宫颈癌患者癌组织中CD49f的表达量及其对免疫指标水平和不良生存结局的影响

目的分析宫颈癌患者的癌组织中CD49f的表达量及其对患者免疫指标水平和不良生存结局的影响。方法纳入宫颈癌患者(宫颈癌组)和宫颈良性疾病患者(对照组)各50例。对比两组病变组织CD49f蛋白、mRNA的表达情况以及血清免疫指标水平,分析宫颈癌患者CD49f mRNA相对表达量与血清免疫指标水平的相关性,并采用Cox回归模型分析影响患者生存结局的因素。结果宫颈癌组CD49f蛋白阳性率及mRNA相对表达量均高于对照组(均P<0.05)。与对照组比较,宫颈癌组血清CD3^+T淋巴细胞、CD4^+T淋巴细胞水平以及CD4^+/CD8^+比值降低,CD8+T淋巴细胞、自然杀伤细胞以及免疫抑制酸性蛋白(IAP)水平上升(均P<0.05)。宫颈癌患者的CD49f mRNA相对表达量与血清IAP、CD8^+T淋巴细胞、自然杀伤细胞水平呈正相关,与CD3^+T淋巴细胞和CD4^+T淋巴细胞水平均呈负相关(均P<0.05)。CD49f mRNA表达量升高是影响宫颈癌患者生存情况的危险因素之一(P<0.05)。结论宫颈癌患者宫颈癌组织中CD49f呈高表达,其或可导致宫颈癌患者血清免疫指标水平出现异常,且是患者不良生存结局的影响因素。

CD49f维持宫颈癌干细胞特性的作用研究

目的研究整合素家族蛋白成员整合素α6,即CD49f在维持宫颈癌干细胞特性中的作用。方法采用生物信息学分析肿瘤基因组图谱(The Cancer Genome Atlas,TCGA)和基因表达汇编(Gene Expression Omnibus,GEO)数据库中CD49f转录本水平在宫颈癌组织和正常宫颈组织中的表达差异。在宫颈癌细胞系HeLa,SiHa,C33A,HT-3和CaSki中,采用免疫细胞化学方法检测CD49f蛋白的表达。采用流式细胞计数仪检测和分选获得CD49f^high和CD49f^low的两群细胞并进行MTT实验检测细胞活力。检测两群细胞对化疗药顺铂和5-氟尿嘧啶的敏感性。体外肿瘤球形成实验和体外分化培养检测两群细胞的自我更新能力和分化能力的差异。结果数据库结果显示CD49f转录本水平在宫颈癌组织中的表达高于正常宫颈组织(P<0.05)。CD49f蛋白在宫颈癌5个细胞系中均有不同程度的表达且定位于细胞膜。流式细胞计数仪分选获得CD49f^high和CD49f^low的两群细胞,MTT结果显示两群细胞的体外增殖能力差异无统计学意义(P>0.05),而肿瘤干细胞特性包括较强的肿瘤球形成能力、多项分化能力和对传统化疗药物的抵抗性,在CD49f^high的宫颈癌细胞中显著高于CD49f^low的细胞群,差异有统计学意义(P<0.05)。结论CD49f在宫颈癌组织中表达增高,能够显著促进宫颈癌干细胞的自我更新能力、抑制分化和化疗药敏感性等特性,提示其可能作为宫颈癌干细胞诱发的复发转移和不良预后的生物标志物。

CD49f剪接异构体在不同细胞系中的表达

目的比较CD49f选择性剪接异构体在人不同来源干细胞以及结肠癌细胞系中的表达,并构建特定异构体过表达载体用于功能研究。方法 RT-PCR及real-time PCR检测CD49f选择性剪接异构体在不同细胞中的表达;分子克隆方法构建各异构体的慢病毒过表达载体;流式细胞计量术、Western blot及real-time PCR检测CD49f各异构体的过表达;Transwell方法检测细胞侵袭能力的改变。结果人胚胎干细胞系H9中表达CD49f异构体B,而上皮类细胞仅表达异构体A;间质细胞中二者均有表达,但异构体A表达多于异构体B;检测的4个结肠癌细胞系中CD49f异构体A和B均有表达,其中HT29和HCT116中以异构体A为主,而HCT8和LoVo中异构体B的表达更为明显。构建的慢病毒表达载体可使HT29中CD49f异构体A和B获得特异性过表达,其中异构体B的过表达使HT29的侵袭能力增加。结论不同类型细胞中CD49f选择性剪接异构体A和B的表达存在显著差异,二者的生物学功能具有差别。

CD29和CD49f对乳腺肿瘤干细胞转移的影响

目的探讨CD29和CD49f对乳腺癌中肿瘤干细胞转移的影响。方法用流式分选技术分离CD24/CD29/CD49f亚群细胞。以伤口愈合、肿瘤细胞侵袭实验检测各标志物对肿瘤干细胞体外迁移分化的影响。以实时定量反转录聚合酶链反应（RT-qPCR）和免疫荧检测在裸鼠瘤分离得到的肿瘤细胞上的标志物。结果CD29和CD49f在癌症转移中具有重要作用，且两个蛋白的功能具有互补的特点。CD24^＋/CD29^＋双阳性细胞表达大量的间质型肿瘤细胞标志。CD24^-/CD29^-双阴性细胞则表达大量的上皮型肿瘤细胞标志。结论CD29和CD49f可能依赖于基质信号通路调节肿瘤干细胞间的基质连接并因此增强了肿瘤干细胞存活、分化和转移的能力。

补髓生血颗粒对慢性再生障碍性贫血患者骨髓单个核细胞粘附分子VLA-6/CD_(49f)水平影响的研究

目的:探讨补髓生血颗粒对慢性再生障碍性贫血(简称慢性再障,ChronicAplasticAnemiaCAA)患者的整合素VLA亚家族粘附分子VLA-6/CD49f表达水平的影响。方法:将45例慢性再障患者随机分为补髓生血颗粒组(试验组)和再障生血片组(对照组),采用流式细胞术(FCM)检测试验组和对照组慢性再障患者治疗前后骨髓单个核细胞相关整合素VLA亚家族粘附分子VLA-6/CD49f的抗原表达水平并进行比较分析,并与10例正常人进行比较。结果:CAA患者骨髓单个核细胞粘附分子VLA-6/CD49f处于低表达状态,疗后表达水平升高,且补髓生血颗粒对VLA-6/CD49f表达的调整程度优于再障生血片组,且肾阳虚与肾阴虚患者疗后VLA-5/CD49f表达有显著差异。结论:慢性再障患者骨髓单个核细胞粘附分子VLA-6/CD49f表达水平异常,它可能参与了CAA的造血调控,补髓生血颗粒可以通过调节骨髓细胞粘附分子表达水平来改善CAA的骨髓造血功能,是治疗CAA的有效药物。

来源于乳腺癌正常组织乳腺干细胞的安全性

背景:乳腺干细胞的培养对研究乳腺的发育及乳腺癌具有重要的意义。目的:找到一种易操作的体外分离培养乳腺干细胞的方法,并验证其安全性。方法:分离培养乳腺癌旁正常组织中乳腺上皮细胞,流式细胞仪分选CD49f和EPCAM阳性细胞进行干细胞表面标记分析及细胞集落形成能力分析,然后在乳腺干细胞、乳腺癌组织和乳腺癌旁正常组织中提取mR NA,实时荧光定量PCR检测C-erbB-2和Maspin基因的表达。结果与结论:(1)成功培养出人乳腺干细胞,并且细胞表面特异性标志物CD49f,EPCAM高表达;(2)集落形成能力分析可见混合集落、腔上皮细胞集落、肌上皮细胞集落;(3)乳腺干细胞C-erbB-2低表达,而Maspin高表达,证明来源于乳腺癌正常组织的乳腺干细胞具有生物安全性。