SLE患者CD45RA^＋和CD45RO^＋T细胞亚群的变化

利用流式细胞术及免疫双荧光染色法，检测３５例系统性红斑狼疮（ＳＬＥ）患者外周血ＣＤ４５ＲＡ￣＋和ＣＤ４５ＲＯ￣＋Ｔ细胞亚群。结果表明，ＳＬＥ患者ＣＤ４￣＋细胞降低，ＣＤ８￣＋细胞增高，ＣＤ４￣＋／ＣＤ８￣＋降低；ＣＤ４￣＋ＣＤ４５ＲＡ￣＋细胞在病情活动期降低，在稳定期回升；ＣＤ４￣＋ＣＤ４５ＲＯ￣＋细胞则在活动期有增高倾向，在稳定期下降；ＣＤ８￣＋ＣＤ４５ＲＡ￣＋及ＣＤ８￣＋ＣＤ４５ＲＯ￣＋细胞均在活动期增高，又均在稳定期降至正常水平。提示ＣＤ４５ＲＡ￣＋和ＣＤ４５ＲＯ￣＋Ｔ细胞在ＳＬＥ发病机理中可能占有重要意义。

腔镜手术对直肠癌患者免疫平衡及CD_4^+CD_(45)RA^+T和CD_4^+CD_(45)RO^+T细胞的影响

目的探讨腔镜手术对直肠癌患者免疫平衡及CD4+CD45RA+T细胞和CD4+CD45RO+T细胞表达的影响。方法67例直肠癌患者中,33例拟进行腹腔镜手术,设为L组,34例拟进行开腹手术,设为O组。观察术前1 d、术后2 d、术后7 d患者Th1、Th2、CD4+CD45RA+T、CD4+CD45RO+T细胞表达水平。结果 L组患者术前和术后Th1、Th2、CD4+CD45RA+T、CD4+CD45RO+T细胞表达无显著差异(P>0.05)。O组术后2 d、术后7 d患者Th1细胞表达水平显著下降(P<0.01),Th2细胞表达显著升高(P<0.01);CD4+CD45RA+T细胞的表达显著升高(P<0.01),CD4+CD45RO+T细胞的表达显著降低(P<0.05)。结论腹腔镜手术较开腹手术对直肠癌患者的免疫平衡、CD4+CD45RA+T细胞和CD4+CD45RO+T细胞表达的影响小,对机体细胞免疫功能干扰较轻。

慢性乙型肝炎患者外周血CD45RA^+、CD45RO^+ T淋巴细胞亚群的特点及临床意义

目的:探讨慢性乙型肝炎患者外周血CD4+CD45RA+、CD4+CD45RO+、CD8+CD45RA+和CD8+CD45RO+T淋巴细胞亚群的特点及其与肝病病情的关系。方法:采集46例轻中度慢性乙型肝炎患者、58例重度慢性乙型肝炎患者和30例健康人的外周抗凝血,应用流式细胞技术三色荧光分析法对其外周血中CD4+CD45RA+、CD4+CD45RO+、CD8+CD45RA+和CD8+CD45RO+T淋巴细胞亚群进行检测。结果:轻中、重度慢性乙型肝炎患者与正常人相比,其外周血中CD4+、CD8+T细胞均无明显改变;CD8+CD45RA+T细胞均明显降低,CD8+CD45RO+T细胞均明显增高,而CD4+CD45RA+、CD4+CD45RO+T细胞均无明显改变;重度慢性乙型肝炎患者与轻中度慢性乙型肝炎患者相比,CD8+CD45RA+T细胞明显降低(P<0.05),CD8+CD45RO+T细胞明显升高(P<0.05)。结论:乙型肝炎慢性化过程中,CD8+CD45RO+T细胞起重要作用且与慢性乙型肝炎患者病情的进展呈正相关;检测CD4+CD45RA+、CD4+CD45RO+、CD8+CD45RA+和CD8+CD45RO+T淋巴细胞亚群比检测CD4+和CD8+T细胞亚群更能正确、充分、全面地了解慢性乙型肝炎的发病机制和预后,从而有效地指导临床治疗。

帕金森病患者血清RANTES水平及外周血CD4^+CD45RO^+T淋巴细胞比例测定及意义

目的检测帕金森病(PD)患者血清RANTES水平及外周血CD4+CD45RO+T淋巴细胞比例,探讨其变化原因、相关影响因素及其在PD免疫异常发病机制中的作用。方法采用生物素双抗体夹心酶联免疫吸附法对43例PD患者(PD组)、33例健康人(正常对照组)血清调节活化正常T细胞表达与分泌的趋化因子(RANTES)水平进行检测,同时采用流式细胞术检测外周血CD4+CD45RO+T淋巴细胞比例。采用PD统一评分量表(UPDRSⅢ)对PD患者进行病情评估。依据性别、年龄、病程、治疗状况对PD患者进行分组比较。结果与对照组比较,PD组血清RANTES水平、外周血CD4+CD45RO+T淋巴细胞比例均明显升高(P均<0.01),PD组血清RANTES水平与外周血CD4+CD45RO+T淋巴细胞比例呈正相关(r=0.53,P<0.01),与UPDRS评分亦呈正相关(r=0.74,P<0.001)。依据性别、年龄、病程、治疗状况对PD患者分组比较,各组间均无统计学差异(P均>0.05)。结论与正常对照比较,PD患者血清RANTES水平及外周血CD4+CD45RO+T淋巴细胞比例均明显增高,2者显著正相关。血清RANTES水平与PD患者UPDRS评分正相关。提示活化小胶质细胞及CD4+T淋巴细胞介导的特异性免疫反应在PD的发病、进展过程中起重要作用。

再生障碍性贫血CD4^+/CD8^+T亚群的CD45RA^+/RO^+表达与中医辨证分型的相关性研究

目的:研究再生障碍性贫血(Aplastic Anemia,AA)患者外周血淋巴细胞表面抗原CD45RA+/RO+的表达,探讨CD45RA+/RO+与辨证分型的关系。方法:采用流式细胞技术,对AA患者34例,健康对照人群34名外周血淋巴细胞的CD45RA+/RO+及相关免疫学指标进行检测,同时对AA患者进行辨证分型,从免疫学角度讨论CD45RA+/RO+的表达与中医证型的关系。结果:(1)与健康对照相比,CD45RA+绝对值在肾阴虚组中明显下降(P<0.01);与肾阳虚组相比,肾阴虚组中明显下降(P<0.01);与肾阴虚组相比,肾阴阳两虚组中明显上升(P<0.05)。(2)与健康对照相比,CD8+CD45RO+(%)在AA辨证分型各组中显著上升(P<0.05)。结论:(1)CD8+CD45RO+(%)表达显著增高,印证了AA患者体内T细胞异常活化后转化为记忆T细胞的数量增多,进而导致骨髓衰竭的免疫学发病机制,说明中医辨证分型确有其客观物质基础,同时反映出辨证分型与AA免疫学发病机制的内在联系。(2)CD45RA+绝对值在辨证分型中变化显著,可作为AA中医证型的一个客观指标,并值得对其进行深入研究。

补肾益气扶正汤联合化疗对肾癌根治性切除术后外周血CD4^+CD45RA^+和CD4^+CD45RO^+T细胞的影响

目的观察补肾益气扶正汤联合化疗对肾癌根治性切除术后外周血CD4^+CD45RA^+和CD4^+CD45RO^+T细胞及不良反应发生情况的影响。方法将146例肾癌根治性切除术后患者随机分为2组,对照组73例给予化疗治疗,研究组73例给予补肾益气扶正汤联合化疗治疗,2组均持续治疗3个化疗疗程。记录2组治疗前后中医症状积分及KPS评分,检测2组治疗前后外周血CD4^+CD45RA^+和CD4^+CD45RO^+T细胞水平,统计2组治疗后临床疗效及治疗期间不良反应发生情况。结果治疗后,2组中医症状积分均较治疗前显著降低(P均<0.05),且研究组显著低于对照组(P<0.05);研究组临床治疗总有效率显著高于对照组(P<0.05);2组CD4^+CD45RA^+T细胞均较治疗前显著降低(P均<0.05)、CD4^+CD45RO^+T细胞均较治疗前显著升高(P均<0.05),且研究组CD4^+CD45RA^+T细胞均显著低于对照组(P均<0.05)、CD4^+CD45RO^+T细胞均显著高于对照组(P均<0.05);2组KPS评分均较治疗前显著升高(P均<0.05),且研究组显著高于对照组(P<0.05)。治疗期间,研究组消化道反应、感冒样症状、神经系统症状以及白细胞降低发生率均显著低于对照组(P均<0.05)。结论补肾益气扶正汤联合化疗可明显减轻肾癌根治性切除术后患者症状体征,调节外周血CD4^+CD45RA^+和CD4^+CD45RO^+T细胞水平,减少不良反应,且疗效更好。

桥本氏甲状腺炎患者外周血中CD4^+CD45RO^+记忆性T细胞的表达及意义

目的:检测初诊桥本氏甲状腺炎(Hashimoto's thyroiditis,HT)患者外周血CD4^+CD45RO^+记忆性T细胞比例,探讨其在HT发病中的意义。方法:收集初诊的HT患者作为病例组(HT,n=53),另外选取年龄、性别相匹配的正常人作为对照组(HC,n=43),并根据甲状腺功能状态将HT组分为甲状腺功能正常组(HT-A,n=15)、亚临床甲减组(HT-B,n=14)和临床甲减组(HT-C,n=24)。流式细胞仪检测外周静脉血中CD4^+CD45RO^+记忆性T细胞比例,酶联免疫吸附法检测血清中IFN-γ、IL-17水平,化学发光法检测甲状腺功能及甲状腺特异性抗体滴度。结果:HT组外周血中CD4^+CD45RO^+记忆性T细胞比例、IFN-γ、IL-17、TPOAb与Tg Ab水平均显著高于HC组,P<0.01。双变量相关分析显示HT患者外周血CD4^+CD45RO^+记忆性T细胞的比例与IFN-γ、TPOAb、Tg Ab均呈正相关(P<0.01,P=0.015,P<0.01)。结论:CD4^+CD45RO^+记忆性T细胞在HT患者外周血中呈高表达,CD4^+CD45RO^+记忆性T细胞可能参与了HT的发病过程。

儿童免疫性血小板减少症IL-27、CD4^+CD45RA^+T及CD4^+CD45RO^+T细胞变化

目的检测免疫性血小板减少症患儿外周血细胞因子IL-27、CD4^+T细胞表面抗原CD45RA和CD45RO表达的变化,探讨其在ITP发病过程中的作用。方法新诊断ITP患儿35例,正常体检儿童35例作为对照,ELISA法检测血清IL-27水平、流式细胞术法检测外周血CD4^+T细胞CD45RA和CD45RO的表达率,采用t检验、直线相关分析进行比较。结果血清IL-27浓度ITP组(195.35±70.30)ng/L,对照组(301.25±125.40)ng/L,差异有统计学意义(P<0.01);CD4^+CD45RA+T细胞表达率ITP组(26.34±5.58)%,对照组(30.56±5.35)%;CD4^+CD45RO^+T细胞表达率ITP组(55.12±7.85)%,对照组(48.45±6.74)%,差异均有统计学意义(P<0.01);血清IL-27水平与外周血小板计数无相关性(r=0.202,P=0.575)。结论 IL-27、CD4^+CD45RA+T细胞和CD4^+CD45RO^+T细胞介导的细胞免疫异常可能参与了ITP发病。

肝硬化患者血清TNF-α和CD45RO^+粒细胞检测的意义

目的研究肝硬化失代偿期在无细菌感染和合并细菌感染时血清肿瘤坏死因子 (TNF) - α浓度和CD45 RO+ 粒细胞表达的变化及检测意义。方法 EL ISA与流式细胞术。结果肝硬化失代偿期合并细菌感染组 ,血清 TNF-α浓度和粒细胞群中 CD45 RO+ 细胞数比无细菌感染组有显著升高 ,两者之间以及两者与正常对照组之间都存在着明显差别。结论细菌感染是导致肝硬化患者血清 TNF-α浓度升高和 CD45 RO+ 粒细胞增多的主要原因 ,因此 。

CTLA_4-Ig对老年支气管哮喘病人CD_4^+CD_(45)RO^+T细胞功能的影响

目的研究老年支气管哮喘病人周围血CD4+CD45RO+T细胞表达IL-4及IL-13的情况及CTLA4-Ig对其影响。方法用ELISA方法测定老年支气管哮喘病人CD4+CD45RO+T细胞产生IL-4和IL-13的水平及CTLA4-Ig对其影响。结果老年支气管哮喘病人CD4+CD45RO+T细胞分泌IL-4、IL-13增多,IL-13增多较IL-4更为明显(P<0.01),CTLA4-Ig可有效抑制老年哮喘病人CD4+CD45RO+T细胞分泌IL-4和IL-13(P<0.01)。结论CD4+CD45RO+T细胞产生的IL-4和IL-13在老年哮喘发病中起重要作用,CTLA4-Ig可有效抑制IL-4和IL-13的分泌。

CD45RO^+T细胞和CD68^+细胞在外阴上皮内非瘤样病变和外阴癌中的侵润

目的:探讨CD45RO+T细胞和CD68+细胞在外阴上皮内非瘤样病变和外阴癌发生、发展过程中的侵润及作用。方法:免疫组化S-P法分别检测CD45RO+T细胞、CD68+细胞在各20例外阴鳞状上皮细胞增生、外阴硬化性苔藓、外阴鳞状上皮癌病变中的侵润,取10例外阴正常皮肤作对照。结果:CD45RO+T细胞和CD68+细胞在外阴正常皮肤中侵润水平极低,明显低于外阴鳞状上皮细胞增生、外阴硬化性苔藓和外阴鳞状细胞癌病变(P<0.05)。它们在外阴硬化性苔藓晚期病变中侵润明显高于早期病变(P<0.05);在中高分化外阴鳞状细胞癌组织中侵润明显高于低分化外阴鳞状细胞癌组织(P<0.05)。CD45RO+T细胞在中高分化外阴鳞状细胞癌组织中侵润最高,其次是晚期硬化性苔藓(P<0.05);CD68+细胞在中高分化外阴鳞状细胞癌和晚期硬化性苔藓病变中侵润最高,但二者之间没有统计学差异(P>0.05);它们均明显高于外阴鳞状细胞增生、低分化外阴鳞状细胞癌和早期硬化性苔藓(P<0.05),而在后三者之间侵润没有明显差异(P>0.05)。CD68+细胞和CD45RO+T细胞在外阴不同病变中侵润具有正相关性,相关系数为0.742(P<0.001),而且CD68+细胞多出现在CD45RO+T细胞的周围,且多在病变浅层。结论:CD45RO+T细胞和CD68+细胞参与皮肤的免疫反应,它们相互协同作用,在外阴上皮内非瘤样病变和外阴癌发生发展过程中发挥免疫调节作用。

AHZ和PHN患者CD4^+CD45RO^+、CD4^+CD45RA^+T细胞的表达及其意义

目的探讨急性期带状疱疹和带状疱疹后遗神经痛患者外周血CD4^+CD45RO^+、CD4^+CD45RA^+T细胞的表达及其意义。方法收集带状疱疹患者47例(其中急性期带状疱疹患者35例,带状疱疹后遗神经痛患者12例)、健康对照者20例,采用流式细胞术检测研究对象外周血中CD4^+CD45RA^+、CD4^+CD45RO^+T细胞水平并进行比较。结果急性期带状疱疹患者CD4^+CD45RA^+T细胞水平明显低于带状疱疹后遗神经痛患者及健康对照者(P<0.05);急性期带状疱疹患者CD4^+CD45RO^+/CD4^+CD45RA^+比值均明显高于带状疱疹后遗神经痛患者及健康对照者(P<0.05)。结论CD4^+CD45RA^+T细胞的减少可能与急性期带状疱疹的发病相关。

莲蓣消瘿汤对桥本甲状腺炎患者外周血中CD4^(+)CD45RO^(+)记忆性T细胞的影响

目的:观察莲蓣消瘿汤对甲状腺功能正常的桥本甲状腺炎(HT)患者外周血CD4^(+)CD45RO^(+)记忆性T细胞水平的影响。方法:将132例甲状腺功能正常的HT肝郁脾虚证患者随机分为中药组(莲蓣消瘿汤)、西药组(硒酵母)、中药联合西药组(联合组),每组44例,治疗12周,治疗前后通过化学发光免疫分析法检测血清游离三碘甲状腺原氨酸(FT3)、游离甲状腺素(FT4)、促甲状腺素(TSH)、甲状腺过氧化物酶抗体(TPO-Ab)、甲状腺球蛋白抗体(Tg Ab)浓度,酶联免疫吸附法(ELISA)测定血清白细胞介素-17(IL-17)、干扰素-γ(IFN-γ)的表达量,流式细胞技术测定CD4^(+)CD45RO^(+)记忆性T细胞在外周血单个核细胞(PBMC)中的百分比。结果:联合组、中药组、西药组患者治疗后TPO-Ab、Tg Ab低于治疗前(P<0.05),联合组、中药组患者治疗后IL-17、IFN-γ、CD4^(+)CD45RO^(+)记忆性T细胞在PBMC中百分比均低于治疗前(P<0.01);治疗后组间比较,联合组患者血清TPO-Ab、Tg Ab、IL-17、IFN-γ水平明显低于中药组、西药组(P<0.05),中药组患者血清TPO-Ab、Tg Ab、IL-17、IFN-γ水平低于西药组(P<0.05),联合组、中药组患者CD4^(+)CD45RO^(+)记忆性T细胞在PBMC中百分比均低于西药组(P<0.01),中药组患者治疗后CD4^(+)CD45RO^(+)记忆性T细胞在PBMC中百分比与联合组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:莲蓣消瘿汤能降低甲状腺功能正常的HT患者血清TPO-Ab、Tg Ab滴度及血清IL-17、IFN-γ水平,并降低CD4^(+)CD45RO^(+)记忆性T细胞在PBMC中百分比,调节机体免疫功能,改善桥本甲状腺炎。

慢性HBV感染者外周血CD45RA^+、CD45RO^+T细胞亚群的特点及意义

目的研究慢性HBV感染者外周血CD8^+CD45RA^+T、CD8^+CD45RO^+T细胞亚群的特点,探讨二者在慢性HBV感染进程中的作用。方法收集76例慢性HBV感染者,分4组,其中肝功能正常高病毒载量组8例、肝功能异常高病毒载量组26例、肝功能正常低病毒载量组26例、肝功能异常低病毒载量组16例。另收集健康对照组21例。检测各项指标,统计并分析数据。结果与健康对照组相比,慢性HBV感染者组CD8^+CD45RA^+T细胞水平较低、CD8^+CD45RO^+T细胞水平较高,差别有统计学差异(P <0. 05);与肝功能异常的慢性HBV感染者组相比,肝功能正常的慢性HBV感染者组CD8^+CD45RA^+T水平较高,CD8^+CD45RO^+T水平较低,差别均有统计学意义(P均<0. 05);高病毒载量组与低病毒载量组相比,CD8^+CD45RA^+T细胞、CD8^+CD45RO^+T细胞水平均无统计学差异(P均> 0. 05)。结论慢性HBV感染者外周血CD8^+CD45RA^+T细胞可能诱导机体对HBV免疫耐受; CD8^+CD45RO^+T细胞可能诱导机体对HBV免疫清除;慢性HBV感染者胸腺输出功能降低,可能是难以清除HBV感染的重要原因。

IL-23在体外促进肺结核患者CD4^+ CD45RO^+细胞增殖及IFN-γ的分泌

目的探讨白细胞介素23(interleukin 23,IL-23)在体外对肺结核患者CD4^+CD45RO^+细胞增殖及其分泌IFN-γ的影响。方法将40例肺结核患者和15例健康成人外周血中分离出的外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cell,PBMC),分为肺结核PBMC对照组、肺结核PBMC实验组、健康PBMC对照组、健康PBMC实验组及健康PBMC卡介苗组。加入IL-23等不同刺激因子后,在体外用流式细胞仪检测各组PBMC中的CD4^+、CD4^+CD45RO^+,及CD45RO^+细胞的百分数,用ELISA法测细胞培养上清液IFN-γ的浓度。结果肺结核PBMC实验组中CD4^+、CD4^+CD45RO^+、CD45RO^+3种细胞百分数及IFN-γ的含量分别为:8.645%、24.406%、7.721%、(156.921±152.800)pg/m L,明显高于肺结核PBMC对照组的5.530%、15.811%、5.746%、(93.421±88.728)pg/m L(P<0.05)。健康PBMC实验组中的CD4^+、CD4^+CD45RO^+、CD45RO^+3种细胞百分数及IFN-γ的含量分别为:7.551%、23.778%、11.971%、(111.000±104.771)pg/m L,高于健康PBMC对照组的4.884%、20.512%、9.615%、(38.287±30.530)pg/m L(P均>0.05);肺结核PBMC对照组的CD45RO^+细胞百分数(5.746%)明显低于健康PBMC对照组(9.615%)(P>0.05);肺结核PBMC实验组的CD45RO^+细胞百分数(7.721%)也明显低于健康PBMC实验组(11.971%)(P>0.05)。肺结核PBMC对照组的IFN-γ含量(93.421±88.728)pg/m L显著高于健康PBMC对照组(38.287±30.530)pg/m L(P<0.05)。结论体外细胞培养实验中,IL-23可以促进肺结核患者外周血中CD4^+T、CD4^+CD45RO^+、CD45RO^+细胞的增殖,且促进T淋巴细胞分泌IFN-γ,参与了对结核感染的免疫。

慢性乙型肝炎患者外周血CD45RA+,CD45RO+T淋巴细胞亚群的特点及临床意义

目的 探讨慢性乙型肝炎患者外周血CD4＋CD45RA＋，CD4＋CD45RO＋，CD8＋CD45RA＋和CD8＋CD45RO＋T淋巴细胞亚群的特点及及其与肝病病情的关系．方法 采集46例轻中度慢性乙型肝炎患者、58例重度慢性乙型肝炎患者和30例健康人的外周抗凝血，应用流式细胞技术三色荧光分析法对其外周血中CD4＋CD45RA＋，CD4＋CD45RO＋，CD8＋CD45RA＋和CD8＋CD45RO＋T淋巴细胞亚群进行检测，结果轻中、重度慢性乙型肝楚患者与正常人相比．其外周血中CD4＋，CD8＋T细胞均无明显改变；CD8＋CD45RA＋T细胞均明显降低，CD8＋CD45RO＋T细胞均明显增高，而CD4＋CD45RA＋，CD4＋CD45RO＋T细胞均无明显改变；重度慢性乙型肝炎患者与轻中度慢性乙型肝炎患者相比，CD8＋CD45RA＋T细胞明显降低（P〈0．05），CD8＋CD45RO＋T细胞明显升高（P〈0．05）．结论乙型肝炎慢性化过程中，CD8＋CD45RO＋T细胞起重要作用且与慢性乙型肝炎患者病情的进展呈正相关；检测CD4＋CD45RA＋．CD4＋CD45RO＋．CD8＋CD45RA＋和CD8＋CD45RO＋T淋巴细胞亚群比检测CD4＋和CD8＋T细胞亚群能使我们更加正确、充分、全面地了解慢性乙型肝炎的发病机制和预后，从而有效地指导临床治疗。

关于CD45RA/CD45RO分子的功能研究

CD45RA和CD45RO是白细胞共同抗原的两种异型.CD45RA+和CD45RO+T淋巴细胞在表型、功能等各方面均不同,了解其亚群的变化可能有助于了解许多疾病的发病机制、临床状态及预后.

GD患者外周血CD4^+CD28-T细胞亚群的表型特征及临床意义

检测Graves病(GD)患者外周血CD4^+CD28-T细胞水平及其表面CD45RO/CD45RA及ICOS的表达,探讨CD4^+ CD28-T细胞亚群在GD免疫致病机制中的作用。采用三色荧光抗体染色及流式细胞术检测了42例初发GD患者和30例健康者外周血中CD4^+CD28-T细胞的百分率及其表面CD45RO/CD45RA和ICOS表达水平,同时检测其甲状腺功能并进行相关性分析。结果GD患者外周血中CD4^+CD28-T细胞百分率明显高于健康对照组,并高表达ICOS分子,与FT3水平显著正相关;与健康对照组相比,GD患者CD4^+CD28^-CD45RO^+T细胞百分率也显著增高,而CD4^+CD28^-CD45RA^+T细胞呈下降趋势,FT3、FT4水平与CD4^+CD28-T细胞表面CD45RO的表达率呈正相关,而FT3水平与CD45RA表达呈负相关。结论GD患者外周血CD4^+CD28^-T细胞异常增高,表面高表达ICOS分子,具有记忆性细胞的表型特征,与甲状腺功能异常有一定的相关性,CD4^+CD28-T细胞可能是参与GD免疫病理反应的自身反应性T细胞。

CD45RON-糖基化位点对galectin-3结合CD45RO突变体转染细胞的影响

目的构建CD45RO不同N-糖基化位点突变的T细胞株,并检测其与galectin-3的结合情况。方法采用N→Q定点突变技术分别去除CD45RO的11个N-糖基化位点,制备单个N-糖基化位点缺失的CD45RO,然后将其导入慢病毒表达载体pWPXL中,11个携带单个N-糖基化位点缺失的CD45RO重组慢病毒质粒与慢病毒包装质粒psPAX2和MD2.G共转染293T细胞,将包装重组慢病毒感染CD45-的J45.01细胞,流式分选后获得11株分别表达CD45RO单个N-糖基化位点缺失的J45.01 T细胞株。通过RT-PCR和流式细胞术分别从RNA水平和蛋白水平验证CD45RO突变体的转录和表达,应用流式细胞术检测CD45RO突变细胞株与galectin-3的结合情况。结果成功构建了11个CD45RO单个N-糖基化位点缺失的T细胞株,各突变细胞株能稳定表达突变基因,经测序再次证实突变位点正确,CD45RO突变体能稳定表达于细胞表面。galectin-3与N327Q突变细胞的结合明显增强,与N36Q突变细胞和N217Q突变细胞的结合明显减弱。结论 CD45RO N-糖基化位点对galectin-3与CD45RO-J45.01细胞的结合有调节作用。