CD81、CCL26基因在黔北麻羊不同性腺组织中的表达研究

CD81和CCL26基因是影响哺乳动物性腺细胞融合的重要因子,但其在黔北麻羊性腺组织中的表达情况尚不清楚。为研究CD81和CCL26基因在黔北麻羊不同组织中的表达量,本实验以单、多羔黔北麻羊为研究对象,提取下丘脑、垂体、子宫、输卵管、卵巢组织的RNA,并将5种性腺组织RNA逆转录合成第一链cDNA,随后采用q-PCR技术检测CD81、CCL26基因的mRNA在单、多羔黔北麻羊不同性腺组织中的表达水平。结果表明:黔北麻羊性腺组织中CD81、CCL26基因的mRNA均有表达,2种基因均在单、多羔卵巢中的表达量最高;CD81基因在单羔组子宫中的表达量最低;CD81基因在多羔组、CCL26基因在单多羔组下丘脑中的表达量均最低;组间差异表达量分析可知,CD81基因在多羔组子宫的表达量显著高于单羔组;CCL26基因在单羔组卵巢和输卵管的表达量显著高于多羔组,在单羔组子宫的表达量极显著高于多羔组。本实验结果提示,CD81和CCL26基因可能与山羊繁殖能力相关,也为初步揭示山羊繁殖的分子调控机制提供了参考依据。

人CD81真核表达载体的构建及在COS-7细胞中的表达

目的:构建含人CD81基因的真核表达载体,探讨CD81在COS-7细胞的表达,为研究丙型肝炎病毒(HCV)与CD81 相互作用奠定基础. 方法:从我们构建的含人CD81全编码基因载体pMD18-T- CD81,应用双酶切回收基因片段,定向克隆入真核表达载体pVAXl;通过脂质体介导的基因转染技术将pVAXl- CD81和空载体转入COS-7细胞;应用抗CD81单克隆抗体通过间接免疫荧光法检测COS-7细胞的表达产物. 结果:重组的含CD81基因的真核表达载体pVAXl-CD81 经酶切和PCR鉴定分析正确,并证明在COS-7细胞表面有效地表达CD81蛋白. 结论:成功构建含CD81全编码基因的真核表达载体pVAXl-CD81,并在COS-7细胞表面有效表达CD81分子, 该转染细胞可作为研究CD81在HCV感染中的作用提供模型.

CD81外显子6、7、8在中国人丙型肝炎病毒感染中单核苷酸多态性的研究

目的 探讨 CD81在中国人丙型肝炎病毒 (hepatitis C virus,HCV)感染中是否存在遗传易感性。方法 针对人和非洲绿猴的 CD81有 4个氨基酸位点 (16 3、186、188、196 )不同 ,而非洲绿猴不感染HCV,以正常人群和 HCV感染阳性患者的基因组 DNA为研究对象 ,用 PCR结合 DNA测序的方法对以上 4个氨基酸对应的 CD81基因位点进行分析。结果 在 CD81外显子 6、7、8没有发现单核苷酸多态性 ;尽管在一部分内含子 6和 3′端调控区发现了 3个多态位点 :110 2 8G/ T、1186 0 C/ T、1196 0 G/ A,但它们与HCV的感染无关 (P>0 .0 5 )。结论 未见 CD81外显子 6、7、8与 HCV感染的易感性相关 ;由于 CD81蛋白的其它位点在种间是高度保守的 ,因此在中国人群中 CD81蛋白的多态性稀少或不存在。