多发性骨髓瘤患者OPN、CD44v_6的表达与病情进展的关系

背景与目的:骨桥蛋白(osteopontin,OPN)与其受体——CD44受体和整合素受体结合后,参与骨重建、骨质重吸收、血管重塑、癌细胞浸润和转移等过程。为此本研究检测了多发性骨髓瘤(multiple myeloma,MM)患者的OPN和变异的CD44受体(CD44v6)水平,以探讨其与MM病情进展的关系。方法:32例MM患者,分为A组(包括初发和复发病例)和B组(化疗后病情稳定)2组,同时收集外伤骨折或非肿瘤良性贫血患者15例作为对照。采用酶链免疫吸附试验(ELISA)分别检测了MM患者和对照组的单个核细胞及骨髓基质细胞(bone marrow mononuclear cells,BMSCs)培养上清液的OPN、CD44v6水平并进行相关分析。结果:A组(19例)患者的OPN表达水平显著高于B组(13例)和对照组患者(P<0.05)。对A组中的14例患者和B组中的10例患者进行了CD44v6水平检测,其结果A组的CD44v6表达水平显著高于B组和对照组患者(P<0.05),B组的CD44v6水平显著高于对照组(P<0.05);OPN水平与CD44v6(r=0.52,P=0.000)、恶性浆细胞数(r=0.74,P=0.000)、M蛋白水平(r=0.53,P=0.014)、血β2-MG水平(r=0.62,P=0.002)均呈正相关。结论:OPN和CD44v6水平升高与MM的发生和病情进展有关;可能与MM的肿瘤负荷、疾病阶段和肿瘤浸润有关。

子宫腺肌病内膜细胞中HAS-2和CD44的表达及雌激素对其影响

目的:探索子宫腺肌病(ADS)在位子宫内膜细胞中透明质酸合成酶(HAS)基因优势亚型和透明质酸受体CD44的表达及雌激素调节作用。方法:选择2017年10月—2018年9月在本院手术治疗的ADS患者21例为ADS组,19例无子宫内膜病变患者为对照组,qRT-PCR技术检测体外培养的子宫内膜细胞HAS各亚型(HAS1、HAS2、HAS3)和标准CD44 mRNA的表达及其对不同浓度雌激素作用的反应性。结果:ADS组子宫内膜细胞HAS2和CD44 mRNA的表达量(0.302±0.063、0.254±0.067)高于对照组(0.168±0.025、0.128±0.018)(P<0.0001),且两者在ADS组中表达呈正相关(r=0.797,P<0.0001);两组子宫内膜细胞HAS1和HAS3表达均无差异(P>0.05)。0.1、1.0、10.0 nmol/L 17β-雌二醇均能上调ADS组HAS2 mRNA表达量,与未用药0 nmol/L比较均有差异(P<0.05);对照组仅1.0 nmol/L 17β-雌二醇能显著上调HAS2 mRNA表达量,与未用药组比较有差异(P<0.05); 1.0、10.0 nmol/L 17β-雌二醇使ADS组CD44 mRNA表达量显著上调,与未用药组比较有差异(P<0.05);对照组仅10 nmol/L 17β-雌二醇可显著上调CD44 mRNA的表达量,与未用药组比较有差异(P<0.05)。结论:ADS子宫内膜细胞HAS2和CD44的表达异常增高且两者呈正相关,并受高浓度雌激素的正向调控。

Kit信号通路调控成年小鼠Cajal间质细胞的表型改变

目的 通过构建阻断Kit信号的动物模型，观察结肠壁内Cajal间质细胞（interstitial cells of cajal，ICC）数量与网络的变化，探讨调控ICC可塑性的分子机制。方法选取45只4周龄健康BALB/c小鼠，体质量18～20 g，酪氨酸激酶特异性抑制剂伊马替尼（imatinib，STI571）灌胃制作动物模型，全层铺片Kit/CD44双重荧光标记观察造模后0、8、16 d及停药8、16 d，各亚型Kit＋和CD44＋ICC数量和形态的变化，Western blot和实时定量荧光RT-PCR分别从蛋白水平和基因水平检测Kit和CD44量的变化。结果 ①以近端结肠为例，Imatinib可致结肠壁内Kit＋ICC-IM、ICC-MY数量明显减少，用药16 d其数量下降至对照组的50%左右[ICC-MY：（136.17±3.56）vs（66.74±1.47），P〈0.05]，停药后逐渐恢复正常。②ICC-SM的数量及网络在整个实验过程中没有明显变化。③用药后，Kit蛋白水平和基因水平均明显下降，停药后恢复正常。④用药后各亚型CD44＋ICC的数量及网络没有变化，且CD44在蛋白和基因水平均没有变化。结论 Kit信号通路可调节结肠ICC的可塑性。抑制Kit信号通路后，ICC并没有消失，只是丢失了其Kit表型。

透明质酸聚合物胶束的制备及其内涵体的pH敏感性

首先以脱氧胆酸(DOCA)和三苯甲基组氨酸甲酯盐酸盐(H-His(Trt)-OMe·HCl)为反应物,经催化剂缩合制得DOCA-His(Trt)中间体。然后将透明质酸(HA)经N-羟基琥珀酰亚胺(NHS)和1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺盐酸盐(EDC·HCl)活化形成活性酯。最后将活性酯接枝DOCA-His(Trt)中间体,制得HA-DOCA-His(Trt)聚合物,脱Trt保护,制得HADOCA-His聚合物。采用FT-IR鉴定HA-DOCA-His的化学结构,并评价其溶血性和pH敏感性,通过超声法制备载紫杉醇的HA-DOCA-His胶束,并以透析法考察其体外释药行为。采用MTT法考察胶束的细胞毒性。结果表明,HA-DOCA-His溶血性与聚氧乙烯蓖麻油(Cremophor EL)相当,远远低于Tween 80;载紫杉醇的HA-DCA-His胶束在模拟内涵体环境中具有触发释药行为;相比于紫杉醇溶液,HA-DOCA-His载药胶束在模拟内涵体pH环境下表现出高效抑制MCF-7肿瘤细胞的增殖作用;HA-DOCA-His胶束可作为CD44受体和内涵体pH敏感的多靶向胶束载药系统,用于难溶性抗肿瘤药物的肿瘤靶向递药和胞内靶向释药。

多发性骨髓瘤患者SDF-1α、OPN、CD44v6和TRACP-5b表达的研究

目的探讨基质细胞衍生因子-1α(SDF-1α)、骨桥蛋白(OPN)、变异的CD44受体(CD44v6)和抗酒石酸酸性磷酸酶5b(TRACP-5b)在多发性骨髓瘤(MM)发病中的作用。方法用ELISA法检测了32例MM患者和15例对照骨髓单个核细胞(MNCs)和骨髓基质细胞(BMSCs)的SDF-1α、OPN、CD44v6和TRACP-5b水平。结果 MNCs产生的SDF-1α、OPN、CD44v6水平在初发和复发组、病情稳定MM组和对照组显著下降(P<0.05)。9例初发和复发患者的BMSCs与人骨髓瘤细胞系U266加入rhIL-6混合培养后,SDF-1α水平明显增高(P<0.05)。SDF-1α、OPN、TRACP-5b水平在MM患者骨质破坏≥3处、<3处和对照组显著下降(P<0.05)。结论 SDF-1α、OPN和CD44v6水平升高与MM发病或病情进展、骨质破坏有关。

pH响应型透明质酸胶束的制备及其药物传递性能

制备透明质酸-脱氧胆酸两亲性缀合物(HAAD),用于制备胶束并包载模型抗肿瘤药物阿霉素(DOX),研究其理化性质以及体外抗肿瘤性能。通过酰胺反应制备硼酸功能化脱氧胆酸(AD),之后基于硼酸酯键制备具有pH响应性的HAAD并包载DOX,研究胶束的微观形貌、DOX的包封率、载药量和体外药物释放行为。通过癌细胞(MCF-7)和正常细胞(COS7)对其细胞毒性和细胞摄取进行评价,成功制备HAAD,其在水溶液中能自组装形成胶束并包载DOX,DOX载药量为9.15%。体外药物释放实验显示,其具有pH响应的释药行为,在酸性环境下药物释放速率较快。流式细胞分析结果显示,载药HAAD胶束能被CD44受体过表达的MCF-7细胞有效摄取,而对正常细胞的毒性远小于肿瘤细胞,表现出选择性抑制细胞生长的特性。

载多柔比星透明质酸聚合物胶束的制备及其抗肿瘤活性

通过超声法制备了载多柔比星的透明质酸-聚组氨酸聚合物(HPH)胶束。结果所得胶束呈类球形,粒径为(212.2±11.9)nm,多分散系数为0.28±0.02,?电位为(-11.91±0.66)m V,包封率为(92.09±0.88)%,载药量为(7.24±0.46)%。体外释放结果显示载药胶束具有明显的p H依赖性。胶束在酸性(p H 5.0和6.0)介质中的释药速度明显高于在中性(p H 7.4)介质中。体外细胞毒性试验表明,空白载体对表面过表达CD44受体的肿瘤细胞MCF-7和A549以及正常细胞L929均无明显毒性;但载药胶束对肿瘤细胞的存活率具有明显抑制作用,且呈浓度依赖性,而即使胶束中1浓度达到10?g/ml,L929细胞的存活率仍接近60%。细胞摄取试验表明,载药胶束在肿瘤细胞中的相对摄取量显著大于正常细胞。

基底膜糖蛋白抑制黑素瘤扩散

美国马里兰州国立牙齿和颅面研究所的Dr．Hynda K Kleinman声称，阻断CD44受体活性肽段很重要。该受体是转移细胞的主要受体，它是恶变的激活因子。Kleinman等合成了层黏连蛋白α-5链球状结构域(A5G肽)上的4个肽，这些肽可减少小鼠黑素瘤细胞在肺部的移植。