过敏性鼻炎患者外周血CD4^(+)2型辅助T(Th2)细胞中IL-18的表达升高

目的 探讨过敏性鼻炎(AR)患者外周血2型辅助T(Th2)细胞白细胞介素18(IL-18)、 IL-18结合蛋白亚型a(IL-18BPa)和IL-18受体α(IL-18Rα)的表达水平及过敏原对其表达的影响。方法 采用大籽蒿花粉过敏原粗提液(ASWE)和梧桐花粉过敏原粗提液(PPAE)、室尘螨过敏原粗提液(HDME)激发外周血单个核细胞和免疫磁珠分选后的CD4^(+)T细胞,流式细胞术检测上述标本CD4^(+)Th2细胞中IL-18、 IL-18BPa和IL-18Rα的表达,BioPlex检测血浆IL-4的水平,并分析其与IL-18+Th2细胞比例的相关性。结果 与正常对照相比,AR患者外周血CD4^(+)Th2细胞中IL-18+细胞的比例增加,IL-18的平均荧光强度(MFI)增强;IL-18Rα MFI降低。过敏原可直接诱导分选后的HC CD4^(+)Th2细胞表达IL-18和IL-18Rα, AR患者CD4^(+)Th2细胞表达IL-18Rα。AR患者血浆IL-4水平升高,并与IL-18+Th2细胞的比例相关。结论 过敏原可能通过诱导外周血CD4^(+)Th2细胞表达IL-18参与AR发病。

CD4^+ Th细胞亚群与哮喘研究

哮喘是最常见的呼吸系统疾病之一,常常给人们的工作和生活造成严重影响,尤其是在发达国家。其病理特征主要是反复的气道重塑,气道高反应性（airway hyperresponsiveness,AHR）和炎症^（[1]）。患者的主要临床表现为气短,胸闷和咳嗽。簇分化抗原4（cluster differentiation antigen,CD4）细胞是人体免疫系统中的一种重要免疫细胞。

CD_4^+Th细胞在噁唑酮诱导的小鼠实验性肠炎中的变化

目的研究CD4+Th细胞在口恶唑酮诱导的小鼠实验性肠炎中的变化及肠炎的发病机制。方法健康昆明小鼠24只随机平均分为正常组和模型组(以口恶唑酮灌肠造模)。造模3 d后全部处死,提取外周血单个核细胞(PBMC)、脾脏单个核细胞(SMC)和肠黏膜固有层单个核细胞(LPMC)进行细胞培养,并利用细胞内细胞因子流式检测法测定Th1/Th2比例。结果培养48 h后,模型组的LPMC中Th1细胞百分比和Th2细胞百分比均比正常组明显上升(P<0.01),Th1/Th2比正常组显著下降(P<0.01)。培养96 h后,模型组的LPMC中Th1细胞百分比与正常组相比差异无统计学意义(P>0.05),Th2细胞百分比较正常组明显上升(P<0.01),Th1/Th2比正常组显著下降(P<0.01)。而2组的PBMC和SMC相比Th1、Th2细胞百分比和Th1/Th2差异均无统计学意义(P>0.05)。结论口恶唑酮诱导的小鼠实验性肠炎是一种Th2亚群占优势的肠黏膜局部免疫紊乱。

复合通用CD4^+Th细胞表位基因的原核表达及免疫学特性

目的构建复合通用CD4+Th细胞表位基因的原核表达载体,检测表达蛋白的免疫学特性,并探讨其作为载体蛋白的可能性。方法以限制性核酸内切酶BamHⅠ和HindⅢ双酶切重组质粒pUC19-Pep10,回收长度为650bp左右的目的片段,插入原核表达载体pQE30中,获得重组质粒pQE30-Pep10,转化大肠杆菌M15后进行诱导表达。表达产物经SDS-PAGE和Westernblot分析后,进行亲和层析纯化及透析复性,获得重组蛋白Pep10,将Pep10和TT分别免疫雌性BALB/c小鼠,以间接ELISA法和流式细胞术分别检测其免疫原性和淋巴细胞增殖效应。结果SDS-PAGE显示重组蛋白Pep10相对分子质量约为23000,表达量达41%,主要以包涵体形式表达,Westernblot检测可见特异性染色条带,纯化后纯度达94%,共获得42mg重组蛋白。其体外淋巴细胞增殖效应与TT相当,增殖指数分别为4.216和4.736,而免疫原性远低于TT,特异性IgG几何平均滴度(GMT)分别为1∶15758.65和1∶67558.81。结论已成功构建重组原核表达载体pQE30-Pep10,并在大肠杆菌中高效表达,且表达的重组蛋白Pep10具有良好的淋巴细胞增殖效应和较低的免疫原性,有可能作为一种新型载体蛋白,用于多糖结合疫苗的研制。

过敏原对过敏性鼻炎患者外周血CD4^(+)Th17细胞IL-18、IL-18结合蛋白a和IL-18受体α表达水平的影响

目的分析过敏性鼻炎(allergic rhinitis,AR)患者外周血CD4^(+)Th17细胞中IL-18、IL-18结合蛋白a(IL-18-binding protein a,IL-18BPa)和IL-18受体α(IL-18 receptorα,IL-18Rα)的表达水平及过敏原对其表达的影响。方法选择2019年10月—2020年9月锦州医科大学附属第一医院过敏反应科门诊AR患者45例和该医院体检中心体检者23例(健康对照组)为研究对象。根据皮肤点刺试验结果,将患者分为阳性组(AR组,24例)和阴性组(nAR组,21例)。收集受试者血液样本,流式细胞术检测过敏原对CD4^(+)Th17细胞中IL-18、IL-18BPa和IL-18Rα蛋白质表达水平的影响。Bioplex检测血浆中IL-17A水平,并分析其与IL-18^(+)Th17细胞比例的相关性。结果与健康对照组比较,AR组患者CD4^(+)Th17细胞和IL-18^(+)Th17细胞比例均增加(P<0.01),IL-18BPa+Th17细胞比例降低(P<0.01),IL-18BPa的平均荧光强度(mean fluorescence intensity,MFI)增加(P<0.01),IL-18Rα的MFI降低(P<0.01);nAR组患者CD4^(+)Th17细胞IL-18BPa的MFI增加(P<0.0001),IL-18Rα的MFI降低(P<0.0001)。与nAR组患者比较,AR组患者IL-18^(+)Th17细胞比例(P<0.05)和IL-18Rα的MFI均增加(P<0.01)。户尘螨和梧桐花粉过敏原粗提液能分别诱导AR组患者IL-18^(+)Th17和IL-18BPa+Th17细胞比例增加(P<0.05)。户尘螨过敏原粗提液可直接诱导分选后的健康对照者CD4^(+)Th17细胞表达IL-18和IL-18Rα(P<0.05)。AR组患者血浆IL-17A水平升高(P<0.001),并与IL-18^(+)Th17细胞比例中度相关(P<0.05)。结论过敏原可能通过诱导外周血CD4^(+)Th17细胞表达IL-18和IL-18Rα参与AR发病。

绝经后骨质疏松症的T细胞亚群的变化及意义

目的探讨绝经后骨质疏松症女性患者外周血的T细胞亚群的改变及意义.方法流式细胞仪检测68例绝经后骨质疏松症女性及60例无骨质疏松症绝经后女性外周血的T细胞亚群,绝经后骨质疏松症女性患者外周血的T细胞亚群的改变.结果绝经后骨质疏松症女性患者外周血的T抑制/毒性淋巴细胞(Ts)比率降低,Th/Ts比值升高,NK细胞、B淋巴细胞升高(P<0.05).结论外周血的T淋巴细胞亚群的变化可能促进了OP的发生发展.NK细胞、B淋巴细胞在体液免疫、免疫应答当中也出现相应的改变,进一步加重了绝经期妇女的免疫紊乱.

抗IL-9抗体对哮喘小鼠肺部炎症的影响

目的通过比较不同干预措施对气道局部炎症反应和主要免疫系统中CD4+Th2细胞活性的影响,旨在了解外源性抗IL-9抗体对哮喘潜在的治疗价值。方法40只BALB/c小鼠随机分为阳性对照组、阴性对照组、抗IL-9抗体组和地塞米松(Dex)组,建立小鼠哮喘模型,采取不同干预措施,比较各组支气管肺泡灌洗液(BALF)细胞计数、肺组织学检查。结果抗IL-9抗体和Dex均可抑制淋巴细胞、嗜酸性细胞和中性粒细胞等炎症细胞在肺内的过度聚集,降低BALF中Th2细胞因子;Dex降低支气管肺泡灌洗液(BALF)中Th1细胞因子水平,而抗IL-9抗体对其无影响。结论抗IL-9抗体和Dex均能明显减轻哮喘小鼠的肺部炎症,在气道建立起新的Th1/Th2平衡。与Dex相比,应用抗IL-9抗体建立的新平衡不会造成因细胞免疫功能受抑引起的一系列不良反应。