人CD9蛋白在SP2/0细胞中的表达与检测

CD9被证明是精卵质膜相互作用中一种重要的蛋白。通过构建CD9基因真核表达载体,在293GP细胞中包装成假病毒,并成功感染SP2/0细胞,利用逆转录病毒转染效率高,外源基因表达稳定等优点,在哺乳动物细胞中表达人CD9蛋白,并分别采用RT-PCR法、Western杂交法、流式细胞仪法检测重组细胞中CD9的表达情况,经检测CD9基因在SP2/0重组细胞中正常表达。

MRP1/CD9蛋白在人肝细胞癌中的表达及其意义

目的探讨MRP1/CD9蛋白在人肝细胞癌(HCC)中的表达及其与癌侵袭转移的关系.方法构建肝癌组织芯片.样本包括肝细胞癌及癌旁肝组织152例,癌栓22例,肝内转移癌4例,肝外转移癌17例.正常对照肝组织5例.应用免疫组织化学(免疫组化)方法检测肝癌组织芯片中样本MRP1/CD9蛋白的表达.结果 27%(41/152)肝细胞癌原发灶表达MRP1/CD9蛋白.伴癌栓形成HCC中MRP1/CD9蛋白表达率低于无癌栓形成者(分别为21.82%和40.48%; P<0.05).巨块型肝癌中MRP1/CD9蛋白表达率亦低于直径在10cm以下者(分别为5%和34.82%; P<0.01).MRP1/CD9蛋白表达尚与HCC病理分级及血清AFP水平有关:病理分级2级的阳性表达率高于3～4级(分别为39.02%和22.52%;P=0.043),血清AFP≤20μg/L者阳性表达率高于>20μg/L者(分别为41.94%和22.50%;P=0.029).结论肝细胞癌MRP1/CD9蛋白表达水平低下可能与癌组织侵袭转移有关.

哺乳动物精卵融合必需蛋白质IZUMO1-JUNO/CD9的研究进展

精卵融合是受精过程中最为重要的步骤。目前公认IZUMO1、JUNO和CD9(cluster of differentiation antigen 9)为精卵融合的必需蛋白质,其中IZUMO1与JUNO在精卵识别时会形成复合体。有研究表明IZUMO1、JUNO和CD9主要参与精卵融合最初的黏附过程,且它们之间是相互关联发挥作用的。近年来由于X射线晶体学相关技术的发展,IZUMO1-JUNO晶体结构基本被阐明,然而精卵融合的具体分子机制仍未被完全揭示。所以,对哺乳动物精卵融合必需蛋白质IZUMO1-JUNO/CD9的结构、功能和分子机制进行阐述是十分必要的。

CD44V9和nm23基因蛋白在胃癌中的表达及其临床意义

目的 :探讨胃癌组织中CD44V9和nm2 3的表达、相互关系及其临床意义。方法 :应用免疫组化SABC法对 6 0例胃癌中CD44V9和nm2 3表达进行检测。结果 :胃癌组织中CD44V9和nm2 3的阳性表达率分别为75 %和 5 5 %;CD44V9阳性胃癌中nm2 3阳性表达率 (4 2 .2 %)明显低于CD44V9阴性胃癌 (93.3%) (P <0 .0 1)。CD44V9阳性表达与胃癌Lauren分型、浸润深度及淋巴结转移有关 (P <0 .0 5 ) ,nm2 3表达与胃癌淋巴结转移有关 (P <0 .0 5 )。结论 :CD44V9和nm2 3在胃癌中表达呈明显负相关 ,二者有可能作为临床上预测胃癌侵袭转移潜能的指标。

肿瘤转移抑制因子CD9/MRP-1基因在小鼠围着床期子宫内膜的动态表达

目的:探讨肿瘤转移抑制基因(CD9)/运动相关蛋白(MRP-1)mRNA和蛋白在胚胎着床过程中的作用。方法:应用RT-PCR和免疫组化技术观察CD9/MRP-1mRNA和蛋白在早孕和假孕小鼠子宫中的表达规律。结果:早孕d1-4小鼠子宫组织均有CD9/MRP-1mRNA表达,且d4表达最多;其蛋白主要表达在d1-4的子宫内膜上皮细胞,且早孕d2-4CD9/MRP-1在子宫基质细胞散在阳性表达。假孕d1-8小鼠子宫组织均有CD9/MRP-1mRNA表达,假孕d5表达开始增加,至d6达到峰值。而CD9/MRP-1蛋白在假孕d1-8子宫内膜腺上皮均有表达,而子宫内膜腔上皮均无表达。假孕d2-5,子宫基质细胞出现散在阳性表达。结论:①CD9/MRP-1在早孕小鼠子宫中呈动态表达,提示它在胚胎精确侵袭子宫内膜的调节中发挥作用。②CD9/MRP-1在妊娠小鼠子宫的表达是非胚胎依赖性的。

降钙素对高原强直性脊柱炎继发骨质疏松患者血清MMP-9、CD36、IL-17的影响探讨

目的:研究降钙素对高原强直性脊柱炎继发骨质疏松患者血清基质金属蛋白酶-9(matrix metalloproteinase-9,MMP-9)、CD36、白介素-17(interleukin-17,IL-17)的影响。方法:选取我院2010-01~2015-01收治的52例高原强直性脊柱炎继发骨质疏松患者为实验组,52例单纯高原强直性脊柱炎患者为对照组,实验组通过给予降钙素(50IU,肌注,1/d;14d后为2/周)治疗,组内所有患者均于治疗前和治疗后同一天抽取静脉血,采用Western blot法检测MMP-9、CD39和IL-17表达变化,探寻高原强直性脊柱炎继发骨质疏松的分子机制,为临床治疗提供参考依据。结果:与正常对照组比较,降钙素组治疗前患者血清MMP-9、IL-17表达较高(P<0.05),CD36表达较低(P<0.05);经降钙素治疗后,降钙素组患者血清MMP-9、IL-17表达降低(P<0.05),CD36表达升高(P<0.05)。结论:在高原强直性脊柱炎继发骨质疏松患者发病中MMP-9、CD36、IL-17可能起到重要作用,细胞因子直接或间接影响机体免疫功能和炎症反应,进而在强直性脊柱炎继发骨质疏松发生发展中发挥重要影响,降钙素能有效防治此类患者骨质疏松程度加重。

胆囊良恶性病变组织中HMGA2和CD9表达及意义

目的研究胆囊良恶性病变组织中HMGA2和CD9表达水平及其临床病理意义。方法 108例胆囊腺癌、46例癌旁组织、15例腺瘤和35例慢性胆囊炎手术切除标本常规制作石蜡包埋切片,HMGA2和CD9染色方法为EnVision免疫组化法。结果胆囊腺癌HMGA2表达阳性率明显高于癌旁组织(χ2=16.13,P<0.01)、腺瘤性息肉(χ2=8.19,P<0.01)和慢性胆囊炎(χ2=21.41,P<0.01);胆囊腺癌CD9表达阳性率明显低于癌旁组织(χ2=8.76,P<0.01)、腺瘤性息肉(χ2=3.96,P<0.05)和慢性胆囊炎(χ2=14.31,P<0.01);HMGA2表达阳性和(或)CD9表达阴性的良性病例的胆囊上皮均呈中至重度不典型增生。高分化、肿块最大径<2 cm、无淋巴结转移、未侵犯周围组织的病例HMGA2表达阳性率明显低于低分化、肿块最大径≥2 cm、淋巴结转移和侵犯周围组织的病例(P<0.05或P<0.01);高分化腺癌、肿块最大径<2 cm、无淋巴结转移和未侵犯周围组织的病例CD9表达阳性率明显高于低分化腺癌、肿块最大径≥2 cm、淋巴结转移和侵犯周围组织病例(P<0.05或P<0.01)。经Kaplan-Meier生存分析发现HMGA2表达阳性病例术后生存期明显低于阴性表达病例(P=0.020),但CD9表达阳性病例术后生存期明显高于阴性表达病例(P=0.019);Cox多变量回归分析显示HMGA2阳性表达和(或)CD9表达阴性是反映胆囊腺癌预后不良的一个重要指标。结论 HMGA2和CD9表达与胆囊腺癌发生、临床生物学行为及预后有密切关系。

CD147/MMP-9通路与2型糖尿病合并高血压患者发生颈动脉粥样硬化的关系

目的探究2型糖尿病(T2DM)合并高血压患者中CD147/基质金属蛋白酶-9(MMP-9)通路与颈动脉粥样硬化(CAS)发生的关系。方法选取T2DM合并高血压患者100例,根据颈动脉内中膜厚度(IMT)将其分为2组:观察组(存在CAS)28例、对照组(不存在CAS)72例。比较2组血清CD147、MMP-9水平;多因素Logistic回归分析T2DM合并高血压患者CAS发生的影响因素;受试者工作特征(ROC)曲线下面积(AUC)评价血清CD147、MMP-9对T2DM合并高血压患者CAS的诊断价值;Pearson相关分析血清CD147、MMP-9与CAS程度(IMT、斑块指数)的相关性。结果与对照组比较,观察组血清CD147、MMP-9水平更高(均P<0.05);血清CD147、MMP-9均为T2DM合并高血压患者CAS发生的危险因素(均P<0.05);血清CD147、MMP-9联合诊断T2DM合并高血压患者CAS的AUC值为0.907,明显高于单一指标检测;T2DM合并高血压患者血清CD147、MMP-9与IMT、斑块指数呈正相关(均P<0.05)。结论CD147/MMP-9通路参与T2DM合并高血压患者CAS的发生,是防治T2DM合并高血压患者CAS发生的靶点。

超低温冷冻对牛卵母细胞组蛋白乙酰化和膜蛋白CD9表达的影响

本试验旨在探讨玻璃化冷冻对牛体外成熟卵母细胞(MⅡ期)组蛋白乙酰化和膜蛋白CD9表达的影响。牛MⅡ期卵母细胞采用OPS法冷冻,即卵母细胞于10%EG+10%DMSO溶液中预处理30s,然后再移入玻璃化溶液EDFSF30中处理25s,以OPS为承载器投入液氮中。毒性组卵母细胞未投入液氮,其他过程与冷冻组相同,新鲜牛MⅡ期卵母细胞为对照组。卵母细胞解冻后,利用免疫荧光染色法检测存活细胞DNA组蛋白乙酰化;qRT-PCR和Western blot检测CD9mRNA蛋白的表达。结果表明:冷冻组卵母细胞形态正常率(93.8%)和存活率(92.7%)显著低于毒性组(100.0%,97.2%)和对照组(100.0%,98.5%)(P<0.05),而毒性组与对照组之间无显著差异。超低温冷冻后,卵母细胞DNA组蛋白乙酰化水平显著上升(P<0.05),CD9mRNA与蛋白表达显著降低(P<0.05)。以上显示,玻璃化冷冻不但降低了牛体外成熟卵母细胞的存活率,而且改变了DNA组蛋白乙酰化和膜蛋白CD9表达水平。

PD4、CD44v6及CD44v9蛋白在人喉癌组织中的表达及临床意义

目的：探讨支原体单克隆抗体PD4与黏附分子CD44v6、CD44v9蛋白在人喉癌组织中的表达及临床意义。方法：采用免疫组织化学Envision法检测212例喉不同病变组织标本（喉癌137例,喉癌前病变26例,声带息肉34例和癌周正常喉组织15例）中PD4、CD44v6、CD44v9蛋白的表达。结果：①PD4、CD44v6、CD44v9在人喉癌组织中表达阳性率分别为45.3%（62/137）、72.3%（99/137）、56.2%（77/137）,明显高于其他喉不同病变组织（均P〈0.01）。②中晚期（Ⅲ～Ⅳ期）、伴颈淋巴结转移的喉癌组织中PD4、CD44v6、CD44v9阳性表达率均显著高于早期（Ⅰ～Ⅱ期）和无颈淋巴结转移的喉癌组织（均P〈0.01）;喉癌术后3年或5年存活患者PD4、CD44v6、CD44v9表达阳性率明显低于生存时间未达3～5年者（P〈0.01或P〈0.05）。③PD4和CD44v6、CD44v9在人喉癌组织中联合表达阳性率为27.7%（38/137）,显著高于喉其他不同病变组织中联合表达阳性率（5.3%,4/75）（P〈0.01）。结论：喉癌的发生、发展及预后与PD4、CD44v6、CD44v9联合表达密切相关。

哺乳动物精卵黏附和融合的分子基础

哺乳动物受精是一个多分子参与的多级过程,在精卵融合形成一个受精卵时达到顶点。新的研究已表明:精卵黏附后,精子膜从赤道区开始与卵膜融合;有精子膜上的去整合蛋白金属蛋白酶蛋白家族(ADAM)、Izumo、附睾蛋白DE、卵膜上的整合蛋白、四次跨膜蛋白CD9、CD81、糖基磷脂酰肌醇锚定蛋白等多种分子参与精卵黏附和融合过程。

上皮性卵巢癌组织中MRP-1/CD9的表达及临床意义

目的探讨运动相关蛋白MRP-1/CD9在上皮性卵巢癌组织中的表达及临床意义.方法 2004年1～11月中国医科大学附属第二医院应用半定量RT-PCR方法,检测MRP-1/CD9mRNA在36例上皮性卵巢癌、6例交界性卵巢肿瘤、8例良性上皮性卵巢肿瘤和8例正常卵巢组织中的表达.结果 MRP-1/CD9mRNA在上皮性卵巢癌和交界性卵巢肿瘤组织中的表达率和表达强度分别为(33.3%,0.63±0.47)和(66.7%,1.10±0.40),与正常卵巢(100%,1.66±0.31)和卵巢良性肿瘤(100%,1.52±0.29)相比明显降低(P<0.05), 其在卵巢癌中的表达率和表达强度均与肿瘤分期呈负相关(P<0.05),而与组织分级和病理类型无关(P>0.05).结论 MRP-1/CD9的表达缺失在上皮性卵巢癌的发生、发展、浸润过程中起重要的作用,可作为卵巢癌生物学行为的重要指标.