小鼠心源性CD51阳性细胞的分离与鉴定

【目的】探讨整合素蛋白αv(CD51)阳性细胞在小鼠正常心脏组织中的分布情况并鉴定其是否存在心肌干细胞相关特性。【方法】通过免疫荧光染色,RT-PCR,Q-PCR等方法,观察CD51+细胞在C57小鼠心脏中的表达及分布情况;应用流式细胞仪进一步检测心脏中CD51的表达比例,并分选出CD51阳性细胞进行体外培养;利用CCK-8实验检测细胞增殖能力;细胞稳定传代后进行成骨、成脂诱导,检测其多向分化能力。【结果】实验结果显示小鼠心脏中存在CD51+细胞,随年龄增大其表达水平呈下降趋势;在出生7d C57小鼠心脏组织中可观察到CD51+细胞广泛分布于心房、心室;流式细胞仪分选出生7 d C57小鼠心脏组织中阳性细胞结果显示阳性率约4%左右;诱导结果显示该细胞可以分化形成骨及脂肪组织,进一步证明其存在多向分化能力。【结论】小鼠心肌组织中CD51+细胞是具有干细胞性的细胞亚群,可能为心脏来源的MSC样干细胞。

CD51阳性心肌细胞对心肌梗死后小鼠心功能改善的作用

目的探讨CD51阳性(CD51+)的心肌细胞移植治疗AMI后心脏结构及功能变化。方法取C57小鼠14只随机分为对照组(n=7)和细胞移植组(n=7),结扎冠状动脉左前降支制成心肌梗死模型。细胞移植组心肌梗死后立即于心肌梗死部位注射转染红色荧光蛋白的CD51+心肌细胞(RFP-CD51),对照组注射生理盐水。移植后1周及1个月分别用小动物心脏彩色多普勒超声(彩超)仪检测心功能指标的变化及组织形态改变,并且在移植后1个月时观察RFP-CD51细胞是否分化为成熟心肌细胞。结果细胞移植组的小鼠在1周及1个月时的心脏彩超均显示LVEF、左心室缩短分数(LVFS)均显著高于对照组(P<0.01),左心室收缩末容积(LVESV)小于对照组(P<0.05),而左心室舒张末容积(LVEDV)则无显著差异(P>0.05)。在心肌梗死3周后发现移植的CD51+细胞分化为成熟心肌细胞。结论 AMI后的CD51+心肌细胞移植可分化为成熟心肌细胞、改善心功能、防止心脏重构、减轻心腔扩大。

体外诱导小鼠心脏CD51^+细胞分化为血管内皮细胞的研究

目的探讨小鼠心脏CD51^+细胞的分离培养及体外定向诱导分化为血管内皮细胞的可行性,为其治疗心脏血管内皮损伤提供理论依据。方法取出日龄为7 d的C57 BL/6乳鼠心脏,用流式分选法分选原代细胞、悬浮培养法培养及纯化心脏CD51^+细胞。用内皮生长培养基(EGM-2)对纯化和扩增后的CD51^+细胞进行体外诱导内皮分化20 d。诱导后观察细胞形态变化;实时荧光定量PCR分析内皮相关基因CD31、CD34、v WF、VEGFR-2及VE-Cadherin的mRNA表达;细胞免疫荧光技术、流式表型分析术检测内皮相关标志CD31、VEGFR-2及v WF的表达;测定细胞一氧化氮(NO)含量、行体外血管形成实验以鉴定其功能。结果诱导内皮分化后细胞变为短梭形,呈铺路石样排列生长;荧光定量PCR结果显示诱导后细胞CD31、CD34、v WF、VEGFR-2、VE-Cadherin的mRNA相对表达量较诱导前增加(t值分别为24.529、6.383、25.872、5.256、5.255,P均<0.05);细胞免疫荧光染色及流式表型分析结果均显示诱导后细胞表达CD31、VEGFR-2及v WF;诱导后细胞NO含量较诱导前增加(t=9.549,P=0.011)并具有体外形成管腔样结构的能力。结论心脏CD51^+细胞具有在体外定向诱导分化为血管内皮细胞的能力。

CD51^+内皮微泡是高血压伴肥胖患者的内皮细胞损伤标记之一

本刊编委,北京协和医学院、中国医学科学院微循环研究所、卫生部微循环重点实验室仉红刚教授（通讯作者）课题组在《Endocrine》（2015,49（1）：283-285,IF：3.878）发表了题为＂CD51＋endothelial microparticles as a biomarker of endothelial dysfunction in obese patients with hypertension＂的研究论文,主要内容如下：

西湖牌51CD5A(5B)和47CD9型彩电故障维修九例

[例1] 故障现象 一按电源总开关后,听见机内“嗞嗞”一声,然后变“三无”。 分析与检修 开机后能听见“嗞”声,说明机内自动保护电路在起作用。此时测主电源输出电压为零。估计是电源输出负载电路有短路性故障,而开关振荡电路工作应该是正常的。在电源输出电路中,最常见的短路故障有:(1)行输出变压器内部短路;(2)行管击穿短路;(3)逆程电容击穿短路;(4)114伏稳压二极管击穿短路等。 最常用的检修方法:将行管从电路中脱开(脱开L604或L406也行),接一个60W灯泡作电源假负载,开机试之,结果故障依旧,说明故障不在行输出电路。然后将VD806拆下,一测量发现它已击穿短路。经更换一只新管子SR2M后,故障排除。在该机型电源电路中,VD806击穿的故障率较高。(参照下例图1)