高纯度CD3^-CD56^+CD16^+NK细胞体外扩增技术的研究

本研究探索高纯度CD3-CD56+CD16+NK细胞体外扩增技术。应用免疫磁珠分选法(MACS)分离出高纯度的CD3-CD56+CD16+NK细胞,置于含10%人AB血清的造血干细胞培养基(SCGM)中,加入细胞因子IL-2、IL-15、SCF组成不同培养体系进行体外扩增。采用细胞计数法、流式细胞术免疫表型分析和CCK-8试剂盒检测对K562细胞的杀伤率等方法比较不同培养体系对NK细胞增殖前后的数量、纯度及杀伤活性的影响;并采取相同方法对IL-2的浓度与NK细胞增殖效率及杀伤活性之间的关系进行探讨。结果发现,经免疫磁珠分选法所得的高纯度CD3-CD56+CD16+NK细胞扩增18天后,IL-2/IL-15/SCF组扩增倍数显著高于其他组(p<0.05);含细胞因子组的NK细胞对K562细胞的杀伤活性显著提高,尤其是IL-2/IL-15组和IL-2/IL-15/SCF组在效靶比10∶1时杀伤活性均高达90%以上。低、中、高浓度IL-2组扩增倍数之间比较差异无显著性(p>0.05),而在对K562细胞杀伤率的比较上,高浓度组明显高于低、中浓度组(p<0.05)。结论:在10%人AB血清的SCGM中加入IL-2/SCF/IL-15细胞因子组合,可使经MACS纯化的NK细胞在体外高效地活化及增殖;本培养体系中IL-2浓度较低(<1 000U/ml)时,NK细胞的扩增效率及对K562细胞的杀伤率与IL-2的浓度高低无相关性;而高浓度的IL-2(≥1 000U/ml)可进一步激活纯化后NK细胞的体外杀伤活性。

CD_3^+CD_(56)^+NKT细胞及CD_3^-CD_(56)^+NK细胞在恶性肿瘤患者的临床意义研究

背景与目的细胞毒性淋巴细胞在抗肿瘤免疫效应中发挥着重要作用,CD3+CD56+NKT细胞作为一类新的具有细胞毒性的效应细胞,目前关于其抗肿瘤意义的探讨主要集中于血液系统恶性疾病,而在实体肿瘤中的应用和临床价值研究尚少。本研究旨在初步探讨抗肿瘤细胞CD3+CD56+NKT细胞及CD3-CD56+NK细胞在恶性肿瘤患者外周血的表达状态及其临床意义。方法采用流式细胞术分析118例恶性肿瘤患者(55例肺癌患者和63例乳腺癌患者)及46例健康对照组外周血中的T细胞亚群及CD3+CD56+NKT细胞、CD3-CD56+NK细胞表达。结果恶性肿瘤患者组CD3+CD8+T细胞、CD3+CD56+NKT细胞以及CD3-CD56+NK细胞表达率均明显高于健康对照组(P<0.01)。肺癌患者中以CD3+CD8+T细胞和CD3+CD56+NKT细胞明显增加为主;乳腺癌患者中以CD3+CD56+NKT细胞和CD3-CD56+NK细胞明显增加为主。结论CD3+CD56+NKT细胞在肺癌和乳腺癌患者的抗肿瘤效应中占据重要地位,而CD3+CD8+CTL和CD3-CD56+NK细胞在不同类型肿瘤患者中具有不同的重要性。

CD4^+、CD25^+、CD127 low调节T细胞及CD16^+、CD56NK细胞在脑梗死急性期患者外周血中的表达及其关系

目的探讨脑梗死(CI)患者外周血中CD4+、CD25+、CD127 low调节T细胞及CD16+、CD56NK细胞的百分比变化及两者在CI患者免疫反应中的相互作用机制。方法采用流式细胞术检测50例急性CI患者(发病2d)外周血中CD4+、CD25+、CD127 low调节T细胞及CD16+、CD56NK细胞的表达水平,并与健康对照组进行比较。结果急性CI患者(发病2d)外周血中的CD4+、CD25+、CD127 low调节T细胞的表达水平低于健康对照组,而CD16+、CD56NK细胞的数量则明显高于健康对照组(p<0.05)。结论急性CI患者发病2d,CD16+、CD56NK细胞表达水平上升,而CD4+、CD25+、CD127 low调节性T细胞表达明显低于健康对照组,说明CD4+、CD25+、CD127 low调节性T细胞和CD16+、CD56NK细胞是促进CI发生的原因之一。

CD16+CD56+NK细胞在重症肌无力发病机制中的作用

目的:研究重症肌无力(MG)患者外周血CD16+CD56+ NK细胞的水平,及其在MG发病机制中的作用。方法:应用流式细胞仪检测16例MG患者与20名正常对照外周血CD16+CD56+NK细胞的百分率。结果:MG组外周血CD16+CD56+NK细胞百分率(13.81±5.59)%明显高于对照组的(7.23±1.95)%,P<0.05。结论:NK细胞在MG发病中起重要作用,既可通过分泌IFN2γ等细胞因子途径促进MG的发病,也可通过细胞毒作用发挥免疫效应。

CD3^-CD16^+CD56^+NK细胞水平变化在急性胰腺炎严重程度预测中的作用

目的分析急性胰腺炎(acute pancreatitis,AP)发病早期CD3^-CD16^+CD56^+NK细胞计数在AP严重程度预测中的作用。方法采用流式细胞仪荧光抗体标记法分别对164例AP患者的外周血单核细胞进行CD3、CD16、CD56荧光抗体标记,分析比较AP患者CD3^-CD16^+CD56^+NK细胞在外周血单核细胞中的百分比和计数情况,及其与AP严重程度的关系。用ROC曲线和AUC评价CD3^-CD16^+CD56^+NK细胞在外周血单核细胞中的百分比和计数对SAP的诊断价值。结果与正常对照组相比,MAP组、MSAP组和SAP组的CD3^-CD16^+CD56^+百分比和计数均显著下降,各组间差异有统计学意义(P<0.05)。CD3^-CD16^+CD56^+细胞百分比的AUC为0.86(95%CI:0.745~0.973),取值≤5.27%时,特异性为0.92,敏感性为0.79;CD3^-CD16^+CD56^+细胞计数的AUC为0.89(95%CI:0.808~0.961),取值≤0.056×109/L时特异性为0.90,敏感性为0.79。结论 CD3^-CD16^+CD56^+NK细胞在外周血单核细胞中的百分比和细胞计数对SAP早期诊断有一定的价值。

系统性红斑狼疮患者外周血CD3^-CD16^+CD56^+NK细胞水平变化的临床意义

分析系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血CD3^-CD16^+CD56^+NK细胞水平变化。94例SLE患者作为研究对象,另选取同期健康体检者50例为对照组。结果显示SLE组CD3^-CD16^+CD56^+NK细胞计数和百分率均明显低于对照组(P<0.05);Pearson积差分析显示CD3^-CD16^+CD56^+NK细胞计数与SLEDAI评分和24 h尿蛋白定量呈明显负相关性(P<0.05);以8.04%为临界值,CD3^-CD16^+CD56^+NK细胞计数判断SLE活动性的灵敏度为57.78%,特异度为78.57%,AUC为0.677。实验表明SLE患者外周血CD3^-CD16^+CD56^+NK细胞表达明显减少,观察其表达水平变化可为判断病情活动度和肾功能损害提供参考依据。

IVF-ET术后妊娠早期绒毛膜下血肿与NK细胞及其表面分子CD49d、CD11b的关系

目的:探讨辅助生殖(IVF^-ET)术后患者妊娠早期绒毛膜下血肿(SCH)与两种NK细胞亚型CD56^+CD16^+NK细胞、CD56^+16^-NK细胞及其表面整合素αm4(CD49d)、整合素αm (CD11b)的关系。方法:选取2019年2月^-2019年12月于本院生殖中心行IVF^-ET术助孕后临床妊娠患者41例,其中伴有绒毛膜下血肿20例为观察组,未合并绒毛膜下血肿21例为对照组。比较两组外周血中CD56^+CD16^+NK细胞、CD56^+16^-NK细胞及其表面整合素分子CD49d、CD11b的表达量。结果:CD56^+CD16^+NK细胞在观察组和对照组外周血淋巴细胞中的占比分别为9.73(6.32~15.18)%、9.96(6.50~12.68)%,CD56^+16^-NK细胞在观察组和对照组外周血淋巴细胞中占比分别为4.61(3.54~8.39)%、5.71(4.35~8.86)%,两组间均无差别(P>0.05)。CD11b在观察组和对照组CD56^+CD16^+NK细胞表面占比分别为98.59(97.20~99.33)%、100.00(99.80~100.00)%,CD11b在观察组和对照组CD56^+16^-NK细胞表面占比分别为78.09(60.64~86.24)%、87.09(80.36~91.33)%,观察组均低于对照组(均P<0.05)。CD49d在观察组和对照组CD56^+CD16^+NK细胞表面占比100.00(99.97~100.00)%、100.00(100.00~100.00)%,CD49d在观察组和对照组CD56^+16^-NK细胞表面占比99.52(97.93~100.00)%、99.44(98.28~100.00)%,观察组与对照组无差异(P>0.05)。结论:IVF^-ET术后妊娠早期合并绒毛膜下血肿患者外周血中CD56^+CD16^+NK细胞、CD56^+16^-NK细胞表面CD11b的表达低于IVF^-ET术后妊娠早期未合并绒毛膜下血肿患者,CD49d在两种细胞亚型表面的表达无差异。

晚期血吸虫病患者外周血NK细胞Tim-3分子的表达及其与肝纤维化指标的关系

目的探讨T细胞免疫球蛋白和黏蛋白结构域分子3(T cell immunoglobulin and mucin domain protein 3,Tim-3)在晚期血吸虫病患者外周血CD56+自然杀伤细胞(NK细胞)表面的表达及其与肝纤维化指标的关系。方法采用流式细胞术检测28例临床晚期血吸虫病患者和30例健康者CD56+NK细胞表面Tim-3的表达,应用全自动化学发光免疫分析仪检测肝纤维化血清学三型前胶原N端肽(PIIIP N-P)、层黏连蛋白(LN)、IV型胶原(CIV)和透明质酸(HA)等4项指标,ELISA检测血清中γ-干扰素(IFN-γ)和白细胞介素-4(IL-4)水平,Fibroscan仪检测肝硬度值(LSM)反映肝纤维化程度。统计分析Tim-3表达水平与IL-4和IFN-γ水平、肝脏纤维化程度以及肝纤维化血清指标的相关性。结果流式细胞分析结果显示,晚期血吸虫病患者外周血CD56+NK细胞表面Tim-3表达水平为(62.3±11.4)%,高于健康对照组的(52.1±6.5)%(P<0.01)。晚期血吸虫病患者和健康对照组的PIIIP N-P水平分别为(86.5±29.5)ng/ml和(22.0±7.8)ng/ml,LN分别为(49.3±21.5)ng/ml和(20.4±6.3)ng/ml,CIV分别为(67.5±22.3)ng/ml和(22.0±3.9)ng/ml,HA分别为(645.9±483.1)ng/ml和(54.7±27.7)ng/ml,两组各指标差异均具有统计学意义(P<0.05)。晚期血吸虫病患者和健康对照组IFN-γ水平分别为(93.9±20.1)ng/L和(107.7±24.6)ng/L,IL-4分别为(46.6±11.8)ng/L和(28.9±8.9)ng/L,两组差异均具有统计学意义(P<0.05)。Spearman非参数相关分析结果显示患者CD56+NK细胞表达的Tim-3水平与患者肝纤维化指标LSM、PIIIP N-P、LN、CIV和IL-4水平呈正相关(r=0.528~0.834,P<0.01),与IFN-γ水平呈负相关(r=-0.501,P<0.01),而与HA水平无明显相关性(r=0.352,P>0.05)。结论晚期血吸虫病患者外周血CD56+NK细胞Tim-3表达呈上调,并与患者肝纤维化指标LSM、PIIIP N-P、LN、CIV和IL-4水平呈正相关。

NK细胞及淋巴细胞坏死率对URSA患者免疫治疗疗效的影响

目的探讨皮下注射淋巴细胞对不明原因性复发性流产(URSA)的临床疗效,回顾性分析免疫治疗前后CD16+CD56+NK细胞与淋巴细胞坏死率(CDC)的变化与妊娠结局的关系。方法应用荧光染色法和流式细胞术对行主动免疫治疗的440例URSA患者治疗前后淋巴细胞坏死率和CD16+CD56+NK细胞比率进行测定,并随访妊娠结局。结果353例成功妊娠至孕12周之后,成功妊娠率85.50%;60例在孕12周前再次流产,流产率为14.50%;其它(17例1年以上未孕,10例失访)。妊娠成功组治疗后淋巴细胞坏死率显著上升,CD16+CD56+NK细胞明显下降(P<0.01);失败组治疗后淋巴细胞坏死率升高,而CD16+CD56+NK细胞下降不明显(P>0.05)。结论主动免疫治疗效果较好,CD16+CD56+NK细胞和淋巴细胞坏死率是URSA患者孕前免疫状态的两个独立指标,亦是评价免疫治疗疗效的两个重要参数。

HCG对反复种植失败患者种植窗期子宫内膜NK细胞亚型的影响

目的通过观察反复种植失败患者种植窗期HCG宫腔灌注后CD56＋CD16-和CD56＋CD16＋NK细胞百分比的变化,探讨HCG改变母胎界面的免疫微环境,介导免疫耐受的机制,进而为反复种植失败患者宫腔灌注HCG治疗提供理论依据。方法随机选择2013年1月～2015年1月在吉林省人民医院生殖中心行辅助助孕反复胚胎种植失败的患者共42例,实验组（宫腔灌注HCG组）21例：在自然周期/促排周期排卵后3 d或激素替代周期黄体酮注射后3 d用移植管宫腔灌注重组HCG 500 IU,3 d后取内膜组织,分离NK细胞。分别用流式细胞仪鉴定计数CD56＋CD16-NK细胞和CD56＋CD16＋NK细胞。对照组21例（单纯机械刺激组）：自然周期/促排周期排卵后3 d或激素替代周期黄体酮注射后3 d用移植管单纯行预移植,3 d后取内膜组织,分离NK细胞。分别用流式细胞计数CD56＋CD16-NK细胞和CD56＋CD16＋NK细胞。结果实验组CD56＋CD16-NK细胞百分比高于对照组,差异有统计学意义。结论宫腔灌注HCG能提高反复种植失败患者种植窗期子宫内膜局部CD56＋CD16-NK细胞百分比,诱导免疫耐受、进而提高子宫内膜容受性,促进胚胎植入。

补肾中药对溴隐亭致流产鼠模型中蜕膜CD56^+NK细胞表面CD69和CD94表达的影响

为了观察补肾中药是否能影响蜕膜CD5 6 + NK细胞比例及其表面CD6 9、CD94的表达 ,从而进一步阐明补肾中药对母胎界面免疫的影响机制。SD大鼠于孕 6～ 8d皮下注射溴隐亭 0 3mg/kg·d ,建立改良的溴隐亭致SD大鼠流产模型 ,随机分为三组。A组为模型组 ;B、C组在孕 1～ 1 1d分别给予大剂量中药 (4 5g/kg·d)、P(8mg/kg·d) ,另设正常孕鼠对照 (D组 )。孕 1 2d处死 ,取蜕膜组织 ,分离成单个细胞悬液 ,用流式细胞分析技术观察 4组蜕膜CD5 6 + NK细胞的量及蜕膜NK细胞表面CD6 9、CD94的表达差异。结果发现 :B组 (P <0 0 5 )、C、D组 (P <0 0 1 )妊娠率与A组相比增加 ,并且有差异 ;B、C组蜕膜CD5 6 + NK细胞比例与A组相比明显增加 ,与D组无差异 ;各组蜕膜CD5 6 + NK细胞表面CD6 9表达无差异 ;B、C、D组CD94的表达与A组相比显著增加 ;A组蜕膜CD5 6 + NK细胞表达CD6 9与CD94相比明显增加 ,B、C组相反。因此 ,补肾中药能影响蜕膜CD5 6 + NK细胞表面CD6 9、CD94的表达 ,可能通过增加CD94的表达 ,抑制CD6 9从而进一步抑制NK细胞的活性 。

壹期煤工尘肺患者CD19^+B淋巴细胞、CD56^+CD16^+NK细胞表达及补体C3、C4水平

目的探讨CD19+B淋巴细胞、CD56+CD16+NK细胞和补体C3、C4水平在壹期煤工尘肺(CWP)中的变化及意义。方法采用流式细胞术检测56例壹期CWP患者(CWP组)、45例井下健康接尘矿工(接尘对照组)及48例井上健康人(正常对照组)外周血中CD19+B淋巴细胞、CD56+CD16+NK细胞表达水平;免疫比浊法检测血清补体C3、C4水平。结果与正常对照组和接尘对照组比较,CWP组CD19+升高,CD56+CD16+下降,差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01);C3与C4水平无明显改变(P>0.05)。接尘对照组CD56+CD16+和C4水平均高于正常对照组,差异有统计学意义(P<0.05);CD19+和C3水平虽也有所升高,但差异无统计学意义(P>0.05)。CWP组C3与C4呈正相关(r=0.610,P<0.01),其他各指标间无相关性。结论壹期CWP患者存在B淋巴细胞介导的体液免疫上调,NK细胞免疫功能低下。

CD4^+CD25^+CD127^(low)调节性T细胞和CD3^-CD56^+CD69^+NK细胞在肺结核患者中的意义

目的:探讨CD4+CD25+CD127low调节性T细胞和CD3-CD56+CD69+NK细胞在肺结核患者中的免疫调节作用。方法:取30例健康体检者(HD)、30例非耐药初治肺结核(S-TB)患者及30例多耐药结核病(MDR-TB)患者2 ml肝素抗凝外周静脉血,经CD3、CD4、CD25、CD56、CD69、CD127流式抗体标记后,Beckman流式细胞仪(FCM)计数各组CD4+CD25+CD127lowT、CD3-CD56+NK、CD3-CD56+CD69+NK细胞百分比含量。结果:MDR-TB组CD4+CD25+CD127low调节性T细胞百分比含量为(10.63±3.85)%,明显高于HD组的(3.03±1.07)%和S-TB组的(7.17±2.94)%(P=0.000);S-TB组CD3-CD56+NK细胞百分比含量为(17.69±8.34)%,高于HD组的(16.60±6.21)%和MDR-TB组的(14.70±5.57)%,但差异无统计学意义(P>0.05);MDR-TB组CD3-CD56+CD69+NK细胞百分比含量为(3.50±1.22)%,明显低于HD组的(9.73±4.35)%和S-TB组的(5.71±2.28)%(P=0.004)。结论:随着肺结核病程的发展,外周血中CD4+CD25+CD127low调节性T细胞含量逐渐升高,CD3-CD56+NK细胞含量先上升然后下降,CD3-CD56+CD69+NK细胞含量逐渐下降。调节性T细胞可能通过抑制结核患者CD3-CD56+CD69+NK细胞免疫应答来影响肺结核病的进程。

CD3^-CD56^+NK细胞及CD3^+CD56^+NKT样淋巴细胞在急性白血病患者中的变化

目的通过分析急性白血病患者发病时以及缓解时外周血CD3^-CD56^+NK细胞及CD3^+CD56^+NKT样淋巴细胞的数量以及功能变化,进一步了解急性白血病患者免疫功能状态。方法使用流式细胞分析外周血CD3^-CD56^+NK细胞及CD3^+CD56^+NKT样淋巴细胞的数量,同时分析上述两群细胞内的干扰素表达水平来评估细胞的功能。结果CD3^+CD56^+NKT样淋巴细胞数量在急性白血病发病时显著增加,经化疗获得完全缓解后数量又下降到正常健康人水平,并且无论在发病时还是缓解时CD3^+CD56^+NKT样淋巴细胞内干扰素水平均明显下降。CD3^-CD56^+NK细胞的变化有所不同,在发病时数量以及功能改变均不明显,而在疾病缓解时,急性淋巴细胞白血病患者CD3^-CD56^+NK细胞的数量下降明显,急性髓系白血病患者CD3^-CD56^+NK细胞的功能下降明显。结论急性白血病患者发病时可能产生免疫反应,但免疫细胞功能缺陷可能参与疾病的发生进展,其中CD3^+CD56^+NKT样淋巴细胞的变化可能与疾病的关系更密切,且急性髓系白血病患者免疫细胞功能异常更明显。

CD3^-CD16^+CD56^+NK细胞与系统性红斑狼疮活动的相关性研究

目的探讨SLE患者外周血CD3^-CD16^+CD56^+NK细胞的表达水平及其临床意义。方法流式细胞术检测134例SLE患者、90名健康对照外周血CD3^-CD16^+CD56^+NK细胞计数及占淋巴细胞百分比,ELISA法测定血清抗核抗体、抗dsDNA抗体、抗C1q抗体水平;Logistic多元逐步回归分析SLE患者疾病活动的独立危险因素,Pearson或Spearman相关分析CD3^-CD16^+CD56^+NK细胞与SLE患者临床指标的相关性,多元逐步回归分析影响CD3^-CD16^+CD56^+NK细胞的独立危险因素。结果SLE患者外周血CD3^-CD16^+CD56^+NK细胞计数和占淋巴细胞百分比[(151±126)%,(10±7)%,134例]均低于健康对照组[(404±261)%,(19±9)%,90名](t=-12.218,P<0.01;t=-9.606,P<0.01)。活动组SLE患者外周血CD3^-CD16^+CD56^+NK细胞计数和占淋巴细胞百分比[(94±67)%,(9±6)%,54例],均低于非活动组[(189±142)%,(11±6)%,80例](t=-4.586,P<0.01;t=-2.241,P=0.027)。外周血CD3^-CD16^+CD56^+NK细胞计数和百分比、病程、尿蛋白定量(24 h)、ESR、C4均与SLE患者疾病活动的独立相关(OR=0.990、0.936、0.979、1.813、1.040、0.183,P均<0.05)。而SLEDAI评分与SLE患者CD3^-CD16^+CD56^+NK细胞计数独立相关(β=-0.358,P<0.01)。结论SLE患者外周血中CD3^-CD16^+CD56^+NK细胞计数及百分比是SLE患者疾病活动的独立危险因素,外周血CD3^-CD16^+CD56^+NK细胞下降可能在SLE发生、进展中扮演重要角色。

CD56^(neg)NK细胞在HIV感染的作用:进展与展望

HIV是导致人体免疫功能严重缺陷的RNA病毒,而自然杀伤(NK)细胞作为固有免疫系统中的天然免疫细胞,可以通过不同的杀伤机制抑制HIV的感染和复制。在急性期,NK细胞可以通过抗体依赖的细胞介导的细胞毒性作用(Antibody Dependent Cell Mediated Cytotoxicity,ADCC)对HIV感染的细胞进行有效的杀伤和清除。随着HIV感染的进展,NK细胞逐渐表现出功能耗竭,以及出现功能异常的CD56^(neg)NK细胞亚群,最终导致NK细胞功能受损。尽管NK细胞对于抗HIV感染的作用已多有研究,但对于CD56^(neg)NK细胞亚群的功能研究甚少。CD56^(neg)NK细胞亚群在健康人中比较少见,主要常见于HIV感染者中,但对其功能及来源仍不清楚。本文主要通过阐述CD56^(neg)NK细胞亚群在HIV感染中的作用,对其可能起源进行总结概括,以明确NK细胞在抗HIV感染过程中发挥的重要作用。

糖尿病对重症肌无力NK细胞亚型及功能的影响

目的探讨重症肌无力(MG)合并糖尿病患者NK细胞亚型改变及其功能特征。方法收集2021年1月至11月期间于山东省千佛山医院神经内科住院治疗的重症肌无力患者26例,其中合并糖尿病的MG(MG+DM组)患者13例,不合并糖尿病的MG(MG组)患者13例。采用流式细胞术检测NK细胞及其亚型的比例、检测NK细胞IFN-γ和IL-17的分泌水平、检测Th1和Th17细胞比例;体外试验检测高糖处理流式分选的NK细胞其IFN-γ的分泌水平变化;最后,分析NK细胞分泌的IFN-γ与Th1和Th17细胞分化的相关性。结果MG+DM组患者外周血CD56^(bright)NK比例高于MG组(P=0.022),CD56^(bright)NK比例与定量MG评分(QMG score)呈正相关(r_(s)=0.47,P=0.015);MG+DM组患者外周血IFN-γ^(+)NK细胞比例(P=0.043)和NK细胞IFN-γ平均荧光强度升高(P=0.029);体外实验中高糖组IFN-γ^(+)NK细胞比例(P=0.046)和IFN-γ平均荧光强度(P=0.011)高于对照组;IFN-γ^(+)NK细胞比例和IFN-γ的平均荧光强度与外周血Th1细胞比例(r=0.52,P=0.009;r=0.41,P=0.045)和Th17细胞比例(r=0.66,P<0.001;r=0.60,P=0.002)呈正相关。结论糖尿病可能通过促进NK细胞分泌IFN-γ诱导Th1和Th17细胞异常分化,参与MG患者体内T细胞亚型的免疫失衡状态。

卡介菌多糖核酸对213例复发性流产患者免疫状态的影响

免疫功能异常是复发性流产（recurrent spontaneous abor-tion,RSA）的常见病因。赵爱民等发现T淋巴细胞亚群的改变与流产有关。李江平等报道卡介菌多糖核酸（BCG-polysaccharides nucleic acid,BCG-PSN）有较强的免疫调节作用,已广泛应用于变态反应性疾病、自身免疫性疾病、病毒感染性疾病等的辅助治疗。我们采用BCG-PSN治疗RSA患者,检测患者治疗前后皮肤划痕反应及外周血CD56＋NK细胞。

脓毒症患儿外周血自然杀伤细胞比例及亚群的变化

目的 探讨脓毒症患儿外周血自然杀伤（natural killer,NK）细胞及各亚群比例的变化.方法 2009年1月至2012年12月我院住院的脓毒症患儿按病情分为脓毒症组25例和严重脓毒症组12例,同时设健康对照组37例.提取各组患儿外周血,采用流式细胞术检测NK细胞及各亚群比例.结果 脓毒症组患儿CD16^＋ NK细胞（0.44％±0.13％）较健康对照组明显减少（P＜0.01）.严重脓毒症组患儿外周血CD16^＋ NK细胞（0.73％±0.25％）较健康对照组（1.78％±0.39％）明显减少（P＜0.05）.严重脓毒症组患儿外周血CD56^＋ CD16^＋ NK细胞（4.82％±2.57％）较健康对照组（9.52％±1.16％）明显减少（P＜0.05）.严重脓毒症组患儿外周血NK细胞总数（5.90％±3.27％）较健康对照组（11.80％±2.40％）明显减少（P＜0.05）.脓毒症组与健康对照组患儿NK细胞总数差异无统计学意义（P＞0.05）.严重脓毒症组、脓毒症组、健康对照组患儿CD56^＋ NK细胞差异无统计学意义（P＞0.05）.结论 脓毒症患儿NK细胞总数减少不明显,但其亚群CD16^＋ NK细胞明显减少.严重脓毒症患儿CD16^＋ NK细胞、CD56^＋ CD16^＋ NK细胞两个亚群均减少.NK细胞总数也减少.脓毒症及严重脓毒症患儿CD56^＋ NK细胞数量无明显减少.CD16^＋ NK细胞数量减少可能是脓毒症的易感因素之一,并与严重脓毒症的发生发展有关.

严重脓毒症患儿外周血自然杀伤细胞比例、亚群的变化

目的探讨严重脓毒症患儿外周血自然杀伤(natural killer,NK)细胞及各亚群比例的变化。方法以2009年1月—2012年12月收治并临床治愈的严重脓毒症患儿8例为研究对象,所有患儿于诊断严重脓毒症24 h内(急性期)及病情稳定进入恢复期后抽取外周血检测N K细胞及各亚群:CD56+NK细胞、CD16+NK细胞、CD56+16+NK细胞百分率。计量资料采用t检验,P<0.05为差异有统计学意义。结果 NK细胞、CD56+CD16+NK细胞、CD16+NK细胞比例恢复期[(5.70±2.77)%、(4.75±3.23)%、(0.53±0.41)%]均较急性期[(4.44±0.90)%、(3.73±1.21)%、(0.41±0.28)%]明显升高,比较差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论严重脓毒症患儿表达CD16+分子的NK细胞数量,恢复期较急性期明显升高。这可能是严重脓毒症患儿能进入恢复期或能治愈的重要原因之一。