炎症性肠病患者肠道菌群特点及其与CD8^(+)CD28^(+)/CD8^(+)CD28^(-)T细胞免疫的相关性分析

目的探讨炎症性肠病(inflammatory bowel disease,IBD)患者肠道菌群特点及其与CD8^(+)CD28^(+)/CD8^(+)CD28^(-)T细胞免疫的相关性。方法选取2021年6月至2023年6月山西白求恩医院医院IBD患者83例,根据疾病类型分为溃疡性结肠炎组(UC组、51例)和克罗恩病组(CD组、32例),另选取同期体检健康成人为对照组(45名)。收集3组基本资料和临床资料,比较3组粪便菌群特点、外周血CD8^(+)CD28^(+)、CD8^(+)CD28^(-)T细胞水平和炎症因子水平,采用Pearson相关分析粪便菌群数量与CD8^(+)CD28^(+)和CD8^(+)CD28^(-)T细胞水平的相关性。结果83例IBD患者中男55例、女28例,年龄20~58岁,平均(39.9±9.2)岁;45名对照组中男26例、女19例,平均(39.7±9.3)岁。3组一般资料的比较,差异无统计学意义(P>0.05)。与对照组相比,UC组和CD组肠道菌群中大肠埃希菌、肠杆菌、酵母菌、拟杆菌、肠球菌群数量较高,消化球菌、乳酸杆菌、双歧杆菌、真杆菌菌群数量较低,差异均有统计学意义(P<0.05)。与对照组相比,UC组和CD组CD8^(+)CD28^(+)T细胞水平和CD8^(+)CD28^(+)/CD8^(+)CD28^(-)较低,CD8^(+)CD28^(-)T细胞水平较高,差异均有统计学意义(P<0.05)。CD8^(+)CD28^(+)/CD8^(+)CD28^(-)T与肠杆菌、酵母菌、拟杆菌呈负相关(r=-0.416、-0.344、-0.471,均P<0.05),与乳酸杆菌、双歧杆菌呈正相关(r=0.354、0.481,均P<0.05)。结论IBD患者肠道菌群数量异常改变,且存在CD8^(+)CD28^(+)/CD8^(+)CD28^(-)T细胞免疫失调,体内炎症反应增强。IBD患者的肠道菌群如肠杆菌、酵母菌、拟杆菌、乳酸杆菌、双歧杆菌数量与CD8^(+)CD28^(+)和CD8^(+)CD28^(-)T细胞水平存在相关性。

CD8^(+)CD28^(-)T细胞对单倍型造血干细胞移植后急性移植物抗宿主病的影响

目的:探讨CD8^(+)CD28^(-)T细胞对单倍型造血干细胞移植(haplo-HSCT)后急性移植物抗宿主病(aGVHD)的影响。方法:回顾性分析60例行haplo-HSCT的血液病患者移植后CD8^(+)CD28^(-)T细胞绝对计数与aGVHD的关系,并比较不同CD8^(+)CD28^(-)T细胞绝对计数组间慢性移植物抗宿主病(cGVHD)、感染及预后的差异。结果:60例行haplo-HSCT患者中有40例发生aGVHD,发生率为66.67%,中位发生时间为32.5(20-100)天。Haplo-HSCT后30天,aGVHD组CD8^(+)CD28^(-)T细胞绝对计数显著低于无aGVHD组(P=0.03)。ROC曲线表明移植后30天CD8^(+)CD28^(-)T细胞绝对计数在一定程度上可预测aGVHD的易感性。移植后30天低细胞计数组(CD8^(+)CD28^(-)T细胞绝对计数<0.06/μl)患者的aGVHD发生率显著高于高细胞计数组(CD8^(+)CD28^(-)T细胞绝对计数≥0.06/μl,P=0.011)。多因素Cox回归分析进一步验证了移植后30天CD8^(+)CD28^(-)T细胞绝对计数是aGVHD发生的独立风险因素,低细胞计数组aGVHD的发生风险是高细胞计数组的2.222倍(P=0.015)。不同CD8^(+)CD28^(-)T细胞绝对计数组间cGVHD、真菌感染、EB病毒感染、巨细胞病毒感染的发生无统计学差异。不同CD8^(+)CD28^(-)T细胞绝对计数组的总生存率、非复发相关死亡率、复发率没有显示出明显的统计学差异。结论:行haplo-HSCT后30天CD8^(+)CD28^(-)T细胞延迟重建的患者更易发生aGVHD,并且CD8^(+)CD28^(-)T细胞绝对计数在一定程度上可预测其易感性。单倍型造血干细胞移植后CD8^(+)CD28^(-)T细胞绝对计数与cGVHD、真菌感染、EB病毒感染、巨细胞病毒感染无关,且与移植后的生存预后无显著相关。

CD4^(+)CD8^(-)T细胞大颗粒淋巴细胞白血病的临床分析

目的:探讨CD4^(+)CD8^(-)T细胞大颗粒淋巴细胞白血病(T-LGLL)患者的临床特征及诊疗方案。方法:报告1例CD4^(+)CD8^(-)T-LGLL患者的临床表现、诊断及治疗情况,并结合文献进行回顾性分析。结果:患者为老年女性(70岁),临床进展缓慢,以血小板减少为主要表现,骨髓增生较低下,血涂片以大颗粒淋巴细胞为主,免疫分型及T细胞克隆重排符合T-LGLL应用环磷酰胺50 mg/d联合泼尼松(后逐渐减停)治疗,达到部分缓解(PR)。结论:CD4^(+)CD8^(-)T细胞大颗粒淋巴细胞白血病临床上极为罕见,与CD4^(-)CD8^(+)T-LGLL临床表现存在差异。

骨髓间充质干细胞通过上调CD8^+CD28^-T细胞抑制T细胞的增殖

本研究旨在探讨CD8+ CD2 8- T细胞在间充质干细胞 (MSC)抑制T细胞增殖中的作用。应用尼龙毛柱分离T淋巴细胞 ,再经CD8磁珠分选出CD8+ T淋巴细胞 ;用植物血凝素 (PHA)刺激与或未与MSC共培养 3天的CD8+ T细胞 ,应用MTT法测定T细胞的增殖 ;应用流式细胞术分别检测与或未与MSC共培养 8天的CD8+ T细胞亚群的变化及用PHA刺激与或未与MSC共培养 3天的CD8+ T细胞亚群的变化。结果表明 ,MSC抑制PHA刺激引起的CD8+ T细胞的增殖 ,且这种抑制作用是剂量依赖性的 ;流式细胞术结果显示 ,与未经MSC处理的CD8+ T细胞相比 ,MSC显著上调共培养 8天的CD8+ T细胞中的CD8+ CD2 8- 亚群 ,及经PHA作用 72小时后的CD8+ T细胞中的CD8+ CD2 8- 亚群。结论 :MSC通过上调CD8+ CD2 8- T细胞发挥抑制作用。

原发性肝癌患者CD8^+CD28^-和CD8^+CD28^+细胞亚群的分析

目的研究原发性肝癌(HCC)病人外周血CD8+细胞亚群及CD8+T细胞上CD28分子的表达。方法用流式细胞仪对20例原发性肝癌病人的CD8+细胞亚群及CD8+T细胞上CD28分子(即CD8+CD28+和CD8+CD28-)的表达进行检测。结果HCC病人CD8+细胞百分率升高,CD8+CD28+细胞百分率降低,CD8+ CD28-细胞百分率升高,与对照组相比具有显著性差异。CD8+CD28+、CD8+CD28-细胞百分率与CD8+T细胞百分率的相关性研究表明,CD8+CD28-细胞数与CD8+T细胞数之间呈正相关。结论HCC病人CD8+细胞升高,CD8+细胞上CD28分子的表达是异常的,即CD8+CD28细胞数升高,CD8+CD28+细胞数降低;CD8+T细胞的升高是CD8+CD28-细胞亚群升高的结果。+++-

咳嗽合剂对老年感染后咳嗽病人外周血CD8^+CD28^-T细胞Foxp3 mRNA表达的影响

目的探讨咳嗽合剂对感染后咳嗽疾病老年病人外周血CD8^+CD28^-T细胞Foxp3 mRNA的表达作用。方法选取2016年11月至2017年10月感染后咳嗽病人50例,随机分成2组。对照组不予干预治疗;试验组口服咳嗽合剂20 mL,3次/d,疗程7 d;分别检测治疗前1 d与治疗7 d后的CD8^+CD28^-T细胞含量、占单核细胞的百分比及CD8^+CD28^-T细胞Foxp3 mRNA的表达。结果对照组CD8^+CD28^-T细胞含量、CD8^+CD28^-T细胞占单核细胞的百分比及CD8^+CD28^-T细胞Foxp3 mRNA表达在治疗前后比较差异无统计学意义。试验组CD8^+CD28^-T细胞含量、CD8^+CD28^-T细胞占单核细胞的百分比及CD8^+CD28^-T细胞Foxp3 mRNA的表达在治疗前后比较差异具有统计学意义。结论咳嗽合剂抗炎作用可能与CD8^+CD28^-T细胞Foxp3 mRNA表达有关,可能通过抑制CD8^+CD28^-T细胞产生,减少免疫抑制,加快炎症消退。

CD8^+CD28^-NRP-1^+T细胞在肾移植手术后患者外周血中的比例变化及意义

用流式细胞仪分别检测不同功能状态下肾移植术后患者体内的CD8^+CD28^-NRP-1^+Ts细胞和CD8^+CD28^-Foxp3^+Ts细胞,通过比较两类细胞的阳性表达率初步探讨它们之间的表达关系和意义。选取正常健康人10例,移植肾功能稳定的长期存活者24例,慢性移植物肾病者20例,急性排斥者15例,取受试者外周静脉血,分离单个核细胞,利用流式细胞仪检测CD8^+CD28^-NRP-1^+Ts细胞和CD8^+CD28^-Foxp3^+Ts细胞在CD8^+CD28^-T细胞群中的比例。结果表明组间比较得出,CD8^+CD28^-NRP-1^+Ts细胞和CD8^+CD28^-Foxp3^+Ts细胞比例在四组之间均有统计学差异(P<0.05)。其中在长期存活组表达量最高,其CD8^+CD28^-NRP-1^+Ts细胞和CD8^+CD28^-Foxp3^+Ts的比例分别为16.15%±1.49%和11.90%±2.73%,其次为正常健康人(13.83%±2.38%、9.44%±2.03%),然后为慢性移植物肾病组(8.03%±2.67%、5.26%±0.65%),而急排组最低(3.34%±1.73%、2.36%±1.14%),并且四组间这两种细胞呈同一变化趋势且前者的变化幅度大于后者。组内比较显示,CD8^+CD28^-NRP-1^+Ts细胞比例均高于CD8^+CD28^-Foxp3^+Ts细胞(P<0.05)。CD8^+CD28 NRP-1^+Ts细胞可以从整体水平上反映肾移植术后患者的免疫状态,它比CD8^+CD28^-Foxp3^+Ts细胞更能全面的反映术后患者的预后情况。

他克莫司与环孢菌素A对肝移植受者CD8^+ CD28^-调节性T细胞的不同调节特性

目的探讨他克莫司(FK506)与环孢菌素A(CsA)对肝移植受者CD8+ CD28-调节性T细胞(Treg)及细胞因子IL-10的调节效应。方法采用荧光标记单克隆抗体结合流式细胞技术分析接受FK506或CsA治疗的肝移植受者外周血CD8+ T细胞及共刺激分子CD28的表达情况,采用流式细胞小球微阵列术(CBA)分析血浆中IL-10浓度。以健康志愿者和患终末期肝脏疾病拟进行肝移植者作为对照。结果疾病对照组CD8+ T细胞和CD8+ CD28- T细胞/CD8+ CD28+ T细胞比值(Ratio值)显著低于健康对照组(P<0.05)。FK506治疗组CD8+ T细胞表达显著回升(P<0.05),且增加的CD8+ T细胞主要为CD8+ CD28- Treg(P<0.05)。CsA治疗组CD8+ T细胞和CD8+ CD28- Treg未出现明显回升(P>0.05)。且FK506治疗组CD8+ CD28- Treg表达显著高于CsA治疗组(P<0.05)。两治疗组血浆IL-10水平均显著高于健康对照组和疾病对照组(P<0.05),但组间差别无显著性(P>0.05)。结论FK506可促进肝移植受者外周血CD8+ CD28- Treg表达并同时促进IL-10的产生从而加强T细胞的免疫耐受,而CsA虽不能有效促进CD8+ CD28- Treg的表达但却能促进IL-10的产生。

原因不明复发性流产与蜕膜CD4^+ CD25^+ T调节细胞和CD8^+ CD28^- T细胞的关系

目的:探讨原因不明复发性流产(unexplained recurrent spontaneous abortion,URSA)与蜕膜CD4+ CD25+ T细胞和CD8+ CD28-T细胞的关系。方法:采用流式细胞四色荧光法,检测原因不明复发性流产17例(URSA组)和正常早孕人流20例(对照组)的蜕膜CD4+ CD25+ T细胞及其FoxP3(+)表达,CD8+ CD28- T细胞及其表面CD95、CD95L表达。结果:两组蜕膜中CD4+ CD25+ T细胞比例无明显差异(P>0.05),URSA组蜕膜CD4+ CD25+ T细胞中FoxP3阳性率明显低于对照组(P<0.0001)。两组蜕膜CD8+ CD28- T细胞比例及其细胞表面CD95和CD95L的阳性表达率均无明显差异(P>0.05);结论:蜕膜CD4+ CD25+ FoxP3(+)T调节细胞明显减少,是导致URSA患者母胎界面免疫耐受异常的重要原因。

初发过敏性紫癜患儿外周血CD_4^+CD_^(28)-和CD_8^+CD_(28)^-T细胞水平变化及意义

目的观察初发过敏性紫癜(HSP)患儿外周血T淋巴细胞亚群(CD4+CD2-8T细胞和CD8+CD2-8T细胞)的表达变化,并探讨其临床意义。方法采用流式细胞技术(FCM)检测89例初发HSP患儿(HSP组)和30例健康儿童(对照组)外周血T淋巴细胞免疫表型。结果 HSP组CD4+CD2+8、CD8+CD2+8、CD3+CD4+T淋巴细胞表达水平及CD4+/CD8+比率较对照组显著降低(P均<0.05);HSP组CD3+和CD3+CD8+T淋巴细胞表达水平与对照组相比无显著性差异(P>0.05);HSP组CD4+CD2-8T细胞和CD8+CD2-8T细胞较对照组明显增高(P均<0.05),但在皮肤型、关节型、腹型、混合型和紫癜性肾炎五种临床类型间无明显差别(P均>0.05)。结论 HSP患儿存在T淋巴细胞亚群的紊乱,CD4+CD2-8T细胞及CD8+CD2-8T细胞的异常增高可能参与了其发病过程,但与HSP临床类型无关。

晚期恶性肿瘤患者化疗前后CD8^+、CD8^+CD28^+、CD8^+CD28^-T细胞的变化观察

目的 :分析 6 4例晚期恶性肿瘤患者化疗前后CD8+ 、CD8+ CD2 8+ 、CD8+ CD2 8- 的变化 ,并探讨其与病情的关系。方法 :采用流式细胞术检测 6 4例晚期恶性肿瘤患者治疗前后T淋巴细胞亚群 ,并与健康体检者作比较。结果 :实验组晚期恶性肿瘤患者化疗前CD4 + 低于对照组 (P <0 0 5 ) ,而化疗前后CD4 + CD8+ 明显低于对照组 (P <0 0 1) ,CD8+ 、CD8+ CD2 8- 明显高于对照组 (P <0 0 1)。治疗后 ,化疗有效者CD4 + 、CD4 + CD8+ 、CD8+ CD2 8+ 升高 (P <0 0 5、P <0 0 1) ,而CD8+ CD2 8- 降低 (P <0 0 5 ) ;化疗无效者CD4 + CD8+ 、CD8+ CD2 8+ 降低 (P <0 0 5、P <0 0 1) ,CD8+ CD2 8- 升高 (P <0 0 1)。结论 :晚期恶性肿瘤患者T淋巴细胞免疫功能低下 ,有效的治疗能提高患者的T淋巴细胞免疫功能 ,临床上检测CD8+ 、CD8+ CD2 8+ 、CD8+ CD2 8- 对恶性肿瘤的治疗和预后有一定的监测作用。

慢性荨麻疹患者外周血中CD8^+CD28^-T细胞检测结果分析

目的:探讨CD8^+CD28^-T细胞在慢性荨麻疹患者致病机制中的作用。方法:收集临床慢性荨麻疹(CU)病例83例,同时设立对照组64例进行比较。应用ELISA法检测研究对象血清中抗Ig E抗体、抗FcεRⅠ抗体浓度,流式细胞仪检测外周血中CD3^+、CD4^+、CD8^+、CD8^+CD28^-、CD4^+CD25^+T细胞比例,分析检测结果。结果:83名CU中,23例抗Ig E抗体为阳性,占27.7%(27/83);31例抗FcεRⅠ抗体为阳性,占37.3%(31/83)。CU患者外周血CD8^+T细胞比例、CD8^+CD28^-T细胞比例低于正常对照组(P<0.05),CD4^+/CD8^+比值、CD4^+CD25^+T细胞比例均高于对照组(P<0.05)。结论:CU患者机体外周血CD8^+CD28^-T细胞、CD4^+CD25^+T细胞比例与对照组相比存在差异,CD8^+CD28^-T细胞比例降低也可能是CU致病机制之一。

外周血CD4^(+)CD25^(+)、CD8^(+)CD28^(+)调节性T细胞水平对早期宫颈癌患者腹腔镜根治术后预后的预测价值

目的分析外周血CD4^(+)CD25^(+)、CD8^(+)CD28^(+)调节性T细胞水平对早期宫颈癌(CC)患者腹腔镜根治术后预后的预测价值。方法招募2018年9月至2020年9月于儋州市人民医院接受腹腔镜根治术治疗的早期CC患者204例,根据患者术后随访期间预后情况分为预后不良组(43例)和预后良好组(161例)。比较两组临床资料。采用Spearman秩相关分析外周血CD4^(+)CD25^(+)调节性T细胞水平与CD8^(+)CD28^(+)调节性T细胞水平的相关性。采用多因素logistic回归分析早期CC患者腹腔镜根治术后预后不良的影响因素。采用受试者工作特征(ROC)曲线评估外周血CD4^(+)CD25^(+)、CD8^(+)CD28^(+)调节性T细胞水平对早期CC患者腹腔镜根治术后预后不良的预测价值。结果预后不良组CD4^(+)CD25^(+)调节性T细胞、癌胚抗原(CEA)、糖类抗原125(CA125)水平,术后切缘阳性占比以及术中宫旁浸润占比高于预后良好组,CD8^(+)CD28^(+)调节性T细胞水平低于预后良好组,差异有统计学意义(P<0.05)。Spearman秩相关分析结果显示,早期CC患者外周血CD4^(+)CD25^(+)调节性T细胞水平与CD8^(+)CD28^(+)调节性T细胞水平呈负相关(r_(s)=-0.478,P<0.05)。多因素logistic回归分析结果显示,较高的CEA、CA125、CD4^(+)CD25^(+)调节性T细胞水平是促进早期CC患者腹腔镜根治术后预后不良发生的独立危险因素(P<0.05),较高的CD8^(+)CD28^(+)调节性T细胞水平是抑制早期CC患者腹腔镜根治术后预后不良发生的独立保护因素(P<0.05)。ROC曲线分析结果显示,外周血CD4^(+)CD25^(+)、CD8^(+)CD28^(+)调节性T细胞水平能有效预测早期CC患者腹腔镜根治术后预后不良(P<0.05),两项指标联合可进一步提高预测效能[AUC(95%CI)=0.939(0.898~0.979),P<0.001],灵敏度和特异度分别为86.00%、88.20%。结论外周血CD4^(+)CD25^(+)、CD8^(+)CD28^(+)调节性T细胞水平与早期CC患者腹腔镜根治术后预后不良有关,二者能有效预测早期CC患者腹腔镜根治术后预后不良。

CD8^+CD28^-T细胞在脑疝患者的动态变化与临床意义

目的探讨脑疝患者外周血CD8+CD28-T细胞的动态变化与临床意义。方法收集36例脑疝组(A组)患者外周血,以41例未出现脑疝的重型颅脑损伤患者(B组)及32例健康人(C组)作为对照,采用流式细胞术检测外周血CD8+CD28-T细胞及其胞内转化生长因子β1(TGF-β1)及白介素10(IL-10)百分含量。分别在伤后3 h、6 h及12 h观察A及B组患者外周血CD8+CD28-T细胞、TGF-β1及IL-10变化。结果三组CD8+CD28-T细胞、TGF-β1及IL-10总体差异均有显著性(P<0.05),但B组与C组无统计学差异,而A组上述三者均显著低于另外B及C组(P<0.05)。B组患者在伤后3 h、6 h及12 h的CD8+CD28-T细胞、TGF-β1及IL-10差异均无统计学意义;A组患者3 h、6 h及12 h的CD8+CD28-T细胞、TGF-β1及IL-10均呈进行性下降,表现为任意两个时间点的差异均有统计学意义(P<0.05),且均显著低于B组(P<0.05)。结论 CD8+CD28-T细胞显著下降是脑疝患者的一个重要细胞免疫学特征,其伤后12h内进行性下降与病情进展密切相关。

肾癌根治术患者手术前后CD8^+CD28^-T细胞表达及临床意义

目的探讨肾癌根治术患者手术前后CD8^+CD28^-T细胞表达及临床意义。方法收集52例接受根治术的肾癌患者作为观察对象,采用流式细胞术检测手术前后外周血CD8^+CD28^-T细胞、白介素10(IL-10)及转化生长因子β1(TGF-β1)含量;分析三者含量与肿瘤分期的相关性,并以肾错构瘤患者及正常人作为对照。结果肾癌患者CD8^+CD28^-T细胞、IL-10及TGF-β1均显著高于另外两组,但肾错构瘤患者与正常人之间均无统计学差异(P<0.05);术前III期患者CD8^+CD28^-T细胞、IL-10及TGF-β1显著高于I及II期(P<0.05);术后各期肾癌患者CD8^+CD28^-T细胞及TGF-β1含量均显著低于术前(P<0.05),但IL-10却与术前无统计学差异;术后III期患者CD8^+CD28^-T细胞、IL-10及TGF-β1显著高于Ⅰ及Ⅱ期患者(P<0.05),但术前及术后I及II期患者上述三项指标均无统计学差异。相关性分析显示CD8^+CD28^-T细胞、IL-10及TGF-β1与分期均呈显著正相关性(P<0.05),其相关程度由大至小依次为CD8^+CD28^-T细胞>TGF-β1>IL-10。结论CD8^+CD28^-T细胞及其细胞因子表达含量增多可能是肾癌的一个新免疫机制,前者可在一定程度上鉴别肾癌与良性肿瘤,且可以评价手术效果。

术前CDCD8^+CDCD28^-T细胞含量在预测肾癌患者术后复发中的作用

目的探索术前CD8^+CD28^-调节性T细胞(Treg)含量在预测肾细胞癌(RCC)患者术后复发的效能。方法术前检测33例接受肾癌根治术的RCC患者外周血CD8^+CD28^-Treg含量,术后进行为期60个月的随访,观察CD8+CD28-Treg与复发的关系,并与术前中性粒/淋巴细胞比值(NLR)进行对照。结果共有9例患者出现复发,占27.27%,平均复发时间均数为术后24个月;复发患者的CD8^+CD28^-Treg及NLR数值均大于非复发组(P=0.034、0.041)。受试者工作曲线分析显示CD8+CD28-Treg及NLR均与RCC存在显著相关性,曲线下面积分别为0.819及0.703(P=0.004及0.021),且当CD8^+CD28^-Treg为8.21%时,其预测复发的敏感度为92.6%,特异度为90.5%,显著高于NLR。结论术前CD8^+CD28^-Treg在预测RCC患者术后复发具有较理想的准确度,对于术前该细胞百分含量高于8.21%的患者需在术后2年内加强随访。

恶性淋巴瘤患者外周血T细胞CD8^+CD28^-表达及意义

目的探讨恶性淋巴瘤患者外周血T细胞CD8+CD28-表达及意义。方法采用流式细胞仪检测35例恶性淋巴瘤患者外周血T细胞CD8+CD28+及CD8+CD28-。结果恶性淋巴瘤患者外周血T细胞CD8+CD28+及CD8+CD28-与正常对照有显著性差异(P<0.05):治疗有效后两者趋于正常(P>0.05);而无效组与正常对照组相比仍有显著性差异(P<0.05)。结论恶性淋巴瘤患者外周血T细胞CD8+CD28+及CD8+CD28-表达异常,不同治疗效果表达不同,恶性淋巴瘤患者有免疫功能异常,治疗有效后免疫功能恢复正常。

CD_8^+CD_(28)^-T细胞介导大鼠远距离缺血预处理肾脏保护效应的研究

目的探讨CD8+CD28-T细胞在远程缺血预处理保护早期肾脏热缺血再灌注损伤中的作用。方法雄性SD大鼠40只随机分为假手术对照组(sham)、单纯缺血再灌注组(IRI)、肾脏缺血预处理+缺血再灌注组(KIP+IRI)、远程缺血预处理+缺血再灌注组(RIP+IRI),再灌注2h后各组抽血检测肌酐、IL-10、CD8及CD28并作肾脏组织学观察。结果RIP+IRI组、KIP+IRI组外周血CD8+CD28-T细胞比例、血清IL-10浓度高于IRI组、sham组(P<0.01),而外周血CD28+T细胞含量低于IRI组,并伴随血清肌酐、肾组织中肾小管损害程度Paller氏评分的下降(P<0.01),RIP+IRI和KIP+IRI组间以上指标差异无显著性(P>0.05)。结论远程缺血预处理与肾脏缺血预处理存在相似的保护早期肾脏热缺血再灌注损伤的作用,其中CD8+CD28-T细胞参与其中并发挥免疫抑制作用。

CD8^+CD28^-调节性T细胞与肾癌患者复发及生存期的关系

目的:探讨CD8^+CD28^-调节性T细胞(Treg)与肾细胞癌(RCC)患者复发及生存期的关系。方法:对38例RCC患者进行为期60个月的随访,检测其外周血CD8^+CD28^-Treg含量变化,并分析其预测复发的效能及其与生存期的关系。结果:38例RCC患者生存期为11~69个月;其中11例(28.9%)复发并死亡,平均复发区间24个月。手术组患者CD8^+CD28^-Treg含量明显低于非手术组(P=0.037),无复发组的CD8^+CD28^-Treg含量明显低于复发组(P=0.029)。CD8^+CD28^-Treg的曲线下面积为0.827,与复发存在显著相关性(P=0.002);当CD8^+CD28^-Treg为8.16%时,其预测复发的敏感度为89.5%,特异度为92.4%。生存分析显示RCC患者的5年生存率为76.31%(29/38);手术组患者的生存期(57.35±12.76个月)与非手术患者生存期(50.26±7.19个月)差异存在统计学意义。结论:术后2年内是肾癌复发的主要时间区间,CD8^+CD28^-Treg有助于预测复发,且其百分比接近8.16%时需高度注意复发可能;接受肾癌根治术患者的CD8^+CD28^-Treg更低,生存期越长,提示该T细胞具有重要临床意义。

LncRNA LINC01137通过诱导CD8^(+)T细胞耗竭促进非小细胞肺癌进展的机制研究

目的研究长链非编码RNA(long non-coding RNA,LncRNA)LINC01137在非小细胞肺癌(nonsmall cell lung cancer,NSCLC)免疫逃逸中的生物学功能及其潜在的调节机制。方法采集24例健康志愿者和24例NSCLC患者血液样本,并收集NSCLC肿瘤组织和癌旁组织检测LINC01137水平。利用Starbase数据库预测LINC01137与miR-22-3p的结合位点,荧光素酶报告基因分析进行验证。采用A549细胞来源的外泌体和/或sh-LINC01137干扰序列转染A549细胞,检测细胞增殖和侵袭能力;收集转染后的细胞上清液培养CD8^(+)T细胞,检测CD8^(+)T细胞耗竭标志物干扰素-γ(interfereron-γ,IFN-γ)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、颗粒霉素B(granzyme B)和白细胞介素-2(interleukin-2,IL-2)水平,以及PD-1+Tim3^(+)CD8^(+)T细胞百分比。采用外泌体和/或miR-22-3p模拟物(miR-22-3p mimic)转染CD8^(+)T细胞,检测PD-1蛋白水平。结果与癌旁组织相比,NSCLC肿瘤组织中LINC01137表达(3.357±0.548 vs 1.011±0.371)明显升高;与健康志愿者相比,NSCLC患者外周血LINC01137表达(3.216±0.342 vs 1.007±0.313)亦明显升高,差异具有统计学意义(t=-17.367,-17.147,均P<0.001)。肿瘤组织LINC01137表达与外周血中LINC01137表达呈正相关(r=0.755,P<0.05)。在A549细胞来源的外泌体中LINC01137显著富集。与Exo+sh-NC组相比,Exo+sh-LINC01137组细胞活力(65.852%±4.715%vs 100.153%±11.934%)及细胞侵袭(21.464%±3.481%vs 43.126%±1.447%)能力显著降低,差异具有统计学意义(t=4.630,9.953,均P<0.01)。NSCLC患者外周血中LINC01137表达和CD8^(+)T细胞百分比呈负相关(r=-0.520,P<0.05)。与Exo+sh-NC组相比,Exo+sh-LINC01137组IFN-γ(3865.314±543.852 pg/ml vs 1786.971±105.982 pg/ml),TNF-α(4631.930±510.715pg/ml vs 1973.242±379.623pg/ml),Granzyme B(3876.496±312.438pg/ml vs 1879.439±287.584pg/ml)和IL-2 mRNA水平(3.286±0.437 vs 1.015±0.314)升高,PD-1+Tim3^(+)CD8^(+)T细胞百分比(7.680%±2.185%vs 18.952%±3.216%)降低,差异具有统计学意义(t=-6.497,-7.237,-8.146,-7.310,5.021,均P<0.01)。miR-22-3p是LINC01137的靶基因。与Exo+NC mimic组相比,Exo+miR-22-3p组PD-1蛋白水平(0.384±0.087 vs 1.003±0.147)显著降低,差异有统计学意义(t=6.277,P<0.01)。结论NSCLC患者肿瘤组织及外周血中LINC01137表达显著上调;NSCLC细胞来源的外泌体中LINC01137通过靶向CD8^(+)T细胞中miR-22-3p并抑制其表达,诱导CD8^(+)T细胞耗竭,促进NSCLC细胞免疫逃逸。