miR-3127-5p靶向抑制Cdk10表达促进肝癌细胞迁移与侵袭

目的探究miR-3127-5p在肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)中的表达情况、临床意义及作用机制。方法实时定量PCR(qPCR)检测miR-3127-5p在HCC组织与癌旁组织、正常肝细胞(L02)与HCC细胞系中的表达情况;TCGA数据库分析正常肝组织及肝癌组织中miR-3127-5p的表达差异;分析miR-3127-5p的表达与HCC患者临床病理特征及预后的关系;在HCCLM3细胞中敲减miR-3127-5p,Transwell实验来检测细胞侵袭及迁移能力;TargetScan数据库预测miR-3127-5p下游靶基因,并通过双荧光素酶报告基因实验加以验证。结果与癌旁组织和正常肝细胞相比,miR-3127-5p在HCC组织及细胞系中均高表达(P<0.05),与门静脉癌栓(P=0.016)及TNM分期(P=0.016)有关;基于TCGA数据库数据的生存分析显示,miR-3127-5p高表达与不良预后相关(P=0.002);在HCCLM3细胞中敲减miR-3127-5p抑制细胞的侵袭及迁移;通过生物信息学预测并通过双荧光素酶报告基因实验证实细胞周期素依赖性激酶10(cyclin-dependent kinase 10,Cdk10)是miR-3127-5p的直接靶基因,回复实验证实Cdk10介导了miR-3127-5p对肝癌细胞侵袭及迁移能力的促进作用。结论在HCC中miR-3127-5p通过靶向抑制抑癌基因Cdk10从而促进肝癌细胞侵袭及迁移。

卵巢癌中CDK10基因启动子甲基化检测的临床意义

目的:分析卵巢癌中受体O型蛋白酪氨酸磷酸酶(CDK10)基因启动子甲基化状态及临床意义。方法:应用甲基化特异性PCR检测CDK10基因在50例卵巢癌组织和27例正常卵巢组织中的甲基化状态并结合临床病理资料进行分析。结果:在卵巢癌组织中CDK10甲基化阳性率为60.0%(30/50),正常卵巢组织未出现CDK10甲基化;CDK10甲基化与肿瘤临床分期、病理分型与Ki-67表达相关(P<0.05)。结论:CDK10基因甲基化可能是参与卵巢癌发展的重要分子事件。

护理风险管理对降低CDK10表达阳性的肝癌放疗患者并发症发生率的意义

目的:探讨护理风险管理对降低周期素依赖性激酶 10(CDK10)表达阳性的肝癌放疗患者并发症发 生率的意义。方法:CDK10表达阳性的 82例肝癌患者平分成对照组和观察组各 41例,对照组在常规治疗的 基础上采用常规护理,观察组在对照组的基础上采用护理风险管理。比较两组患者并发症、护理满意度及护 理后生活质量水平变化情况。结果:观察组的并发症总发生率显著低于对照组(P<0.05)。观察组的满意度 显著高于对照组(P<0.05)。护理 1个月后,观察组生活质量评分显著高于对照组(P<0.05)。结论:采用护 理风险管理可有效降低 CDK10表达阳性的肝癌放疗患者并发症发生率并提高生活质量水平,患者护理满意 度高。

CDK10在肝细胞癌组织中的表达及其临床意义

目的探究周期素依赖性蛋白激酶10(CDK10)在肝细胞癌(HCC)组织内的表达及与患者临床特征和预后的关系。方法采用免疫组化技术检测在HCC组织芯片中CDK10的表达情况;采用卡方分析比较CDK10表达差异与肝细胞癌患者各临床参数之间的关联,并结合Kaplan-Meier生存分析和COX比例风险模型评价CDK10的表达与患者预后的相关性。结果CDK10蛋白在HCC组织中阳性表达于细胞质,癌组织中的表达(32.98%)显著低于癌旁组织(59.30%)(P<0.05)。CDK10高表达与组织学分级、肿瘤分期、TNM分期、肿瘤大小、血清AFP水平均呈正相关(P<0.05)。CDK10高表达组肝细胞癌患者的术后生存时间明显高于CDK10低表达组肝细胞癌患者(P<0.05);COX多因素分析提示,CDK10表达水平与组织学分级可作为影响肝细胞癌患者生存的独立预后指标(P<0.05)。结论CDK10可作为一种抑癌基因低表达于HCC患者的肿瘤组织,有望成为肝癌早期诊断的分子标志物和判断预后的参考指标。

HEK293细胞中CDK10蛋白复合体的分离纯化

通过半定量RT-PCR(reverse transcriptase PCR)检测了CDK10在人胚胎肾细胞(HEK293)、人宫颈癌细胞(HeLa)、人乳腺癌细胞(MCF7)中的表达水平,克隆并构建了全长CDK10基因的真核表达质粒.在HEK293中筛选得到了稳定表达CDK10-Flag的细胞系,大规模培养该细胞系,分离细胞核、细胞质提取物,在非变性条件下利用anti-Flag抗体免疫共沉淀(Immunoprecipitation,IP),银染及蛋白质免疫印迹检测结果表明分离到CDK10蛋白及与其可能结合的其它蛋白,为质谱(Mass Spectrum,MS)鉴定提供材料.

周期素依赖性激酶10在胃癌组织中的表达及其临床意义

目的研究分析胃癌组织中周期素依赖性激酶10(CDK10)表达的临床意义。方法应用免疫组织化学EnVision法检测128例胃癌石蜡标本中CDK10的表达状态并结合临床病理资料进行统计分析,用Kaplan-Meier生存期分析研究CDK10同胃癌患者预后的相关性。结果胃癌组织中CDK10表达缺失率50.8%(65/128),同胃癌临床分期(P<0.05)、淋巴结转移(P<0.05)、远处转移(P<0.05)、病理分化程度(P<0.05)有相关性。结论 CDK10表达下调同胃癌临床病理特征密切相关,可能是参与胃癌发展的重要分子事件。

周期素依赖性激酶10在食管鳞癌中的表达及其临床意义

目的分析食管鳞癌组织中周期素依赖性激酶10(CDK10)表达的临床意义。方法应用免疫组织化学EnVision法检测208例食管鳞癌标本中CDK10的表达状态并结合临床病理资料进行统计分析,用Kaplan-Meier方法分析CDK10表达与食管鳞癌患者预后的关系。结果食管鳞癌组织中CDK10表达在临床TNM分期中Ⅲ/Ⅳ期高于Ⅰ/Ⅱ期,淋巴结转移组(N1~N3)高于无淋巴结转移组(N0),T3/T4组高于T1/T2组,男性患者组高于女性患者组(P均<0.05)。食管鳞癌组织中CDK10高表达的患者总生存期低于CDK10低表达的患者(P<0.001)。结论 CDK10表达同食管鳞癌患者预后密切相关,可能是参与食管鳞癌发展的重要分子事件。

乳腺癌组织中周期素依赖性激酶10基因启动子甲基化状态检测的临床意义

目的探讨乳腺癌组织中周期素依赖性激酶10(cyclin-dependent kinase 10,CDK10)基因启动子甲基化状态及其与临床病理参数的联系。方法应用甲基化特异性聚合酶链反应检测CDK10基因启动子在50例乳腺癌组织及相应癌旁组织中的甲基化状态并结合临床病理资料进行分析。结果在乳腺癌组织中CDK10基因甲基化阳性率为60%(30/50),癌旁对照组织未出现CDK10基因甲基化。CDK10基因甲基化同淋巴结转移与临床分期显著相关(P<0.05)。结论 CDK10基因甲基化与乳腺癌临床分期密切相关,可能是参与乳腺癌发展的重要分子事件。

Al Kaissi综合征1例患儿的基因变异分析及文献复习

目的探讨1例Al Kaissi综合征患儿的遗传学病因,并为其家系提供产前诊断。方法选取2021年3月6日于河南省郑州大学第一附属医院就诊的1例Al Kaissi综合征患儿为研究对象。提取患儿基因组DNA,应用拷贝数变异测序(CNV-seq)和全外显子组测序(WES)技术对患儿进行遗传变异筛查,应用PCR-琼脂糖凝胶电泳和实时荧光定量PCR技术(qPCR)对筛查结果进行验证,同时验证其父母以明确变异来源,并对该家系的产前绒毛样本进行检测。结果患儿为6岁4个月男性,具有低耳位、招风耳和三角脸等特殊面容,语言和智力发育迟缓,存在先天性室间隔缺损。CNV-seq结果未见明显异常,WES结果提示患儿CDK10基因第1、2外显子纯合缺失,PCR-琼脂糖凝胶电泳和qPCR结果进一步证实患儿父母均为CDK10基因第1、2外显子杂合缺失携带者。该家系产前绒毛样本提示胎儿为CDK10基因第1、2外显子杂合缺失携带者。结论结合临床表型,上述患儿考虑为CDK10基因第1、2外显子纯合缺失所致的Al Kaissi综合征。

周期素依赖性激酶10在口腔鳞癌中的表达及其临床意义

目的分析口腔鳞癌组织中周期素依赖性激酶10(CDK10)表达的临床意义。方法应用免疫组织化学EnVision法检测208例口腔鳞癌标本中CDK10的表达状态并结合临床病理资料进行统计分析,Kaplan-Meier方法研究CDK10同口腔鳞癌患者预后的相关性。COX风险比例模型进行单因素分析和多因素分析确立影响患者的独立预后因素。结果口腔鳞癌组织中CDK10阳性表达率为50.5%,同T分期、临床TNM分期、淋巴结转移和患者总生存期显著相关。单因素分析显示CDK10表达是影响患者生存期的危险因素。结论CDK10表达同口腔鳞癌临床病理特征和患者预后密切相关,可能是参与口腔鳞癌发展的重要分子事件。

人周期素依赖性激酶10真核表达质粒的构建及鉴定

目的构建人周期素依赖性激酶10(cyclin-dependent kinase 10,CDK10)真核表达质粒,并进行鉴定。方法采用RT-PCR法从人鼻咽癌细胞株HNE1中扩增CDK10基因全长编码区序列,克隆入真核表达载体pc DNA3.1(+)中,构建重组表达质粒pc DNA-CDK10,转染人鼻咽癌细胞株CNE-2,采用Western blot法检测转染细胞中CDK10蛋白的表达水平。结果重组真核表达质粒pc DNA-CDK10经双酶切及测序证实构建正确;经800μg/ml的G418筛选2周后,获得过表达CDK10的稳定转染细胞系CDK10c1和CDK10c2;与空载体转染对照组相比,CDK10c1和CDK10c2细胞中CDK10蛋白的表达量均显著升高(P均<0.05)。结论成功构建了人CDK10真核表达质粒。