HBV相关肝细胞癌组织中CDC37基因启动子微卫星多态性及其与基因表达的关系

目的：探讨乙型肝炎病毒（ HBV）相关肝细胞癌（ HCC）组织中CDC37基因启动子区微卫星的多态性及其与基因表达的关系。方法22例接受手术治疗的HBV相关HCC患者，分别提取其癌组织和癌旁组织中的基因组DNA，PCR扩增CDC37基因启动子区含微卫星区段序列，并克隆至PMD-18T载体，每份标本至少挑选3个克隆进行测序，然后对HCC组织和癌旁组织、CDC37过表达的HCC组织与相应的癌旁组织、CDC37过表达和无过表达的HCC组织的启动子GT微卫星多态性组成形式进行比较分析。结果本组患者HCC组织和癌旁组织中CDC37基因启动子区存在（GT）n1-GC-（GT）n2多种类型的微卫星形式，位于CDC37启动子区1368～1415位，以（GT）10-GC-（GT）9最为常见。 HCC组织与癌旁组织的CDC37启动子微卫星多态性形式的总体分布相比，P＞0．05；CDC37过表达HCC组织与相应的癌旁组织的微卫星的总体分布相比，P＞0．05；而CDC37过表达和无过表达HCC组织的微卫星的总体分布相比，P＜0．05，其中（GT）10-GC-（GT）9形式在CDC37过表达患者中所占比例高于无过表达患者，两者相比，P＜0．05，（GT）10-GC-（GT）12形式在CDC37无过表达患者中所占比例高于过表达患者，两者相比，P＜0．05。结论 HBV相关HCC患者癌组织中CDC37基因启动子区存在微卫星多态性，CDC37过表达和无过表达HCC组织的微卫星形式有不同。

HBV复制及不同基因表达不影响CDC37水平

目的研究HBV复制和不同基因表达是否会影响肝细胞内CDC37的表达水平。方法首先扩增HBV6种基因P、preS1、preS2、S、C和X,并构建至pCMV表达载体,分别转染Huh7和HepG2细胞系,Western blot检测CDC37表达水平;另外将含CDC37基因启动子序列的荧光素酶报告质粒pGL3与HBV的6种基因表达质粒分别共转染Huh7和HepG2细胞系,检测荧光素酶信号。其次分别构建B、C、D和CD重组体4种HBV基因型毒株的1.28拷贝全基因质粒,运用AdEasy腺病毒系统进行重组和包装后分别感染Huh7和HepG2细胞系,并检测CDC37表达水平。结果基因表达结果显示,HBV6种基因的表达对肝癌细胞系内CDC37的表达水平无明显影响,而且HBV6种不同蛋白的表达对CDC37启动子的活性无明显影响。1.28拷贝HBV全基因质粒的感染结果显示,HBV不同基因型毒株的复制对CDC37基因的表达水平亦无明显影响。结论 HBV的复制和不同基因的表达不会明显影响CDC37的表达水平。