PBMC中低或不表达,表明肿瘤局部的CD4+CD25h ighT细胞主要是CD4+CD25h ighFoxp3+Treg。结合临床资料分析显示Treg在肺腺癌比例较高。结论:CD4+CD25h ighFoxp3+Treg在肺癌患者肿瘤浸润淋巴细胞中明显升高,可能与其通过细胞与细胞间接触抑制CD8+T细胞的杀伤效应,最终发挥免疫抑制效应相关。

肺癌和乳腺癌患者外周血中CD4^+CD25^+T细胞及foxp3 mRNA的变化特点及临床意义

目的:探讨肺癌、乳腺癌患者外周血中CD4+CD25+调节性T细胞水平的变化及临床意义。方法:应用流式细胞术检测9例肺癌、9例乳腺癌患者及10例非肿瘤患者外周血单个核细胞(PBMC)中CD4+CD25+T细胞占CD4+T细胞的比例,应用RT-PCR技术检测人外周血PBMCfoxp3基因的表达。结果:流式细胞术检测显示,肺癌及乳腺癌患者外周血PBMC中CD4+CD25+T细胞占CD4+T细胞的比例[(21·30±11·26)%]高于非肿瘤患者[(14·19±8·56)%](P<0·05),肺癌及乳腺癌患者外周血PBMC中foxp3mRNA的表达水平高于非肿瘤患者表达水平(P<0·05),肺癌和乳腺癌患者外周血CD4+CD25+调节性T细胞比例增加。结论:CD4+CD25+调节性T细胞在维持自身免疫稳定的同时对肿瘤免疫具有抑制作用,该细胞群比例的增加可能参与肿瘤的发生。

胃癌患者不同区域淋巴结和外周血CD4^+CD25^+Foxp3^+调节性T细胞的表达和临床意义

目的探讨胃癌患者不同区域淋巴结及外周血中CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞(Tregs)频数变化和临床意义。方法收集45例胃癌患者不同区域淋巴结及外周血标本,采用流式细胞仪检测各标本中Tregs占CD4+T细胞比例,并与胃癌TNM分期、分化程度等参数进行相关性分析。结果 Tregs在引流区阳性淋巴结、引流区阴性淋巴结、非引流区淋巴结、外周血中比例分别为(20.71±2.72)%、(14.43±2.62)%、(10.09±2.27)%、(9.72±2.13)%,前3组中两两相比均差异显著(P<0.05),后2组相比无显著差异(P>0.05)。引流区阳性淋巴结中Tregs细胞比例与肿瘤分期无显著相关(P>0.05);引流区阴性淋巴结、非引流区淋巴结、外周血中Tregs细胞比例与肿瘤分期相关(r=0.429、0.453、0.367;P<0.05),且Ⅲ+Ⅳ期Tregs比例显著高于Ⅰ+Ⅱ期比例。不同区域淋巴结Tregs分布与年龄、性别、肿瘤部位、病理分化间差异无相关性。结论 Tregs在不同区域淋巴结及外周血中分布表达呈递减趋势,可能是导致胃癌淋巴结微环境内出现局部免疫抑制,导致肿瘤细胞发生免疫逃逸的重要因素。

淋巴结核患者外周血CD4^+CD25^(high)FoxP3^+调节性T淋巴细胞以及血浆IFN-γ和IL-10水平及其临床意义

目的研究淋巴结核患者外周血CD4+CD25highFoxP3+调节性T淋巴细胞(Treg)和干扰素γ(IFN-γ)、白细胞介素10(IL-10)水平的变化及临床意义。方法采用流式细胞仪对100例淋巴结核患者及30名正常人外周血CD4+CD25highFoxP3+Treg和IFN-γ、IL-10水平进行检测。结果淋巴结核患者组与正常对照组比较,外周血CD4+CD25highFoxP3+Treg和IL-10水平均升高(P<0.05),而IFN-γ水平则降低(P<0.05)。在干酪样型、增殖型和混合型3种类型的淋巴结核病之间各指标差异均无统计学意义(P>0.05)。结论淋巴结核患者细胞免疫功能明显异常。CD4+CD25highFoxP3+Treg和IFN-γ、IL-10在淋巴结核的发病过程中发挥了重要作用。

CD4^+CD25^+Foxp3^+调节性T细胞与2型糖尿病肾病的关系

目的探讨CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞(Treg细胞)与2型糖尿病肾病之间的关系,为2型糖尿病肾病的预防和治疗提供新的思路。方法采用流式细胞仪胞内染色技术测定60例2型糖尿病患者和15例正常对照组外周血CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞表达率。结果①CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞表达率在2型糖尿病组和对照组之间无显著性差异。②微量蛋白尿组和大量蛋白尿组CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞表达率较对照组有显著性降低(P<0.05),而且大量蛋白尿组较微量蛋白尿组表达率降低更明显(P<0.05)。③病程与CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞表达率呈显著负相关;UAER分级的等级变量与CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞表达率之间有显著的负相关性。结论CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞可能参与了2型糖尿病肾病的发生和发展。

宫颈癌患者外周血中CD4^+CD25^+Foxp3^+调节性T淋巴细胞及血清中IL-10、TGF-β的表达及其临床意义

目的探讨宫颈癌患者外周血CD4^+CD25^+Foxp3^+调节性T淋巴细胞(regulatory T cells,Treg)、T淋巴细胞亚群以及血清IL-10、TGF-β1、TGF-β2细胞因子的表达及其临床意义。方法选取32例宫颈癌患者和24位健康体检者为研究对象,采用流式细胞术检测受试者外周血中CD4^+CD25^+Foxp3^+Treg占CD4^+T淋巴细胞的比例、T淋巴细胞亚群细胞比例;采用ELISA方法检测血清中细胞因子IL-10、TGF-β1、TGF-β2的含量。结果与健康对照组相比,宫颈癌组外周血中CD4^+CD25^+Foxp3^+Treg占CD4^+T淋巴细胞的比值明显增高,差异有统计学意义(P<0.01),T淋巴细胞亚群(CD3^+、CD4^+、CD8^+、CD4^+/CD8^+、CD19^+)比例差异无统计学意义(P>0.05),血清IL-10含量明显增高,TGF-β2含量明显降低,差异有统计学意义(P<0.01),TGF-β1的含量差异无统计学意义(P>0.05);宫颈癌组手术后、化疗后CD4^+CD25^+Foxp3^+Treg占CD4^+T淋巴细胞的比例,血清IL-10、TGF-β1、TGF-β2含量均明显降低,差异有统计学意义(P<0.01),CD4^+CD25^+Foxp3^+Treg与TGF-β1之间存在正相关(r=0.673,P<0.01)。结论宫颈癌患者CD4^+CD25^+Foxp3^+Treg占CD4^+T淋巴细胞的比值增高,且与TGF-β1含量呈正相关,可能在宫颈癌的肿瘤发生发展及肿瘤免疫逃逸中起着重要作用。

炎症性肠病患者外周血CD4^＋CD25^＋Treg细胞及其特异标志物Foxp3表达水平的研究

目的:通过检测炎症性肠病(IBD)不同病期患者以及对照组外周血CD4+CD25+Treg及其特异标志物Foxp3的表达,来分析与IBD疾病活动性关系,探讨CD4+CD25+Treg和Foxp3在IBD发病机制中的作用。方法:52例IBD患者和35例正常对照组分别应用流式细胞术和逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测外周血中CD4+CD25+T细胞亚群的百分率测定和外周血单个核细胞Foxp3mRNA的表达水平。结果:IBD患者外周血CD4+CD25+Treg细胞比例明显低于疾病缓解期患者和正常对照组(P<0.01);活动期IBD患者中使用激素和/或免疫抑制剂与未使用激素和/或免疫抑制剂结果差异有统计学意义;IBD患者外周血单个核细胞(PBMC)中Foxp3 mRNA表达水平低于缓解期和正常人,差异有显著性(P<0.05);缓解期Foxp3 mRNA水平与正常人差异无显著性(P>0.05);IBD患者外周血CD4+CD25+Treg细胞表达率及PBMC中的Foxp3 mR-NA表达水平与疾病活动指数评分呈负相关性。结论:活动期IBD患者外周血CD4+CD25+Treg细胞及Foxp3 mRNA表达下调,而恢复期其表达回升,且二者呈正相关,并与临床活动评分呈负相关,因此认为CD4+CD25+Treg细胞和Foxp3可能参与疾病的发生发展,与疾病的活动性密切相关。

CD^4+CD25^+调节性T细胞及其相关蛋白Foxp3在小儿支原体肺炎患者中的表达

目的探讨不同滴度时小儿肺炎支原体(MP)感染患儿外周血CD4+CD25+Treg细胞和CD4+Foxp3+Treg细胞变化及其临床意义。方法采用流式细胞分析法分别检测MP感染患儿76例,其中MP抗体IgM阳性滴度1∶80 26例,1∶160 17例,1∶320 15例,1∶640 18例和24例健康体检者(对照组)外周血CD4+CD25+Treg细胞,CD4+Foxp3+Treg细胞的表达水平。结果 MP感染患儿1∶80组CD4+CD25+Treg、CD4+Foxp3+Treg细胞均明显高于1∶640组和对照组(P<0.05),MP感染患儿1∶80组CD4+Foxp3+Treg细胞明显高于1∶320组(P<0.05),其余各组组间比较差异均无统计学意义(P>0.05),CD4+CD25+Treg细胞及CD4+Foxp3+Treg细胞的变化与滴度的变化均呈负相关(r=-0.402、-0.376,P<0.01),CD4+Foxp3+Treg细胞的变化与CD4+CD25+Treg细胞的变化呈正相关(r=0.627,P<0.01)。结论 CD4+CD25+Treg细胞和CD4+Foxp3+Treg细胞在小儿MP感染低滴度组发病初期显著升高,但在高滴度组升高并不明显,且两种细胞的变化与滴度的变化呈负相关,Foxp3蛋白可能是CD4+CD25+Treg特异性的标志。

湿疹患者外周血CD4^＋CD25^＋FOXP3^＋调节性T细胞和血清IL-4，IL-10，TGF—β检测及临床研究

目的通过对湿疹患者外周血单个核细胞（PBMC）中转录调节因子3（FOXP3）阳性的天然调节性T细胞（nTreg，CD4^＋CD25^＋Foxp3^＋）表达率及其血清白介素4（IL-4）、白介素10（IL-10）、转化生长因子β（TGF—β）水平的检测结合心理评定并与对照组进行对比分析，探讨其在湿疹发病过程中的作用及患者发病的可能机制。方法应用流式细胞术（flow cytometry，FCM）和ELISA法对湿疹患者（n=32）、对照组（n=32）分别进行PBMC中nT表达率及血清IL-4，IL-10，TGF-β水平进行检测，同时应用症状自评量表（SCL-90）进行心理评定。结果湿疹患者PBMC中nTreg细胞表达率（％）为4．86±1.69，明显低于对照组6．10±2．21；血清IL-4（96．21±20．07pg／ml），IL-10（12．6±1．95pg／ml）含量高于对照组相应检测值53．93±13．10，9．82±1．34pg／ml；TGF-β 15．76±3．11ng／ml含量明显低于对照组（24．39±4．44ng／ml），各项检测指标两纽之间比较差并均有统计学意义（P〈0．01），患者心理健康状态与对照组比较也有显著性差异。结论nTreg数量降低减弱了对Th2细胞的抑制作用是湿疹患者发病的关键环节，Th1／Th2失衡、细胞因子分泌异常在疾病的发生发展中起重要作用，是湿疹发病和慢性化的重要原因，加强对湿疹患者的心理疏导以减少对患者精神、躯体造成的伤害，提高疗效具有重要临床意义。

哮喘患儿CD4^+CD25^+调节性T细胞及FOXP3的表达

目的:研究CD4+CD25+调节性T细胞在哮喘儿童外周血中的比例改变,并探讨其临床意义。方法:采用细胞内染色的流式细胞术检测急性发作期哮喘患儿外周血CD4+CD25+Treg及其调控基因FOXP3的表达,并与健康对照组进行比较。结果:急性发作期哮喘患儿外周血CD4和CD25双阳性细胞所占比例与健康对照组无明显差异(P>0.05),而CD4+CD25+FOXP3调节性T细胞在外周血中的比例明显低于健康对照组(P<0.01)。结论:哮喘患儿外周血CD4+CD25+FOXP3调节性T细胞在外周血中的比例明显减少,可能与哮喘的发病机制有关。