Bowen病中P63蛋白表达及CD68阳性巨噬细胞反应研究

目的探讨Bowen病中P63蛋白与巨噬细胞CD68的表达情况,并分析两者之间的相关性。方法回顾性选取2015年7月至2018年10月沈阳市第七人民医院皮肤科存档的28例Bowen病患者的病理组织标本,均通过沈阳市第七人民医院2名经验丰富的皮肤病理学专家确诊,取同期进行手术切除的16名健康者皮肤组织作为对照,采用免疫组化SP染色法对Bowen组患者的皮损以及16名正常皮肤组织进行P63蛋白以及CD68染色处理。结果 P63蛋白与巨噬细胞CD68在皮肤健康者组织中的表达均较低,而在Bowen病中,呈较强阳性反应,染色强度升高,差异具有统计学意义(χ~2=7. 922、8. 441,P=0. 001、0. 000)。在Bowen病中,P63蛋白与巨噬细胞CD68阳性表达水平呈较为显著的正相关性(r=0. 447,P=0. 000)。结论 P63蛋白以及巨噬细胞CD68与Bowen病的发生均相关,巨噬细胞CD68阳性反应以及过度表达的P63均参与了Bowen病变细胞增生的过程。

IL-1β通过激活ERK1/2信号通路抑制人脐带间充质干细胞CD200表达抑制巨噬细胞M2极化

目的探究白细胞介素1β(IL-1β)调控人脐带间充质干细胞CD200表达及其对巨噬细胞极化的影响及作用机制。方法无血清培养基分离培养获得人脐带间充质干细胞(hUC-MSC),形态学观察及流式细胞术检测CD73、CD90、CD105、CD14、CD34、CD45、人类白细胞抗原DR(HLA-DR)的表达,确定间充质干细胞属性;20 ng/mL IL-1β处理hUC-MSC 24 h,流式细胞术检测CD200阳性细胞率,实时定量PCR和Western blot法检测CD200 mRNA和蛋白表达水平;佛波酯(PMA)诱导THP-1巨噬细胞活化,并与IL-1β处理感染CD200过表达慢病毒的hUC-MSC共培养,流式细胞术检测CD11c和CD206阳性细胞比例;IL-1β联合细胞外信号调节激酶1/2(ERK1/2)特异性抑制剂PD98059处理hUC-MSC,Western blot法检测细胞丝裂原激活蛋白激酶(MAPK)信号分子与CD200的表达。结果IL-1β显著下调hUC-MSC CD200蛋白表达与CD200阳性细胞率;过表达CD200显著上调hUC-MSC CD200表达,且CD200过表达hUC-MSC提高巨噬细胞CD206阳性细胞比率;IL-1β激活hUC-MSC的ERK1/2信号通路,PD98059上调IL-1β处理后hUC-MSC中CD200的蛋白表达。结论IL-1β通过激活ERK1/2信号通路抑制CD200的表达,进而抑制hUC-MSC对巨噬细胞向M2型极化的促进作用。

小鼠心肌梗死进程中巨噬细胞CD59和P2X7表达的动态变化

目的探讨小鼠心肌梗死进程中巨噬细胞亚群的动态变化与CD59、P2X7表达的动态变化。方法将成年雄性C57BL/6J小鼠36只随机分为对照组(不做任何处理,6只)和心肌梗死组(30只)。通过冠状动脉左前降支结扎建立小鼠急性心肌梗死模型,心肌梗死组30只小鼠又随机分为A、B、C、D、E组,分别在心肌梗死后1、3、5、7、14 d取材。收取小鼠的外周血和心脏组织,采用流式细胞术检测巨噬细胞亚群的动态变化与CD59和P2X7的表达情况。结果心肌梗死后1、3 d外周血中单核细胞数量均高于对照组[(9.5±1.7)、(10.3±3.7)×10^(4)/ml比(3.2±3.1)×10^(4)/ml](均P<0.05)。心肌梗死后1、3、5 d心脏组织白细胞计数、巨噬细胞计数均高于对照组(均P<0.05)。心脏组织中Ly6C^(high)巨噬细胞计数在心肌梗死后3 d达到高峰,而Ly6C^(low)亚群在心肌梗死后5 d达到高峰,均高于对照组(均P<0.05)。心肌梗死后1 d P2X7^(-)CD59^(-)巨噬细胞占Ly6C^(high)巨噬细胞百分比高于对照组,而P2X7^(+)CD59^(+)巨噬细胞占比低于对照组(均P<0.05)。心肌梗死后1、3、5 d P2X7^(+)CD59^(+)巨噬细胞占Ly6C^(low)巨噬细胞百分比均低于对照组,而P2X7^(-)CD59^(+)巨噬细胞占比均高于对照组(均P<0.05)。结论在小鼠急性心肌梗死的不同阶段,心脏组织巨噬细胞的亚群呈现动态变化,同时伴随CD59和P2X7表达的动态变化。

CD38经TFEB介导促进溶酶体再生而调节巨噬细胞胆固醇外流

目的:探讨CD38对巨噬细胞溶酶体再生及胆固醇外流的影响。方法:以低密度脂蛋白(LDL)受体敲除(LDLr^(-/-))小鼠的骨髓源性巨噬细胞为细胞模型。采用活细胞成像系统观察烟酸腺嘌呤二核苷酸磷酸(NAADP)对巨噬细胞溶酶体数量的影响;利用ELISA检测巨噬细胞内NAADP的水平;细胞经NA处理后,利用RT-q PCR检测CD38 m RNA表达,利用Western blot检测CD38蛋白表达和转录因子EB(TFEB)磷酸化水平;利用激光共聚焦技术观察CD38/NAADP信号通路对溶酶体数量和胆固醇外流的影响。结果:NAADP可显著增加巨噬细胞中溶酶体的数量(P<0.05),这种效应可被NAADP拮抗剂NED-19、Ca^(2+)螯合剂BAPTA及钙调磷酸酶抑制剂Cs A明显抑制(P<0.05);CD38可明显促进巨噬细胞中NAADP的合成(P<0.05);NAADP合成底物NA可明显促进CD38 m RNA和蛋白表达(P<0.05);NA还可显著降低TFEB的磷酸化水平,且这一效应也可被NED-19、BAPTA和Cs A明显抑制(P<0.05);阻断CD38/NAADP信号通路可明显抑制NA诱导的溶酶体数量增加和溶酶体游离胆固醇及胞质胆固醇酯的外流(P<0.05);在LDLr/CD38双基因敲除巨噬细胞中,NA诱导的溶酶体数量增加和溶酶体游离胆固醇及胞质胆固醇酯的外流效应消失,CD38基因回补后,这一效应即可恢复(P<0.05)。结论:CD38可经TFEB介导,触发巨噬细胞溶酶体再生,进而促进巨噬细胞溶酶体游离胆固醇和胞质中胆固醇酯的外流。

M2型巨噬细胞抑制CD8^(+)T细胞促进食管癌细胞恶性生物行为

目的探讨M2型巨噬细胞通过抑制CD8^(+)T细胞的抗肿瘤能力参与食管癌的恶性生物学行为的作用。方法利用佛波酯(PMA)联合白细胞介素4(IL-4)/IL-13将人单核细胞白血病细胞(THP-1)诱导为M2型巨噬细胞并用实时定量PCR检测相关炎性因子。运用磁珠分选法分选健康志愿者外周血CD8^(+)T细胞,用流式细胞术验证分选纯度。构建CD8^(+)T细胞与食管鳞癌细胞的非接触性共培养体系(CD8^(+)T细胞),和构建M2型巨噬细胞、CD8^(+)T细胞与食管鳞癌细胞的非接触性共培养体系(M2型巨噬细胞联合CD8^(+)T细胞)。平板克隆实验和CCK-8细胞毒性实验检测各组肿瘤细胞增殖能力。Transwell^(TM)实验检测各组肿瘤细胞侵袭和迁移能力。流式细胞术检测并分析各组肿瘤细胞的凋亡情况。运用GraphPadPrism9.5软件进行统计学分析和制图。结果诱导后巨噬细胞IL-10和精氨酸酶1(Arg1)表达上调,IL-12和肿瘤坏死因子α(TNF-α)表达下降,具有M2表型巨噬细胞特征。磁珠分选法成功的分选出CD8^(+)T细胞,其阳性率>90%。食管鳞癌细胞与CD8^(+)T细胞非接触性共培养组的增殖、侵袭、迁移和抗凋亡能力显著低于单独癌细胞组;而食管鳞癌细胞与M2型巨噬细胞条件培养基预处理CD8^(+)T细胞共培养后,其增殖、侵袭、迁移和抗凋亡能力与食管鳞癌和CD8^(+)T细胞共培养组相比显著增强。结论M2型巨噬细胞通过抑制CD8^(+)T细胞的抗肿瘤能力促进食管鳞癌细胞的增殖、侵袭、迁移和抗凋亡。

CXCL8通过增加M2型巨噬细胞浸润及抑制CD8^(+)T细胞浸润促进结直肠癌免疫抑制微环境的形成

目的探讨CXC趋化因子配体8(CXCL8)对结直肠癌(CRC)微环境的免疫调节作用。方法使用过表达CXCL8的鼠源CRC细胞株CT26细胞建立BALB/c小鼠皮下移植瘤模型,监测肿瘤生长情况,成瘤三周后剥离肿瘤组织并取出小鼠脾脏,一方面制备肿瘤单细胞悬液,流式细胞术检测肿瘤微环境中M2型巨噬细胞及CD8^(+)T细胞的浸润情况;另一方面制备脾脏单细胞悬液,分选脾脏CD8^(+)T细胞,在体外将T细胞与过表达CXCL8的CT26细胞共培养,细胞毒性实验检测T细胞杀伤能力。结果过表达CXCL8促进小鼠CRC移植瘤生长;过表达CXCL8的CRC组织中M2型巨噬细胞浸润增加、CD8^(+)T细胞浸润减少;过表达CXCL8的小鼠CRC细胞并不影响CD8^(+)T细胞体外杀伤能力。结论CXCL8过表达CRC细胞通过增加M2型巨噬细胞浸润及抑制CD8^(+)T细胞浸润促进CRC免疫抑制微环境的形成。

CD68、CD163阳性巨噬细胞在食管癌组织浸润及对预后的影响

目的探讨CD68+/CD163+巨噬细胞在食管癌组织浸润及其对预后的影响。方法应用免疫组化方法检测CD68+、CD163+巨噬细胞在食管癌组织的浸润,比较CD68、CD163阳性巨噬细胞浸润密度及对食管癌患者预后的影响。结果食管癌组织CD68、CD163阳性巨噬细胞浸润密度较癌旁正常组织明显增多(t=21.379,P<0.01;t=21.712,P<0.01)。CD68+、CD163+巨噬细胞浸润密度与患者生存时间均呈负相关性(r=-0.281,P<0.01;r=-0.344,P<0.01)。CD68+、CD163+巨噬细胞浸润高密度组5年生存率低于低密度组,分别为30.5%vs56.9%,27.1%vs60.3%(P<0.05),但COX风险因素分析CD68+巨噬细胞不是独立的预后因素(P>0.05),而CD163+巨噬细胞是独立的预后因素(P<0.01)。结论 CD68+、CD163+巨噬细胞在食管癌组织中具有较高的浸润密度,CD163+巨噬细胞浸润密度与患者预后具有密切相关性。

CD68-阳性巨噬细胞在人冠状动脉粥样硬化病变中的分布特点及其意义

目的探讨人冠状动脉粥样硬化病变中CD68-阳性巨噬细胞的分布以及与冠状动脉粥样硬化病变类型、管腔狭窄之间的关系及其意义。方法选用53例尸检病例的312块冠状动脉组织标本,光镜下诊断弥漫性内膜增厚和冠状动脉粥样硬化病变及其类型,用免疫组织化学计数冠状动脉粥样硬化病变中CD68-阳性巨噬细胞,用Sc ion图像软件系统检测和计算冠状动脉标本中管腔狭窄程度、脂质坏死核心和钙化基质面积。结果在冠状动脉粥样病变中,40%（124/312）为弥漫性内膜增厚,5%（16/312）为Ⅰ型,10%（31/312）为Ⅱ型,21%（66/312）为Ⅲ型,4%（14/312）为Ⅳ型,18%（55/312）为Ⅴ型和2%（6/312）为Ⅵ型。脂质坏死核心面积在高胆固醇组明显大于正常胆固醇组（P〈0.05）,而钙化基质面积在早期病变（ⅠⅢ型）和进展期病变（ⅣⅥ型）之间有显著性差异（P〈0.05）;冠状动脉粥样硬化病变CD68-阳性巨噬细胞随着冠状动脉粥样硬化病变进展和管腔狭窄程度的加重而增多,分别呈正相关（P〈0.01）,且不同病变类型、管腔狭窄程度之间以及正常胆固醇组与高胆固醇组之间有显著性差异（P〈0.05）。结论CD68-阳性巨噬细胞随着人冠状动脉粥样硬化病变进展和管腔狭窄程度的加重而增多,表明巨噬细胞浸润始终始发和加重冠状动脉粥样硬化病变,大量巨噬细胞主要在斑块肩部区浸润和脂质坏死核心的增大与冠状动脉粥样硬化病变进展、不稳定性斑块破裂及并发症的发生有关。

趋化因子CCL3和巨噬细胞CD68+、CD163+在老年结肠癌中的表达及临床意义

结肠癌是常见消化道恶性肿瘤之一,根据WHO发布的《2020年世界癌症进展报告》,全球每年结肠癌发病率位于第3位,致死率位于第2位,老年人更是结肠癌的高发人群[1]。近年来,随着外科手术治疗的进步,靶向治疗、免疫治疗的引入以及个体化临床治疗的广泛应用,结肠癌的治疗取得了很大的进步。但是,由于老年病人身体状况较差,对放化疗的敏感性及耐受性较低,预后不良风险增高[2]。因此,探讨老年结肠癌病人肿瘤进展相关指标,及早预测病人预后,并优化治疗方案尤为必要。

生理状态下大鼠大网膜Ⅰ型与Ⅱ型乳斑内CD68、CD163阳性巨噬细胞数量对比研究

目的对比研究生理状态下大鼠大网膜I型与II型乳斑内CD68、CD163阳性巨噬细胞的数量。方法 SD大鼠大网膜铺片,CD68、CD163双重标记,免疫荧光显微镜下观察计数CD68、CD163阳性巨噬细胞,对比分析I型与II型乳斑内CD68、CD163阳性巨噬细胞的数量。结果 I型与II型乳斑内均可见CD68阳性、CD163阳性巨噬细胞;I型乳斑内CD68阳性巨噬细胞与CD163阳性巨噬细胞数量比较差异无统计学意义(P﹥0.05);II型乳斑内CD68阳性巨噬细胞与CD163阳性巨噬细胞数量对比差异无统计学意义(P﹥0.05);I型与II型乳斑内CD68阳性巨噬细胞与CD163阳性巨噬细胞的数量基本相同。结论生理状态下大鼠大网膜I型与II型乳斑内均存在CD68、CD163阳性巨噬细胞;均存在巨噬细胞的极化分型,主要以M2型巨噬细胞的形式存在,推断乳斑具有发挥降低炎症反应,发挥组织修复的功能。

胃癌组织中肿瘤相关巨噬细胞CD68、PD-L1表达与胃癌预后情况分析

目的 探究胃癌微环境中肿瘤相关巨噬细胞(tumor-associated macrophages, TAMs)白细胞分化抗原68(cluster of differentiation68, CD 68)CD68、程序性死亡受体-配体1(programmed cell death-ligand 1, PD-L1)表达及对胃癌患者临床预后的影响。方法 收集2019年7—12月东莞市人民医院36例胃癌患者的病理标本和临床信息,采用免疫荧光法检测癌组织和癌旁组织中CD68和PD-L1表达,并进行统计分析。结果 胃癌组织中CD68阳性细胞平均值为(143±63)个,高于癌旁组织(81±35)个,差异有统计学意义(t=-12.713,P<0.05);胃癌组织中CD68和PD-L1双阳性细胞平均值为(56±31)个,高于癌旁组织(39±23)个,差异有统计学意义(t=-11.928,P<0.05);CD68高表达患者平均生存时间为26个月,总生存率(overall survival rate,OS)为27.8%,显著低于CD68低表达患者平均生存时间36个月,OS为63.2%,差异有统计学意义(P<0.05);TAMs PD-L1高表达患者平均生存时间为25个月,OS为33.3%,显著低于TAMs PD-L1低表达患者平均生存时间37个月,OS为53.9%,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 CD68、PD-L1在胃癌组织中高表达,CD68、PD-L1高表达患者平均生存时间缩短,OS显著降低,预后更差。

CD68和CD206阳性巨噬细胞在乳腺癌组织中的浸润及对预后影响

目的探讨乳腺癌间质中CD68^+和CD206^+肿瘤相关巨噬细胞(tumor associated macrophages,TAMs)的浸润与临床病理特征的关系及其对预后的影响。方法应用免疫组化Max Vision法检测172例乳腺癌和50例乳腺良性病变组织中CD68和CD206的表达,比较CD68^+TAMs和CD68^+/CD206^+TAMs浸润密度与乳腺癌临床病理特征的关系及其对预后的影响。结果CD68^+TAMs和CD68^+/CD206^+TAMs在乳腺癌的浸润密度均较良性病变组织升高(P均<0.000 1);CD68^+/CD206^+TAMs高密度表达分别与肿瘤直径增大、淋巴结分期及临床分期增高等有关(P<0.000 1,P=0.007,P<0.000 1)。CD68^+/CD206^+TAMs高密度浸润组患者的无病生存率及总生存率均较低密度浸润组降低(P=0.013,P=0.003)。结论 CD68^+TAMs和CD68^+/CD206^+TAMs在乳腺癌组织中有较高的浸润密度,CD68^+/CD206^+TAMs可能与乳腺癌的发生、发展密切相关,并有望成为预测乳腺癌预后的重要潜在标志物。

三阴型乳腺癌中CD68和CD163阳性的肿瘤相关巨噬细胞

肿瘤浸润淋巴细胞(TILs)是辅助治疗的预后标志物和潜在靶标,根据先前验证的临界值将其分为高水平(≥30%)和低水平(<30%)。高水平的TILs在乳腺癌特别是三阴型乳腺癌(TNBC)中具有抗肿瘤活性,预后良好。近来研究表明肿瘤相关巨噬细胞(TAMs)也是肿瘤生长和癌症进展的重要因素,可将巨噬细胞分为经典激活1型(M1样)和交替激活2型(M2样)两种。

TGF-β对膀胱癌组织中巨噬细胞来源肿瘤相关成纤维细胞的影响及其机制

目的探讨TGF-β对膀胱癌组织中巨噬细胞来源肿瘤相关成纤维细胞(CAF)的影响及其机制。方法采用Kaplan-Meier法分析膀胱癌组织中α-SMA^(+)CD68^(+)CAF表达水平与患者的总生存率(OS)的关系;采用免疫荧光技术检测α-SMA^(+)CD68^(+)CAF在膀胱癌组织中的浸润情况;采用Western blot实验检测TGF-β对α-SMA^(+)CD68^(+)CAF体外诱导作用。同时构建膀胱癌小鼠模型,采用免疫荧光技术和免疫组化法检测TGF-β对膀胱癌小鼠体内α-SMA^(+)CD68^(+)CAF的诱导作用及对CD8^(+)T细胞浸润的影响。结果膀胱癌组织中α-SMA与CD68的表达呈正相关,且α-SMA^(+)CD68^(+)CAF高表达的患者预后更差(χ^(2)=9.05,P<0.05)。免疫荧光技术检测结果显示,膀胱癌组织中存在α-SMA^(+)CD68^(+)CAF。Western blot实验检测结果显示,TGF-β可显著促进α-SMA^(+)CD68^(+)CAF的生成。膀胱癌小鼠模型体内实验显示,TGF-β可促进膀胱癌组织中α-SMA^(+)CD68^(+)CAF的生成,从而抑制CD8^(+)T细胞的浸润。结论TGF-β可显著促进膀胱癌组织中巨噬细胞来源CAF的生成,从而抑制CD8^(+)T细胞的浸润。

CD68、CD11c和CD163阳性巨噬细胞在乳腺癌组织中表达及与临床病理特征和预后的关系

目的探讨乳腺癌肿瘤间质(tumor stroma,TS)中CD68^(+)、CD11c^(+)和CD163^(+)肿瘤相关巨噬细胞(tumor associated macrophages,TAM)的免疫组化表达及与临床病理特征、生存期的关系。方法采用免疫组化法检测81例乳腺癌和50例乳腺腺病组织中CD68、CD11c和CD163的表达,将乳腺癌TS中的TAM(M1、M2)进行量化分析,按比率中位数0.8为界,分为高M2/M1表达组和低M2/M1表达组,比较两组的临床病理特征、总生存期(overall survival,OS)的关系。结果81例乳腺癌中导管原位癌15例(15/81,18.5%),浸润性导管癌61例(61/81,75.3%),浸润性小叶癌5例(5/81,6.2%);发病年龄30~84岁,中位年龄62岁。肿瘤体积中位数31.5 cm^(3)(范围2~120 cm^(3))。高M2/M1表达组和低M2/M1表达组在病理分级、AJCC分级方面差异有显著性(P<0.05)。患者中位随访时间35个月(5~45个月),其中13例(13/81,16.0%)死亡,16例(19.8%)复发或转移。Kaplan-Meier生存曲线示高M2/M1表达组乳腺癌患者的OS较低M2/M1表达组低(P<0.001)。结论TS中CD68^(+)TAM和CD163^(+)TAM与乳腺癌的发生、发展及预后密切相关,CD11c^(+)TAM可能提示预后良好。TAM的浸润程度和位置,对于评估患者预后具有重要意义。

动脉粥样硬化大鼠血清IL-1β、IL-6以及冠状动脉巨噬细胞CD68的变化

目的检测动脉粥样硬化(AS)模型大鼠血清中IL-1β、IL-6以及冠状动脉巨噬细胞CD68 mRNA的表达,探讨其在冠状动脉粥样硬化发生、发展中的作用及机制。方法将24只成年SD大鼠普通基础饲料饲喂1 w后,随机分成两组:实验组12只,正常对照组(NC组)12只,各组雌雄各半。实验组按60万单位/kg体重腹腔注射维生素D3后饲以高脂饲料(0.2%甲硫氧嘧啶,0.3%胆酸钠,1%胆固醇,7.5%化猪油,10%蛋黄粉,81%基础饲料),自由进水;NC组饲以普通基础饲料,自由进食进水。饲喂9 w后,大鼠禁食12 h,眼球取血、离心、取血清,全自动生化分析仪检测血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C),ELISA测定IL-1β、IL-6,RT-PCR检测冠状动脉巨噬细胞CD68的变化。结果实验组(TC)、(TG)、(LDL-C)、(HDL-C)含量较对照组升高显著(P<0.01,P<0.05,P<0.01,P<0.05);实验组血清IL-1β、IL-6以及冠状动脉巨噬细胞CD68 mRNA较对照组显著升高(P<0.05,P<0.01,P<0.01)。结论血清IL-1β、IL-6以及冠状动脉巨噬细胞CD68与动脉粥样硬化发生关系密切,可能通过相互诱导、相互协同共同参与动脉粥样硬化发生、发展过程。

乌司他丁对食管癌手术患者CD14^(+)肺泡巨噬细胞及免疫功能的影响

目的:探讨术前静脉输注乌司他丁对食管癌手术患者单肺通气时CD14^(+)肺泡巨噬细胞、局部及全身炎性反应和免疫功能的影响。方法:前瞻性选取南京医科大学附属肿瘤医院2019年10月至2020年8月行胸腔镜下食管癌根治手术患者80例,数字随机表法分为两组:对照组和乌司他丁组各40例。乌司他丁组患者麻醉诱导前静脉输注20 KU乌司他丁,对照组给予生理盐水。检测两组患者术前和术后2 h外周静脉中血白介素-2(IL-2)和免疫细胞,并检测术中单肺通气1 h后非通气侧肺支气管肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid, BALF)中CD14^(+)巨噬细胞、IL-2、免疫细胞。结果:两组患者一般情况比较无差异。术后2 h乌司他丁组患者外周血中IL-2、CD14^(+)单核细胞增高幅度小于对照组,差异有统计学意义(P<0.05),NK细胞、CD4^(+)T细胞、CD8^(+)T细胞及活化的T细胞亚群增高幅度高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。两组患者术前外周血IL-2、CD14^(+)单核细胞及主要免疫细胞亚群差异无统计学意义(P>0.05)。与对照组相比,乌司他丁组患者单肺通气1 h后非通气侧肺BALF中IL-2和CD14^(+)巨噬细胞增高幅度明显小于对照组,差异有统计学意义(P<0.05),而CD4^(+)T细胞、CD8^(+)T细胞高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05),活化的T细胞也高于对照组,差异有统计学意义(P<0.01)。结论:麻醉前给予乌司他丁能减少食管癌术中单肺通气时全身及肺部的炎性反应,保护患者的免疫功能,具有临床应用价值。

3种不同致伤条件下在体肺泡巨噬细胞的CD68和TNF-α表达

目的 探讨不同致伤条件对继发性肺损伤肺泡巨噬细胞CD68和TNF α表达的影响。方法 利用免疫组化方法 ,将两种抗体进行双标染色 ,观察大鼠在创伤、LPS腹腔感染、创伤复合LPS腹腔感染时与正常情况下肺泡巨噬细胞阳性表达情况 ,结合各组死亡率和常规HE染色进行分析。结果 肺泡巨噬细胞CD68和TNF α阳性表达细胞在伤后均明显增加 ,与对照组差异显著 (P <0 0 1) ,各致伤组间也有差异 (P <0 0 1) ,创伤复合LPS腹腔感染组增加最显著 ,LPS腹腔感染组次之 ,创伤组最少。结论 肺泡巨噬细胞CD68和TNF α的表达受致伤因素的影响 ,其表达强度随伤情加重而增强。

CD68^+、CD163^+巨噬细胞对食管癌浸润及预后的影响

目的探讨CD68+、CD163+巨噬细胞对食管癌浸润及预后的影响。方法收集手术切除的食管癌组织标本84例、食管癌旁组织标本49例,采用免疫组化法检测组织标本中CD68+、CD163+巨噬细胞浸润密度,并对患者预后进行分析。结果食管癌组织中CD68+、CD163+巨噬细胞浸润密度每视野(35.69±14.50)个和(29.78±12.36)个,中位数分别为32.8个和27.1个;癌旁正常组织中CD68+、CD163+巨噬细胞浸润密度每视野(4.26±2.30)个和(2.33±1.71)个,中位数分别为3.4个和2.2个。食管癌组织中CD68+、CD163+巨噬细胞浸润密度明显高于癌旁正常组织(P均<0.05)。TNMⅢ期者、有淋巴结转移者、低分化程度者CD68+、CD163+巨噬细胞浸润密度明显高于TNMⅠ~Ⅱ期者、无淋巴结转移者、高中分化程度者(P均<0.05);患者术后1年、3年、5年生存率分别为83%,67%,46%,中位生存时间为44.21个月。Spearman相关分析显示,CD68+、CD163+巨噬细胞浸润密度与患者生存时间呈现负相关性(P<0.05);多因素Cox回归分析TNM分期、淋巴结转移、分化程度、CD163+巨噬细胞浸润密度是影响患者预后的独立危险因素(P均<0.05)。结论食管癌患者局部病灶组织中CD68+、CD163+巨噬细胞浸润密度明显增高,CD163+巨噬细胞浸润密度增高是影响患者预后的独立因素。

肿瘤微环境中不同部位CD68^+巨噬细胞对鼻咽癌进展和预后的影响

目的研究免疫微环境对不同部位巨噬细胞对鼻咽癌(NPC)进展和预后的影响。方法收集在中山大学肿瘤防治中心经病理证实为鼻咽癌的石蜡标本557例。采用免疫组化染色法检测巨噬细胞分子标志物CD68,观察并计数CD68在癌巢和间质不同部位的表达,统计分析其阳性细胞数与临床病理特征及鼻咽癌患者预后的关系。结果 CD68+巨噬细胞在间质中浸润比癌巢中活跃(中位数:4.47/HPF相比1.87/HPF)。KaplanMeier生存曲线和log-rank统计分析结果表明,癌巢中的CD68^+巨噬细胞数量与NPC患者的无瘤生存时间及总体生存时间均显著正相关。间质中的CD68^+巨噬细胞数量与NPC患者的无瘤生存时间及总体生存时间亦显著正相关。单因素Cox比例风险模型显示,癌巢中的CD68^+巨噬细胞浸润较多的患者相比于数量较少的患者发生治疗后转移复发(HR=0.667,P=0.002)及死亡(HR=0.626,P=0.002)的风险较低。间质中的CD68^+巨噬细胞数量较多的患者较数量较少的患者发生治疗后转移复发(HR=0.664,P=0.005)及死亡(HR=0.66,P=0.008)的风险较低。结论免疫微环境中癌巢和间质中CD68^+巨噬细胞浸润数量增多与鼻咽癌患者预后呈正相关,CD68^+巨噬细胞浸润数量增多可降低局部复发和远处转移风险。