CD40反义RNA的构建及其诱导Balm细胞凋亡

目的：探讨ＣＤ４０反义ＲＮＡ对Ｂａｌｍ细胞的影响。方法：用ＲＴＰＣＲ法从人扁桃体细胞获得ＣＤ４０ｃＤＮＡ，双脱氧终止法测序正确后，构建编码膜内段ＣＤ４０基因的反义ＲＮＡ表达载体（ｐｃＤＮＡ３ＣＤ４０），将其导入人Ｂ细胞株Ｂａｌｍ细胞。结果：发现转导后细胞生长代谢受抑，细胞体积缩小，有细胞碎块脱落，ＦＡＣＳ检测出现典型凋亡峰；细胞发光减弱，发光值明显低于正常对照组及转导空载体组（Ｐ＜０．０１），与放线菌素Ｄ（ＡｃｔＤ）、氨甲喋呤（ＭＴＸ）、肿瘤坏死因子（ＴＮＦ）处理组有相似的形态及发光改变。结论：提示ＣＤ４０反义ＲＮＡ特异性阻断了ＣＤ４０正常功能的发挥，导致细胞凋亡。

CD_(154)反义RNA诱导Jurkat细胞的凋亡

目的 探讨 CD1 54反义 RNA诱导 Jurkat细胞凋亡的作用。 方法 应用 RT- PCR扩增人 CD1 54膜外段基因 ,以及 T- A克隆技术和亚克隆技术构建 CD1 54反义 RNA的真核表达载体 ,并将其转染入 Jurkat细胞中。应用电镜及流式细胞仪 (FCM)检测观察 Jurkat细胞的凋亡指标。 结果 电镜观察 CD1 54反义 RNA转染的 Jurkat细胞内可见凋亡小体 ,并且 FCM检测显示一明显的凋亡峰。 结论 CD1 54反义 RNA可诱导 Jurkat细胞凋亡。