不同细胞因子组合对人脐血单个核细胞体外扩增及CD49d和CXCR4表达的影响

为了探讨不同的细胞因子组合对脐血单个核细胞体外的扩增作用及扩增后CD49d和CXCR4的变化,将新鲜脐血标本分离的单个核细胞接种于含有不同细胞因子组合的无血清无基质培养体系中培养7天,在0天,7天检测有核细胞数,CD34+细胞数及CD34+CXCR4+,CD34+CD49d+的细胞数和集落形成单位(CFU)数.根据不同细胞因子组合实验分组为:对照组;SF组(SCF+FL);SFT组(SCF+FL+TPO)和SFT6组(SCF+FL+TPO+IL-6)。结果表明,和对照组相比,SF组合仅能低水平支持脐血造血细胞扩增,加入TPO后即SCF/FL/TPO组合能有效的扩增脐血细胞,但SFT和SFT6两组之间差异却无明显发生(P>0.05);SF,SFT和SFT63组的细胞因子组合均可提高脐血CD34+细胞CD49d,CXCR4的表达,但3组之间差异无显著性(P>0.05)。结论:SF组合可协同扩增人造血细胞,但协同作用较弱;TPO在脐血造血干/祖细胞体外扩增中起重要调节作用,而IL-6作用不显著;SCF/FL/TPO3种因子组合不仅可促进脐血造血祖细胞的扩增,而且可上调脐血造血细胞CD49d,CXCR4表达。

蝎毒多肽提取物对白血病小鼠E-钙黏蛋白、CD49d和CXCR4表达的影响

目的探讨蝎毒多肽提取物(PESV)对E-钙黏蛋白、CD49d和CXCR4表达的影响,探究PESV对白血病细胞髓外浸润的影响与机制。方法NOD-SCID小鼠50只,建立人白血病NOD-SCID小鼠髓外浸润模型,随机分为5组,每组10只,分别为PESV高、中、低剂量组,模型组和空白组。PESV高、中、低剂量组小鼠分别尾静脉注射PESV1.2,0.6,0.3 mg/kg,模型组和空白组均注射0.9%的生理盐水0.3 ml,治疗28 d后,用流式细胞术检测小鼠外周血中CD49d和CXCR4的表达,35 d处死小鼠后用免疫组化法检测其肝脏中E-钙黏蛋白表达。结果治疗组CD49d和CXCR4的表达均低于模型组(P<0.01),各治疗组E-钙黏蛋白表达均高于模型组(P<0.01)。结论PESV可以有效地提高白血病小鼠E-钙黏蛋白的表达,降低CD49d和CXCR4的表达,具有较好的阻抑白血病细胞髓外浸润的作用。

慢性再生障碍性贫血患者治疗前后细胞粘附分子CD11a、CD49d表达的变化

为探讨细胞粘附分子 (CAMs)CD11a、CD4 9d在慢性再生障碍性贫血 (CAA)患者的表达及与临床的关系 ,采用碱性磷酸酶抗碱性磷酸酶法 (APAAP法 )测定 2 0例慢性再生障碍性贫血患者在SSL/C方案治疗前后骨髓及外周血单个核细胞 (MNC)粘附分子CD11a和CD4 9d表达的阳性细胞百分率。结果发现 ,慢性再生障碍性贫血患者治疗后骨髓及外周血MNC的CD11a及骨髓MNC的CD4 9d表达的阳性细胞百分率较治疗前升高 ,外周血MNC的CD4 9d表达治疗前后无显著差异。结论 :细胞粘附分子表达降低在慢性再生障碍性贫血的发病中发挥了一定作用 ,随着病情的缓解粘附分子表达增强 ,纠正再生障碍性贫血患者粘附分子的异常表达 ,可以改善其骨髓造血功能。

抗CD49d单克隆抗体与rhG CSF动员的外周血干细胞移植重建小鼠造血功能的比较研究

为比较研究抗CD49d单克隆抗体和重组人粒细胞集落刺激因子 (rhG CSF)动员的外周血干细胞对造血功能重建的影响 ,经放、化疗预处理的BALB/c小鼠分别接受经生理盐水(对照组 )、rhG CSF(实验 1组 )、抗CD49d单克隆抗体 (实验 2组 )动员的同系小鼠的外周血干细胞移植 ,观察受体小鼠的 4周存活率、外周血白细胞 (WBC)、骨髓有核细胞 (BMNC)、粒细胞巨噬细胞集落形成单位 (CFU GM)及脾集落形成单位 (CFU S)等指标。结果显示 ,实验 1、2组小鼠的 4周存活率、WBC、BMNC ,CFU GM和CFU S均明显高于对照组(P <0 0 1) ,实验 1、2组之间比较差异无显著性意义 (P >0 0 5 )。提示抗CD49d单克隆抗体或rhG CSF均能动员小鼠外周血干细胞 ,并能重建同系小鼠的造血功能。

补肾生血法对慢性再障患者表达α_5β_1/CD49e水平影响的研究

目的:探讨补肾生血法对慢性再生障碍性贫血(简称慢性再障,CAA)患者α5β1/CD49e表达水平的影响。方法:将60例慢性再障患者随机分为实验组和对照组,分别给予补髓生血颗粒和康力龙,采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测α5β1/CD49e的mRNA表达,流式细胞术(FCM)检测骨髓造血干/祖细胞α5β1/CD49e的表达水平。结果:CAA骨髓单个核细胞整合素α5β1/CD49e mRNA及骨髓造血干/祖细胞α5β1/CD49e呈低表达状态,补肾中药补髓生血颗粒能促进其表达,与有效药物康力龙比较无显著差异(P(0.05)。结论:CAA可能存在骨髓微环境功能缺陷,调节骨髓造血干/祖细胞粘附分子的表达,改善骨髓造血干/祖细胞与骨髓基质细胞/细胞外基质间的粘附功能,从而促进骨髓造血功能恢复可能是补髓生血颗粒治疗CAA的作用理之一。

CD49d在白血病中的表达及预后意义

目的探讨CD49d在各型白血病中的表达及其预后意义。方法采用流式细胞术对60例白血病患者进行免疫分型及CD49d表达检测,分析白血病患者的无病生存期与CD49d表达的相关性。结果 (1)CD49d在各型白血病中均有表达,在慢性白血病中的表达高于急性白血病,在慢性淋巴细胞白血病的表达率高于慢性粒细胞白血病,其表达率分别为100%和75%。(2)在急性粒细胞白血病(Acute myeloid leukemia,AML)各型中,AML-M4和AML-M5的表达略高于其他各型。(3)CD49d表达与提示预后不良的CD7、CD64等表达正相关。结论 CD49d的表达与白血病的分化程度有关,可能与白血病的预后关系密切。

卡维地络对心绞痛患者白细胞表面CD11b及CD49d表达的影响

目的 :研究卡维地络对心绞痛患者外周血白细胞表面 CD11b及 CD49d表达的影响。方法 :住院冠心病患者共48(男 3 7,女 11)例 ,其中稳定型心绞痛 (SAP) 2 2例 ,不稳定型心绞痛 (UAP) 2 6例 ,随机将 SAP,U AP 2组患者 ,各分为治疗组 (给予卡维地络 10 m g口服 ,2 / d,术前 7d起使用 )及对照组 (给予美托洛尔 12 .5 m g口服 ,2 / d,术前 7d起使用 ) ,分别于服药前及手术前采集股动脉血样 ,用 FCM直接免疫荧光法检测股动脉血中性粒细胞 (Neu)、单核细胞 (Mon)表面黏附分子 CD11b及 CD49d表达水平。结果 :服药前两组 CD11b及 CD49d表达均无显著差异 ,UAP患者卡维地络组与美托洛尔组 Neu与 Mon CD11b及 CD49d均高于 SAP患者组 (P <0 .0 5 ) ,服药 7d后UAP组 Neu CD11b卡维地络组明显低于美托洛尔组。结论 :不稳定心绞痛 Mon及 Neu CD11b及 CD49d表达均显著高于 SAP。卡维地络降低 Neu表面 CD11b及 CD49d表达 ,对

脓毒症患儿外周血淋巴细胞CD11a、CD54、CD49d及CD106的表达

目的探讨脓毒症患儿外周血淋巴细胞CD11a、CD54、CD106及CD49d的表达意义。方法分别于急危重期、恢复期采集脓毒症患儿外周血,用流式细胞术检测CD11a、CD54、CD106及CD49d水平。结果观察组在急危重期淋巴细胞CD11a、CD54、CD106及CD49d阳性率与对照组比较明显升高;恢复期脓毒症组外周血淋巴细胞CD54、CD49d较对照组高,CD11a、CD106与对照组比较差异无统计学意义,严重脓毒症组、脓毒症休克组CD11a、CD54、CD106及CD49d与对照组比较,差异均有统计学意义。结论脓毒症患儿外周血淋巴细胞黏附分子CD11a、CD54、CD106及CD49d在急危重期及恢复期均有升高,在脓毒症过程中发挥了一定的作用,CD11a、CD54、CD106及CD49d表达明显升高可能是病情危重的信号。

新型外周血CD34^+细胞动员剂——抗CD49d单克隆抗体的实验研究

为了探讨外周血干细胞动员的新途径 ,用抗CD4 9d单克隆抗体和rhG CSF及二者联合给小鼠皮下注射 ,动态观察小鼠外周血的白细胞总数和CD34+ 细胞数的变化 ,并将各种动员方法所获得的干细胞分别进行干细胞移植。结果发现 ,给予动员剂后小鼠的外周血白细胞总数和CD34+ 细胞比例明显升高 ,以rhG CSF和抗CD4 9d单克隆抗体联合给药效果最佳。移植后各组小鼠均获造血重建 ,以联合动员组造血恢复速度最快。结论 :抗CD4 9d单克隆抗体能有效动员小鼠外周血干细胞 ,与rhG CSF具有协同作用。

CD49d单抗加rhG-CSF动员外周血干细胞对造血重建的影响

目的探讨抗CD49d单克隆抗体穴McAb雪联用重组人粒细胞集落刺激因子穴rhG-CSF雪动员的外周血干细胞对造血重建的影响。方法经放、化疗预处理的BALB/c小鼠,分别接受经rhG-CSF(实验1组)、抗CD49dMcAb(实验2组)、抗CD49dMcAb联合rhG-CSF(实验3组)动员的同系小鼠的外周血干细胞移植,观察受体小鼠的4周存活率及外周血白细胞(WBC)、骨髓单核细胞(BMNC),粒细胞巨噬细胞集落形成单位(CFU-GM)及脾集落形成单位(CFU-S)等指标。结果实验3组小鼠的4周存活率、WBC、BMNC,CFU-GM、CFU-S数均明显高于实验1和2组,具有显著性差异(P<0.05或P<0.01)。结论抗CD49dMcAb联合rhG-CSF应用能协同动员小鼠外周血干细胞,并能成功重建同系小鼠的造血功能。

反复自发性流产患者外周血CD14~＋细胞表面CD49b和淋巴细胞活化基因3表达水平降低

目的观测黏附分子CD49b和负性调节分子淋巴细胞活化基因3(LAG-3)在反复自发性流产(RSA)患者CD14+细胞上的表达。方法收集7例正常对照者和12例RSA患者外周血5 m L,分离外周血单个核细胞(PBMC)和血浆,流式细胞术检测PBMC中CD14+细胞表面CD49b和LAG-3的表达;ELISA检测血浆中细胞因子白细胞介素10(IL-10)和转化生长因子β(TGF-β)的水平。结果 RSA患者外周血中,单核细胞的比例与正常对照组相比无显著性差异;CD14+CD49b+、CD14+LAG-3+、CD14+CD49b+LAG-3+细胞的百分比均低于正常对照组。血浆中,TGF-β的水平低于正常对照组;IL-10的水平无显著差异。结论 RSA患者外周血CD14+细胞表面CD49b和LAG-3的表达和血浆中TGF-β的水平均显著降低。

CD49a分子研究进展

CD49a是α1β1整联蛋白的α链,表达于间充质细胞、免疫细胞、内皮细胞及肿瘤细胞等细胞表面。作为黏附分子,CD49a的主要功能为介导细胞对细胞外基质的黏附。近年研究发现,CD49a也是组织驻留淋巴细胞的重要标志。除介导细胞黏附外,CD49a还可调节机体免疫应答,且与肿瘤进展密切相关。本文对CD49a在不同淋巴细胞上介导的黏附作用、组织驻留作用、对淋巴细胞功能状态的调节作用及其与肿瘤发生发展的关系进行综述。

人胎盘来源的间充质干细胞诱导CD4^+CD45RA^-CD49b^+LAG3^+Tr1细胞增殖研究

目的研究人胎盘来源的间充质干细胞(MSC)是否能诱导正常人外周血单个核细胞(PBMC)中CD4+CD45RACD49b+LAG3+Tr1细胞增殖。方法分离、纯化、表型鉴定人胎盘来源的MSC。实验分组如下:PBMC组、PBMC+MSC组、CD3+CD28+PBMC组和MSC+CD3+CD28+PBMC组。相同条件下培养24 h后,流式细胞术检测各组CD4^+CD45RA^-CD49b^+LAG3^+Tr1细胞比例;ELISA法检测各组上清中白细胞介素10(IL-10)水平,并对MSC+CD3+CD28+PBMC组中的CD4^+CD45RA^-CD49b^+LAG3^+Tr1比例和其上清中IL-10含量作相关性分析。结果MSC+CD3+CD28+PBMC组中CD4^+CD45RA^-CD49b^+LAG3^+Tr1细胞比例为(6.66±2.80)%,PBMC组为(1.01±0.44)%,PBMC+MSC组为(1.14±0.78)%,CD3+CD28+PBMC组为(4.20±2.58)%,差异有统计学意义(P<0.05)。MSC+CD3+CD28+PBMC组上清中的IL-10含量为(14.45±3.14)pg/m L,PBMC组为(0.90±0.05)pg/m L,PBMC+MSC组为(11.00±3.02)pg/m L,CD3+CD28+PBMC组为(6.04±1.90)pg/m L,差异有统计学意义(P<0.05)。MSC+CD3+CD28+PBMC组中的CD4+CD45RACD49b+LAG3+Tr1比例与其上清中IL-10含量成正相关(r=0.880,P<0.01)。结论 MSC可以诱导CD3、CD28活化的PBMC细胞中的CD4^+CD45RA^-CD49b^+LAG3^+Tr1细胞增殖,CD4^+CD45RA^-CD49b^+LAG3^+Tr1细胞比例增加与上清中IL-10水平升高有关。

宫颈癌患者癌组织中CD49f的表达量及其对免疫指标水平和不良生存结局的影响

目的分析宫颈癌患者的癌组织中CD49f的表达量及其对患者免疫指标水平和不良生存结局的影响。方法纳入宫颈癌患者(宫颈癌组)和宫颈良性疾病患者(对照组)各50例。对比两组病变组织CD49f蛋白、mRNA的表达情况以及血清免疫指标水平,分析宫颈癌患者CD49f mRNA相对表达量与血清免疫指标水平的相关性,并采用Cox回归模型分析影响患者生存结局的因素。结果宫颈癌组CD49f蛋白阳性率及mRNA相对表达量均高于对照组(均P<0.05)。与对照组比较,宫颈癌组血清CD3^+T淋巴细胞、CD4^+T淋巴细胞水平以及CD4^+/CD8^+比值降低,CD8+T淋巴细胞、自然杀伤细胞以及免疫抑制酸性蛋白(IAP)水平上升(均P<0.05)。宫颈癌患者的CD49f mRNA相对表达量与血清IAP、CD8^+T淋巴细胞、自然杀伤细胞水平呈正相关,与CD3^+T淋巴细胞和CD4^+T淋巴细胞水平均呈负相关(均P<0.05)。CD49f mRNA表达量升高是影响宫颈癌患者生存情况的危险因素之一(P<0.05)。结论宫颈癌患者宫颈癌组织中CD49f呈高表达,其或可导致宫颈癌患者血清免疫指标水平出现异常,且是患者不良生存结局的影响因素。

CD49f维持宫颈癌干细胞特性的作用研究

目的研究整合素家族蛋白成员整合素α6,即CD49f在维持宫颈癌干细胞特性中的作用。方法采用生物信息学分析肿瘤基因组图谱(The Cancer Genome Atlas,TCGA)和基因表达汇编(Gene Expression Omnibus,GEO)数据库中CD49f转录本水平在宫颈癌组织和正常宫颈组织中的表达差异。在宫颈癌细胞系HeLa,SiHa,C33A,HT-3和CaSki中,采用免疫细胞化学方法检测CD49f蛋白的表达。采用流式细胞计数仪检测和分选获得CD49f^high和CD49f^low的两群细胞并进行MTT实验检测细胞活力。检测两群细胞对化疗药顺铂和5-氟尿嘧啶的敏感性。体外肿瘤球形成实验和体外分化培养检测两群细胞的自我更新能力和分化能力的差异。结果数据库结果显示CD49f转录本水平在宫颈癌组织中的表达高于正常宫颈组织(P<0.05)。CD49f蛋白在宫颈癌5个细胞系中均有不同程度的表达且定位于细胞膜。流式细胞计数仪分选获得CD49f^high和CD49f^low的两群细胞,MTT结果显示两群细胞的体外增殖能力差异无统计学意义(P>0.05),而肿瘤干细胞特性包括较强的肿瘤球形成能力、多项分化能力和对传统化疗药物的抵抗性,在CD49f^high的宫颈癌细胞中显著高于CD49f^low的细胞群,差异有统计学意义(P<0.05)。结论CD49f在宫颈癌组织中表达增高,能够显著促进宫颈癌干细胞的自我更新能力、抑制分化和化疗药敏感性等特性,提示其可能作为宫颈癌干细胞诱发的复发转移和不良预后的生物标志物。

CD49a阳性NK细胞参与类风湿关节炎疾病进程

目的研究外周血中CD49a阳性NK细胞的功能及其在类风湿关节炎中的作用。方法流式细胞术检测健康志愿者和类风湿关节炎患者外周血NK细胞及其亚群包括CD56^(bright)NK、CD56^(dim)NK细胞群上CD49a及IFN-γ的表达;ELISA检测健康志愿者和类风湿关节炎患者血浆中IFN-γ的表达。结果与健康志愿者相比,RA患者外周血NK细胞及其2个亚群上CD49a的表达均显著升高。在RA患者血浆、外周血NK细胞及其亚群上IFN-γ的表达显著升高;同时CD49a与IFN-γ双阳性的NK细胞比例增加,且CD49a阳性NK细胞较CD49a阴性NK细胞表达更高水平的IFN-γ。结论CD49a阳性NK细胞参与类风湿关节炎疾病进程。

CD49f剪接异构体在不同细胞系中的表达

目的比较CD49f选择性剪接异构体在人不同来源干细胞以及结肠癌细胞系中的表达,并构建特定异构体过表达载体用于功能研究。方法 RT-PCR及real-time PCR检测CD49f选择性剪接异构体在不同细胞中的表达;分子克隆方法构建各异构体的慢病毒过表达载体;流式细胞计量术、Western blot及real-time PCR检测CD49f各异构体的过表达;Transwell方法检测细胞侵袭能力的改变。结果人胚胎干细胞系H9中表达CD49f异构体B,而上皮类细胞仅表达异构体A;间质细胞中二者均有表达,但异构体A表达多于异构体B;检测的4个结肠癌细胞系中CD49f异构体A和B均有表达,其中HT29和HCT116中以异构体A为主,而HCT8和LoVo中异构体B的表达更为明显。构建的慢病毒表达载体可使HT29中CD49f异构体A和B获得特异性过表达,其中异构体B的过表达使HT29的侵袭能力增加。结论不同类型细胞中CD49f选择性剪接异构体A和B的表达存在显著差异,二者的生物学功能具有差别。

CD49d在白血病患者诊断中的应用

目的:观察探讨CD49d在白血病患者诊断中的应用,总结其临床意义。方法:选取40例白血病患者,分别对免疫分型和采用流式细胞术CD49d的表达进行检测,观察分析其检测结果。结果:CD49d在各类型白血病患者中皆有分布,以AML-M4型和CLL型分布率最高,皆为100%,高于其它类型的表达,差异显著(P<0.05);CD49d阳性的患者与阴性患者的中位无病生存期(DFS)比较无显著性差异(P>0.05);CD49d阳性率与CR率间存在明显的相关性(P<0.05)。结论:CD49d与白血病的分化程度有一定的相关性,在白细胞患者诊断中对CD49d的表达进行检测,对预测其预后具有重要的临床意义。