Qa-1限制性CD8^(+)调节性T细胞参与感染性疾病发病机制的研究进展

小鼠Qa-1与人类白细胞抗原E(HLA-E)同源,属于非经典主要组织相容性复合体Ⅰb(MHCⅠb)类分子,可提呈自身或外源性抗原肽与T细胞受体(TCR)和自然杀伤细胞2组成员A(或C)(NKG2A/C)两类不同受体相互作用,从而在免疫应答和免疫调节中发挥重要作用。其中,Qa-1限制性CD8^(+)调节性T细胞(CD8^(+)Treg)是目前研究较为深入的CD8^(+)Treg亚群之一,可通过发挥免疫抑制作用维持机体免疫稳态和自身免疫耐受,与肿瘤、感染、自身免疫性疾病及移植排斥等多种临床疾病的发生发展密切相关。本文就Qa-1限制性CD8^(+)Treg的表型特征、功能效应、调控机制及其参与感染性疾病发病机制的最新研究进展作一综述。

外周血CD4^(+)CD25^(+)、CD8^(+)CD28^(+)调节性T细胞水平对早期宫颈癌患者腹腔镜根治术后预后的预测价值

目的分析外周血CD4^(+)CD25^(+)、CD8^(+)CD28^(+)调节性T细胞水平对早期宫颈癌(CC)患者腹腔镜根治术后预后的预测价值。方法招募2018年9月至2020年9月于儋州市人民医院接受腹腔镜根治术治疗的早期CC患者204例,根据患者术后随访期间预后情况分为预后不良组(43例)和预后良好组(161例)。比较两组临床资料。采用Spearman秩相关分析外周血CD4^(+)CD25^(+)调节性T细胞水平与CD8^(+)CD28^(+)调节性T细胞水平的相关性。采用多因素logistic回归分析早期CC患者腹腔镜根治术后预后不良的影响因素。采用受试者工作特征(ROC)曲线评估外周血CD4^(+)CD25^(+)、CD8^(+)CD28^(+)调节性T细胞水平对早期CC患者腹腔镜根治术后预后不良的预测价值。结果预后不良组CD4^(+)CD25^(+)调节性T细胞、癌胚抗原(CEA)、糖类抗原125(CA125)水平,术后切缘阳性占比以及术中宫旁浸润占比高于预后良好组,CD8^(+)CD28^(+)调节性T细胞水平低于预后良好组,差异有统计学意义(P<0.05)。Spearman秩相关分析结果显示,早期CC患者外周血CD4^(+)CD25^(+)调节性T细胞水平与CD8^(+)CD28^(+)调节性T细胞水平呈负相关(r_(s)=-0.478,P<0.05)。多因素logistic回归分析结果显示,较高的CEA、CA125、CD4^(+)CD25^(+)调节性T细胞水平是促进早期CC患者腹腔镜根治术后预后不良发生的独立危险因素(P<0.05),较高的CD8^(+)CD28^(+)调节性T细胞水平是抑制早期CC患者腹腔镜根治术后预后不良发生的独立保护因素(P<0.05)。ROC曲线分析结果显示,外周血CD4^(+)CD25^(+)、CD8^(+)CD28^(+)调节性T细胞水平能有效预测早期CC患者腹腔镜根治术后预后不良(P<0.05),两项指标联合可进一步提高预测效能[AUC(95%CI)=0.939(0.898~0.979),P<0.001],灵敏度和特异度分别为86.00%、88.20%。结论外周血CD4^(+)CD25^(+)、CD8^(+)CD28^(+)调节性T细胞水平与早期CC患者腹腔镜根治术后预后不良有关,二者能有效预测早期CC患者腹腔镜根治术后预后不良。

RhoA、CD4^(+)CD25^(+)调节性T细胞、MYBL2在胃癌患者中的表达及对预后和生存时间的影响

目的:探讨RhoA、CD4^(+)CD25^(+)调节性T细胞、成髓细胞瘤转录因子第2亚型(MYBL2)在胃癌患者中的表达及对预后和生存时间的影响。方法:选取2017年1月至2019年1月于本院就诊的134例胃癌患者术后癌组织标本作为研究对象,另选取其中62例胃癌患者相应的癌旁组织标本及40例同期非胃癌患者正常胃黏膜组织标本进行对照,检测癌组织、癌旁组织、正常胃黏膜组织中RhoA、CD4^(+)CD25^(+)调节性T细胞、MYBL2的表达情况,分析其对胃癌预后及生存时间的影响。结果:RhoA,CD4^(+)CD25^(+)调节性T细胞、MYBL2在癌组织中的阳性率均明显高于癌旁组织和正常胃黏膜组织(P<0.05)。胃癌患者术后平均生存时间为(28.61±1.34)个月,其中RhoA、CD4^(+)CD25^(+)调节性T细胞、MYBL2阳性患者的生存时间均短于阴性患者(P<0.05)。RhoA(+)、CD4^(+)CD25^(+)调节性T细胞(+)、MYBL2(+)是胃癌患者预后的危险因素(P<0.05)。结论:检测RhoA,CD4^(+)CD25^(+)调节性T细胞、MYBL2的表达可作为胃癌病情严重程度、预后及生存时间评估的重要补充手段。

LAG3对多房棘球蚴感染小鼠模型CD8^(+)T细胞免疫功能调节作用的研究

目的研究淋巴细胞激活基因3(Lymphocyte activation gene 3,LAG3)对多房棘球蚴慢性感染小鼠CD8^(+)T细胞免疫功能的调节作用。方法取C57BL/6野生型(Wild-type,WT)和LAG3缺陷型(Knock-out,KO)小鼠各10只,每只小鼠经肝门静脉接种3000个多房棘球蚴原头节建立多房棘球蚴感染模型。感染12周后,分别取两组小鼠肝脏和脾脏组织,采用苏木精-伊红(Hematoxylin-eosin,HE)染色观察肝脏病灶周围炎性细胞浸润和病理表现,通过免疫组织化学观察肝脏病灶周围“炎症微环境”与脾脏中CD8^(+)T的比例。收集两组小鼠肝脏与脾脏淋巴细胞,采用流式细胞术筛选不同CD8^(+)T细胞亚群,检测CD8^(+)T细胞、效应记忆CD8^(+)T细胞(Effector memory CD8^(+)T cell,CD8^(+)Tem)、中心记忆CD8^(+)T细胞(Central memory CD8^(+)T cell,CD8^(+)Tcm)、初始CD8^(+)T细胞(Naive CD8^(+)T cell,CD8^(+)Tn)比例与绝对数,以及分泌细胞因子γ干扰素(IFN-γ)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素10(IL-10)和白细胞介素17A(IL-17A)的比例。通过多房棘球蚴虫体蛋白体外刺激两组小鼠肝脏淋巴细胞,采用流式细胞术检测CD8^(+)T细胞分泌细胞因子IFN-γ、IL-10和IL-17A的比例。结果HE染色结果显示,与野生型小鼠比较,LAG3缺陷型小鼠肝脏形成的炎性病灶数量增多,差异有统计学意义(P<0.05)。免疫组织化学结果显示,与野生型小鼠比较,LAG3缺陷型小鼠肝脏病灶周围CD8^(+)T细胞募集升高,差异有统计学意义(P<0.05);LAG3缺陷型小鼠脾脏CD8^(+)T细胞募集有降低的趋势,差异无统计学意义(P>0.05)。流式细胞术结果显示,与野生型小鼠比较,LAG3缺陷型小鼠肝脏效应记忆型CD8^(+)T细胞比例有升高的趋势,差异无统计学意义(P>0.05);脾脏CD8^(+)T细胞比例降低,脾脏CD8^(+)Tem表型比例升高,差异均有统计学意义(P<0.01)。LAG3缺陷型小鼠肝脏和脾脏CD8^(+)T细胞分泌TNF-α和IL-10能力均增强,差异均有统计学意义(P<0.05)。多房棘球蚴的虫体蛋白体外刺激肝脏淋巴细胞实验结果显示,与野生型小鼠比较,LAG3缺陷型小鼠CD8^(+)T细胞分泌IFN-γ、IL-10比例升高,差异均有统计学意义(P<0.05);LAG3缺陷型小鼠CD8^(+)T细胞分泌IL-17A的能力有升高趋势(P>0.05)。结论在小鼠多房棘球蚴慢性感染中,LAG3可抑制肝脏和脾脏CD8^(+)T细胞免疫应答能力,调节炎症反应。

CD8^+调节性T细胞亚群在系统性红斑狼疮患者外周血中分布的初步研究

目的:研究系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血CD8+CD28-调节性T细胞和CD8+CD28+效应性T细胞的比例,以及CD8+CD28-/CD8+CD28+细胞间的比值及其临床意义。方法:对37例SLE患者及15例健康对照新鲜外周全血以双抗体标记流式细胞术测定CD8+CD28-、CD8+CD28+T细胞亚群比例,计算CD8+CD28-/CD8+CD28+细胞间比值,并分析以上数据与SLE活动度、SLE活动性评分(SLEDAI)、免疫球蛋白增高或补体下降或肾损害的关系,观察激素治疗对以上数据变化的影响。结果:(1)稳定期SLE患者外周血CD8+CD28-T细胞群比例较正常对照及活动性SLE显著升高,而高活动性SLE患者CD8+CD28+T细胞群比例显著降低,同时CD8+CD28-/CD8+CD28+细胞间比值显著升高;(2)SLEDAI与CD8+CD28+T细胞亚群比例存在负相关(P<0.05),与CD8+CD28-/CD8+CD28+细胞间比值存在正相关(P<0.05);(3)SLE患者中补体水平降低者较补体水平正常者、有肾损害者较未发生肾损害者CD8+CD28-/CD8+CD28+细胞间比值显著升高;(4)对10例活动性SLE患者进行追踪,经激素治疗达到稳定期后,其CD8+T细胞、CD8+CD28-T细胞比例及CD8+CD28+T细胞比例均显著增高。结论:SLE患者体内免疫系统紊乱可表现在CD8+T细胞亚群比例改变上,其中CD8+CD28+T细胞群比例以及CD8+CD28-/CD8+CD28+细胞间比值改变可能反映了细胞免疫功能的紊乱,而CD8+CD28-调节性T细胞比例增高与病情活动的控制有关;CD8+CD28-/CD8+CD28+比值与病情活动性和补体异常及肾损害相关,可以作为病情监测的指标。

MOG诱导的实验性自身免疫性脑脊髓炎小鼠中枢及外周神经系统CD4^+ T及CD8^+ T调节性细胞变化

目的：观察实验性自身免疫性脑脊髓炎小鼠中枢及外周CD4^＋CD25^＋调节性T细胞（CD4^＋CD25^＋Treg），CD8^＋CD28^-调节性T细胞（CD8^＋CD28^-Treg）表达的变化情况，并探讨相关的细胞免疫学机制。方法：雌性C57BL／6小鼠随机分为未使用髓鞘少突胶质细胞糖蛋白35—55（MEVGWYR-SPFSRVVHLYRNGK）（MOG35-55）免疫的对照组和使用MOG35-55免疫诱导的EAE小鼠模型组，采用临床症状评分记录小鼠行为学变化、HE染色观察CNS炎症细胞浸润及病理改变，使用流式细胞术（FCM）检测小鼠中枢及外周CD8^＋CD28^-Treg，CD4^＋CD25^＋Treg细胞表达水平。结果：MOG35-55诱导的EAE模型组动物出现典型的EAE临床行为学及病理学表现，FCM检测EAE模型组小鼠脾细胞CD4^＋CD25^＋Treg较对照组升高但无统计学差异，CD8^＋CD28^-Treg表达水平明显低于对照组（P〈0．01），EAE模型组中枢有CD4^＋CD25^＋Treg，CD8^＋CD28^-Treg淋巴细胞的浸润，且CD4^＋CD25^＋Treg，CD8^＋CD28^-Treg在中枢的表达均高于外周，对照组中枢神经系统未检测到淋巴细胞浸润。结论：CD4^＋CD25^＋Treg，CD8^＋CD28^-Treg均参与调控EAE的病理过程，CD4^＋CD25^＋Treg，CD8^＋CD28^-Treg在EAE小鼠中枢及外周分布及变化的不同，提示其进人中枢神经系统（CNS）并参与调节中枢局部炎症。

自身免疫性疾病患者外周血CD8^+调节性T细胞的表达及临床意义

目的研究自身免疫性疾病(AID)患者外周血CD8+调节性T细胞的表达及其临床意义。方法对53例系统性红斑狼疮(SLE)患者和55例类风湿性关节炎(RA)患者及38例健康者(对照组)外周血以双抗体标记流式细胞术测定CD8+CD28-和CD8+CD28+T细胞亚群比例及CD8+CD28-/CD8+CD28+细胞间比值,分析检测数据与疾病活动变化的关系。结果 SLE患者稳定期CD8+CD28-T细胞亚群比例较活动期及对照组显著升高,差异有统计学意义(P<0.05);活动期CD8+CD28+T细胞亚群比例较稳定期和对照组显著降低,差异有统计学意义(P<0.05),CD8+CD28-/CD8+CD28+细胞间比值较稳定期和对照组显著升高,差异有统计学意义(P<0.05)。SLE活动性指数评分(SLEDAI)与CD8+CD28+T细胞亚群比例负相关(P=0.001,r=-0.56),与CD8+CD28-/CD8+CD28+比值正相关(P=0.002,r=0.51)。RA患者稳定期CD8+CD28-T细胞较活动期和对照组增高,差异有统计学意义(P<0.05),CD8+CD28+T细胞及CD8+CD28-/CD8+CD28+比值RA活动期和稳定期患者与对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论 AID患者存在CD8+T细胞亚群比例的改变,反映机体细胞免疫功能紊乱。

CD_8^+CD_(28)^-调节性T细胞在上呼吸道感染后长期咳嗽发病机制的作用

目的探索CD+8CD-28调节性T细胞在上呼吸道感染(URI)后长期咳嗽发病中的作用。方法将62例长期咳嗽患者分为轻中重3组,分别检测肺功能、外周血及痰液中嗜酸粒细胞(EOS)比例和CD+8CD-28T细胞含量及其细胞因子表达;同期选取22例健康体检者作为对照组。结果长期咳嗽患者肺功能呈不同程度受损,以重度咳嗽者明显。长期咳嗽患者的外周血及痰液中EOS比例、CD+8CD-28T细胞含量均显著高于健康对照组;其中重度咳嗽组EOS比例、CD+8CD-28T细胞含量显著高于轻、中度咳嗽组[EOS比例:外周血(4.86±2.79)%比(3.81±2.16)%、(4.32±2.27)%,痰液(19.38±7.89)%比(9.29±4.92)%、(13.21±5.86)%;CD+8CD-28T细胞含量:外周血(21.92±5.91)%比(12.98±4.74)%、(16.27±5.01)%,痰液(9.02±3.26)%比(3.84±1.06)%、(5.92±2.17)%,均P<0.05]。长期咳嗽患者CD+8CD-28T细胞上清液中细胞因子白细胞介素-10(IL-10)、转化生长因子-β1(TGF-β1)、叉头翼状螺旋转录因子(Foxp3)的mRNA表达均明显高于健康对照组,且随培养时间延长呈逐渐升高趋势,其中仍以重度咳嗽组最高。肺功能、EOS、CD+8CD-28T细胞及其细胞因子间均呈显著相关性。结论继发于URI的长期咳嗽患者存在气道高反应性,CD+8CD-28T细胞及其细胞因子可能参与该过程。

CD4^+CD25^+调节性T细胞与CD4^+T、CD8^+T细胞在结直肠癌组织中的分布

目的分析CD4+CD25+FOXP3+调节性T细胞(Treg)与CD4+T、CD8+T在结直肠癌(colorectal carcinoma,CRC)组织中的分布及其与临床病理特征之间的关系。方法收集42例CRC新鲜手术标本,应用冰冻切片、免疫组织化学SP法检测肿瘤组织和癌旁组织中FOXP3+、CD4+T和CD8+T阳性细胞数。结果 CRC患者肿瘤组织中FOXP3表达水平显著升高,与癌旁组织相比差异有统计学意义(P<0.01);中低分化组Treg细胞数明显高于高分化组(P<0.01);淋巴结转移组Treg细胞数明显高于无淋巴结转移组(P<0.05);癌巢内CD4+、CD8+T细胞数及CD4+/CD8+值显著低于间质(P<0.01);Ⅲ+Ⅳ期、淋巴结转移组癌巢内CD4+/CD8+比值显著低于Ⅰ+Ⅱ期及无淋巴结转移组(P<0.05);CRC中Treg数量与癌巢内CD4+/CD8+比值显著负相关(r=-0.605,P<0.01)。结论 CRC的发生发展可能与其癌组织局部微环境中Treg数量变化相关,肿瘤局部Treg数量的增多与T淋巴细胞亚群比例失调可能成为肿瘤免疫逃逸的机制之一。

他克莫司与环孢菌素A对肝移植受者CD8^+ CD28^-调节性T细胞的不同调节特性

目的探讨他克莫司(FK506)与环孢菌素A(CsA)对肝移植受者CD8+ CD28-调节性T细胞(Treg)及细胞因子IL-10的调节效应。方法采用荧光标记单克隆抗体结合流式细胞技术分析接受FK506或CsA治疗的肝移植受者外周血CD8+ T细胞及共刺激分子CD28的表达情况,采用流式细胞小球微阵列术(CBA)分析血浆中IL-10浓度。以健康志愿者和患终末期肝脏疾病拟进行肝移植者作为对照。结果疾病对照组CD8+ T细胞和CD8+ CD28- T细胞/CD8+ CD28+ T细胞比值(Ratio值)显著低于健康对照组(P<0.05)。FK506治疗组CD8+ T细胞表达显著回升(P<0.05),且增加的CD8+ T细胞主要为CD8+ CD28- Treg(P<0.05)。CsA治疗组CD8+ T细胞和CD8+ CD28- Treg未出现明显回升(P>0.05)。且FK506治疗组CD8+ CD28- Treg表达显著高于CsA治疗组(P<0.05)。两治疗组血浆IL-10水平均显著高于健康对照组和疾病对照组(P<0.05),但组间差别无显著性(P>0.05)。结论FK506可促进肝移植受者外周血CD8+ CD28- Treg表达并同时促进IL-10的产生从而加强T细胞的免疫耐受,而CsA虽不能有效促进CD8+ CD28- Treg的表达但却能促进IL-10的产生。

支气管哮喘患者外周血CD4^+、CD8^+T细胞、CD4^+CD25^+调节性T细胞表达水平与肺功能的相关性研究

目的探讨支气管哮喘患者外周血CD4~^+、CD8^+T细胞、CD4^+CD25^+调节性T细胞表达水平与肺功能的关系。方法收集2012年3月~2015年6月北京市房山区中医医院呼吸科收治的支气管哮喘患者106例,其中急性发作(急性发作组)患者59例,非急性发作(非急性发作组)患者47例,同时以72例健康者作为对照组。对所有入组研究对象进行肺活量(VC),一秒用力呼气容积占用力肺活量的百分比(FEV1/FVC%)及呼气流量峰值(PEF)检查,采用流式细胞仪检测外周血CD4^+、CD8^+T细胞及CD4^+CD25^+调节性T细胞水平,并对急性发作期患者CD4^+、CD8^+T细胞、CD4^+CD25^+Treg水平与肺功能的相关性进行分析。结果 1非急性发作组及急性发作组的肺功能指标与对照组比较均显著降低(P<0.05);与非急性发作组比较,急性发作组患者肺功能指标均明显偏低(P<0.05)。2非急性发作组及急性发作组患者CD4^+T细胞水平、CD4^+CD25^+Treg水平及CD4^+/CD8^+比值明显低于对照组,CD8^+T细胞水平、CD4^+CD25^+Treg/CD4^+比值显著高于对照组(P<0.05);与非急性发作组比较,急性发作组CD4^+T细胞水平、CD4^+CD25^+Treg水平及CD4^+/CD8^+比值显著下降,CD8^+T细胞水平、CD4^+CD25^+Treg/CD4^+比值显著上升(P<0.05)。3急性发作期患者外周血CD4^+T细胞水平与肺功能指标均呈正相关(r=0.47、0.50、0.45,P<0.05);CD8^+T细胞水平与肺功能指标均呈负相关(r=-0.54、-0.49、-0.56,P<0.05);CD4^+CD25^+Treg水平与肺功能指标均呈正相关(r=0.39、0.42、0.40,P<0.05)。结论 CD4^+、CD8^+T细胞及CD4^+CD25^+调节性T细胞在支气管哮喘疾病的发生、发展过程中发挥着重要作用,其水平可用来评估支气管哮喘病情的严重程度。

颅内动脉瘤破裂与CD8^+CD28^-调节性T细胞的关系

目的探讨CD8+CD28-调节性T细胞在颅内动脉瘤发生破裂中所起的作用。方法收集确诊未破裂动脉瘤患者20例,破裂者17例,采用流式细胞术检测其外周血CD8+CD28-调节性T细胞的百分含量;并选择16例正常人及12例脑胶质瘤患者作为对照。对未破裂的患者进行为期2年随访,观察CD8+CD28-T细胞的变化情况。结果健康对照组的CD8+CD28-T细胞含量为27.82%±3.59%,胶质瘤患者的含量为23.71%±8.21%,未破裂动脉瘤患者为13.87%±4.17%,而破裂者为6.93%±2.08%。破裂患者的CD8+CD28-T细胞水平显著低于未破裂者(t=-1.865,P=0.041),且两组动脉瘤患者均低于正常人(均为P<0.01),但胶质瘤患者与正常人与无统计学差异(P=0.117);经过2年随访,共有5例患者失访,在余下的15例患者当中有3例发生破裂(分别在第16、18及22个月发生破裂),此3例患者第1年末的CD8+CD28-T细胞含量已明显低于随访前(P<0.05),且发生破裂后该细胞的含量显著低于第一年末(P<0.05)。结论 CD8+CD28-调节性T细胞减少可能与动脉瘤发生破裂相关。

CD4^+CD25^+和CD8^+调节性T细胞的作用机制

调节性T细胞(Treg)主要在机体免疫系统中发挥负向调节作用,既能抑制不恰当的免疫反应,又能限定免疫应答的范围、程度及作用时间,对CD4+和CD8+效应性T淋巴细胞的增殖起抑制作用,因此在移植物抗宿主病、自身免疫病、过敏性疾病等的发病机制和临床治疗中有潜在的应用价值。本文重点介绍CD4+CD25+Treg和CD8+Treg的作用机制,并简述调节性T细胞研究面临的挑战与展望。

多发性骨髓瘤患者外周血CD4^+ CD25^+和CD8^+ CD28^-调节性T细胞研究

目的:探讨CD4+CD25+和CD8+CD28-调节性T细胞(Tregs)在多发性骨髓瘤(MM)患者外周血中的变化及意义。方法:采用流式细胞术检测38例MM患者及20例健康对照外周血CD4+CD25+和CD8+CD28-Tregs水平。分别采用溴甲酚绿法、透射免疫比浊法测定患者血清白蛋白(Alb)、β2-微球蛋白(β2-MG)。结果:初诊MM患者外周血CD4+CD25+/high、CD4+CD25highCD127low及CD8+CD28-Tregs比率均明显升高;CD4+CD25+/high和CD4+CD25highCD127lowTregs比率在各临床分期均较对照组升高,随分期增高呈现增加趋势,且CD4+CD25high和CD4+CD25highCD127lowTregs在Ⅲ期患者显著高于Ⅰ期患者;CD8+CD28-Tregs在Ⅱ、Ⅲ期显著高于正常对照,且Ⅱ期高于Ⅰ期,Ⅲ期高于Ⅱ期,逐期递增,而在Ⅰ期与对照组比较无显著差异;CD4+CD25+/high和CD4+CD25highCD127lowTregs比率在进展期和稳定期均较对照组升高,但两期之间比较无明显差异,而CD8+CD28-Tregs在进展期高于稳定期及对照组,稳定期和对照组间比较无明显差异;CD4+CD25highTregs和CD4+CD25highCD127lowTregs比率与Alb水平均呈负相关。结论:MM患者体内存在CD4+CD25+Tregs和CD8+CD28-Tregs异常增加,可能是MM免疫逃逸的一个重要机制,这些变化同临床分期、病情进展及预后存在一定程度相关性。

大鼠原位肺移植后CD8^+调节性T细胞的变化

目的:研究大鼠原位肺移植后体内CD8+调节性T细胞(CD8+Treg)的分布及动态变化规律。方法:以cuff技术构建原位左肺移植的Wistar→Lewis大鼠同种肺移植模型20只、Lewis→Lewis同基因移植模型5只以及假手术模型5只,分别在术后不同时间点处死大鼠,切除移植物或者对照肺组织行常规病理学检查,以离心法、研磨法以及裂解法分别获取血液、脾脏、肺门淋巴结以及移植肺内的淋巴细胞,行流式细胞学检查。结果:同种移植组肺内可以见到典型的急性排斥反应。大鼠的血液和组织内检测到了CD8+CD45RC-Treg。同基因移植组肺组织及淋巴结内CD8+CD45RC-Treg/CD3+和CD8+CD45RC-Treg/CD8+分别为(15.88±2.72)%、(13.88±2.81)%和(30.68±5.25)%、(31.43±4.56)%,高于同种移植组(11.27±3.06)%、(9.89±1.86)%和(18.04±4.65)%、(18.89±4.79)%(t=2.518、2.648和4.030、4.240,P均<0.05)。结论:原位肺移植后肺组织及淋巴结内出现CD8+CD45RC-Treg的聚集,排斥反应发生后其在肺内的数量减少。

RA患者外周血CD8^+CD28^-和CD4^+CD25^+调节性T细胞的表达及疾病活动性指标相关性分析

目的:检测类风湿性关节炎(RA)患者外周血CD8+CD28-、CD4+CD25+调节性T细胞亚群,探讨其与临床活动性指标的关系。方法:采用流式细胞术检测台州医院RA患者外周血CD8+CD28-、CD4+CD25+ T细胞亚群比例,探讨调节性T细胞与RA活动性、类风湿因子(RF)、免疫球蛋白(Ig)、C反应蛋白(CRP)、补体C3、抗CCP抗体、抗核抗体(ANA)、血小板(PLT)及血沉(ESR)的关系。结果:活动期RA患者外周血CD4+CD25+调节性T细胞亚群比例显著低于正常对照组(P<0.01),但稳定期RA患者与正常对照组结果差异无统计学意义(P>0.05)。活动期和稳定期RA患者CD8+CD28-与正常对照组相比较,结果无统计学意义(P>0.05);CD4+CD25+与CRP密切相关(r=-0.593,P<0.05),CD8+CD28-与ESR相关系数呈弱相关。CD4+CD25+和CD8+CD28-细胞与RF、IGG、C3、ANA、anti-CCP和PLT未见明显相关性。结论:活动期RA患者外周血CD4+CD25+ T细胞亚群比例减少,CD4+CD25+ T细胞可能与类风湿性关节炎疾病进展有关。

CD8^+调节性T细胞与器官移植

调节性T细胞（regulatory T cells，Treg）在维持机体免疫平衡方面发挥关键作用，对于器官移植术后诱导治疗和维持免疫耐受具有重要意义。

非小细胞肺癌患者外周血单个核细胞中CD8^+T细胞、调节性T细胞、自然杀伤细胞水平及其对化疗疗效及预后影响

目的探讨非小细胞肺癌患者外周血单个核细胞中CD8+T细胞、调节性T细胞、自然杀伤细胞水平,分析其对非小细胞肺癌患者化疗疗效及预后的影响。方法选取自2017年1月至2018年4月唐山市人民医院收治的60例非小细胞肺癌患者为观察组,并根据患者治疗后临床疗效分为缓解组(n=33)与未缓解组(n=27);选取同期进行体检的50例健康者为健康组。观察组分别于治疗前、后检测外周血单个核细胞中CD8+T细胞、调节性T细胞、自然杀伤细胞水平;健康组体检当天检测上述指标。记录并比较健康组与观察组治疗前的上述指标。治疗后,评估观察组患者临床疗效,并比较不同疗效患者CD8+T细胞、调节性T细胞、自然杀伤细胞水平,分析其对临床疗效影响;分析CD8+T细胞、调节性T细胞、自然杀伤细胞水平对患者预后的影响。结果观察组治疗前CD8+T细胞、调节性T细胞、自然杀伤细胞水平均高于健康组,差异有统计学意义(P<0.05)。未缓解组患者CD8+T细胞、调节性T细胞、自然杀伤细胞水平明显高于缓解组,差异有统计学意义(P<0.05)。CD8+T细胞、调节性T细胞、自然杀伤细胞水平是影响非小细胞肺癌患者临床疗效的独立危险因素(P<0.05)。绘制对数生存曲线显示,CD8+T细胞、调节性T细胞、自然杀伤细胞高表达患者存活率低于低表达患者,差异有统计学意义(P<0.05)。结论非小细胞肺癌患者CD8+T细胞、调节性T细胞、自然杀伤细胞水平较健康者明显增高,CD8+T细胞、调节性T细胞、自然杀伤细胞水平是影响患者临床疗效的独立危险因素。

CD4^+CD25^+CCR6^+调节性T细胞在小鼠乳腺癌模型中对CD8^+T细胞的抑制作用

目的:观察CD4+CD25+CCR6+调节性T细胞(简称CCR6+Tregs)体内对CD8+T细胞功能的抑制作用,并探讨其与肿瘤免疫逃逸的关系。方法:建立4T1乳腺癌细胞荷瘤裸鼠模型,FACS分选CCR6+Tregs,检测其Foxp3的表达;FACS分选4T1特异性CD8+T细胞,CFSE标记后分别与CCR6+Tregs或CCR6-Tregs共同过继转输入4T1荷瘤裸鼠体内,观察荷瘤裸鼠肿瘤生长情况和小鼠存活时间;FACS检测肿瘤组织中CD8+T细胞的增殖、细胞因子IFN-γ的产生和颗粒酶B的表达情况。结果:CCR6+Tregs和CCR6-Tregs均高表达Foxp3;CCR6+Tregs和CD8+T细胞共转输组4T1荷瘤裸鼠肿瘤的生长明显快于CCR6-Tregs共转输组和CD8+T细胞单转输组,同时该组荷瘤裸鼠生存时间也明显缩短(P<0.05);CCR6+Tregs和CD8+T细胞共转输组CD8+T细胞的增殖、IFN-γ的产生和颗粒酶B的表达均明显低于CCR6-Tregs共转输组和CD8+T细胞单转输组(P<0.05)。结论:CCR6+Tregs在体内可以有效抑制CD8+T细胞的功能,其在肿瘤免疫逃逸和肿瘤发生、发展中发挥重要作用。

CD8^+调节性T细胞诱导移植免疫耐受的研究进展

免疫耐受是器官移植临床研究的终极目标,是改善移植患者预后生存的关键。调节性T细胞(regulatory T cells,Tregs)在诱导免疫耐受过程中发挥着重要作用,如何诱导供体产生特异性Tregs是诱导免疫耐受突破的关键。尽管近20年来已经证实CD8^+Tregs在移植诱导免疫耐受中发挥重要的作用,但其特性仍然存在很大的争议。本文拟对CD8^+Tregs移植免疫耐受研究进展作一综述,探讨其在诱导肝移植免疫耐受中的潜力。