NADH对L02细胞Bcl-2、Bax、P53、CD95及CD95L表达的影响

目的 研究抗氧化剂NADH对体外培养的正常人肝细胞系L0 2缺血再灌注损伤的保护作用及可能的机制。方法 实验分组 :将培养的L0 2细胞分为 :缺血再灌注损伤组 (I R) ,缺血再灌注损伤 +NADH(I R +NADH)及对照组 (未经处理的L0 2细胞 )。用流式细胞仪观察细胞处理后6、12、18及 2 4h细胞的凋亡率及 12h时 ,Bcl 2、Bax、P5 3、CD95及CD95L的表达 ,并以透射电镜观察细胞凋亡的超微结构。结果 NADH可明显抑制缺血再灌注损伤细胞的凋亡 ,并能上调Bcl 2表达 ,下调Bax、P5 3、CD95及CD95L的表达 ,与I R组相比较差异显著 (P <0 .0 5 )。透射电镜下可见典型的凋亡细胞的特征。结论 NADH对缺血再灌注损伤诱导的L0 2肝细胞有明显地保护作用。其作用机制可能与通过调节Bcl 2、Bax、P5 3。

SYBR荧光实时定量PCR检测肝移植受者CD95和CD95L mRNA表达

目的检测肝移植受者外周血淋巴细胞CD95和CD95L mRNA的表达,并探讨其在移植肝急性排斥反应中的意义。方法采用SYBR荧光实时定量PCR法检测56例肝移植受者外周血淋巴细胞CD95和CD95L mRNA的表达。结果 CD95和CD95L mRNA在移植肝急性排斥患者外周血中的表达均显著升高(P<0．01),时间上平均早于血肝功能酶谷丙转氨酶、谷草转氨酶升高2 d。结论 CD95和CD95L与移植肝急性排斥反应密切相关,CD95和CD95L mRNA可作为移植肝急性排斥反应发生的预测和诊断指标之一。

多发性硬化患者血和脑脊液淋巴细胞CD95和CD95L的变化

多发性硬化(multiple sclerosis,MS)是以中枢神经系统脱髓鞘和炎细胞浸润为特征的自身免疫性疾病.细胞凋亡在自身免疫性疾病的作用已引起重视[1],膜蛋白CD95通过与其配体CD95L的结合是触发凋亡的主要途径.本研究的目的是观察MS患者外周血(PB)和脑脊液(CSF)中淋巴细胞CD95和CD95L的表达水平.

CD95在大鼠急性脊髓损伤后细胞凋亡过程中的作用(英文)

目的通过对大鼠急性脊髓损伤模型CD95的检测,以探讨CD95在脊髓损伤后细胞凋亡过程中的作用。方法Wistar雌性大鼠42只,使用改良Allen氏法制作急性脊髓损伤模型36只,采用HE,Nissl染色和免疫组化方法,检测了损伤后1,4,8,24,72h及7d的脊髓组织。结果损伤后4h,损伤段灰质可见CD95阳性细胞,8h达高峰。正常组未见CD95阳性细胞表达。高倍镜观察,阳性细胞具有凋亡细胞的特征。结论CD95蛋白可能在诱导脊髓损伤后神经细胞凋亡的过程中,发挥着重要作用。

慢性HBV感染者CD8^+T细胞CD95、CD38、HLA-DR表达的变化和意义

目的检测慢性HBV感染者外周血CD8^+T细胞CD95、CD38、HLA-DR表达水平,探索HBV感染过程中CD8^+T细胞活化与耗竭的相关性。方法收集未经抗病毒治疗的HBV感染者76例及健康对照者14例外周血,根据外周血HBV DNA水平分为高病毒载量组与低病毒载量组;使用流式细胞术检测HBV感染者CD8^+T细胞CD95、CD38、HLA-DR的表达以及共表达水平,同时进行相关性分析。结果与健康对照组比较,慢性HBV感染者CD8^+T细胞CD95、HLA-DR的表达、CD38和HLA-DR的共表达水平显著升高(P<0.01);CD8^+T细胞CD95与HLA-DR表达呈正相关(P<0.05)。结论慢性HBV感染过程中CD95的表达可能对外周血CD8^+T细胞的耗竭过程发挥重要作用,而HLA-DR的表达升高和CD38+HLA-DR+CD8^+T细胞频率的升高提示CD8^+T细胞仍然维持着一定的效应潜能。

IL-10对脊髓损伤后细胞凋亡和CD95作用的初步探讨

目的检查急性脊髓损伤(SCI)后细胞凋亡及CD95的表达,初步探讨白细胞介素10(IL10)对大鼠SCI后细胞凋亡的干预作用。方法将SD雄性大鼠48只随机分为假手术组(n=6)、损伤组(n=30)、治疗组(n=12)。使用改良Allen法制作脊髓损伤模型,分别手术后4h、8h、24h、72h及7d处死并取材(每时间点n=6)。治疗组损伤后30min给予IL10。应用HE染色、免疫组化及凋亡细胞原位末端标记法(TUNEL)对损伤脊髓组织进行检测。结果损伤后4h,损伤段灰质可见CD95及TUNEL阳性细胞。CD95阳性细胞表达于8h达高峰;TUNEL阳性细胞于24～72h达高峰。TUNEL阳性细胞主要见于神经元及胶质细胞,以胶质细胞为主。IL10治疗组的TUNEL阳性细胞数在8h、72h明显减少;免疫组化检测CD95表达降低。正常组未见CD95及TUNEL阳性细胞表达。结论SCI后CD95的表达可能在SCI后诱导细胞凋亡的过程中起重要作用;早期应用IL10能干预SCI后的细胞凋亡,但不减少CD95的表达。

乌司他丁对肾移植患者围手术期外周血T细胞亚群CD95表达以及血浆sICAM-1、IL-8水平的影响

目的观察乌司他丁对肾移植患者围手术期外周血T细胞亚群CD95表达及外周血细胞因子可溶性细胞间黏附分子1（sICAM-1）、白细胞介素8（IL-8）水平的影响,探讨其促进移植肾功能早期恢复的机制及对患者机体免疫功能的调节作用。方法择期肾移植患者51例,ASAⅡ~Ⅲ级,随机分成乌司他丁干预组（n=26）和对照组（n=25）。观察两组麻醉给药前,术后第7、14天外周血T细胞亚群CD95表达水平及外周血细胞因子水平的变化。结果两组患者肾移植术后第7、14天外周血T细胞亚群CD95表达水平及外周血细胞因子sICAM-1、IL-8水平较麻醉给药前前显著升高（P〈0.01）,在第7天时点最高,在第14天时点仍显著高于血管开放前水平（P〈0.05）;但乌司他丁组升高的幅度在第7、14天时点均对照组组小（P〈0.05）。结论肾移植患者围手术期外周血T细胞亚群CD95表达水平增高,CD95表达增加是肾移植患者免疫系统亢进的表现,乌司他丁能有效减少肾移植围术期CD95的表达,能够保护和恢复肾移植术后患者的细胞免疫功能。肾移植围术期血中促炎因子sICAM-1、IL-8水平显著增高,可能与肾缺血再灌注损伤有关。乌司他丁能有效减少肾移植围术期ICAM-1、IL-8的释放,对缺血再灌注损伤后的移植肾有保护作用。

肺结核患者血中CD95与PD-1,PD-L1的检测与分析

目的 研究肺结核病人外周血T淋巴细胞上CD95与程序性死亡因子-1（PD-1）及其配体PD-L1的表达情况,初步探讨其在肺结核发生发展中的意义.方法 采用流式细胞术（Flow Cytometry,FCM）检测63例初治活动性肺结核患者外周血T淋巴细胞上CD95与PD-1,PD-L1的表达水平,并与正常人对照,进行临床分析.结果 初治活动性肺结核患者外周血T淋巴细胞上CD95的表达率为（62.07±14.87）%,与正常对照组（35.74±10.14）%比较显著升高（t=8.515,P＜0.05）;PD-L1的表达率为（26.55±12.8）%,与正常对照组（18.56±6.46）%比较显著升高（t=3.127,P＜0.05）;而PD-1的表达率（13.64±9.10）%与正常对照组（28.71±7.06）%比较显著降低（t=-7.766,P＜0.05）;经相关性分析,初治活动性肺结核患者外周血T淋巴细胞上CD95与PD-1的表达水平呈正相关,差异具有统计学意义（r=0.279,P＜0.05）,CD95与PD-L1表达水平无确定相关性（r=-0.025,P＞0.05）.结论 CD95和PD-L1在肺结核病患者T淋巴细胞上的表达明显升高,这可能在肺结核病的发生、发展过程中起重要作用.

慢性HBV感染者外周血CD19+B细胞CD95与CD38的表达

目的:检测慢性HBV感染者外周血CD19+B细胞CD95与CD38的表达水平,研究HBV感染过程中CD95、CD38在B细胞中的表达规律。方法:募集慢性HBV感染者60例,根据血清HBV病毒载量,分为高病毒载量组、低病毒载量组,另取13例健康志愿者血液作为健康对照;利用流式细胞术检测慢性HBV感染者中CD19+B细胞CD38、CD95的表达情况,并分析不同指标表达的相关性。结果:与健康对照组比较,慢性HBV感染者CD19+B细胞CD95表达水平、CD95与CD38共表达水平显著升高(均P<0.01),相关性分析表明慢性HBV感染者外周血B细胞频率与B细胞CD95、CD38的表达水平不存在相关关系(P>0.05)。结论 :在慢性HBV感染过程中,CD19+B细胞可能通过表达CD95或共表达CD95、CD38参与了机体对HBV感染的免疫应答过程。

HIV感染对记忆型和处女型CD4^+T细胞上CD95的影响

目的 :了解 CD95在 HIV感染者记忆型和处女型 CD4 + T细胞表面的表达情况 ,探讨 Fas/ CD95在 HIV感染中的作用。方法 :采用流式细胞检测仪 (FACS)对 HIV感染者外周血 CD4 + T细胞表面 CD95、CD4 5 RA、CD4 5 RO的表达进行分析 ,用 EL ISA检测血清中 Fas水平。结果 :HIV感染后 ,血清 Fas水平随疾病的进展而逐渐升高 ,同时伴有处女型 T细胞表面 CD95表达增高以及记忆型 T细胞 CD95表达逐渐下降。结论 :Fas参与了 HIV的感染过程。研究 Fas和 CD95、CD4 5 RA、CD4 5 RO之间的关系 ,可以加深对 HIV致病机制的认识 ,并可了解疾病的进展情况和指导治疗。

老年人外周血淋巴细胞的凋亡及CD28和CD95的表达

目的通过对健康老年人与健康成年人外周血淋巴细胞的凋亡率及CD28和CD95表达水平的比较性研究,观察衰老对淋巴细胞凋亡的影响,以及CD28和CD95与淋巴细胞凋亡的关系。方法将实验对象分为2组:成年组(25～59岁)与老年组(60～90岁)各20例,采用免疫荧光标记流式细胞术检测外周血淋巴细胞CD28和CD95的水平;Annexin-V-FITC/PI双染色流式细胞术测定地塞米松诱导的淋巴细胞凋亡。结果老年组:淋巴细胞凋亡率〔(14.90±4.12)%〕显著高于成年组〔(8.12±3.12)%〕;CD28+CD95-〔(8.80±4.86)%〕及CD28+〔(36.31±10.38)%〕均明显低于成年组〔(23.09±3.48)%、(52.29±4.90)%〕,而CD28-CD95+〔(53.23±8.28)%〕、CD95+〔(80.25±7.19)%〕及CD28-〔(63.69±10.38)%〕明显高于成年组〔(33.58±4.72)%、(63.18±4.12)%、(47.71±4.90)%〕;CD28+CD95+在两组间差异无统计学意义。淋巴细胞凋亡率与CD28(CD28+)呈负相关,与CD95(CD95+)呈正相关。结论老年人淋巴细胞凋亡率上升;CD28+表达下降,CD28-、CD95+表达上升;淋巴细胞的凋亡率与CD28+、CD95+有相关性。提示老化导致老年人淋巴细胞凋亡增加,CD28和CD95的变化与淋巴细胞凋亡密切相关。

慢性肝炎组织中CD95（Fas／APO－1）抗原的分布及其意义

ＣＤ９５（Ｆａｓ／ＡＰＯ－１）是存在于细胞表面介导细胞凋亡的膜受体分子，属于ＴＮＦＲ／ＮＧＦＲ超家族的成员。本文用免疫组织化学法研究Ｆａｓ抗原在乙型和丙型肝炎病毒引起的慢性肝炎肝组织中的分布，探讨细胞凋亡启动因子Ｆａｓ在病毒性肝炎发病机制中的作用。结果显示，Ｆａｓ抗原表达阳性细胞在肝小叶中多呈散在或灶状分布于肝小叶周边靠近汇管区的碎屑样坏死区内，周围有淋巴细胞浸润，但也有少数病例Ｆａｓ抗原表达在肝小叶内呈弥漫分布，一般局限于某个肝小叶。Ｆａｓ抗原仅表达于肝细胞浆和／或胞膜上且呈细颗粒状均匀分布，核内未见表达，但其表达的肝细胞又仅限于核心抗原阳性和／或ＨＢｘＡｇ阳性的肝细胞。随着慢性肝炎组织炎症活动性的增加及纤维化程度的增力。，Ｆａｓ抗原表达的阳性率也显著增加（Ｐ＜０．０５）。Ｆａｓ抗原表达阳性的病例在活检时的血清ＡＬＴ浓度（８３．５±２７．４ＩＵ／ｍｌ）明显高于该抗原表达阴性者（２６．５±１８．７ＩＵ／ｍｌ）（Ｐ＜０．００１），而与患者的年龄和性别无关。结论：Ｆａｓ抗原表达的阳性率与慢性肝炎的活动度及肝纤维化的程度相关；Ｆａｓ杭原表达阳性的病例血清ＡＬＴ水平高，提示Ｆａｓ高表达于病变较严重的组织；Ｆａｓ抗原?

CD95介导细胞凋亡机制的最新研究动态

ＣＤ９５介导细胞凋亡机制的最新研究动态刘志国樊代明李恩善＊（第四军医大学西京医院全军消化中心＊免疫学教研室，西安７１００３２）ＣＤ９５（Ｆａｓ／Ａｐｏ－Ｉ）为神经生长因子／肿瘤坏死因子（ＮＧＦ／ＴＮＦ）受体超家族成员，主要表达于活化Ｔ细胞表面，其配体...

类风湿关节炎survivin,CD95及PTEN相关信号分子研究进展

类风湿关节炎是一种以关节滑膜浸润性增生、炎症反复发作及关节软骨和骨质破坏为主要病理改变的慢性自身免疫性疾病,凋亡抑制、过度增殖并侵袭关节软骨及骨质是类风湿关节炎的主要分子机制。本文对survivin、CD95、PTEN及其他基因的生物学特性,以及其对类风湿性关节炎病情进展和疾病调控中的作用进行综述。

肾移植术后急性排斥受者外周血中CD95定量表达水平的动态观察

目的监测肾移植术后急性排斥受者外周血中T淋巴细胞表面CD95定量表达的动态变化。方法采集肾移植受者不同时间段的抗凝静脉血与相应荧光标记的单克隆抗体反应,用双色流式细胞术定量分析T淋巴细胞表面CD95的表达量,同时分析健康对照组CD95的定量表达。结果健康成人T淋巴细胞表面CD05的表达量为(6 226.5±2 162.3)分子/细胞,无性别及年龄差异(P>0.05);肾移植术后稳定组受者CD95的表达量为(7 323.4±1 769.8)分子/细胞,与健康对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。肾移植受者在术后出现急性排斥时CD95表达水平明显升高[(23 107.4±10 517.7)分子/细胞],免疫冲击治疗后呈下降趋势,至治疗2个月后CD95的表达水平与稳定组差异已无统计学意义(P>0.05)。结论CD95参与了肾移植术后急性排斥反应的免疫过程,其表达水平可作为肾移植术后受者急性排斥反应的辅助诊断指标,且在评估治疗效果中具有重要意义。

肝细胞癌患者外周血CD95和OX40L的表达

目的:研究肝细胞癌(HCC)患者外周血CD95和OX40L mRNA的表达情况,并探讨其临床意义。方法:将研究对象的淋巴细胞与相应荧光标记的单克隆抗体反应,经洗涤、固定后,应用双色流式细胞术分析T淋巴细胞表面CD95+CD3+的表达量。采用荧光定量逆转录聚合酶链反应(FQ-RT-PCR)方法检测外周血单个核细胞共刺激分子OX40L mRNA的表达水平。结果:HCC患者外周血CD95+CD3+的表达水平明显高于健康对照组,差异有统计学意义([34±20)%vs(20±7)%,t=2.960,P<0.01];HCC患者外周血单个核细胞OX40L mRNA表达水平明显低于健康对照组,差异有统计学意义(0.46±0.36vs0.86±0.70,t=2.302,P<0.05)。结论:HCC患者外周血CD95及OX40L分子的异常表达在HCC的发生中起重要作用。

慢性乙型肝炎、肝硬化患者外周血淋巴细胞CD95的表达及意义

目的 探讨慢性乙型肝炎 (CHB)、肝硬化 (LC)患者外周血淋巴细胞 (PBL)凋亡在乙型肝炎病毒 (HBV)感染发病机制中的作用。方法 用流式细胞仪对 70例慢性乙型肝炎、肝硬化患者PBL的Fas(CD95 )表达进行了检测。30例正常人作为对照组。观察PBL中凋亡细胞比例 ,病例组同时检测HBV复制指标。结果 ①慢性乙型肝炎、肝硬化患者PBL凋亡率均明显高于正常对照组 (P <0 .0 1) ,肝硬化患者低于慢性乙型肝炎患者 (P <0 .0 5 ) ;②病毒复制指标阳性患者PBL的CD95表达率明显高于阴性患者 (P <0 .0 5 )。结论 ①CHB患者的PBL存在自体凋亡现象 ,这可能是HBV致病机制及持续感染的重要因素 ;②CHB的PBL自体凋亡发生率与HBV的复制有关。

慢性阻塞性肺疾病患者外周血CD2^+、CD3^+、CD4^+、CD8^+、CD95^+表达及临床意义

T淋巴细胞亚群在调节机体免疫机能中发挥着重要作用,也在某些疾病的发生与发展中具有重要意义.本研究采用流式细胞术检测30例慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者外周血CD2+、CD3+、CD4+、CD8+及CD95+水平,探讨其在COPD发生、发展中的作用.

腺病毒载体RNA干扰抑制Fas(CD95)表达作用

目的:观察串联表达Fas-shRNA的腺病毒载体pAdeno-X-siFas 1+siFas 2对脂多糖(LPS)/D-氨基半乳糖(D-GalN)诱导BALB/c鼠肝细胞Fas过表达的影响。方法:20只雄性BALB/c鼠随机分为:RNA干扰组(RNAi组)、腺病毒通用阴性对照组(HK组)、模型组(M组)和正常对照组(N组)。RNAi组于0 h、24 h经尾静脉注射腺病毒载体pAdeno-X-siFas 1+siFas 2两次,HK组尾静脉注射阴性腺病毒载体;M组尾静脉注射生理盐水;24 h后上述3组腹腔注射LPS/D-GalN;N组尾静脉和腹腔均注射生理盐水。注射LPS/D-GalN8 h后,麻醉并处死鼠取肝脏,冰冻切片荧光显微镜检测腺病毒转染率;Western Blot检测各组肝细胞Fas表达;RT-PCR检查Fas mRNA表达。结果:RNAi组和HK组腺病毒对肝细胞的转染率差异没有显著性(P=0.935);RNAi组与M组和HK组相比肝细胞Fas表达水平显著减少(P<0.01),其Fas mRNA水平也明显降低(P<0.01)。结论:串联重组腺病毒载体能有效转染肝细胞并抑制LPS/D-GalN诱导的BALB/c鼠肝细胞Fas基因的过表达。