AFPmRNA和CD44V6mRNA在肝癌患者外周血中检测的临床意义

目的:建立检出原发性肝癌(PHC)患者外周血中微转移的方法,并探讨其临床意义。方法:采集PHC患者50例,40例肝良性疾病患者(10例肝血管瘤,10例肝囊肿,10例肝硬化,10例慢性肝炎),20例肝转移肿瘤患者(直肠癌肝转移10例,胃癌肝转移10例),30例健康志愿者的外周血。用RT-PCR方法检测外周血中AFP mRNA和CD44v6 mRNA的表达。结果:50例PHC患者外周血中AFP mRNA和CD44v6 mRNA检出率分别为50%(25/50)和58%(29/50)。74%(37/50)的患者至少一种标志物阳性。AFP mRNA在肝炎肝硬化患者外周血中的检出率15%(3/20),转移性肝癌、肝血管瘤、肝囊肿患者及健康献血员中均未检出。CD44v6 mRNA在转移性肝癌患者外周血中的检出率45%(9/20),肝炎肝硬化、肝血管瘤、肝囊肿患者及健康献血员中均未检出。PHC患者外周血中AFPm-RNA检出率与血清AFP水平,肿瘤大小,门静脉癌栓,肝内转移无相关性(P>0.05)。与肝外转移密切相关(P<0.05)。CD44v6 mRNA检出率与肿瘤大小,门静脉癌栓,肝内外转移密切相关(P<0.05),而与血清AFP水平无相关性(P>0.05)。结论:在PHC患者外周血中联合检测AFPmRNA和CD44v6 mRNA的表达,有助于提高微转移检测的灵敏度和特异性,CD44v6mRNA预测肝癌转移、复发的意义优于AFP mRNA。

CD44v6mRNA和HSP70mRNA在胃癌中的表达及研究

目的:检测CD4 4v6mRNA和HSP70mRNA在胃癌组织中的表达,探讨CD4 4v6mRNA和HSP70mRNA在胃癌发生发展中的作用。方法:利用核酸原位杂交技术对39例胃癌组织进行检测。结果:CD4 4v6mRNA和HSP70mRNA在胃癌组织表达的阳性率都为6 1.5 4% (2 4 / 39) ,CD4 4v6mRNA和HSP70mRNA在高分化管状腺癌与低分化管状腺癌中的表达都有显著性差异(P <0 .0 5 ) ,但HSP70mRNA在胃癌组织的表达与性别、年龄、浸润深度及淋巴结有无转移都无关(P >0 .0 5 ) ,而CD4 4v6mRNA与淋巴结有无转移有关(P <0 .0 5 )。结论:CD4 4v6mRNA和HSP70mRNA在胃癌组织都有较高的表达,两者均可作为评估胃癌预后的指标。

非小细胞肺癌患者外周血CD_(44)V_6mRNA表达与微转移的相关性研究

目的探讨CD_(44)V_6mRNA表达与非小细胞肺癌(NSCLC)外周血微转移的关系及临床意义,及其与CK19 mRNA在外周血中联合检测的临床意义。方法应用免疫组化SP法检测56例NSCLC癌组织中CD_(44)V_6mRNA的表达情况,应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术检测外周血中CD_(44)V_6mRNA与CK19 mRNA的表达情况。采集20例肺部良性病变患者正常肺组织和外周血作对照。结果 CD_(44)V_6mRNA在NSCLC癌组织中表达明显高于良性病变正常肺组织(P﹤0.001),其阳性表达率在各病理分期间、有无淋巴结转移组间的差异具有统计学意义(P﹤0.05),而在各病理类型间差异无统计学意义(P﹥0.05)。NSCLC患者外周血中CD_(44)V_6mRNA阳性表达率高于对照组(P﹤0.05),其阳性表达率在各病理分期间、有无淋巴结转移间的差异具有统计学意义(P﹤0.05)。CD_(44)V_6mRNA在NSCLC组织中表达与外周血中表达呈正相关,NSCLC外周血中CD_(44)V_6mRNA与CK19mRNA表达呈正相关;CD_(44)V_6mRNA与CK19 mRNA联合检测灵敏度为75.0%,优于单基因检测(P﹤0.05)。结论NSCLC外周血中CD_(44)V_6mRNA的高表达与其侵袭转移有关,CD_(44)V_6mRNA可作为检测NSCLC外周血微转移的分子肿瘤标志物,并有望成为判定NSCLC预后的分子标志物;CD_(44)V_6mRNA与CK19 mRNA联合检测可提高NSCLC血行微转移诊断的敏感度。

肝细胞癌组织中CD_(15) mRNA与CD44v6 mRNA的表达

目的 :研究CD15mRNA表达与肝细胞癌 (HCC)侵袭转移和预后的关系 ,以及与CD44v6mRNA表达的相关性。方法 :应用原位杂交和免疫组织化学方法 ,检测分析HCC组织中CD15mRNA及其蛋白和CD44v6mRNA的表达情况。结果 :99例HCC中 ,CD15mRNA及其蛋白和CD44v6阳性率表达分别为 38.4%、36 .4%和41.4%。CD15mRNA表达与其蛋白表达一致 ,与CD44v6mRNA表达关联性密切。CD15mRNA及其蛋白和CD44v6mRNA表达 ,均与HCC侵袭转移倾向和病人预后相关。结论

肺癌组织中CD44v6和nm23H1的mRNA表达及临床意义

目的：探讨ＣＤ４４ｖ６和ｎｍ２３Ｈ１的ｍＲＮＡ表达与肺癌 临床意义及其相关性。方法：应用原位杂交ＣＳＡ方法，检测６５例肺癌组织ＣＤ４４ｖ６和ｎｍ２３Ｈ１的ｍ ＲＮＡ表达，结合临床病理指标及随访病例进行研究分析。结果：在肺癌中ＣＤ４４ｖ６和ｎｍ２３Ｈ１的ｍ ＲＮＡ表达阳性率分别为６６．２％和４９．２％。ＣＤ４４ｖ６ｍＲＮＡ高表达和ｎｍ２３Ｈ１ｍＲＮＡ低表达均与肺癌ＰＴＮ Ｍ分期、病理分级和淋巴结转移呈正相关，患者＞５年存活率越低。肺癌ＣＤ４４ｖ６ｍＲＮＡ表达与ｎｍ ２３Ｈ１ ｍＲＮＡ表达呈负相关。结论：肺癌中ＣＤ４４ｖ６ｍＲＮＡ表达与ｎｍ２３Ｈ１ｍＲＮＡ表达具有负调节的协同作用 ，均可作为预测肺癌转移和评估预后的重要生物学指标。

原位逆转录PCR间接法检测人大肠癌组织和细胞株中CD44V6 mRNA的应用研究

目的探讨用原位逆转录ＰＣＲ间接法检测人类大肠癌组织及大肠癌细胞株内ＣＤ４４Ｖ６ｍＲＮＡ的表达。方法在大肠癌组织冰冻切片及ＨＴ２９和ＬｏＶｏ大肠癌细胞爬片上，先作蛋白酶Ｋ及ＤＮａｓｅ消化处理，再行逆转录、原位ＰＣＲ扩增和扩增后原位杂交检测，分析扩增产物与Ｖ６探针结合显色情况。结果ＬｏＶｏ细胞较ＨＴ２９细胞显色快而着色深，大肠癌癌灶较癌旁组织及远端正常大肠粘膜组织显色速度及强度均有显著性差异；反应液内有特异的ｃＤＮＡ扩增产物渗出；自制的原位ＰＣＲ模具性能稳定，封闭和防渗漏效果好。结论用原位逆转录ＰＣＲ间接法检测大肠癌组织及大肠癌细胞株内ＣＤ４４Ｖ６ｍＲＮＡ的表达，特异性强，定位性好，显色效果达到了光镜下分析的要求；反应液内的扩增产物还可作Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交及基因分析；自制的原位ＰＣＲ模具经济、方便。