盘状红斑狼疮患者T淋巴细胞CD70基因启动子区域甲基化水平的研究

目的研究盘状红斑狼疮(DLE)患者T淋巴细胞CD70 mRNA的表达及CD70基因启动子DNA甲基化的状态,探讨CD70在DLE发病机制中作用。方法将2014年1月至2015年6月的15例活动期、15例非活动期DLE患者和15例正常人对照组外周血中T淋巴细胞的分离以及DNA、RNA提取,然后以定量RT-PCR测定CD4^+细胞和CD8^+细胞中CD70 mRNA转录水平,亚硫酸氢钠基因测序法检测CD4^+细胞和CD8^+细胞CD70基因启动子区域甲基化水平。结果活动期、非活动期和健康对照组DLE患者CD4^+T淋巴细胞中的CD70 mRNA转录水平分别为(0.82±0.21)、(0.61±0.15)和(0.43±0.11),呈逐步递减趋势,且两两比较差异均有显著统计学意义(P<0.01),活动期、非活动期DLE患者和健康对照CD4^+T淋巴细胞CD70基因启动子序列-600^-300 bp区域平均甲基化水平分别为(0.29±0.05)、(0.41±0.03)和(0.59±0.02),呈逐步递增趋势,且两两比较差异均有统计学意义(P<0.01).结论 DLE患者T淋巴细胞中CD4^+细胞CD70基因启动子区域的低甲基化状态可能引起CD70过度表达,这为DLE疾病患者的检测提供又一指标。

盘状红斑狼疮患者T淋巴细胞CD70基因的表达及临床意义

目的检测盘状红斑狼疮(DLE)患者外周T淋巴细胞CD70基因表达水平,并探讨CD70基因在DLE发病机理中的作用。方法 RT-PCR测定2014年1月至2015年6月在我院就诊的15例活动期、15例非活动期DLE患者和同期健康体检的15例健康人(对照组)外周血T淋巴细胞CD70 m RNA转录水平,流式细胞术检测各组样本中CD4+CD70+T/CD8+CD70+T的阳性率。结果活动期和非活动期DLE患者T淋巴细胞中的CD70 m RNA转录水平分别为(4.5±0.19)和(2.9±0.09),显著高于对照组的(1.9±0.11),差异均有显著统计学意义(P<0.01),且活动期DLE患者T淋巴细胞中的CD70 m RNA的转录水平明显高于非活动期DLE患者,差异具有统计学意义(P<0.05);活动期和非活动期DLE患者的外周血CD4+CD70+T淋巴细胞的阳性率分别为(18.82±1.22)%和(15.32±1.01)%,明显高于对照组的(14.63±0.41)%,差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01),且活动期DLE患者的阳性率显著高于非活动期DLE患者,统计有显著统计学意义(P<0.01);活动期和非活动期DLE患者T淋巴细胞中CD8+CD70+的阳性率与对照组比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。结论 CD70基因的过度表达在DLE的发生发展中起着重要的作用,且CD70过度表达可作为检测DLE疾病患者的一个重要指标。

河流型水牛热休克蛋白70(HSP70)基因CDS序列的多态性分析

为了研究河流型水牛HSP70基因CDS序列的多态性,试验首先从摩拉水牛、尼里/拉菲水牛、槟榔江水牛、地中海水牛冷冻精液中抽提基因组DNA,以基因组DNA为模板扩增获得河流型水牛HSP70基因,对其进行基因克隆,测序,序列分析;其次对26头摩拉水牛、43头尼里/拉菲水牛HSP70基因CDS序列进行测序、高分辨率熔解曲线检测分析。结果显示:河流型水牛的HSP70基因CDS序列长度为1927bp,4个品种HSP70基因CDS序列相似度高达99%以上;摩拉、尼里/拉菲种公牛HSP70基因CDS序列存在相同的SNP位点,分别是C602T、A708T、A1284G,并产生不同的基因型。摩拉公牛HSP70基因CDs区602bp位点、尼里/拉菲602bp位点处于Hardy-Weinberg不平衡状态。试验结果说明了HSP70基因在进化上具有高度保守性,但在同一群体中存在多态性。