可溶性CD83促进耐受性DCs和T_(reg)细胞增殖和免疫耐受的分子机制

目的 探索可溶性CD83(sCD83)发挥免疫抑制活性的分子机制。方法 分离6~8周龄C57B/6小鼠骨髓祖细胞培养骨髓衍生树突细胞(DCs)和脾脏内CD4^(+)T细胞。分别向细胞培养物中加入10μl PBS处理(Control组)或10μl 10μg/ml的可溶性CD83处理(sCD83组)。流式细胞术测定DCs中的非成熟DCs(imDCs)和CD4^(+)T细胞中的CD4^(+)CD25^(+)FOXP3^(+)T细胞,即调节性T(T_(reg))细胞的细胞计数所占百分比。Western blot测定imDCs胞内吲哚胺2,3-双加氧酶(IDO)的表达水平及T_(reg)细胞内磷酸酶及张力蛋白同源物(PTEN)、磷酸化蛋白激酶B(p-Akt)、蛋白激酶B(Akt)、细胞核和细胞质核因子-κB亚基RelB和程序性细胞死亡蛋白-1(PD-1)的表达水平。ELISA测定DCs培养上清液中犬尿酸的水平以及imDCs和CD4^(+)T细胞共培养系统中白细胞介素(IL)-10、转化生长因子-β(TGF-β)和IL-12的水平。结果 与Control组相比,sCD83组表达表面标志物CD40、CD83、CD86、Ⅱ类主要组织相容性复合物(MHCⅡ)的DCs细胞计数所占百分比降低(P<0.05);DCs培养上清液中犬尿酸的水平上升(P<0.05)。与Control组相比,sCD83组Treg细胞计数所占百分比升高(P<0.05);胞内PTEN和细胞质RelB的表达增强(P<0.05),而p-Akt、细胞核RelB和PD-1的表达降低(P<0.05);Akt的表达水平差异无统计学意义。在imDCs与CD4^(+)T细胞共培养物上清液中,与Control组相比,sCD83组IL-10和TGF-β的水平升高(P<0.05),IL-12的水平降低(P<0.05)。结论 sCD83能够抑制CD4^(+)T细胞核内RelB的水平调节相关细胞因子的分泌,影响DCs和T_(reg)细胞的细胞间通讯,促进耐受性imDCs和T_(reg)细胞的增殖。

COPD患者痰液CCR6、CD83、Th1、Th2表达及临床意义

目的:探究CC趋化因子受体6(CCR6)、CD83及辅助性T细胞(Th)1、Th2相关细胞因子在慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者痰液中的表达及临床意义。方法:选取2020年8月—2022年11月某院接受治疗的265例COPD患者,根据疾病严重程度将135例急性发作期COPD患者纳入AECOPD组,130例稳定期COPD患者纳入COPD稳定期组,选取同期该院健康体检者100例作为正常对照组。采用流式细胞术和酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测各组痰液样本中CD83、CCR6及Th1[干扰素-γ(IFN-γ)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)]、Th2[白细胞介素(IL)-4、IL-6]相关细胞因子表达水平,并分析COPD稳定期组上述因子表达水平与慢性阻塞性肺疾病全球倡议(GOLD)肺功能分级、COPD评估测试(CAT)评分及改良版英国医学研究委员会呼吸问卷(mMRC)分级的关系。结果:AECOPD组患者痰液中CD83/CCR6比值(0.73±0.40)低于COPD稳定期组(1.40±0.53)和正常对照组(2.85±1.86),而IFN-γ[(43.45±14.80)pg/mL]、TNF-α[(59.55±21.48)pg/mL]、IL-4[(16.30±4.62)pg/mL]、IL-6[(38.97±13.41)pg/mL]水平高于COPD稳定期组[(32.53±8.45)pg/mL]、(30.27±13.18)pg/mL、(10.32±4.54)pg/mL、(19.64±7.16)pg/mL]和正常对照组[(25.22±6.31)pg/mL、(20.42±7.61)pg/mL、(5.38±1.14)pg/mL、(8.40±2.27)pg/mL]差异均有统计学意义(P<0.05)。随着稳定期COPD患者GOLD肺功能分级和CAT评分增加,痰液中CD83/CCR6比值逐渐降低,而IFN-γ、TNF-α、IL-4、IL-6水平逐渐升高,差异均有统计学意义(P<0.05)。mMRC分级≥2级组患者痰液中CD83/CCR6比值(1.11±0.34)低于mMRC分级<2级组(1.53±0.55),IFN-γ[(37.04±9.55)pg/mL]、TNF-α[(36.85±12.10)pg/mL]、IL-4[(12.33±4.65)pg/mL]、IL-6[(21.57±7.80)pg/mL]水平高于mMRC分级<2级组[(30.66±7.21)pg/mL、(27.55±12.70)pg/mL、(9.49±4.25)pg/mL、(18.84±6.76)pg/mL],差异有统计学意义(P<0.05)。结论:COPD患者痰CD83/CCR6比值降低,Th1和Th2相关细胞因子水平升高,且与COPD患者肺功能状态、CAT评分及mMRC分级有关,可作为临床评估COPD患者病情程度的参考指标。

外周血CD83+细胞检测在慢性病毒性肝炎中的意义

为了解树突状细胞 (DC)在慢性病毒性肝炎中的变化及其临床应用价值 ,采用流式细胞仪检测技术检测了 6 5例慢性肝炎患者外周血中 CD83+细胞的水平 .结果显示 :慢性病毒性肝炎患者外周血中 CD83+细胞的水平与病情、短期内患者的预后显著相关 .说明 DC在慢性病毒性肝炎的发生中发挥重要作用 ,而 CD83+细胞的检测有助疾病的鉴别诊断和短期内预后的判断 ,有很好的临床应用价值 .

食管鳞癌和转移淋巴结组织中CD1a和CD83的表达及其临床意义

目的:探讨食管鳞癌(esophageal squamous cell carcinoma,ESCC)和转移淋巴结组织中CD1a和CD83的表达及其与ESCC临床病理特征间的关系。方法:选取河北医科大学第四医院胸外科2002年5月至2003年12月间手术切除并经病理确诊的78例ESCC石蜡标本,采用流式细胞术检测78例ESCC、24例正常食管黏膜、35例正常淋巴结和32例转移淋巴结组织中CD1a和CD83的表达。结果:(1)ESCC组织中CD1a和CD83的表达量明显低于正常黏膜CD1a和CD83的表达量(均P<0.05)。(2)CD1a表达量与癌组织浸润深度、临床分期、分化程度及淋巴结转移无相关性(均P>0.05);CD83表达量与ESCC临床分期及淋巴结转移有关(P<0.05)。(3)转移淋巴结组织中CD1a表达量与正常淋巴结无显著性差异(P>0.05);转移淋巴结组织中CD83表达量显著低于正常淋巴结组织(P<0.05)。结论:ESCC组织中CD83的表达量反映ESCC局部免疫状态,在ESCC的发生、发展过程中具有重要作用,可作为评价食管癌生物学行为的指标。

CD83、CD1a和Ki-67在大肠癌中的表达及意义

目的:探讨CD83、CD1a和Ki-67在大肠癌组织中的表达及预后意义.方法:采用免疫组织化学和流式细胞术检测60例大肠癌组织中CD83、CD1a和Ki-67的表达情况,并分析其与大肠癌临床病理特点和预后的关系.结果:免疫组织化学检测显示,低Dukes分期、预后好的癌组织中CD83和CD1a阳性率均显著高于对应组(均P<0.05),而FCM检测只显示CD1a阳性率显著高于对应组(均P<0.05);两检测均显示,高Dukes分期、预后差的癌组织中Ki-67阳性率显著高于对应组(均P<0.05).结论:CD83、CD1a和Ki-67的表达与大肠癌Dukes分期和预后相关,可以作为检测大肠癌预后的参考指标.

S-100蛋白、CD1a、CD83及Ki-67在口腔朗格汉斯细胞组织细胞增生症中的表达及意义

目的对口腔朗格汉斯细胞组织细胞增生症(LCH)病例进行临床病理回顾性研究及多种免疫表型检测,观察该类疾病的临床病理特征,并对其诊断、鉴别诊断等进行探讨。方法选择原病理诊断为LCH的29例患者为研究对象,分析其临床病理特点;采用链亲和素-生物素-过氧化物酶(SP)法和Elivison二步法检测S-100蛋白、CD1a、CD83及Ki-67在LCH中的表达情况,观察其免疫组织化学结果并进行统计学分析。结果 29例LCH中有5例S-100蛋白、CD1a检测为阴性,排除LCH诊断。在24例LCH中,男性15例,女性9例;患者中位年龄为7.50岁;14例发生于下颌骨,5例发生于上颌骨,5例发生于上下颌骨;按照Bartnick分类,Ⅰ类9例,Ⅱ类13例,Ⅲ类2例;S-100蛋白、CD1a均为阳性表达;颌面部单发骨病损与侵及软组织的颌面部病损相比,Ki-67阳性率较低,而CD83阳性率较高。结论 S-100蛋白、CD1a对于LCH的诊断具有重要意义。颌面部单发的骨LCH可能具有较低的增殖活性,并处于较高的成熟状态;侵及软组织的颌面部LCH可能具有较高的增殖活性,并处于较低的成熟状态。

CD83^+肿瘤浸润性树突状细胞在胃癌组织的表达及临床意义

目的肿瘤组织浸润树突状细胞(tumorinfiltratingdendriticcells,TIDCs)数量和功能对患者预后有显著床意义,但CD83+TIDCs在胃癌组织中的表达情况尚不清楚,需要进行研究。方法采用免疫组化、原位杂交及流式细胞术检测45例胃癌TIDCs的CD83蛋白、CD83mRNA以及S100表达,并分析其临床意义。结果免疫组化显示胃癌组织(42/45)中有S100+散在表达;CD83主要表达于胃癌组织癌旁及正常胃黏膜上。原位杂交显示CD83mRNA在少数标本中(7/45)表达。流式细胞术检测到低水平CD83表达(4%,45/45)。S100和CD83mRNA表达数量与患者年龄、性别、肿瘤部位、浸润深度、病理分期及淋巴结转移情况无显著相关性。CD83蛋白免疫组化表达与胃癌TNM分期显著负相关(r=-0.924,P<0.01);CD83流式细胞检查的表达率与胃癌TNM分期及淋巴结转移呈显著负相关(r=-0.879,P<0.01;r=-0.782,P<0.05)。结论胃癌TIDCsCD83表达与胃癌TNM分期及淋巴结转移有关,可作为临床研究指标使用。

CD83、CD1a标记肿瘤浸润性树突状细胞在大肠癌中的表达及其临床意义

目的探讨肿瘤浸润性树突状细胞(TIDC)在大肠癌组织中的表达及其对预后的意义。方法收集≥5年生存组和<3年死亡组大肠癌病例各30例,免疫组化和流式细胞术分别检测大肠癌组织内TIDC的CD83、CD1a表达状况,分析其与大肠癌临床病理特点和预后的关系。结果 CD83、CD1a的表达与大肠癌的分化程度、淋巴结转移无关,与Dukes分期和预后相关。免疫组化检测显示,60例大肠癌组织中19例检测到CD83阳性表达,24例检测到CD1a阳性表达。CD83、CD1a的表达随着Dukes分期的升高而降低,≥5年生存组表达高于<3年死亡组,差异有统计学意义(P<0.05)。流式细胞术检测到低水平CD83(60/60)、CD1a(60/60)和Ki-67(60/60)表达。在大肠癌组织的不同Dukes分期间,CD83、CD1a在A期+B期大肠癌组织中的表达高于C期+D期大肠癌组织,差异有统计学意义(P<0.05);CD1a在≥5年生存组表达高于<3年死亡组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论大肠癌组织中TIDC的特征性标记物CD83、CD1a的表达与预后相关,可以作为检测大肠癌预后的参考指标。

S100和CD83阳性树突状细胞与大肠肿瘤微环境的关系

目的:探讨大肠癌与大肠腺瘤组织中树突状细胞(dendriticcells,DCs)浸润,了解局部组织的免疫状态对大肠肿瘤发生的影响.方法:采用免疫组织化学SP法检测25例大肠癌与31例大肠腺瘤患者肿瘤组织、肿瘤旁组织以及远处正常大肠黏膜中S100+DCs及CD83+DCs的浸润.结果:大肠癌组织中浸润的S100+DCs、CD83+DCs细胞数明显少于癌旁组织、正常组织以及大肠腺瘤组织,差异均有统计学意义(S100+DCs细胞数:15.36±1.78vs25.14±2.81,32.55±2.65,33.77±3.06;CD83+DCs细胞数:2.50±0.60vs4.91±0.51,5.68±1.14,5.39±0.68,均P<0.05);大肠腺瘤组织中浸润的S100+DCs细胞数明显多于腺瘤旁组织与正常组织(均P<0.05),而CD83+DCs则无差异.结论:DCs在大肠肿瘤中的浸润情况有助于了解肿瘤的免疫逃逸及大肠肿瘤发生的机制.

疣状表皮发育不良患者皮损中朗格汉斯细胞CD1a和CD83表达

目的观察疣状表皮发育不良(EV)患者皮损中朗格汉斯细胞(LC)的CD1a和CD83表达情况。方法采用免疫组织化学方法检测10例EV患者皮损表皮中LC的表面标记分子CD1a和CD83的表达,并以10例正常人的眼皮标本作为对照。结果所有组织中均未见CD83阳性LC,但均可见CD1a阳性LC。EV组CD1a阳性LC计数明显低于对照组(P<0.01),且分布不均匀。结论EV患者的LC功能可能受到抑制。

胃癌浸润性树突状细胞CD83和S100的表达及其临床意义

目的探讨肿瘤组织浸润树突状细胞(tumor infiltrating dendriticcells,TIDCs)在胃癌组织的表达及临床意义。方法采用免疫组化、原位杂交及流式细胞术分别检测4 5例胃癌组织的TIDCs的S1 0 0,CD 8 3及CD 8 3mRNA表达,并分析它们与临床病理特点的关系。结果免疫组化显示胃癌组织(4 2/4 5)中有S1 0 0+DCs不均一表达,CD 8 3表达于癌旁及正常黏膜。原位杂交显示CD 8 3mRNA有少量(7/4 5)表达。流式细胞术可检测到较低水平CD 8 3表达(4%)。S1 0 0和CD 8 3mRNA表达数量与患者年龄、性别、肿瘤部位、浸润深度、病理分期及淋巴结转移情况无显著相关性。免疫组化检测CD 8 3表达与TNM呈负相关(r=-0.9 2 4,P<0.0 1);流式细胞术检测CD 8 3与TNM分期及淋巴结转移呈负相关(r=-0.8 7 9,P<0.0 1;r=-0.7 8 2,P<0.0 5)。结论胃癌TIDCs以未成熟状态为主,S1 0 0表达提示其数量,CD 8 3表达提示其功能,且与胃癌TNM分期及淋巴结转移有关,是更好的临床观测指标。

非小细胞肺癌组织中CD1α、CD83阳性树突状细胞浸润的临床意义

目的探讨CD1α、CD83阳性树突状细胞在肺癌组织中的浸润情况及其临床意义。方法采用流式细胞术检测49例非小细胞肺癌组织,对应的49例癌旁组织,10例炎性假瘤中树突状细胞表面分子CD1α和CD83的表达,分析CD1α和CD83表达水平与肺癌临床分期、病理类型、组织学分级和淋巴结转移的相关性。结果(1)树突状细胞CD1α的表达率在肺癌组织、癌旁组织及炎性假瘤中无显著性差异(P>0.05);(2)肺癌组织中CD83阳性树突状细胞的比例明显低于癌旁组织及炎性假瘤(P<0.05);(3)肺癌组织中树突状细胞CD83的表达率在不同临床分期、病理类型和组织学分级中无显著性差异(P>0.05),但与肺癌的局部淋巴结转移有关(P<0.05)。结论(1)肺癌组织中CD83阳性树突状细胞较癌旁组织及炎性组织中减少;(2)肺癌组织中CD83阳性树突状细胞减少与肿瘤淋巴转移密切相关。

CD83、Ki-67在大肠癌中的表达及预后意义

目的探讨CD83、Ki-67在大肠癌组织中的表达及对预后的意义。方法收集大于或等于5年生存组和小于3年死亡组大肠癌病例各30例,用免疫组化和流式细胞术检测大肠癌组织中CD83、Ki-67的表达,分析其与大肠癌临床病理特点和预后的关系。结果免疫组化检测显示,CD83的表达随着Dukes分期的升高而降低,≥5年生存组表达明显高于小于3年死亡组(P<0.05);Ki-67的表达随着Dukes分期的升高而增高,≥5年生存组表达明显低于小于3年死亡组(P<0.05)。流式细胞术检测显示,CD83在A期和B期中的表达明显高于C期和D期(P<0.05);Ki-67在A期和B期中的表达明显低于C期和D期(P<0.05)。结论大肠癌中CD83、Ki-67表达与预后相关,可以作为检测大肠癌预后的参考指标。

人正常脑组织和脑胶质瘤中S-100、CD83分子的检测

目的:研究S-100、CD83在人正常脑组织和脑胶质瘤中的表达。方法:应用免疫组织化学方法检测30例脑胶质瘤、10例脑胶质瘤瘤旁组织、10例正常脑组织切片中S-100、CD83的表达水平,并与10例肝炎合并肝硬化组织切片进行比较。结果:S-100蛋白在脑胶质瘤、瘤旁组织和正常脑组织的阳性率均为100%,用HPISA-1000图像分析测得其不同的平均阳性灰度值(AGV)分别为72·20±12·30、35·60±9·50和28·60±10·20,脑胶质瘤组织与正常脑组织比较,差别显著(P<0·05),而瘤旁组织与正常脑组织比较,差别无显著性(P>0·05);脑胶质瘤及其瘤旁组织、正常脑组织标本中无CD83阳性细胞表达;CD83在肝炎并肝硬化中的阳性率为100%。结论:正常脑组织和脑胶质瘤中无成熟、有活性的树突状细胞存在;在脑组织和脑疾病的树突状细胞研究中,S-100不能作为DCs的标志物。

一株识别CD83单克隆抗体的研制及其生物学特性鉴定

目的:鼠抗人CD83功能性单克隆抗体(mAb)的研制及其生物学特性的鉴定。方法:以人CD83转基因细胞L929/CD83为免疫原,常规免疫6～8周龄的雌性BALB/c小鼠;采用B淋巴细胞融合技术,将免疫小鼠脾脏细胞与Sp2/0融合,以L929/CD83、293/CD83转基因细胞为抗体筛选阳性细胞,经免疫荧光标记分析对杂交瘤进行反复筛选和多次的克隆化培养;采用Ig类和亚类快速定性试纸法、染色体核型分析、竞争结合抑制试验、间接免疫荧光法、Westernblot对mAb的生物学特性进行鉴定。结果:获得1株稳定分泌鼠抗人CD83mAb的杂交瘤细胞株(命名为9D8),该mAb能特异性地识别成熟的DC、活化的T细胞及肿瘤细胞株Daudi、8226表达的CD83分子,该mAb识别的位点不同于商品化抗人CD83mAb(HB15e)。结论:成功地研制1株鼠抗人CD83mAb,识别位点与HB15e不同,为更好地研究该分子的功能提供良好的物质基础。

食管鳞癌组织中树突细胞CD83和促凋亡蛋白Smac的表达及其临床意义

目的探讨肿瘤浸润树突细胞(TIDC)CD83和促凋亡蛋白Smac在食管鳞癌(ESCC)组织中的表达及其与ESCC临床病理特征间的关系。方法选取经病理确诊的78例ESCC石蜡标本,采用流式细胞术检测78例ESCC、24例正常食管黏膜中TIDC和Smac表达。结果 ESCC组织中CD83表达量明显低于正常黏膜的表达量(P<0.05);Smac的表达量明显低于正常黏膜的表达量(P<0.01);CD83表达量与肿瘤临床分期及淋巴结转移有关(P均<0.05);Smac表达量与肿瘤浸润深度、临床分期及淋巴结转移有关(P均<0.01);CD83和smac在食管鳞癌组织中表达呈正相关。结论 ESCC组织中TIDC的CD83表达量反映ESCC局部免疫状态,CD83和促凋亡蛋白Smac在ESCC的发生、发展过程中具有重要作用,可作为评价食管癌生物学行为的指标。

可溶性小鼠CD83-Ig对同种胰岛β细胞在糖尿病模型小鼠体内存活的影响

目的研究可溶性小鼠CD83-Ig对NIT-1细胞在同种异基因糖尿病模型小鼠体内存活时间的影响。方法将表达小鼠CD83胞外功能区和人IgG1αFc融合基因的真核表达载体pmCD83-hIg转染COS-7细胞,取细胞培养上清液制备CD83-Ig融合蛋白。采用链尿佐菌素(STZ)诱导法制作BALB/c小鼠糖尿病模型,并移植胰岛细胞系NIT-1进行治疗,同时在NIT-1移植的-1,1和3 d输注CD83-Ig,并观察输注CD83-Ig对NIT-1在糖尿病模型小鼠体内存活时间的影响。结果移植NIT-1后第3天各组小鼠血糖均恢复至正常水平;移植物NIT-1细胞在输注CD83-Ig组小鼠体内的存活时间为18 d,较在输注人IgG组和PBS组小鼠体内的存活时间(均为9 d)明显延长;输注CD83-Ig组小鼠平均存活时间为(44.50±6.41)d,而输注人IgG组和PBS组小鼠存活时间分别为(29.86±4.18)d和(30.71±4.49)d。结论CD83-Ig融合蛋白可延长小鼠胰岛β细胞在同种异基因糖尿病小鼠体内的存活时间,可能是一种用于治疗移植排斥反应的较好的免疫抑制剂。

前列腺癌浸润性树突状细胞CD1a、CD83的表达及与临床指标的相关性分析

目的探讨前列腺癌肿瘤浸润性树突状细胞(tumor infiltrating dendritic cells,TIDCs)的数量与活化功能的变化,并探讨分析前列腺癌组织TIDCs的表达与患者血清PSA值、年龄、Gleason评分、骨转移等情况的相关性。方法运用免疫组化Envision两步法染色技术标记28例前列腺癌组织及10例良性前列腺增生组织树突状细胞(dendritic cell,DC)的CD1a及CD83分子,镜下观察被标记的DC的形态和分布情况并人工计数,比较良性和恶性前列腺组织的DC的CD1a及CD83的均数,使用student-t检验,P<0.05为差异有统计学意义。进行28例前列腺癌患者CD1a、CD83、年龄、PSA、Gleason评分的Pearson相关分析及Logistic回归分析,以P<0.05为相关性有统计学意义。结果前列腺癌组织DCCD1a多分布在癌周,染色浅,数量比前列腺增生组织CD1a的数量少,差异有统计学意义(P<0.05);前列腺癌组织DCCD83亦分布于癌周,染色较浅,数量比前列腺增生组织CD83的数量略多,差异无统计学意义(P>0.05);28例前列腺癌患者的CD1a、CD83、年龄、PSA的相关性不显著,相关无统计学意义(P>0.05)。结论前列腺癌TIDCs多分布在癌周,总体数量(用CD1a标记)较良性前列腺组织少,活化的TIDCs(用CD83标记)的数量与良性组织相差不大;CD1a、CD83与年龄、PSA、Gleason评分及骨转移相关性不显著。

健脾益肠散对LPS诱导树突状细胞成熟标志CD83表达的影响

目的观察健脾益肠散对体外脂多糖(LPS)诱导的树突状细胞(DC)成熟标志CD83表达的影响。方法原代分离、培养C57BL/6小鼠DC细胞,采用流式细胞术对DC细胞的主要标记物CDla进行鉴定,LPS诱导细胞构建DC细胞成熟模型。将培养的DC细胞随机分为空白对照组、模型组、中药含药血清组、空白血清组和IL-10组。干预24 h后,采用Western blotting、RT-PCR技术分别检测各组DC细胞中CD83的蛋白和mRNA表达。结果与空白对照组比较,模型组DC细胞CD83的蛋白和mRNA表达均明显增多(P <0.05或P <0.01);中药含药血清组DC细胞CD83的蛋白和m RNA表达减少,与模型组和空白血清组比较差异均有统计学意义(P<0.05)。结论健脾益肠散对LPS诱导的DC细胞成熟标志CD83的蛋白和mRNA表达具有明显的抑制作用,可能是其发挥免疫耐受作用治疗溃疡性结肠炎(UC)的重要机制。