非小细胞肺癌pl6/CDKN2基因失活的研究

目的：分析中国人非小细胞肺癌中ｐ１６／ＣＤＫＮ２基因失活的情况，探讨该基因在肺癌发生中的作用。方法：选取与ｐ１６基因紧密连锁的Ｄ９Ｓ１７４８位点，对１７例临床切除的原发性肺癌标本进行微卫星不稳定性分析，用甲基化特异性ＰＣＲ（ｍｅｔｈｙｌａｔｉｏｎ－ｓｐｅｃｉｆｉｃ ＰＣＲ， ＭＳＰ）检测 ｐｌ６基因启动子区 ＣｐＧ岛甲基化状况，用免疫组织化学法检测Ｐ１６蛋白表达情况。结果：微卫星不稳定性分析结果表明，在１３例Ｄ９Ｓ１７４８位点存在多态性的肿瘤ＤＮＡ中有 ９例（６９ ．２％）发生了杂合性缺失（ｌｏｓｓ ｏｆ ｈｅｔｅｒｏｚｙｇｏｓｉｔｙ， ＬＯＨ）。 ＭＳＰ的结果显示，有 ７０． ６％（１２／１７）的肿瘤组织存在ｐ１６启动子区的异常高甲基化。在本研究中，８２．４％（１４／１７）的肿瘤组织可以检测出一种或两种ｐ１６基因的异常改变。对此１７例肿瘤标本进行的免疫组织化学分析显示，有 １３例 Ｐ１６蛋白表达阴性，其中 ９２ ３％（１２／１３）存在一种或两种ｐ１６基因的异常改变。免疫组化结果与ｐ１６基因分子遗传学改变情况基本吻合。结论：作为一种抑癌基因，ｐ１６在多种肿瘤组织中都有异常改变。我们的研究表明，ｐ１６基因失表达是非小细胞肺癌?

CDKN2基因CpG岛异常甲基化与原发性胃癌的关系研究

探讨原发性胃癌中抑癌基因ＣＤＫＮ２的灭活机制。方法ＰＣＲ┐甲基化检测法检测３６例胃癌和２２例正常胃粘膜组织中ＣＤＫＮ２基因外显子１的ＣｐＧ岛异常甲基化情况。结果有１３例（３６．１％）胃癌标本和１例（４．５％）正常胃组织中ＣＤＫＮ２基因５′端ＣｐＧ岛异常甲基化，两者之间有显著性差异（Ｐ＜０．０５）。结论ＣＤＫＮ２基因的５′端ＣｐＧ岛异常甲基化与胃癌的发生发展相关，是该基因在原发性胃癌中的主要灭活机制。

CDKN2基因的变异在人前列腺增生症中发病机制的研究

目的：研究抑癌基因CDKN2的突变、缺失在人前列腺增生症（BPH）病因中的作用机制。方法：用PCR-银染SSCP技术分析了20例正常前列腺组织和41例BPH中CDKN2基因纯合性缺失和突变的情况。结果：13例BPH有CDKN2基因缺失，总缺失率为31.6％：正常前列腺组织中有1例出现CDKN2基因缺失.缺失率为5％（P＜0.05）;无CDKN2基因的突变。结论：CDKN2基因的变异与BPH的发病机制有关，纯合性缺失是CDKN2基因在前列腺增生中主要灭活机制之一。

人前列腺增生症中CDKN2基因CpG岛异常甲基化

【目的】探讨前列腺增生症 (BPH)与CDKN2基因 5′端CpG岛异常甲基化之间的关系。【方法】用PCR 甲基化检测法检测 38例BPH中CDKN2基因α、β型外显子 1的甲基化情况。【结果】 38例BPH标本中 16例 (4 2 1% )有CDKN2基因CpG岛异常甲基化 ,甲基化序列主要为CmCGG和CCmCGGG。【结论】CDKN2基因CpG岛异常甲基化是其在BPH中的主要失活机制 ,参与BPH的发生发展。

IDH突变型低级别星形细胞瘤p16蛋白表达与CDKN2A基因缺失状况的相关性

目的:以异柠檬酸脱氢酶(isocitrate dehydrogenase,IDH)突变型星形细胞瘤为研究对象,探讨利用p16蛋白免疫标记替代CDKN2A基因纯合性缺失检测的可行性。方法:收集我院既往组织学诊断为低级别星形细胞瘤(WHO 2级)且伴有IDH突变的胶质瘤42例,通过免疫组化方法检测肿瘤组织中p16蛋白表达,分别依据其胞核或胞浆阳性表达率将肿瘤分为阴性(阳性率0%)、低表达(0%<阳性率≤10%)、中表达(10%<阳性率≤25%)、高表达(25%<阳性率≤50%)及过表达(阳性率>50%)5个组别;利用FISH方法检测肿瘤CDKN2A基因纯合性缺失与杂合性缺失状况;采用Fisher精确检验评价p16蛋白表达水平与CDKN2A基因缺失间的相关性。结果:胞核p16蛋白表达水平与CDKN2A基因纯合性缺失间存在显著相关(P<0.001)。阴性组(4/4,100%)均检测到CDKN2A纯合性缺失,中、高及过表达组(22/22,100%)均未检测到CDKN2A纯合性缺失。低表达组与CDKN2A纯合性缺失间缺乏明确对应关系,其中3例(3/16,18.75%)检出纯合性缺失,13例(13/16,81.25%)未检出纯合性缺失。胞核p16蛋白表达水平与CDKN2A杂合性缺失无相关(P=0.228)。胞质p16蛋白表达水平与CDKN2A纯合性(P=0.086)或杂合性(P=0.884)缺失均无相关。结论:IDH突变且组织学呈低级别的星形细胞瘤中,胞核p16蛋白阴性(阳性率0%)或中等及以上表达(阳性率>10%)分别提示存在或不存在CDKN2A纯合性缺失。在上述区间p16蛋白与CDKN2A纯合性缺失间存在良好匹配关系,可用于协助病理诊断与分级。胞核p16蛋白低表达(0%<表达率≤10%)则不能预测CDKN2A纯合性缺失状态,此时仍需进行CDKN2A基因层面检测。

基于数据分析CDKN2A基因在软组织肉瘤中的表达和意义

目的:分析挖掘CDKN2A基因与软组织肉瘤之间的关系。方法:利用GEPIA数据库、UALCAN数据库及String数据库中的数据资料,分析比较CDKN2A基因在软组织肉瘤中的表达及与临床生存期及相关上下游蛋白的关系。结果:CDKN2A基因在软组织肉瘤组织中高度表达,但其表达与临床预后无统计学差异,仅仅表现出相关性趋势。与CDKN2A基因关系紧密的上下游基因蛋白有11个,相互作用关系较为复杂。结论:CDKN2A基因表达与软组织肉瘤高度相关,并且在软组织肉瘤中参与多条细胞信号通路,所起的作用非常复杂,可作为研究软组织肉瘤病因及治疗的切入点。

5-氮-2′-脱氧胞苷对RKO结肠癌细胞株p16/CDKN2基因去甲基化的转录调节作用

目的 探讨DNA 5′CpG岛去甲基化对RKO结肠癌细胞株p16 CDKN2抑癌基因的转录调控作用及对细胞株生长增殖的生物学影响 ,寻找抗癌治疗的新靶点。方法 用特异性DNA甲基转移酶抑制剂 5 氮 2′ 脱氧胞苷 (5 Aza 2′ deoxycytidine)作用结肠癌细胞株 72h后 ,甲基特异性PCR(Methylation specificPCR ,MSP)、T A克隆及DNA测序分析甲基化状态 ,四唑盐 (MTT)比色、逆转录聚合酶链反应 (RT PCR)、荧光定量PCR(Real timePCR)、免疫组织化学染色 (IHC)及蛋白印迹 (Westernblot)检测用药前后RKO细胞株生长倍增时间以及对p16 CDKN2mRNA及蛋白表达的影响。结果 (1)未经 5 Aza deoxycytidine作用的对照组RKO细胞基因组DNA的胞嘧啶保持不变 ,而经 5 Aza CdR作用的RKO结肠癌细胞基因组DNA的胞嘧啶均已变为胸腺嘧啶 ;(2 )与对照组相比 ,3组不同浓度 5 Aza 2′ deoxycytidine均能明显抑制肿瘤细胞生长 ,倍增时间分别增加了 1 4 9、1 6 4、1 87倍 ;(3)经 5 Aza 2′ deoxycytidine作用后 ,p16 CDKN2基因mRNA表达分别增加了 4 89、16 91、19 97倍 ,而DNA甲基转移酶mRNA表达显著降低 ;(4 )免疫组化染色和蛋白印迹均显示 ,经处理后的肿瘤细胞p16 CDKN2蛋白表达呈明显增强。结论 DNA异常甲基化与RKO结肠癌细胞有?

抑癌基因CDKN2的变异与原发性胃癌的关系

目的 研究ＣＤＫＮ２ 基因的突变、缺失与原发性胃癌发生发展的关系。方法 用ＰＣＲ和银染ＳＳＣＰ分析了４５ 例胃癌组织和２２ 例相应正常胃粘膜中ＣＤＫＮ２ 基因的突变和纯合性缺失情况。结果 发现ＣＤＫＮ２ 基因的纯合性缺失率为２８－９ ％ ，其中β型转录子的缺失率为１５－６ ％ ；无一例有ＣＤＫＮ２ 基因的突变。结论 胃癌的发生发展与ＣＤＫＮ２ 基因纯合性缺失密切相关，与ＣＤＫＮ２基因的突变无关，β型转录子参与维持ＣＤＫＮ２ 基因的正常功能，其纯合性缺失与胃癌的发生有关。

CDKN2基因SNP与冠心病发生的关联研究

目的:探讨CDKN2基因邻近的rs10757278、rs10811656和rs1333047这3个位点的变异和冠心病(CAD)发生的关系。方法:选择359例无血缘关系的CAD患者,398例性别、年龄相匹配的健康者作为对照组。利用聚合酶连反应(PCR)扩增其功能区的外显子片段,双脱氧末端终止法测序。家系调查资料包括临床表现、体格检查、心脏超声和心电图。结果:CDKN2基因邻近的rs10757278的GG基因型、rs10811656的T等位基因和rs1333047的TT基因型与CAD发病风险相关联。GG基因型增加CAD发病风险1.91倍(95%CI:1.35～2.68),T等位基因增加CAD发病风险1.67倍(95%CI:1.26～2.23),TT基因型增加CAD发病风险1.57倍(95%CI:1.15～2.06)。结论:CDKN2基因邻近的3个位点变异和CAD发病风险增加相关联。

CDKN2A基因在肺癌中的表达、功能富集和信号通路及其与患者预后关系

探寻CDKN2A基因在肺癌中的可能生物学功能及与肺癌人群的生存关系。方法 相关数据库检索探寻CDKN2A基因表达情况及其与肺癌人群的预后相关性;采用GO和KEEG数据库对CDKN2A在体内的生物学效应进行汇集,并建立相关蛋白作用关系网络。生存数据库中评价CDKN2A基因表达与肺癌人群的生存关系。结果 CDKN2A在膀胱癌、乳腺癌、结直肠癌及肺癌(鳞癌、腺癌)组织中呈现高表达(P<0.05);在肺腺癌和鳞癌组织中高表达(P<0.05)CDKN2A富集于细胞周期蛋白依赖性蛋白丝氨酸/苏氨酸激酶抑制剂活性等生物学功能;CDKN2A基因涉及癌症等相关信号通路;预后分析,CDKN2A基因高表达患者OS(HR=1.30, 95%CI:1.15-1.46, P<0.05)和PFS有关(HR=1.28,95%CI:1.04-1.58 P>0.05),CDKN2A基因高表达肺癌患者OS和PFS均降低。结论 CDKN2A基因在肺癌中高表达,并参与肿瘤发生发展的重要环节,其高表达与肺癌患者的预后不良有关。

人胃癌p16/CDKN2基因蛋白质水平的异常表达(英文)

目的ｐ１６／ＣＤＫＮ２基因是新近发现的肿瘤抑制基因，已有研究表明该基因在许多肿瘤出现缺失、突变或重排．胃癌细胞系中有高频率纯合子缺失，应用Ｓｏｕｔｈｅｒｎｂｌｏｔ和ＳＳＣＰ技术在胃癌手术标本中未发现有该基因的缺失．本文首次研究胃癌中ｐ１６／ＣＤＫＮ２基因在蛋白水平的表达．方法应用蛋白Ａ金探针免疫组化技术对３０例胃癌和２０例正常胃粘膜标本的ｐ１６进行分析．结果所有正常对照组均有ｐ１６表达，其阳性细胞百分率为７２５５％±１７２２％；而胃癌中的阳性细胞百分率为５４９０％±２８９０％，明显低于正常对照（Ｐ＜００５）．在肿瘤病例中有２３３３％（７／３０）ｐ１６表达减低，１０％（３／３０）未表达ｐ１６．此外有１例呈过度表达．结论胃癌中有ｐ１６的异常表达，免疫组化技术可能较准确地反映ｐ１６的表达，更适合于临床研究．

中枢神经系统肿瘤CDKN2基因的丢失

目的：探讨中枢神经系统肿瘤ＣＤＫＮ２基因的丢失情况。方法：采用聚合酶链反应（ＰＣＲ）对８１例脑、脊髓肿瘤手术标本中ＣＤＫＮ２基因的丢失情况进行了检测．结果：胶质瘤ＣＤＫＮ２基因丢失率为６０％，且高级别胶质瘤基因丢失率显著高于低级别肿瘤；脑膜瘤、神经鞘瘤、垂体腺瘤及转移瘤亦存在不同程度ＣＤＫＮ２基因的丢失。结论：ＣＤＫＮ２基因的丢失与中枢神经系统肿瘤的发生。

抑癌基因CDKN2与肿瘤的发生发展

ＣＤＫＮ２基因（Ｐ１６、ＭＴＳ１、Ｃｄｋ４Ｉ）是较近发现的一种新型抑癌基因，其蛋白产物ｐ１６通过直接作用于细胞生长周期的特定调控元件而参与其周期调控。尽管目前ＣＤＫＮ２基因与肿瘤的关系尚未完全阐明，但其在肿瘤细胞中的高频突变率及可能的临床应用前景使其成为当今肿瘤分子生物学研究热点之一。

原发性肝癌中CDKN_2/P16基因突变的研究

目的 阐明 CDKN2 / P16基因突变与原发性肝癌发生的关系。方法 采用 PCR- SSCP及 PCR产物直接银染测序技术 ,对 30例原发性肝癌组织中 CDKN2 / P16基因第二外显子进行突变检测。结果 检出 2例 (2 / 30 ) CDKN2 基因突变 ,均是位于第12 4位密码子的错义突变。结论 CDKN2 基因的突变虽不频发 ,但在原发性肝癌的发生中起了一定作用。

抑癌基因CDKN2和癌基因ras产物与喉癌临床特征关系的初步探讨

为探讨抑癌基因 CDKN2和癌基因 ras 与喉癌临床特征的关系,分别采用免疫组织化学染色 SP 法和双抗体标记流式细胞法,检测57例喉癌及正常喉粘膜上皮细胞内 CDKN2基因产物 P16蛋白和 ras 基因产物 P21蛋白的表达。结果显示,正常喉粘膜上皮细胞内 P16阳性率(95%)显著高于喉癌细胞(45.6%),P<0.01;P16阳性率在喉癌Ⅰ期(66.7%)和Ⅱ期(57.1%),都分别显著高于喉癌Ⅲ期(37.5%)和Ⅳ期(38.9%),P<0.05;颈淋巴结转移组 P16蛋白阳性率(36.4%)显著低于非转移组(47.8%);正常喉粘膜上皮细胞内 P21蛋白为阴性,喉癌细胞内 P21蛋白的阳性率为78.9%;高分化鳞癌组 P21蛋白的阳性率(89.5%)显著高于低分化组(70%),P<0.05。结论:抑癌基因 CDKN2的失活、丢失和癌基因 ras 的激活参与了喉癌的发生;P16蛋白的表达缺失、P21蛋白的阳性表达是反映喉癌细胞生物学行为及临床特征的较好指标。

腺病毒介导的P16/CDKN_2基因对TJ899细胞系活性的影响

目的 研究 5型腺病毒载体 (Ad5)携带P1 6基因对恶性脑胶质瘤细胞系TJ899生长状态的影响。②方法 免疫组化(SP法 )测定P1 6蛋白表达 ,MTT(methlythiazolyltetrazolium ,MTT)法测定恶性脑胶质瘤细胞系生长状态 ,克隆形成实验。③结果 重组体腺病毒能介导P1 6外源基因在恶性脑胶质瘤细胞系TJ899细胞中阳性表达 ,6d时肿瘤细胞生长抑制率为 93 % ,并且能显著地抑制肿瘤细胞的克隆形成能力。④结论 腺病毒介导P1 6基因能在肿瘤细胞中表达 。

CDKN2(P16)基因的研究现状

早在1992年Skolnick等在人类第九号染色体寻找黑素瘤易感基因时,发现9P21位点频发缺失与突变,后来Kamb及Beach分别领导的两个科研小组通过对多种癌细胞的普查,发现了一个新的能抑制多种肿瘤的基因——P16基因,P16基因,又称MTS1(Multiple Tumor Suppressor 1),或称INK4a(Inhibitor of Cyclin—dependent Kinase 4a)。

葡萄胎中CDKN2A基因纯合性缺失和突变的研究

目的:探讨细胞周期依赖性激酶抑制基因(CDKN2A基因,包括p16INK4a和p14ARF基因)外显子1、2的纯合性缺失和突变情况与葡萄胎发生的关系。方法:对38例葡萄胎和30例早孕绒毛的新鲜组织标本进行基因组DNA抽提、PCR扩增,而后应用变性高效液相色谱分析(DHPLC)的方法对扩增产物进行突变检测。结果:1)38例葡萄胎组织样本中,5例发生p16INK4a基因外显子1的纯合性缺失,其纯合性缺失率为13.16%;而30例早孕绒毛组织标本中,未发现p16INK4a基因外显子1的纯合性缺失。p16INK4a外显子1的纯合性缺失率在早孕绒毛组织和葡萄胎组织中差异具有统计学意义(P=0.036);2)38例葡萄胎组织样本和30例早孕绒毛组织样本中,无一例发生p14ARF基因外显子1和p16INK4a外显子2的纯合性缺失;3)经DHPLC检测,38例葡萄胎组织样本和30例早孕绒毛组织样本中,p16INK4a基因外显子1、2和p14ARF基因外显子1扩增产物的所有谱图均为单一峰型,未检测到任何位点的突变发生。结论:p16INK4a基因外显子1的纯合性缺失与葡萄胎的发生具有一定的相关性;在葡萄胎中,CDKN2A基因的遗传变异主要是由于此基因的纯合性缺失造成的,突变可能不是此基因变异的主要形式。

妊娠糖尿病患者血糖、血脂水平与CDKN2A/2B基因多态性的相关性

目的探讨妊娠糖尿病患者血糖、血脂水平与CDKN2A/2B基因多态性的相关性。方法选取2015年1月至2017年1月我院内分泌科、产科收治的妊娠期糖尿病患者120例(GDM组),同时选取同期在我院产科门诊检查糖耐量试验正常的孕妇120例作为对照。检测两组孕妇CDKN2A/2B基因多态性,并对妊娠期糖尿病患者血糖、血脂水平与CDKN2A/2B基因多态性的相关性进行分析。结果妊娠期糖尿病患者TT、TC基因型的总胆固醇(TC)、空腹血糖(FBG)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白(LDL)高于CC基因型,差异有统计学意义(P<0.05);TT、TC基因型的高密度脂蛋白(HDL)低于CC基因型,差异有统计学意义(P<0.05);两组孕妇CDKN2A/2B基因TT、TC、CC 3种基因型分布差异有统计学意义(P<0.05);GDM组危险等位基因T分布频率显著高于健康对照组(P <0.05)。结论 CDKN2A/2B基因可能是妊娠糖尿病的易感基因之一,TC、TG、LDL、HDL、FBG与CDKN2A/2B基因多态性具有相关性。