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龙眼体胚CDC48基因的克隆、原核表达及其在体胚发生过程中的表达分析 被引量:1
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作者 陈义挺 赖钟雄 +4 位作者 方智振 蔡英卿 林玉玲 李焕苓 陈登云 《热带亚热带植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第3期233-241,共9页
为探讨龙眼(Dimocarpus longan)体胚CDC48基因的表达方式,采用RT-PCR和RACE方法,从龙眼胚性愈伤组织中克隆得到1条长度为2620 bp、含有完整开放阅读框的DlCDC48基因cDNA序列(GenBank登录号:EU606206)和长度为2418 bp的DNA序列(GenBank... 为探讨龙眼(Dimocarpus longan)体胚CDC48基因的表达方式,采用RT-PCR和RACE方法,从龙眼胚性愈伤组织中克隆得到1条长度为2620 bp、含有完整开放阅读框的DlCDC48基因cDNA序列(GenBank登录号:EU606206)和长度为2418 bp的DNA序列(GenBank登录号:FJ590953)。DlCDC48编码1个含有805个氨基酸的蛋白质。DlCDC48基因不含内含子。生物信息学分析表明:DlCDC48蛋白为不具跨膜结构域的亲水性胞质蛋白,不具有信号肽,定位在细胞核;与其他植物的CDC48有较高的同源性。将DlCDC48基因构建成原核表达载体,经IPTG诱导表达了1个分子量约为89 kD的蛋白。利用实时荧光定量PCR(qPCR)技术,DlCDC48在龙眼体胚发育过程中的各个阶段均有表达,其中球形胚时的表达量最低,胚性紧实球形结构阶段的表达量最高。这为进一步研究CDC48基因在植物体胚发生中的作用奠定基础。 展开更多
关键词 龙眼 体细胞胚胎发生 cdc48基因 生物信息学 LONGAN (Dimocarpus longan)
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细胞周期调控的一个重要元素—CDC48 被引量:2
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作者 刘丽娜 刘祥林 陈志玲 《生物技术通报》 CAS CSCD 2006年第5期26-29,共4页
细胞周期调控研究已成为当前生物学领域的一大热门课题,对哺乳动物和酵母细胞周期调控的研究已经非常深入且日臻成熟;植物细胞周期调控研究起步相对较晚但近些年来在该领域也取得了很大的进展。CDC48是真核生物中普遍存在的一个重要的... 细胞周期调控研究已成为当前生物学领域的一大热门课题,对哺乳动物和酵母细胞周期调控的研究已经非常深入且日臻成熟;植物细胞周期调控研究起步相对较晚但近些年来在该领域也取得了很大的进展。CDC48是真核生物中普遍存在的一个重要的细胞周期调节基因,其蛋白产物CDC48也是研究较为成熟的一个周期蛋白,国外生物学者对该基因已经开展多年研究,而国内尚未见任何报道。主要论述近几年来有关真核生物酵母、哺乳动物和植物CDC48的研究现状及发展趋势。 展开更多
关键词 细胞周期 周期调控 cdc48 真核生物
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去泛素酶复合体Ubp3/Bre5的制备及与Cdc48作用(英文)
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作者 苏文成 吕操 +8 位作者 时丽丽 景晓飞 盖园明 张洁 谭焕波 王鹏举 夏立新 邹培建 秦刚 《深圳大学学报(理工版)》 EI CAS CSCD 北大核心 2015年第1期58-67,共10页
泛素化是一种存在于真核细胞中与生理功能密切相关的蛋白修饰,泛素化与去泛素化处于动态调节过程中.Ubp3是与人USP10同源的酵母去泛素化酶,结合辅引子Bre5在细胞内发挥广泛作用.为研究该复合体的工作机制,制备重组蛋白复合体,在大肠杆... 泛素化是一种存在于真核细胞中与生理功能密切相关的蛋白修饰,泛素化与去泛素化处于动态调节过程中.Ubp3是与人USP10同源的酵母去泛素化酶,结合辅引子Bre5在细胞内发挥广泛作用.为研究该复合体的工作机制,制备重组蛋白复合体,在大肠杆菌中成功表达并纯化重组Ubp3与Bre5单体及Ubp3/Bre5复合体,首次成功大规模制备重组Ubp3/Bre5复合体.通过一系列pulldown实验,检验Ubp3/Bre5与AAA家族中泛素选择性ATP酶Cdc48的相互作用模式,结果发现,Ubp3及Bre5无法单独与Cdc48结合,但Ubp3/Bre5复合体可以有效与Cdc48相互作用.提出了Ubp3/Bre5-Cdc48相互作用的新模式,制备了高质量重组Ubp3/Bre5复合体.该研究为通过生化及结构生物学进行分子机制探索奠定了基础. 展开更多
关键词 结合蛋白质 Ubp3去泛素化酶 结合辅因子Bre5 ATP酶cdc48 去泛素化复合体 与谷光苷肽巯基转移酶沉淀试验 直接相互作用
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CDC48B facilitates the intercellular trafficking of SHORT-ROOT during radial patterning in roots
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作者 Lihui Yang Mingyue Zhu +10 位作者 Yi Yang Ke Wang Yulei Che Shurui Yang Jinxiang Wang Xin Yu Lixin Li Shuang Wu Klaus Palme Xugang Li Yong Wang 《Journal of Integrative Plant Biology》 SCIE CAS CSCD 2022年第4期843-858,共16页
CELL DIVISION CONTROL PROTEIN48(CDC48)is essential for membrane fusion,protein degradation,and other cellular processes.Here,we revealed the crucial role of CDC48B in regulating periclinal cell division in roots by an... CELL DIVISION CONTROL PROTEIN48(CDC48)is essential for membrane fusion,protein degradation,and other cellular processes.Here,we revealed the crucial role of CDC48B in regulating periclinal cell division in roots by analyzing the recessive gen1 mutant.We identified the GEN1 gene through map-based cloning and verified that GEN1 encodes CDC48B.gen1 showed severely inhibited root growth,increased periclinal cell division in the endodermis,defective middle cortex(MC)formation,and altered ground tissue patterning in roots.Consistent with these phenotypes,CYCLIND 6;1(CYCD6;1),a periclinal cell division marker,was upregulated in gen1 compared to Col-0.The ratio of SHR_(pro):SHR-GFP fluorescence in pre-dividing nuclei versus the adjacent stele decreased by 33%in gen1,indicating that the trafficking of SHORT-ROOT(SHR)decreased in gen1 when endodermal cells started to divide.These findings suggest that the loss of function of CDC48B inhibits the intercellular trafficking of SHR from the stele to the endodermis,thereby decreasing SHR accumulation in the endodermis.These findings shed light on the crucial role of CDC48B in regulating periclinal cell division in roots. 展开更多
关键词 ARABIDOPSIS cdc48B cell division control periclinal cell division SHR
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A converged ubiquitin-proteasome pathway for the degradation of TOC and TOM tail-anchored receptors
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作者 Meijing Yang Shuai Chen +7 位作者 Shey-Li Lim Lang Yang Jia Yi Zhong Koon Chuen Chan Zhizhu Zhao Kam-Bo Wong Junqi Wang Boon Leong Lim 《Journal of Integrative Plant Biology》 SCIE CAS CSCD 2024年第5期1007-1023,共17页
In plants,thousands of nucleus-encoded proteins translated in the cytosol are sorted to chloroplasts and mitochondria by binding to specific receptors of the TOC(translocon on the outer chloroplast membrane)and the TO... In plants,thousands of nucleus-encoded proteins translated in the cytosol are sorted to chloroplasts and mitochondria by binding to specific receptors of the TOC(translocon on the outer chloroplast membrane)and the TOM(translocon on the outer mitochondrial membrane)complexes for import into those organelles.The degradation pathways for these receptors are unclear.Here,we discovered a converged ubiquitin-proteasome pathway for the degradation of Arabidopsis thaliana TOC and TOM tail-anchored receptors.The receptors are ubiquitinated by E3 ligase(s)and pulled from the outer membranes by the AAA+adenosine triphosphatase CDC48,after which a previously uncharacterized cytosolic protein,transmembrane domain(TMD)-binding protein for tail-anchored outer membrane proteins(TTOP),binds to the exposed TMDs at the C termini of the receptors and CDC48,and delivers these complexes to the 26S proteasome. 展开更多
关键词 26S proteasome cdc48 SP1 TOC TOM UBIQUITINATION
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