外周血CD4^(+)CD25^(+)Treg细胞、TLR4、hCMV-IgM与动脉粥样硬化型急性脑梗死患者颈动脉粥样硬化的关系

目的探讨外周血CD4^(+)CD25^(+)Treg细胞、TLR4、人巨细胞病毒(hCMV)-IgM与动脉粥样硬化型急性脑梗死(As-ACI)患者颈动脉粥样硬化的关系。方法选取89例As-ACI患者(脑梗死组),另选取健康体检者43例(对照组)。根据颈内动脉超声结果将As-ACI患者分为内膜正常组、内膜增厚组、斑块组、狭窄组。比较各组外周血CD4^(+)CD25^(+)Treg细胞水平、单个核细胞TLR4表达水平、hCMV-IgM抗体阳性率和内膜中膜厚度(IMT)。分析As-ACI患者颈动脉狭窄的危险因素,分析CD4^(+)CD25^(+)Treg细胞、TLR4与IMT的相关性及其对颈动脉狭窄的预测价值。结果脑梗死组CD4^(+)CD25^(+)Treg细胞、HDLC水平低于对照组,TLR4表达、hCMV-IgM抗体阳性率、TC、TG、LDLC、hs-CRP水平、IMT高于对照组(P<0.05)。内膜正常组、内膜增厚组、斑块组、狭窄组CD4^(+)CD25^(+)Treg细胞水平依次降低,TLR4表达、hCMV-IgM抗体阳性率、IMT依次增高(P<0.05)。CD4^(+)CD25^(+)Treg细胞水平与IMT呈负相关,TLR4表达与IMT呈正相关(P<0.05)。高血压、CD4^(+)CD25^(+)Treg表达、TLR4表达、hCMV-IgM抗体阳性是As-ACI患者颈动脉狭窄的危险因素(P<0.05)。CD4^(+)CD25^(+)Treg细胞、TLR4表达水平联合检测的预测价值高于单独检测(P<0.05)。结论外周血CD4^(+)CD25^(+)Treg细胞、TLR4、hCMV-IgM抗体阳性率与As-ACI患者颈动脉粥样硬化进展有关,外周血CD4^(+)CD25^(+)Treg细胞、TLR4联合可以较好预测病变过程。

急性非ST抬高心肌梗死患者外周血CD4^(+)CD25^(+)Foxp3^(+)Treg和IL-27变化的临床意义

目的观察急性非ST抬高心肌梗死患者(Non-STMI)治疗过程中外周血CD4^(+)CD25^(+)T/CD4^(+)T、CD4^(+)CD25highFoxp3^(+)Treg/CD4^(+)CD25high T比例及细胞因子TGF-β1、IL-10、INF-γ、IL-27的浓度变化,阐明Non-STMI患者是否存在调节性T细胞比例及功能异常。方法选取2012年8月至2016年4月入住中山大学附属第一医院急诊病房和CCU的Non-STMI40名,不稳定性心绞痛(UA)患者19名和同龄健康志愿者20名作为对照组(HC)。患者诊断明确后次日清晨和经规范治疗后5~7天,留取空腹外周血标本。流式细胞术检测CD4^(+)CD25^(+)T/CD4^(+)T、CD4^(+)CD25high Foxp3^(+)Treg/CD4^(+)CD25high T细胞。ELISA法检测细胞因子TGF-β1、IL-10、INF-γ和IL-27浓度。结果UA、Non-STMI组CD4^(+)CD25highFoxp3^(+)Treg/CD4^(+)CD25highT比例较HC组减低(P<0.01);Non-STMI明显低于UA组(P<0.05),而治疗后Non-STMI组Foxp3^(+)Treg细胞比例显著升高(P<0.05)。入院时Non-STMI和UA组TGF-β1、IL-10浓度较HC组明显降低(P<0.05),而INF-γ和IL-27浓度明显升高(P<0.05)。治疗后Non-STMI组IL-27迅速下降,而UA组变化不明显。治疗前IL-27浓度与CD4^(+)CD25highFoxp3^(+)Treg/CD4^(+)CD25highT呈线性负相关、与INF-γ浓度呈线性正相关。治疗后只有IL-27和CD4^(+)CD25high Foxp3^(+)Treg/CD4^(+)CD25highT呈线性负相关。结论Non-STMI患者CD4^(+)CD25highFoxp3^(+)Treg比例及功能异常,细胞因子IL-27有助于判断患者的临床疗效。

冷冻消融联合养肺方治疗对Lewis肺癌CD4^(+)CD25^(+)Foxp3^(+)Treg的影响及机制

目的 探讨冷冻消融联合养肺方治疗对Lewis肺癌CD4^(+)CD25^(+)Foxp3^(+)Treg细胞影响及机制。方法 构建C57BL/6小鼠肺癌皮下移植瘤模型,随机分为模型组、冷冻消融组、冷冻消融联合养肺方低、中、高剂量组,每组5只。模型组行假手术,在小鼠移植瘤部位切开缝合,其余各组均行双循环冷冻消融术。术后冷冻消融联合养肺方低、中、高剂量组分别给予1.64、3.28、6.56 g/kg养肺方灌胃,模型组、冷冻消融组分别给予等体积的生理盐水灌胃,均1次/d,连续给药14 d。给药期间观察并记录各组小鼠肿瘤体积,末次给药后剥离脾脏和移植瘤,称取瘤体质量并计算抑瘤率;流式细胞术检测脾脏CD4^(+)T、CD4^(+)CD25^(+)Foxp3^(+)T细胞比例;qRT-PCR和Western blot法检测瘤组织中Foxp3表达。结果 各组小鼠肿瘤体积均逐渐增长,增长速度为模型组>冷冻消融组>冷冻消融联合养肺方低剂量组>冷冻消融联合养肺方中剂量组>冷冻消融联合养肺方高剂量组。手术联合药物干预14 d后,与模型组比较,各治疗组肿瘤体积小(P<0.05);与冷冻消融组比较,冷冻消融联合养肺方低、中、高剂量组肿瘤体积小(P<0.01);冷冻消融联合养肺方高剂量组肿瘤体积小于低剂量组(P<0.01)。与模型组比较,冷冻消融联合养肺方低、中、高剂量组瘤体质量小(P<0.05);与冷冻消融组比较,冷冻消融联合养肺方低、中、高剂量组瘤体质量小(P<0.05)。冷冻消融组、冷冻消融联合养肺方低、中、高剂量组抑瘤率逐渐升高。与模型组比较,各治疗组CD4^(+)T细胞比例低(P<0.05),冷冻消融联合养肺方低、中、高剂量组的CD4^(+)CD25^(+)Foxp3^(+)T%细胞比例低(P<0.05);与冷冻消融组比较,冷冻消融联合养肺方高剂量组CD4^(+)T、CD4^(+)CD25^(+)Foxp3^(+)T细胞比例低(P<0.05);冷冻消融联合养肺方低、中、高剂量组CD4^(+)T、CD4^(+)CD25^(+)Foxp3^(+)T细胞比例逐渐降低。与模型组比较,冷冻消融联合养肺方低、中、高剂量组肿瘤组织中Foxp3 mRNA相对表达量和Foxp3蛋白表达均降低(P<0.01);冷冻消融联合养肺方中、高剂量组Foxp3 mRNA相对表达量和Foxp3蛋白表达均低于冷冻消融组(P<0.01)和冷冻消融联合养肺方低剂量组(P<0.05)。结论冷冻消融联合养肺方通过减少Lewis肺癌小鼠脾脏CD4^(+)CD25^(+)Foxp3^(+)Treg细胞比例,下调肿瘤组织中Foxp3表达,发挥抑制Lewis肺癌增殖作用,其机制可能与增强机体抗肿瘤免疫应答,改善肿瘤免疫抑制有关。

CD4+CD25+Foxp3+Treg在子痫前期患者外周血中表达的意义及与妊娠结局的相关性分析

目的分析CD4+CD25+叉头框蛋白3(Foxp3)+调节性T淋巴细胞(Treg)在子痫前期(PE)患者外周血表达中的意义及与妊娠结局的相关性。方法选取2020年1月~2023年1月收治的112例PE患者为疾病组,另根据年龄、孕周匹配选取健康孕妇60例为健康组。疾病组中根据疾病严重程度分为轻度组与重度组。比较外周血CD4+CD25+Foxp3+Treg水平差异及不良妊娠结局发生率。疾病组根据是否存在妊娠不良结局分为不良组与良好组。对比良好组与不良组患者临床资料。Logistic回归分析影响PE患者不良妊娠结局的因素。Spearman相关性分析法分析CD4+CD25+Foxp3+Treg与不良妊娠结局的相关性。结果疾病组、轻度组、重度组CD4+CD25+Foxp3+Treg百分比均低于健康组,不良妊娠结局发生率均高于健康组(P<0.01)。疾病组、重度组CD4+CD25+Foxp3+Treg百分比均低于轻度组,不良妊娠结局发生率高于轻度组(P<0.01),重度组CD4+CD25+Foxp3+Treg百分比低于疾病组,不良妊娠结局发生率高于疾病组(P<0.01)。不良组的孕前体质量指数(BMI)、24 h尿蛋白定量高于良好组,终止妊娠时间早于良好组,外周血CD4+CD25+Foxp3+Treg百分比均低于良好组,差异有统计学意义(P<0.001);Logistic回归分析显示孕前BMI、终止妊娠时间、24 h尿蛋白定量、外周血CD4+CD25+Foxp3+Treg百分比均是导致不良妊娠结局的独立危险因素(P<0.001)。Spearman相关性分析显示外周血CD4+CD25+Foxp3+Treg水平与不良妊娠结局呈负相关(r=-0.722,P<0.01)。结论PE患者外周血CD4+CD25+Foxp3+Treg表达水平异常低表达,是导致不良妊娠结局发生的独立危险因素,且与不良妊娠结局的发生成负相关。

炎症性肠病患者外周血CD4^＋CD25^＋Treg细胞及其特异标志物Foxp3表达水平的研究

目的:通过检测炎症性肠病(IBD)不同病期患者以及对照组外周血CD4+CD25+Treg及其特异标志物Foxp3的表达,来分析与IBD疾病活动性关系,探讨CD4+CD25+Treg和Foxp3在IBD发病机制中的作用。方法:52例IBD患者和35例正常对照组分别应用流式细胞术和逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测外周血中CD4+CD25+T细胞亚群的百分率测定和外周血单个核细胞Foxp3mRNA的表达水平。结果:IBD患者外周血CD4+CD25+Treg细胞比例明显低于疾病缓解期患者和正常对照组(P<0.01);活动期IBD患者中使用激素和/或免疫抑制剂与未使用激素和/或免疫抑制剂结果差异有统计学意义;IBD患者外周血单个核细胞(PBMC)中Foxp3 mRNA表达水平低于缓解期和正常人,差异有显著性(P<0.05);缓解期Foxp3 mRNA水平与正常人差异无显著性(P>0.05);IBD患者外周血CD4+CD25+Treg细胞表达率及PBMC中的Foxp3 mR-NA表达水平与疾病活动指数评分呈负相关性。结论:活动期IBD患者外周血CD4+CD25+Treg细胞及Foxp3 mRNA表达下调,而恢复期其表达回升,且二者呈正相关,并与临床活动评分呈负相关,因此认为CD4+CD25+Treg细胞和Foxp3可能参与疾病的发生发展,与疾病的活动性密切相关。

儿童AITP治疗前后CD_4^+CD_(25)^(High)Foxp3^+Treg细胞与Foxp3基因表达的变化

目的探讨CD4+CD25HighFoxp3+Treg细胞在儿童急性特发性血小板减少性紫癜(AITP)发病中的作用及对丙种球蛋白、激素治疗的效应关系。方法流式细胞仪检测AITP患儿治疗前后CD4+CD25HighFoxp3+Treg细胞比例变化,RT-PCR法检测外周血单个核细胞中Foxp3 mRNA的表达。结果单用激素或联用激素和丙种球蛋白治疗后AITP患儿CD4+CD25HighFoxp3+Treg细胞比例和Foxp3基因表达水平较治疗前和正常对照组明显增高(P<0.01),其中联用丙种球蛋白和激素组的增高水平更为明显(P<0.01)。结论CD4+CD25HighFoxp3+Treg细胞比例下降及Foxp3基因表达降低是AITP的发病机制之一,丙种球蛋白和激素可以通过诱导其扩增及活化发挥治疗AITP的作用。

CD4^(+)CD25^(+)Foxp3^(+)Treg及CD19^(+)CD69^(+)B细胞在狼疮性肾炎患者外周血中的水平变化及其与疾病活动度的关系

目的研究CD4^(+)CD25^(+)Foxp3^(+)Treg、CD19^(+)CD69^(+)B细胞在狼疮性肾炎中的水平变化与及其与病活动度的关系。方法选取我院于2018年10月至2020年10月收治的108例狼疮性肾炎患者作为研究组,根据系统性红斑狼疮的疾病活动指数(SLEDAI)分为轻度活动度组(38例)、中度活动度组(44例)、重度活动度组(26例),另选取同期于我院行肾穿刺活检证实为微小病变患者为对照组(50例)。检测受试者外周血中CD4^(+)CD25^(+)Foxp3^(+)Treg、CD19^(+)CD69^(+)B细胞水平,分析各组间细胞水平差异,采用ROC曲线分析CD4^(+)CD25^(+)Foxp3^(+)Treg、CD19^(+)CD69^(+)B细胞诊断狼疮性肾炎的价值,采用Pearson相关性分析各细胞与疾病活动度间的相关性。结果研究组患者外周血CD19^(+)CD69^(+)B细胞、TNF-α、CA199水平均显著高于对照组(P<0.05),而CD4^(+)CD25^(+)Foxp3^(+)Treg明显低于对照组(P<0.05)。不同严重程度狼疮性肾炎患者外周血CD4^(+)CD25^(+)Foxp3^(+)Treg、CD19^(+)CD69^(+)B细胞、TNF-α、CA199水平差异有统计学意义(P<0.05),其中重度组患者外周血CD19^(+)CD69^(+)B细胞、TNF-α、CA199水平最高。Pearson相关性分析显示,CD4^(+)CD25^(+)Foxp3^(+)Treg、CD19^(+)CD69^(+)B细胞分别与SLEDAI评分呈现负、正相关性,相关系数r分别为-0.458、0.468。采用ROC曲线分析显示,CD19^(+)CD69^(+)B细胞、CD4^(+)CD25^(+)Foxp3^(+)Treg诊断狼疮性肾炎的曲线下面积分别为0.801(95%CI=0.722~0.880)、0.839(95%CI=0.775~0.903)。两者联合诊断的曲线下面积为0.885(95%CI=0.826~0.944),高于单独检测(P<0.05)。结论CD4^(+)CD25^(+)Foxp3^(+)Treg、CD19^(+)CD69^(+)B细胞在狼疮性肾炎患者外周血中处于异常水平状态,且水平与疾病活动度相关,两者联合检测可作为诊断狼疮性肾炎的新指标。

结核患者外周血CD4^+CD25^+Foxp3^+Treg表达与巨噬细胞凋亡的临床意义

目的探讨结核病患者外周血单个核细胞(PBMC)中CD4^+CD25^+Foxp3^+调节性T淋巴细胞(Treg)表达与单核巨噬细胞(MΦ)凋亡的可能关系及临床意义。方法用流式仪测定29例活动性结核、17例肺外结核患者治疗前及治疗后3、6个月PBMC中CD4^+CD25^+Foxp3^+Treg表达及MΦ凋亡率,并与20例健康对照者(健康对照组)进行比较。结果活动性结核患者PBMC中CD4^+CD25^+Foxp3^+Treg表达明显高于健康对照组和治疗后患者,且复治患者高于初治患者,肺外结核高于肺结核;患者MΦ凋亡率明显高于健康对照组(P<0.01),初治组明显高于复治组(P<0.01)。活动性结核患者PBMC中CD4^+CD25^+Foxp3^+Treg表达与MΦ凋亡呈负相关。结论 CD4^+CD25^+Foxp3^+Treg表达升高,MΦ凋亡下降,提示与结核病呈慢性感染有关。

不明原因复发性流产小鼠模型CD4^+CD25^+ Treg的比例及Foxp3表达的变化

目的分析比较小鼠正常妊娠模型和流产模型中CD4+CD25+调节性T细胞CD4+CD25+Treg的比例、Foxp3蛋白表达水平及胎盘吸收率,探讨CD4+CD25+Treg与不明原因复发性流产的关系。方法以雌性CBA/J×雄性Balb/c为对照组,以雌性CBA/J×雄性DBA/2J为流产组,各10对,于妊娠第14天采用流式细胞术(flow cytometry,FCM)分析CD4+CD25+Treg在CD4+细胞中所占比例,Western blot检测并比较2组CD4+T细胞中Foxp3的表达,并观察2组小鼠的胎盘吸收情况。结果流产组CD4+CD25+Treg所占比例为(10.1±0.59)%低于对照组(15.5±0.78)%(P<0.05)。流产组胚胎吸收率为(25.6±3.5)%,明显高于对照组(2.4±1.6)%(P<0.01)。流产组Foxp3谱带密度相对值为0.30±0.018,低于正常组的0.68±0.025(P<0.05)。结论小鼠的自然流产模型建立成功,流产组孕鼠CD4+CD25+Treg的比例和Foxp3蛋白表达水平明显低于正常妊娠组,提示流产组高流产率可能与CD4+CD25+Treg数量和Foxp3的表达减少有关,CD4+CD25+Treg细胞的数量减少和功能缺陷可能是不明原因复发性流产的发生机制之一。

冠心病慢性心力衰竭患者外周血CD^(4+)CD^(25+)Foxp^(3+)Treg细胞的研究

目的测定冠心病慢性心力衰竭患者的免疫功能及血浆N端脑钠肽前体(NT-proBNP)水平,评价冠心病慢性心力衰竭的免疫激活状态。方法收集2013年8月—2014年2月,中国中医科学院广安门医院心内科的住院患者125例,其中慢性心力衰竭患者93例,非心力衰竭患者32例。采用化学发光免疫方法测定血浆NT-proBNP水平,流式细胞技术测定外周血CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞比例。结果冠心病慢性心力衰竭患者血浆NT-proBNP高于冠心病非心衰组,而外周血CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞比例低于非心力衰竭组。结论冠心病慢性心力衰竭患者存在免疫激活状态,且血浆NT-proBNP水平随NYHA心功能分级增加而升高。

血红素加氧酶-1上调CD4^+ CD25^+ Treg foxp3表达以增强Treg的免疫抑制功能

本研究探讨血红素加氧酶-1(heme oxygenase-1,HO-1)诱导CD4+CD25+调节性T细胞(regulatory T cells,Treg)foxp3表达,增加IL-10分泌,提高CD4+CD25+Treg的免疫抑制功能。选用磁珠分离正常BALB/c小鼠脾脏CD4+CD25+Treg,转染含HO-1质粒pcDNA3HO-1,或用血红素(hemin)、锡-原卟啉(Sn-protoporphyrin,SnPP)干预,培养48 h。用卵清蛋白致敏、激发BALB/c小鼠建立哮喘模型,并在致敏、激发阶段分别经血红素和SnPP干预。用Real-Time PCR和Western blot方法分别测定培养细胞内HO-1、foxp3 mRNA及蛋白量;ELISA方法分别测定细胞上清液和动物血清中IL-10、TGF-β水平;用磁珠分离哮喘动物脾脏CD4+CD25+Treg进行功能抑制试验。结果显示:经pcDNA3HO-1和血红素上调CD4+CD25+Treg HO-1表达,foxp3表达及蛋白水平相应增加,上清液IL-10水平明显升高。而OVA致敏、激发的哮喘小鼠模型,经血红素干预后,血清IL-10分泌亦增多,CD4+CD25+Treg功能抑制作用显著增强。该结果表明HO-1诱导CD4+CD25+Treg特异性转录因子foxp3表达,促进IL-10分泌,增强CD4+CD25+Treg的调节功能,具有显著的免疫抑制作用。

麻醉方式对直肠癌患者CD4^+CD25^+Foxp3^+Treg水平及预后的影响

目的探讨不同麻醉方式对直肠癌手术患者CD4^+CD25^+Foxp3^+Treg水平及其预后的影响。方法选取2011年1月-2012年12月于陕西省人民医院行CO_2气腹腹腔镜下直肠癌手术的患者143例。比较单纯全身麻醉(GA)、硬膜外复合全身麻醉(EA)及硬膜外复合全身麻醉下6%羟乙基淀粉液急性高容量血液稀释(EA^+AHH)麻醉对患者术中一般情况、术前和术后1个月外周血CD4^+CD25^+Foxp3^+Treg水平及3年随访生存率的影响。结果 EA^+AHH组患者术中血压波动幅度小于其余两组患者。与术前比较,EA^+AHH组术后1个月外周血CD4^+CD25^+Foxp3^+/CD4^+下降幅度大于其余两组,术后3年生存率高于其余两组(P<0.05)。结论 EA^+AHH麻醉可改善CO_2气腹腹腔镜下直肠癌手术患者术后细胞免疫状态及预后,值得在临床推广应用。

CD4^+CD25^+Foxp3^+Tregs在自身免疫性甲状腺疾病中的作用研究

目的:探讨CD4^+CD25^+Foxp3^+Tregs在自身免疫性甲状腺疾病(AITD)中的作用。方法:收集2014年2月-2016年11月在本院进行检查的AITD患者80例为治疗组,其中Graves(GD)患者40例,为GD组;桥本甲状腺炎(HT)患者40例,为HT组;选取健康体检人员20例为对照组。采用流式细胞术检测外周血CD4^+T、CD4^+CD25^+Tregs细胞数量和比例,采用RT-PCR检测外周血Foxp3 mRNA表达水平,采用化学发光法对血清中甲状腺素(TSH)、总三碘甲状腺原氨酸(TT_3)、总甲状腺素(TT_4)、甲状腺球蛋白抗体(TgAb)和甲状腺过氧化酶抗体(TPOAb)的水平进行测定。结果:三组TSH、TT_3、TT_4、TgAb、TPOAb比较,差异均有统计学意义(P<0.05);三组外周血CD4^+T细胞数量比较,差异无统计学意义(P>0.05);GD组外周血CD4^+CD25^+Tregs占CD4^+T细胞的比率与对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05);HT组外周血CD4^+CD25^+Tregs占CD4^+T细胞的比率明显低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);GD组和HT组外周血Foxp3 mRNA表达量均明显低于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05);自身免疫性甲状腺疾病的CD4^+CD25^+Foxp3^+Tregs与TSH、TT_3、TT_4、TgAb和TPOAb有明显正相关性(P<0.05)。结论:CD4^+CD25^+Foxp3^+Tregs可能在AITD的发生发展进程中起着一定的作用,深入研究CD4^+CD25^+Foxp3^+Tregs在AITD中的作用将有助于建立新的预防和治疗策略。

中药有效成分对荷视网膜母细胞瘤小鼠CD4^+CD25^+Foxp3^+Treg表达及血清细胞因子水平的影响

目的:观察黄芪、党参及其组方对荷视网膜母细胞瘤小鼠CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞(CD4+CD25+Foxp3+Treg)表达及血清细胞因子水平的影响。方法:复制C57BL/6小鼠Lewis荷视网膜母细胞瘤动物模型,动态观察黄芪、党参及其组方对抑瘤率、荷瘤转移抑制率、荷瘤小鼠体质量的影响。接种5、10、15、20d后用流式细胞仪检测荷视网膜母细胞瘤小鼠脾CD4+CD25+Foxp3+Treg的表达,20d采集小鼠血清,用流式微球阵列技术检测细胞因子IL-2、IL-6、IL-10、IL-12p70、IFN-γ水平。结果:20d黄芪组和黄芪+党参组小鼠体质量高于对照组(P<0.05),20d黄芪组和黄芪+党参组小鼠瘤重低于对照组(P<0.05),15d黄芪+党参组小鼠瘤重低于对照组(P<0.05);在抑瘤率方面黄芪组和黄芪+党参组明显高于党参组(P<0.01);黄芪+党参组肿瘤转移抑制率为46.61%;对照组小鼠CD4+CD25+Foxp3+Treg表达随荷瘤天数的增加呈上升趋势,而3个中药组则呈下调趋势;3个中药组与对照组比较均能明显下调IL-10水平(P<0.05)并上调IL-2和IFN-γ的水平(P<0.05)。结论:益气活血中药组方黄芪+党参可通过调控荷瘤小鼠CD4+CD25+Foxp3+Treg的表达显著改善其体内存在的免疫耐受状态,其作用效果明显优于单味中药。

CD4^(+)CD25^(+)Foxp3^(+) Treg细胞及其相关因子在梅尼埃病中的意义

目的研究CD4^(+)CD25^(+)Foxp3^(+)调节性T细胞(Treg)及其相关因子在梅尼埃病中的临床意义。方法回顾性纳入2019年8月至2021年5月收治的45例梅尼埃病患者(其中缓解期13例,发作期32例;单侧36例,双侧9例;听力分期1期3例、2期20例、3期16例、4期6例),以同期健康人群30例作为对照组。采用流式细胞术检测两组患者外周血CD4^(+)CD25^(+)Foxp3^(+)Treg细胞百分比及转化生长因子-β(TGF-β)、叉头状转录因子p3(Foxp3)mRNA相对表达;酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清白细胞介素-10(IL-10)水平;分析CD4^(+)CD25^(+)Foxp3^(+)Treg细胞及其相关细胞因子TGF-β、Foxp3、IL-10与病情严重程度、不同听力分期和单双侧患耳的关系;Pearson相关性分析CD4^(+)CD25^(+)Foxp3^(+)Treg细胞表达与IL-10、TGF-β、Foxp3表达的相关性。结果梅尼埃病组患者外周血CD4^(+)CD25^(+)Foxp3^(+)Treg细胞百分比、外周血Foxp3 mRNA相对表达及血清IL-10水平明显低于健康对照组,外周血TGF-βmRNA相对表达则明显高于健康对照组,差异有统计学意义(均为P<0.05)。不同听力分期及单双侧梅尼埃病患者外周血CD4^(+)CD25^(+)Foxp3^(+)Treg细胞百分比及相关细胞因子表达组间差异均无统计学差异(P>0.05)。梅尼埃病患者CD4^(+)CD25^(+)Foxp3^(+)Treg细胞百分比与外周血TGF-β相对表达呈负相关(r=-0.704,P<0.05),与血清IL-10水平(r=0.679)和外周血Foxp3相对表达(r=0.725)呈正相关(P<0.05)。结论梅尼埃病患者外周血CD4^(+)CD25^(+)Foxp3^(+)Treg细胞及相关细胞因子TGF-β、Foxp3、IL-10异常表达,可能与患者体内免疫抑制减弱有关,Treg细胞调控的细胞免疫可能是梅尼埃病的发病机制之一。

CD4^+CD25^+FOXP3^+Treg细胞与急性移植物抗宿主病的关系

背景:CD4+CD25+FOXP3+Treg细胞具有免疫抑制作用,推测可能减少异基因造血干细胞后急性移植物抗宿主病的发生率。目的:观察粒细胞集落刺激因子动员前后,供者外周血CD4+CD25+FOXP3+Treg细胞比率变化,并探讨CD4+CD25+FOXP3+Treg细胞与异基因造血干细胞移植后发生急性移植物抗宿主病的关系。方法:以异基因造血干细胞移植受者90例及其供者为研究对象,供者皮下注射重组人粒细胞集落刺激因子(5μg/kg),1次/12 h,连续5 d后,采集干细胞;分别于动员前后采集供者外周血,流式细胞仪检测其中CD4+CD25+FOXP3+Treg细胞含量,及受者接受移植物中此类细胞含量;根据接受CD4+CD25+FOXP3+Treg细胞数分为高剂量组(细胞比例≥5%)及低剂量组(细胞比例<5%),比较两组移植后急性移植物抗宿主病的发生率。结果与结论:供者在应用粒系集落刺激因子动员前后CD4+CD25+FOXP3+Treg细胞比例分别为11.3%和1.5%,差异有显著性意义(P<0.05);急性移植物抗宿主病阳性组所接受移植物中该群细胞比例为3.4%,阴性组为15.7%,差异有显著性意义(P<0.05);移植造血重建后高剂量组急性移植物抗宿主病的发生率为18.4%,低剂量组急性移植物抗宿主病的发生率为48.1%,二者差异有显著性意义(P<0.05)。因而,粒系集落刺激因子应用能降低正常人外周血中CD4+CD25+FOXP3+Treg细胞比例;CD4+CD25+FOXP3+Treg细胞增加可以降低急性移植物抗宿主病的发生率。

心脏移植大鼠自发免疫耐受模型中CD4^+CD25^+Treg与FOXP3的变化

目的行Wistar(供体)到SD(受体)大鼠的腹部异位心脏移植建立自发免疫耐受模型,探讨CD4+CD25+Treg与FOXP3在同种异体心脏移植大鼠自发免疫耐受形成过程中的作用。方法以光镜、电镜观测移植心肌的病变特点、以流式细胞术检测外周血CD4+CD25+T淋巴细胞数量变化、RT-PCR检测其功能基因FOXP3的表达情况。结果CD4+CD25+T淋巴细胞在对照组中无明显变化,在心脏移植组(实验组)中CD4+CD25+T淋巴细胞术后第1天开始上升,第3天[(6.07±1.55)]达峰值,第5天[(5.44±1.47)]、第7天[(3.35±0.46)]逐渐下降,术后第3,5天明显高于对照组(P<0.05);FOXP3在对照组中无明显表达,在实验组中术后第3、5天表达明显,第7天表达下降。移植心脏的心肌病理改变在第1,3天逐渐加重,第5天时病变最重,第7天减轻,第7天移植心脏排斥反应减轻提示移植心脏产生免疫耐受。结论心脏移植大鼠自发免疫耐受模型中CD4+CD25+T与FOXP3均上调。且基本与移植心脏排斥反应呈负相关,提示CD4+CD25+T细胞的数量与功能变化可能参与自发免疫耐受的形成。

Leptin在系统性红斑狼疮患者中表达及与CD4^+ CD25^+ Foxp3^+ Tregs细胞相关性的研究

目的研究瘦素(Leptin)在系统性红斑狼疮(SLE)患者中表达情况及与疾病活动度、临床和实验室指标及CD4^+CD25^+Foxp3^+Tregs的关系,探讨Leptin对Treg调节作用及对SLE发病的影响。方法选择47例女性SLE患者作为SLE组,另选择年龄、体质量指数与实验组相当的健康体检者25例作为健康组,采用ELISA方法和流式细胞学技术(FACS)测定2组血浆Leptin水平及外周血Tregs百分率,比较SLE组不同疾病活动度患者Leptin水平并分析Leptin与疾病活动评分(SLEDAI)、临床表现、实验室指标及外周血Tregs的相关性。分离SLE患者外周血单个核细胞(PBMC),FACS分析在有/无抗Leptin条件下体外培养40h及80h Tregs百分率。结果 SLE组血浆Leptin水平显著高于健康组(P<0.05);SLE患者中度活动组及重度活动组血浆Leptin水平均高于健康组(P均<0.05),且重度活动组Leptin水平明显高于中度及轻度活动组(P均<0.05);SLE患者血浆Leptin水平与SLEDAI呈正相关(r=0.316 2,P=0.030 4),而与外周血Tregs呈明显负相关(r=0.288 8,P=0.049 0);健康组血浆Leptin水平与外周血Tregs则无明显相关性(r=0.121 9,P=0.561 5)。体外实验中抗Leptin处理后Tregs数量显著增加(P<0.05)。结论 SLE患者血清Leptin水平显著升高,在某种程度上疾病活动程度越高,其血清Leptin水平越高;Leptin可能通过抑制Tregs增殖参与SLE发病。

胃癌患者血清CA72-4、CEA、CA19-9水平与CD4^(+)CD25^(+)Treg细胞比例的相关性及临床意义

目的探讨胃癌患者血清糖类抗原72-4(CA72-4)、癌胚抗原(CEA)、糖类抗原19-9(CA19-9)水平与外周血CD4^(+)CD25^(+)调节性T(Treg)细胞比例的相关性和临床意义。方法回顾性分析2020年1月至2022年12月在西安长安医院就诊的胃癌患者68例作为胃癌组,另选取同期体检的健康志愿者50例作为对照组。检测并比较两组患者血清CA72-4、CEA、CA19-9水平及外周血CD4^(+)CD25^(+)Treg细胞比例。比较胃癌组不同临床资料患者的CA72-4、CEA、CA19-9水平及CD4^(+)CD25^(+)Treg细胞比例,采用Pearson相关分析胃癌组CA72-4、CEA、CA19-9水平与CD4^(+)CD25^(+)Treg细胞比例的相关性。结果胃癌组血清CA72-4、CEA、CA19-9水平及外周血CD4^(+)CD25^(+)Treg细胞比例比对照组高,差异均有统计学意义(P<0.05)。胃癌组TNM分期为Ⅲ~Ⅳ期患者的CA72-4、CEA、CA19-9水平及CD4^(+)CD25^(+)Treg细胞比例比Ⅰ~Ⅱ期患者高,高~中分化程度患者CA72-4、CEA、CA19-9水平比低分化程度患者低,淋巴结转移患者的CA72-4、CEA、CA19-9水平及CD4^(+)CD25^(+)Treg细胞比例比淋巴结未转移患者高,差异均有统计学意义(P<0.05)。胃癌组血清CA72-4、CEA、CA19-9水平与CD4^(+)CD25^(+)Treg细胞比例均呈正相关(r=0.587,0.678,0.696,P<0.05)。结论胃癌患者血清CA72-4、CEA、CA19-9水平及外周血CD4^(+)CD25^(+)Treg细胞比例明显升高且存在正相关性,与胃癌的发生、发展及肿瘤浸润转移密切相关;CD4^(+)CD25^(+)Treg细胞比例随肿瘤负荷的变化而变化,对胃癌患者病情评估、监测机体免疫状态及判断预后具有一定临床价值。

CD4^+CD25^+Foxp3^+Treg细胞与HPV感染的相关性

CD4^+CD25^+Foxp3^+Treg细胞是CD4^+T细胞的新亚群,参与自身免疫病、感染和肿瘤等疾病的发生发展。研究表明CD4^+CD25^+Foxp3^+Treg细胞与尖锐湿疣的发病和疾病转归具有一定的相关性。CD4^+CD25^+Foxp3^+Treg细胞数量及功能缺陷影响自身免疫环境的稳定性。通过对此细胞的监测,可以进一步从免疫学角度了解尖锐湿疣的发病与演变机制。