CDK11p58在H_2O_2诱导PC12细胞凋亡中表达及意义

目的:观察CDK11p58在H2O2诱导的PC12细胞凋亡中的表达及机制。方法:以H2O2处理PC12细胞和(或)过表达CDK11p58及其激酶突变的载体后,蛋白质免疫印迹观察CDK11p58的表达,流式细胞分析术分析PC12细胞的凋亡。结果:将CDK11p58表达载体转入PC12细胞中,在予H2O2处理细胞后,过表达CDK11p58的PC12细胞凋亡较未过表达明显增加,差异有统计学意义(P<0.05)。在转染双突变CDK11p58表达质粒PC12细胞中,H2O2诱导细胞凋亡较对照组无增高,但较转染全长的CDK11p58的表达质粒的细胞组有显著降低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:CDK11p58可以促进H2O2诱导的PC12细胞的凋亡。

CDK11p58基因过表达抑制INS-1细胞的增殖

目的:研究CDK11p58基因对大鼠胰岛瘤细胞INS-1增殖及周期的影响.方法:INS-1细胞分为3组:实验组转染pcDNA3.0-CDK11p58质粒;空载体组转染pcDNA3.0空载体;空白对照组不加任何干扰48h后,Westernblot检测细胞中CDK11p58基因表达水平;MTT法检测转染CDK11p58基因对细胞增殖的影响;流式细胞仪检测转染CDK11p58基因后细胞周期的变化.结果:转染48h后,与空载体组相比,实验组CDK11p58基因的表达水平显著升高(P<0.01)INS-1细胞存活率下降(P<0.05),G1期细胞比例显著上升(69.87%±1.77%vs63.03%±2.66%P<0.01),细胞出现G1期阻滞.结论:CDK11p58基因与INS-1细胞增殖相关其高表达引起的细胞增殖速度放缓的作用机制可能与其所致的细胞G1期延长有关.

过表达CDK11^(p58)促进人胰腺导管腺癌MIAPaCa-2细胞增殖

CDK11p58属于CDK11/PITSLRE蛋白激酶家族成员,由Cdc2L2编码,是一种重要的细胞周期调控蛋白.为了研究CDK11p58与胰腺癌细胞增殖的关系,我们通过采用脂质体转染真核表达载体及G418筛选的方式,获得了稳定过表达CDK11p58的MIAPaCa-2(人胰腺导管腺癌细胞)单克隆细胞,并通过流式细胞分析、MTT检测及real-time PCR的方法检测了细胞周期、细胞增殖能力及G1/S期相关调控基因的转录水平.结果显示,该单克隆细胞(实验组)与空载体组细胞和空白对照组细胞相比G1期细胞比例明显下降(P<0.01),S期细胞比例明显上升(P<0.01);细胞增殖能力明显提高(P<0.01);cyclin D1、cyclin D3、p21基因mRNA水平较两组对照细胞明显升高(P<0.01).提示过表达的CDK11p58通过上调cyclin D1、cyclin D3和p21基因的mRNA水平促进MIAPaCa-2细胞通过细胞增殖的关键限速点G1/S期,加快细胞增殖.