雷帕霉素对S180肉瘤细胞及CD90、CD133、Notch1蛋白表达的影响

目的探讨雷帕霉素对小鼠S180肉瘤细胞生长及抗原分化簇90(CD90)、抗原分化簇133(CD133)、神经源性基因同源蛋白(Notch1)蛋白表达的影响。方法选取处于对数生长期的S180肉瘤细胞,雷帕霉素低、中、高剂量组加入20、50、100 nmol·L-1雷帕霉素,对照组加入等量培养液,采用CCK-8法检测细胞增殖,流式细胞术法检测细胞周期与凋亡。将KM雄性小鼠随机分为对照组以及雷帕霉素低、中和高剂量组,每组10只。按照人体临床用量的0.5、1.0、2.0倍换算小鼠雷帕霉素用量后灌胃,对照组以等量生理盐水灌胃,每日1次,共3周,构建小鼠S180肉瘤皮下荷瘤模型。末次灌胃后24 h,测定小鼠体质量,记录瘤质量并计算抑瘤率。分别采用免疫荧光染色和免疫组织化学染色检测小鼠肿瘤组织CD90、CD133和Notch1的蛋白表达。结果雷帕霉素作用S180肉瘤细胞后,细胞增殖抑制率显著升高(P<0.05),且与作用时间呈正相关;同一作用时间,细胞增殖抑制率随雷帕霉素浓度的增加而升高(P<0.05);不同浓度雷帕霉素作用S180肉瘤细胞48 h后,细胞阻滞于G0/G1期,细胞凋亡率显著升高(P<0.05);免疫荧光染色结果显示,与对照组比较,其他3组小鼠肿瘤组织CD90、CD133和Notch1表达水平显著降低,且随雷帕霉素浓度增加而降低(P<0.05);免疫组织化学染色结果显示,与对照组比较,其他3组小鼠肿瘤组织CD90、CD133和Notch1表达水平显著降低,且随雷帕霉素浓度增加而降低(P<0.05)。结论雷帕霉素能通过下调CD90、CD133和Notch1蛋白表达影响S180肉瘤细胞的增殖和凋亡,达到体内外抑瘤作用。

CD90蛋白的研究进展

目的总结CD90蛋白的研究进展。方法查阅近年来国内外有关CD90蛋白研究的文献并作综述。结果 CD90蛋白与细胞-细胞,以及细胞-细胞质间的作用有关;可促进神经轴突生长和神经再生,诱导胸腺细胞和间质细胞凋亡,参与细胞黏附、外渗和转移,调节纤维化;可作为癌症干细胞的候选标志物。结论 CD90蛋白在多种疾病的发生和发展过程中起重要作用,为肿瘤诊治提供了新的分子治疗靶点。

人类间充质干细胞与卵巢癌细胞间的相互作用研究

目的 通过人类间充质干细胞与卵巢癌细胞共培养方式,研究细胞与细胞间的相互作用方式.方法 用携带荧光基因第三代失活慢病毒载体感染干细胞和卵巢癌细胞,荧光显微镜下记录干细胞在肿瘤微环境中的相互作用过程,用流式细胞术研究共培养后干细胞和肿瘤细胞的细胞表面标志物表达情况;运用分子水平microarray技术,进一步提供蛋白水平表达变化的基因水平依据.结果 人脐带成功获取间充质干细胞（MSC）,成功标记的MSC和卵巢癌细胞SK-OV-3、NIH：OVCAR-3、SCCOHT-1经5-6d共培养后发现MSC促进卵巢癌细胞增殖及表达干细胞特有标志物CD90、部分CD73和CD105.发现在干细胞上有肿瘤细胞特有的CD326（EpCAM）表达.基因微阵列结果表明共培养导致不论肿瘤细胞亦或是干细胞都有大量相关基因的上调和下调.结论 人类间充质干细胞在与卵巢癌细胞相互作用的过程中明显促进卵巢癌细胞增殖,并导致卵巢癌细胞CD90及部分CD73、CD105表达升高,同时基因水平进一步支持MSC升高表达EpCAM.