蜂针对类风湿关节炎大鼠CD40-CD40L的调控作用

目的观察蜂针对类风湿关节炎(RA)大鼠CD40-CD40L的调控作用,探讨蜂针治疗RA的可能机制。方法30只大鼠随机分为模型组、空白组和蜂针组各10只,采用完全弗氏佐剂造模,观察各组痛阈变化、组织病理改变及滑膜组织CD40、CD40L的变化。结果与空白组比较,造模后蜂针组和模型组痛阈显著降低,组织病理改变明显,滑膜CD40、CD40L mRNA水平显著升高(P<0.05)。与模型组比较,治疗3 d后蜂针组痛阈显著升高,组织病理改善,滑膜CD40、CD40L mRNA水平显著降低(P<0.05)。结论蜂针具有镇痛作用,可以缓解RA进展,其机制可能与蜂针抑制CD40、CD40L表达有关。

CD40-CD40L共同表达于人内皮细胞及人动脉粥样斑块中

目的 :探讨CD4 0和CD4 0L在人脐静脉内皮细胞及动脉粥样硬化斑块中是否可共同表达。方法 :CD4 0及CD4 0L在内皮细胞表面的表达分别采用荧光技术、RT -PCR、流式细胞仪和Westernblotting检测。人的动脉粥样硬化斑块中CD4 0及CD4 0L的表达采用免疫组化方法。结果 :人内皮细胞能连续表达CD4 0及CD4 0LmRNA和蛋白 ,并且细胞因子IL - 1β、IL - 6、TNF -α、INF -γ能明显刺激内皮细胞表达CD4 0、CD4 0L。人动脉粥样斑块中能共同表达CD4 0及CD4 0L ,而动脉壁的其它部分不表达。CD4 0L主要表达在斑块的肩部和底部 ,CD4 0在斑块中表达广泛。结论 :人内皮细胞表面及粥样斑块中能共同高表达CD4 0和CD4 0L ,提示CD4 0及CD4 0L相互作用在动脉粥样硬化形成及发展中起重要作用。

阻断CD40-CD40配体系统对动脉粥样硬化的影响

目的探讨阻断CD40-CD40配体系统对动脉粥样硬化的影响。方法18只载脂蛋白E基因敲除小鼠随机分为阳性对照组(n=10)和抗CD40配体抗体组(n=8),并以近交系C57BL/6小鼠作为正常对照。测定血脂、可溶性血管细胞粘附分子1和可溶性细胞间粘附分子1浓度。观察主动脉组织病理形态学改变,免疫组织化学法测定斑块部位巨噬细胞、平滑肌细胞和CD4+T细胞百分率。Western杂交分析测定基质金属蛋白酶9的蛋白表达。结果抗CD40配体抗体治疗可明显降低可溶性血管细胞粘附分子1和可溶性细胞间粘附分子1浓度(P<0.01),对血脂无明显影响(P>0.05);可减轻动脉粥样硬化病变,减少斑块部位巨噬细胞和CD4+T细胞,增加平滑肌细胞数量(P<0.05),降低基质金属蛋白酶9的表达(P<0.01)。结论阻断CD40-CD40配体系统可使血清可溶性粘附分子浓度下降,抑制炎症反应,从而减轻动脉粥样硬化病变,对血脂无影响。

阻断CD40-CD40L共刺激途径对T细胞表型及细胞因子分泌的作用研究

目的 :探讨应用抗CD4 0L单克隆抗体阻断CD4 0 CD4 0L共刺激途径后对T细胞表型及其分泌的细胞因子的影响 ,为体外阻断该共刺激途径诱导T细胞对异体移植抗原的免疫耐受提供实验依据。方法 :供鼠 (C5 7BL 6 H 2b)脾T细胞作为反应细胞 ,受鼠 (BALB CH 2d)脾细胞作为刺激细胞 ,设单抗组 (加抗CD4 0L单抗 )和对照组 (不加单抗 ) ,初次混合淋巴细胞培养(MLR) 7天 ,在不同时间点采用3H TdR掺入法检测细胞增殖率 ,以ELISA法测定培养上清液中IFN γ、IL 2、IL 4、IL 10等的水平 ,第 5天采用流式细胞仪检测CD4 + T和CD8+ T细胞上CD2 5、CD6 9、CD4 0L和CD4 5RA的表达。再次MLR 5天 ,第 1、3、5天采用3H TdR掺入法测定细胞的增殖情况和ELISA法测定培养上清液中的上述细胞因子的水平。结果 :初次和再次MLR结果均显示 ,单抗组细胞增殖反应率明显低于对照组。初次MLR单抗组中CD4 + T和CD8+ T细胞比例明显低于对照组 (P <0 0 5 ) ;单抗组中CD4 + CD2 5 + T、CD4 + CD6 9+ T、CD8+ CD2 5 + T、CD4 + CD4 0L+ T和CD8+ CD6 9+ T细胞比例明显低于对照组 (P <0 0 5 ) ,而CD8+ CD4 0L+ T和CD4 + CD4 5RA +T细胞的比例与对照组相比无明显差异 (P >0 0 5 )。初次MLR中单抗组和对照组培养上清中IL 4和IL 10几乎无法测出 。

银杏内酯B抑制血小板CD40Ligand表达的分子机制研究

目的探讨银杏内酯B(ginkgolide B)对活化血小板CD40 Ligand(CD40L)的影响以及相关的分子机制。方法取正常人血分离血小板,用不同浓度银杏内酯B孵育血小板5 min,然后用胶原(collagen)刺激血小板活化。用Westernblot分析PI3K表达,Akt磷酸化,CD40L的变化。结果①用collagen刺激血小板聚集,银杏内酯B(0.2、0.4、0.6 g.L-1)预处理血小板5 min,血小板聚集率明显降低,聚集率分别为77%,60%和48%。②Western blot结果显示胶原刺激血小板活化后CD40L表达明显增加,银杏内酯B以剂量依赖方式抑制了CD40L表达。③银杏内酯B对胶原刺激的血小板PI3K表达无明显影响。④collagen刺激血小板活化后Akt的磷酸化增加,银杏内酯B抑制了Akt磷酸化。结论银杏内酯B能够有效抑制collagen诱导的血小板聚集以及CD40L的表达,并明显抑制了Akt磷酸化,表明银杏内酯B能够通过PI3K/Akt信号传导通路抑制血小板活化。

普伐他汀和阿司匹林对CD40-CD40L表达及斑块稳定性的影响

目的:研究普伐他汀和阿司匹林对兔腹主动脉粥样硬化斑块CD40-CD40L表达及斑块稳定性的影响。方法:新西兰大白兔32只予高脂饲养16wk及腹主动脉球囊损伤术建立腹主动脉粥样硬化模型,分4组:P组(普伐他汀)、A组(阿司匹林)、A+P组(联合用药)与N组(不用药),分别予相应药物灌胃8wk。通过免疫组化检测比较各组兔腹主动脉粥样硬化斑块内CD40-CD40L表达、MMP-1、胶原及脂质含量变化,超声检测腹主动脉内膜-中膜厚度(IMT)改变,ELISA法测定血清C反应蛋白(CRP)变化,分析2药干预动脉粥样硬化斑块稳定性的机制。结果:用药各组兔腹主动脉斑块内CD40-CD40L表达较N组显著受抑,普伐他汀作用更显著(P组和A+P组均P<0.01);同时各用药组MMP-1的表达、IMT增厚及CRP增高较N组均得到明显抑制(P<0.01),P组和A+P组较N组斑块内脂质显著减少(P<0.01),胶原含量明显增加(P<0.01)。结论:普伐他汀和阿司匹林都可抑制斑块CD40-CD40L系统的表达,促进斑块的稳定性。普伐他汀促进斑块稳定的机制可能是多方面的。

CD40-CD40L与甲状腺相关眼病

甲状腺相关眼病是一种器官特异性自身免疫性疾病,确切的发病机制尚不清楚。近年来研究表明CD40和其配体CD40ligand(CD40L)与自身免疫性疾病的发病关系密切。CD40-CD40L作为一种重要的共刺激信号,通过诱导细胞活化和细胞因子的产生,调节细胞、体液免疫并参与介导细胞内信号转导。本文就CD40-CD40L的结构和分布、对免疫反应的调节及其在甲状腺相关眼病发病中的作用作一综述。

通心络抑制兔动脉粥样硬化斑块及CD40-CD40L表达的实验研究

目的通过去除血管外膜合并高脂饮食的方法复制兔动脉粥样硬化模型,观察通心络对预防兔动脉粥样硬化的作用,并探讨其可能的作用机制。方法24只雄性新西兰大白兔给予高脂饮食,随机分为三组:一组(通心络组)以通心络混悬液灌胃给药,二组(阿托伐他汀组)以阿托伐他汀混悬液灌胃给药,三组(空白对照组)以等量蒸馏水灌胃。三组动物左侧颈总动脉以胶原酶消化法去除外膜;术前取血标本,12周后取血及双侧颈总动脉标本,组织形态学方法评价动脉粥样斑块形成情况,免疫组化方法检测斑块CD40与CD40L表达。结果实验前三组动物的各项血脂指标比较差异均无统计学意义(尸>0．05)。与实验前比较,12周末各组动物血脂水平均明显升高(P<0．05)。第12周末,通心络组和阿托伐他汀组的TC、LDL-C均显著低于对照组(P<0．05),差异无统计学意义(P>0．05)。三组动物左侧动脉内膜增生均较右侧严重:同侧对比空白对照组较通心络及他汀组严重,其中空白对照组左侧动脉可见典型粥样斑块形成。定量分析通心络组及阿托伐他汀组动脉内膜／中膜厚度比值小于空白药物对照组(P<0．001)。通心络组及他汀组CD40与CD40L表达较空白对照组弱;通心络与他汀组对比病变差异无统计学意义。信号强度结果分析提示通心络组及阿托伐他汀组CD40-CD40L信号强度显著低于空白对照组(P<0．001)。结论去除血管外膜合并高脂饮食可成功复制兔动脉粥样硬化模型;通心络和阿托伐他汀一样都具有抗动脉粥样硬化作用,可抑制动脉粥样硬化斑块,其机制可能与下调CD40-CD40L系统,降低其表达有关。

CD40-CD40L系统与斑块稳定性的相关性研究

目的:研究CD40-CD40L系统在兔腹主动脉粥样硬化斑块进展过程中的表达以及与斑块稳定性的相关性。方法:50只健康新西兰大白兔,随机均分为10组:正常对照1～5组(C1～5组)、动脉粥样硬化模型1～5组(AS1～5组)。C1～5组分别予兔标准饲料喂养至8周、10周、12周、14周、16周取腹主动脉标本;AS1～5组均在高脂饲养1周后予腹主动脉球囊导管损伤术造模,并分别持续高脂饮食至8周、10周、12周、14周、16周取标本。各组均于实验前及取标本前检测血清C反应蛋白(CRP),各组腹主动脉标本通过免疫及特殊染色定位、光镜下摄片并计算机图像分析软件测定斑块内CD40、CD40L、MMP-1阳性染色的面积占血管内膜面积百分比值及胶原/脂质含量比值,分析CD40-CD40L系统的表达与斑块稳定性的相关性。结果:AS1～5组均形成腹主动脉粥样硬化斑块。与C1～5组对应比较,AS1～5各组血清CRP均显著增高(P<0.01),斑块内CD40、CD40L、MMP-1的表达显著增加(P<0.01)。在动脉粥样硬化进程中,CD40、CD40L表达与CRP、MMP-1表达呈正相关,与胶原/脂质含量比值负相关。结论:斑块中CD40-CD40L系统表达随着动脉粥样硬化进展而逐渐增高,其高表达与斑块的不稳定性增加密切相关。

CD40-CD40L在寻常性银屑病患者外周血的表达及意义

目的:探讨单核细胞上CD40和其配体CD40L及血清中游离型配体sCD40L在寻常性银屑病患者外周血中的水平及其临床意义。方法:采用流式细胞术检测30例寻常性银屑病患者外周血单核细胞CD40、CD40L表达水平,并采用双抗体夹心酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清sCD40L的浓度。另取20例正常人外周血作为对照组。结果:寻常性银屑病患者外周血单核细胞上CD40的表达水平及血清中sCD40L浓度明显高于对照组(P<0.01),外周血单核细胞CD40与CD40L表达水平呈正相关(r=0.412,P<0.05),外周血单核细胞CD40表达水平与血清中sCD40L浓度呈正相关(r=0.487,P<0.05)。结论:CD40-CD40L通路在银屑病患者免疫功能紊乱中起了重要作用。

基于血脂代谢紊乱探讨益气调脂八味汤对CD40-CD40L系统的调控作用

目的:通过观察中药复方益气调脂八味汤对载脂蛋白E基因敲除(ApoE^(-/-))小鼠主动脉粥样硬化斑块病理形态和CD40-CD40L系统信号的影响,探讨益气调脂八味汤抗动脉粥样硬化的作用机制。方法:40只8周龄雄性ApoE^(-/-)小鼠予高脂饲料喂养建立实验性动脉粥样硬化小鼠模型,至第12周龄时,ApoE^(-/-)小鼠随机分为模型对照组、氯吡格雷组、中药高剂量组和低剂量组。取10只8周龄近交系C57BL/6小鼠作为正常对照组给予普通饲料喂养。各组于第24周取材检测血脂、外周血血小板表面PAC-1、CD40L表达;观察主动脉组织病理形态学改变;检测主动脉组织CD40L表达水平。结果:与模型对照组比较,中药2个剂量组小鼠血清TC、TAG和LDL-C水平均降低,HDL-C水平均升高,差异有统计学意义;与高剂量组比较,低剂量组小鼠血清TC、TAG、LDL-C和HDL-C水平比较差异均无统计学意义。中药组病变程度明显轻于模型对照组,并较氯吡格雷组轻。与模型对照组比较,中药个剂量组小鼠血清PAC-1、CD40L表达的百分比均明显降低,差异有统计学意义;与高剂量组比较,低剂量组小鼠血清PAC-1、CD40L表达百分比差异均无统计学意义。模型组动脉组织CD40L表达光密度值明显高于正常对照组;与高剂量组相比,低剂量组CD40L平均光密度值比较差异无统计学意义。结论:中药复方益气调脂八味汤能够调节血脂,调控CD40-CD40L系统的信号表达而抑制血小板活化,具有明显的抗动脉粥样硬化作用,且不存在剂量差异。

CD40-CD40L系统对主动脉粥样硬化兔血浆黏附分子水平的影响

目的探讨CD40-CD40配体系统(CD40-CD40L)对不同因素致动脉粥样硬化形成的血浆黏附分子影响。方法 40只实验兔随机分为5组,每组8只。A组(正常对照组):普通颗粒饲料喂饲;B组(高脂模型组):高脂饲料喂饲;C组(高脂模型CD40阻断组):高脂饲料喂饲同时给予抗CD40配体抗体0.5ml(250μg),腹腔注射,每周两次;D组(免疫刺激组):应用肺炎衣原体感染制备动脉硬化模型;E组(免疫刺激CD40阻断组):制备模型的同时给予抗CD40配体抗体0.5ml(250μg),腹腔注射,每周两次;实验共16周。实验结束后,检查如下指标:①ELISA法检测sCD40L、sVCAM-1、sICAM-1。斑块/内膜面积比。16周末获取标本检测分析。结果 B、C、D、E组与A组比较sCD40LsVCAM-1、sICAM-1水平升高(P<0.01)。C、E组与B、D组比较sCD40L、sVCAM-1、sICAM-1水平降低(P<0.01)。结论通过高脂饮食、免疫刺激可引起实验兔sCD40L、sVCAM-1、sICAM-1水平升高,阻断CD40-CD40L,可降低实验兔sCD40L、sVCAM-1、sICAM-1水平,从而抑制炎症反应、延缓动脉粥样硬化进展。

CD40-CD40L、IL-10与糖尿病血管病变

糖尿病是威胁全人类健康的代谢紊乱性疾病,其血管并发症是糖尿病致死、致残的主要原因.近年来认为,炎症是2型糖尿病（DM2）及其血管病变共同的发病基础.炎症因子引起的血管内皮炎症反应在糖尿病尤其是血管病变的发生、发展中具有重要作用.CD40/CD40L配体是一对互补跨膜糖蛋白,是免疫和炎症反应中重要的信号转导系统.白细胞介素-10（IL-10）在免疫反应中具有重要的炎症抑制作用.本文就sCD40L、IL-10与糖尿病及血管病变作一综述.

CD40-CD40配体共刺激通路在甲状腺相关性眼病发病中作用研究进展

甲状腺相关性眼病(thyroid-associated ophthalmopathy,TAO)是器官特异性自身免疫性疾病,其发病机制涉及T细胞对几种自身抗原的耐受丧失及以T细胞为主的免疫细胞不适当活化。T细胞活化需要识别共刺激信号,其中CD40-CD40L作为T细胞活化的共刺激信号之一,在TAO的发病机制中起重要作用。本文就CD40-CD40L分子细胞学特征、功能及近年关于其在TAO发病机制中的作用研究进展作一综述。

CD40-CD40L系统与易损斑块的破裂

易损斑块的破裂是急性心血管事件发生的罪魁祸首,CD40-CD40L系统作为免疫和炎症反应的枢纽,其贯穿急性冠脉综合症(ACS)发生发展至斑块破裂及血栓形成的全过程,阻断其信号传导途径可起到一定的预防效果,提示在临床上可作为一种新的治疗途径。

CD40-CD40L在动脉粥样硬化及急性冠状动脉综合征的研究进展

近年研究表明冠心病是免疫参与的慢性炎症反应。免疫介质CD40及其配体广泛存在于T、B淋巴细胞、内皮细胞、平滑肌细胞、单核 /巨噬细胞、血小板及上皮细胞表面 ,二者相互作用可诱导上述细胞产生许多致炎因子 ,参与动脉粥样硬化的发生、发展及转归。阻断CD40 CD40L的相互作用可以抑制动脉粥样硬化 (AS)的发生与发展 ,为防治动脉粥样硬化和急性冠状动脉综合征 (ACS)提供新的治疗手段。

CD40-CD40L功能与疾病的研究进展

CD40与CD40L的相互作用不仅在细胞免疫和 体液免疫中起作用,而且在疾病的发病机制和临床治疗中起重要作用。

老年冠心病不稳定心绞痛患者CD40-CD40L表达的意义

目的:通过对老年UA患者CD40-CD40L在不同的T细胞亚群表达和SOD和MAD测定结果进行分析研究,了解其表达的异常变化是否影响老年UA患者病情的发生发展。方法:采用免疫荧光标记和流式细胞仪技术对48例老年UA患者、50例老年SA患者及40例老年健康者(对照组)的外周血T淋巴细胞亚群表面标记物、不同T细胞亚群CD28、CD40、CO154的表达进行分析。比色法测SOD和MAD的浓度。结果:老年UA及SA患者CD4+/CD3+、CD8+/CD3+及CD4+/CD8+比值较对照组升高,具有显著性差异(P<0.05),各组间CD3+无显著性差异。老年UA组及SA组CD4+上的CD28、CD40、CD154表达较对照组显著性增高(P<0.05)。老年UA及SA组CD8+上的CD28、CD40、CD154表达较对照组显著性增高(P<0.05),但UA与SA组比较无显著性差异。老年UA组SOD和MAD测定结果与老年SA组及对照组比较SOD显著性降低,MAD显著性升高(P<0.01,P<0.05)。SA组与对照组比较SOD显著性降低(P<0.05),MAD无显著性变化(P>0.05)。结论:老年UA患者的CD40、CD40L表达增加,使与动脉硬化相关的多种细胞表达和产生相应的活性物质,促进动脉硬化的形成,加强氧化应激及炎症反应,进一步加重老年UA患者的病情。