胃癌组织CDKN2A基因座p14^(ARF)基因变异及意义

目的 :探讨胃癌组织p14ARF基因变异及其意义。方法 :应用PCR、PCR -SSCP、PCR甲基化分析法和RT -PCR分别检测 48例胃癌及癌旁组织中p14ARF基因纯合性缺失、突变、CpG岛甲基化及其mRNA表达状况。结果 :①胃癌组织p14ARF基因纯合性缺失率为 3 1 3 % (15 / 48) ,癌旁组织均未见纯合性缺失。② 3 3例无纯合性缺失的胃癌及癌旁组织均未见p14ARF基因点突变。③胃癌组织p14ARF基因甲基化率为 47 9% (2 3 / 48) ,癌旁组织仅 2例甲基化 ,两者差异有显著 (P <0 0 1)。④ 45 8% (2 2 / 48)的胃癌组织p14ARFmRNA无表达。 3例外显子E1β和E2共甲基化者p14ARFmRNA均无表达 (10 0 % ) ,2 0例单纯E2甲基化者仅 3例无表达 (15 % ) ,两者差异有显著 (P <0 0 5 )。结论 :胃癌中p14ARF基因失活多由纯合性缺失和 5’CpG岛甲基化所致 。

甲状腺乳头状癌组织中CDKN2A/p14^(ARF)蛋白表达及其临床意义

目的通过检测CDKN2A/p14ARF蛋白在甲状腺乳头状癌组织中的表达,探讨并分析CDKN2A/p14ARF在甲状腺乳头状癌发生发展中的作用和在癌旁正常甲状腺组织与甲状腺乳头状癌之间表达的差异。方法采用免疫组织化学方法(SP法)检测甲状腺乳头状癌和癌旁正常甲状腺组织中CDKN2A/p14ARF蛋白的表达情况,并进行统计学分析。结果 CDKN2A/p14ARF在甲状腺乳头状癌组织中表达阳性率87.8%(36/41),其中阳性程度在(++)以上者20例,占48.8%(20/41)。癌旁正常甲状腺组织阳性率为75%(15/20),甲状腺乳头状癌和癌旁正常甲状腺组织之间差异有统计学意义(P<0.05)。在甲状腺乳头状癌中CDKN2A/p14ARF蛋白表达与患者性别、年龄之间的差异无统计学意义(P>0.05)。结论 CDKN2A/p14ARF在甲状腺乳头状癌中表达率极高,是甲状腺乳头状癌病理诊断中非常有价值的辅助诊断指标。

MDM2、P53与P14ARF在结肠肿瘤中的表达及意义

目的:探讨MDM2、P53和P14ARF在人结肠癌组织中的表达及其意义。 方法:用免疫组织化学方法检测36例癌旁正常结肠组织,28例结肠腺瘤及42例结肠癌中三者的表达及其相互关系。 结果:MDM2、P53、P14ARF在癌旁正常结肠组织,结肠腺瘤,结肠癌中的阳性表达率分别为0,0,21.4％;0.25％,67％和100％,82.1％,80.9％。P53和MDM2在结肠癌中的表达率均明显高于癌旁正常结肠组织(P<0.05),P14ARF在结肠腺瘤和结肠癌中的表达率均明显低于癌旁正常结肠组织(P<0.05)。P53、MDM2和P14ARF在不同分化程度结肠癌中的表达率分别为44.4％,68.0％,87.5％;11.1％,24.0％,25.0％和88.9％、92％、37.5％。P53和MDM2在不同分化程度结肠癌中的表达无明显差异(P>0.05),而P14ARF在低分化结肠癌中的表达明显低于高分化和中等分化的结肠癌(P<0.05)。三者的相关分析提示P53和MDM2之间存在正相关(r=0.8805),P53和P14ARF之间为负相关(r=-0.8169),MDM2和P14ARF之间亦存在负相关,但相关不显著(r=-0.5475)。 结论:P53、MDM2和P14ARF在人结肠癌中的表达异常可能与结肠癌的发生发展有关,联合检测三者的表达可作为早期诊断结肠癌的重要指标。

非小细胞肺癌中pokemon表达与p14^(ARF)、bcl-2的相关性及对预后的影响

目的:探讨非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)组织中pokemon表达和p14ARF、bcl-2表达的关系及其对NSCLC临床病理特征和预后的判定价值。方法:应用SP免疫组织化学方法检测pokemon和p14ARF、bcl-2三种蛋白在62例NSCLC肿瘤组织及20例癌旁正常组织中的表达,分析它们与NSCLC病理学特征的关系,以及pokemon与p14ARF、bcl-2的相关性,并结合随访资料观察上述蛋白表达对NSCLC长期预后的影响。结果:正常肺组织中未见pokemon蛋白表达,p14ARF和bcl-2蛋白阳性表达率分别为95.0%和15.0%;在NSCLC组织中pokemon、p14ARF和bcl-2阳性表达率分别为72.6%、66.1%和53.2%。Pokemon表达与p14ARF表达呈负相关(r=-0.287,P<0.05),与bcl-2表达呈正相关(r=0.293,P<0.05)。Pokemon和p14ARF的表达与TNM分期相关(P<0.05),bcl-2表达与病理分型相关(P<0.05)。Pokemon与bcl-2表达阳性组的5年生存率分别为10.95%和13.74%,显著低于阴性组(P<0.05);p14ARF表达阳性组的5年生存率为21.68%,显著高于阴性组(P<0.05)。结论:NSCLC组织中存在pokemon和p14ARF、bcl-2的表达,pokemon表达与p14ARF表达呈负相关、与bcl-2表达呈正相关,它们对NSCLC的预后评估有一定的临床意义。

MDM2与P14ARF在结肠肿瘤中的表达及意义

目的 探讨MDM2和P14ARF(alternativereadingframe)在人结肠癌组织中的表达及其意义。方法 用免疫组织化学方法检测 3 6例癌旁正常结肠组织 ,2 8例结肠腺瘤及 42例结肠癌中二者的表达及其与组织分化程度的关系。结果 MDM2、P14ARF在癌旁正常结肠组织 ,结肠腺瘤 ,结肠腺癌中的阳性表达率分别为 0、0、2 1.4%和 10 0 %、82 .14 %、80 .95 %。MDM2在结肠腺癌中的表达率明显高于癌旁正常结肠组织及腺瘤组织 (P <0 .0 5 ) ,P14ARF在结肠腺瘤和结肠腺癌中的表达率均明显低于癌旁正常结肠组织 (P<0 .0 5 )。MDM2和P14ARF在不同分化程度结肠癌中的表达率分别为 11.1% ,2 4.0 % ,2 5 .0 %和 88.9%、92 .0 %、3 7.5 %。MDM2在不同分化程度结肠癌中的表达无明显差异 (P >0 .0 5 ) ,而P14ARF在低分化结肠癌中的表达明显低于高分化和中等分化的结肠癌 (P <0 .0 5 )。

P14ARF和E2F1在结直肠肿瘤中的表达及意义

目的:观察P14ARF、E2F1蛋白在结直肠肿瘤的表达,明确其对肿瘤发生及侵袭发展的影响。方法:应用免疫组化方法检测尸检正常结直肠组织6例,结肠腺瘤30例,不伴淋巴结转移(无LNM)结直肠癌35例,伴有淋巴结转移(有LNM)结直肠癌30例,后者再分为手术切缘组织、结直肠癌组织、淋巴结转移癌组织,共6组的P14ARF、E2F1蛋白表达情况,采用半定量和图像分析定量测定含量。结果:①结直肠正常黏膜组织、腺瘤组织、癌组织P14ARF、E2F1的表达阳性率逐渐减少,差异存在统计学意义(P<0.05)。②P14ARF、E2F1在伴有淋巴结转移、肝转移的癌组织内表达阳性率与不伴转移的癌组织之间差异无统计学意义(P>0.05)。③P14ARF、E2F1蛋白表达在不同临床病理特征的关系之间差异无统计学意义(P>0.05)。结论:①P14ARF、E2F1具有抑制癌发生作用,蛋白异常仅是结直肠癌癌变早期事件,与淋巴结、远处器官转移等侵袭活动无关,与临床病理特征无关。②P14ARF、E2F1相互协同抑制细胞生长和诱导凋亡,因而可以作为治疗结直肠癌的新靶点。

p14^(ARF)、mdm2、p53在鼻咽癌中的表达及其临床意义

目的研究p14ARF、mdm2、p53在鼻咽癌组织中的表达与临床分期、淋巴结转移、预后等因素的关系。方法应用免疫化法检测58例鼻咽癌组织和20例慢性鼻咽炎症组织中p14ARF、mdm2、p53表达情况。结果(1)p14ARF、mdm2、p53在鼻咽癌组织和慢性鼻咽炎症组织中的阳性表达率分别为31.0%、41.4%、65.5%和100%、0、0,差异有统计学意义(P<0.05);(2)Spearman相关分析表明,鼻咽癌组织中p14ARF、mdm2、p53三者表达之间均无相关性;(3)p14ARF、mdm2、p53表达与鼻咽癌淋巴结转移、分期、性别、年龄无关;(4)Kaplan-Meier分析方法显示鼻咽癌组织中mdm2表达与生存时间相关(P<0.05);p14ARF、p53表达与生存时间无关。结论p14ARF、mdm2、p53可能参与了鼻咽癌的发生;mdm2表达可作为预测鼻咽癌放疗预后的一项参考指标。

P14ARF、E2F1对结直肠癌发生发展的影响

肿瘤抑制因子P14ARF通过p53-MDM2-P14ARF细胞周期调节系统使细胞老化或凋亡,对肿瘤的发生发展起重要的抑制作用;E2F1可以作为转录因子参与调节细胞周期,然而高表达的E2F1也能诱导许多类型的细胞凋亡,因此E2F1具有促使癌变和诱导凋亡双向性质;P14ARF和E2F1直接影响肿瘤的发生、发展和预后,这关系着患者治疗方案的选择,因而日益受到重视。本文章旨在探讨P14ARF、E2F1与人结直肠癌发生发展的关系,就其机制和影响综述如下。

p14ARF、MDM2和p53蛋白在子宫内膜样腺癌中的表达及其相互关系

目的探讨p14ARF、MDM2和p53蛋白在子宫内膜样腺癌中的表达及其相互关系,为阐明子宫内膜样腺癌的发病机制、临床病理诊断和基因治疗提供理论依据和实验基础。方法采用免疫组化S-P法检测15例正常子宫内膜组织、18例子宫内膜增生组织及43例子宫内膜样腺癌组织标本中p14ARF、MDM2和p53蛋白的表达情况。结果 p14ARF蛋白在子宫内膜样腺癌组织中的表达显著低于子宫内膜增生和正常子宫内膜(P<0.05),MDM2蛋白在子宫内膜样腺癌中的表达有高于子宫内膜增生和正常子宫内膜(P<0.05),p53蛋白在子宫内膜样腺癌组织中的表达显著高于子宫内膜增生和正常子宫内膜(P<0.05)。在子宫内膜样腺癌中,p14ARF与MDM2蛋白的表达无相关性(P>0.05),而p14ARF与p53蛋白的表达呈负相关(r=-0.414,P=0.018),MDM2与p53蛋白的表达呈正相关(r=0.426,P=0.016)。结论 p14ARF蛋白失表达及MDM2和p53蛋白过表达在子宫内膜样腺癌的发生、发展中发挥着一定的作用。p14ARF和p53蛋白表达负相关,MDM2与p53蛋白表达正相关,提示三者可能在同一"p14ARF-MDM2-p53"通路中发挥作用,三者的联合检测可能有助于子宫内膜样腺癌的临床病理诊断,并为基因治疗提供可能的参考指标。

非小细胞肺癌组织中Pokemon、P14ARF及E2F1的表达及其临床意义

目的:检测Pokemon、P14ARF及E2F1蛋白在非小细胞肺癌组织中的表达情况,探讨其在NSCLC发病中的作用和机制。方法:应用免疫组化方法检测NSCLC组和双正常对照组(即支气管对照组和肺泡对照组)中Pokemon、P14ARF及E2F1蛋白的表达情况,分析其与临床病理资料的关系及各指标间的相关性。结果:Pokemon蛋白在NSCLC组、肺鳞癌组、肺腺癌组中的表达均显著高于双对照组(P<0.05),Pokemon蛋白表达与NSCLC的TNM分期相关(P<0.05);E2F1蛋白在NSCLC组、肺鳞癌组、肺腺癌组中的表达均显著高于双对照组(P<0.05),E2F1蛋白表达与NSCLC的TNM分期和淋巴结转移均有关(P<0.05);P14ARF蛋白在NSCLC组、肺鳞癌组、肺腺癌组中的表达均显著低于双对照组(P<0.05),P14ARF蛋白的表达水平与临床病理资料均无关(P>0.05);Pokemon与P14ARF表达水平呈负相关(r=-0.57,P<0.01),与E2F1表达水平呈正相关(r=0.37,P<0.05),P14ARF与E2F1表达水平呈负相关(r=-0.48,P<0.01)。结论:非小细胞肺癌发病过程中,Pokemon通过拮抗P14ARF调节E2F1表达水平来发挥促癌作用。

亚砷酸钠所致L-02人肝细胞损伤与p14ARF表达下调及MDM2、 p53表达增加有关

目的研究亚砷酸钠(NaAsO2)致L-02人肝细胞损伤过程中p14可变读框(p14ARF)、鼠双微基因2(MDM2)和p53的表达变化。方法用(0、5、10、15、20、25)μmol/L NaAsO2分别处理L-02细胞48 h,相差显微镜观察细胞形态变化,CCK-8法检测细胞增殖,异硫氰酸荧光素标记的膜联素Ⅴ/碘化丙啶(annexinⅤ-FITC/PI)双标记结合流式细胞术检测细胞凋亡,实时荧光定量PCR和Western blot法分别检测p14ARF、MDM2和p53 mRNA及蛋白表达。结果与对照组相比,随着NaAsO2浓度增加,染砷组L-02肝细胞增殖活性逐渐降低,细胞凋亡率逐渐升高,p14ARF mRNA及蛋白水平逐渐降低,MDM2 mRNA及蛋白水平逐渐升高,p53 mRNA水平变化不明显,p53蛋白水平逐渐升高。结论NaAsO2所致L-02肝细胞损伤可能与p14ARF表达下调及p53、MDM2表达的上调有关。

p14ARF、E2F-1与肺癌

p14ARF基因和核转录因子E2F-1在细胞周期调控，细胞凋亡和肿瘤发生中具有重要作用。近年来，有研究表明p14ARF在肺癌中的表达率低于正常组织，E2F-1的表达率高于正常组织。本文将就p14ARF、E2F-1与肺癌的关系进行综述。

CDKN2A位点p16^(INK4α)、p14^(ARF)基因变异与胃癌发生的关系

目的 探讨p16^(INK4a)和p14^(ARF)基因变异与胃癌发生的关系。方法 应用聚合酶链反应(PCR)、PCR-单链构象多态性(SSCP)、PCR甲基化分析法和RT-PCR分别检测48例胃癌及癌旁组织中p16^(INK4a)和p14^(ARF)基因纯合性缺失、突变、CpG岛甲基化及mRNA表达状况。结果(1)胃癌组织p16^(INK4a)和p14^(ARF)基因总缺失率为35.4％(17/48),癌旁组织均未见纯合性缺失。(2)31例无纯合性缺失的胃癌及癌旁组织均未见p16^(INK4a)和p14^(ARF)基因点突变。(3)胃癌组织p16^(INK4a)和p14^(ARF)基因总甲基化率为47.90％(23/48),癌旁组织仅2例甲基化,两者差异有显著性(P<0.01)。(4)胃癌组织p16^(INK4a)mRNA缺失率为47.9％(23/48),其中E1α和E2共甲基化者p16^(INK4a)mRNA缺失率(100％,6/6)明显高于其他类型甲基化者(11.8％,2/17)(P<0.01);胃癌组织p14^(ARF)mRNA缺失率为45.8％(22/48),其中E1β和E2共甲基化者p14^(ARF)mRNA缺失率(100％,3/3)明显高于其他类型甲基化者(15％,3/20)(P<0.05)。(5)低未分化癌组p16^(INK4a)和p14^(ARF)mRNA共同缺失率(36.7％,11/30)明显高于高中分化癌组(5.6％,1/18)(P<0.05)。结论 胃癌中p16^(INK4a)和p14^(ARF)基因失活多由纯合性缺失和5’CpG岛甲基化所致,其表达缺失与胃癌的发生密切相关。

hCINAP alleviates senescence by regulating MDM2 via p14ARF and the HDAC1/CoREST complex

Cellular senescence is a major process affected by multiple signals and coordinated by a complex signal response network.Identification of novel regulators of cellular senescence and elucidation of their molecular mechanisms will aid in the discoveryof new treatment strategies for aging-related diseases. In the present study, we identified human coilin-interacting nuclear ATPaseprotein (hCINAP) as a negative regulator of aging. Depletion of cCINAP significantly shortened the lifespan of Caenorhabditiselegans and accelerated primary cell aging. Moreover, mCINAP deletion markedly promoted organismal aging and stimulatedsenescence-associated secretory phenotype in the skeletal muscle and liver from mouse models of radiation-induced senescence.Mechanistically, hCINAP functions through regulating MDM2 status by distinct mechanisms. On the one hand, hCINAP decreasesp53 stability by attenuating the interaction between p14ARF and MDM2;on the other hand, hCINAP promotes MDM2 transcriptionvia inhibiting the deacetylation of H3K9ac in the MDM2 promoter by hindering the HDAC1/CoREST complex integrity. Collectively,our data demonstrate that hCINAP is a negative regulator of aging and provide insight into the molecular mechanisms underlyingthe aging process.

非小细胞肺癌中Pokemon蛋白与P14ARF-MDM2-p53通路蛋白的相关性研究

目的探讨Pokemon蛋白与P14ARF-MDM2-p53通路蛋白在非小细胞肺癌(NSCLC)发病中的作用。方法纳入2015年10月至2016年10月河北医科大学第一医院行手术治疗的35例NSCLC患者为NSCLC组。同时,将癌旁正常支气管断端组织29例及肺炎组织25例分别作为支气管对照组和肺泡对照组。采用免疫组织化学法检测3组中Pokemon、P14ARF、MDM2和p53蛋白的表达情况,分析其与临床病理资料的关系及各蛋白间的相关性。结果Pokemon、MDM2、p53蛋白在NSCLC组中的表达均显著高于支气管对照组和肺泡对照组(P值均<0.01),P14ARF蛋白在NSCLC组中的表达显著低于支气管对照组和肺泡对照组(χ^2=25.39,P<0.01)。p53和MDM2蛋白的表达与NSCLC的分化程度相关(P=0.02、0.03)。在NSCLC组中,Pokemon与P14ARF蛋白表达呈负相关性(r=-0.58,P<0.05),P14ARF与MDM2蛋白表达呈负相关性(r=-0.51,P<0.05),MDM2与p53蛋白的表达呈正相关性(r=0.86,P<0.05)。结论Pokemon通过P14ARF-MDM2-p53通路在NSCLC发病过程中发挥癌基因作用。

TP53通路分子遗传学改变与肝细胞癌

肝细胞癌是一种常见的恶性肿瘤,TP53突变在其发病机制中有重要作用。在我国大陆地区,约有50%HCC患者携带TP53突变,最常见的是黄曲霉毒素导致的R249S突变。MDM2和p14ARF是TP53通路的两个重要调节因子,近来研究显示MDM2扩增和p14ARF纯合性缺失/启动子甲基化也参与了HCC的发生发展过程。目前,有越来越多关于TP53通路改变在HCC早期诊断、预后和治疗中应用的研究,但还需要更多的研究证实。本文重点介绍了TP53通路分子遗传学改变(包括TP53突变、MDM2扩增和p14ARF纯合性缺失/启动子甲基化)与肝细胞癌发生的关系。

燃煤污染型地方性砷中毒患者皮肤组织P14ARF和MDM2及突变型P53蛋白表达

目的 观察燃煤污染型地方性砷中毒患者皮肤组织突变型P53（ P53mt）蛋白及其下游基因P14ARG、MDM2蛋白的表达水平,为揭示砷致皮肤损害的分子机制提供依据.方法 以自愿手术治疗的60例燃煤污染型地方性砷中毒患者作为观察对象,依据皮肤病理学诊断分为一般皮肤病变组（35例）、癌前病变组（19例）、癌变组（6例）；以某医院经病理学诊断无异常的非肿瘤手术患者的9例皮肤组织为对照,采用免疫组织化学EnVision二步法检测皮肤组织中P14ARF、MDM2和P53mt蛋白的表达情况.结果 4组皮肤组织P14ARF蛋白表达阳性率比较,差异有统计学意义（x2=9.39,P＜0.05）；其中癌前病变组、癌变组[46.1％（6/19）、33.3％（2/6）]明显低于对照组[88.9％（8/9）,P均＜0.05]；且随着皮肤病变程度的加重,P14ARF蛋白表达呈降低趋势（P＜0.05）.4组皮肤组织MDM2、P53mt蛋白表达阳性率比较,差异有统计学意义（x2值分别为6.21、20.64,P均＜ 0.05）；其中一般病变组、癌前病变组和癌变组[54.2％（ 19/35）、63.2％（10/19）、66.7％（4/6）和25.7％（9/35）、73.7％（14/19）、83.3％（5/6）]明显高于对照组（0、0,P均＜0.05）；随着皮肤病变程度的加重,MDM2和P53mt蛋白表达呈增强趋势（P均＜0.05）.结论 燃煤污染型地方性砷中毒患者皮肤组织P53mt蛋白表达阳性率升高,且P14ARF和MDM2蛋白表达异常,后者所致的细胞周期和凋亡调控失常可能是砷致皮肤病损发生发展的原因之一.

p16^(INK4a)基因与宫颈癌

pl6INK4a基因在细胞周期调控RB通路中发挥着负反馈调节作用,决定着细胞周期的正常运转和细胞增殖、分化及凋亡,并与多种人类肿瘤的发生、发展、治疗与预后密切相关。综述pl6INK4a基因及其蛋白的表达在宫颈癌中的研究现状,发现pl6INK4a基因甲基化是宫颈癌发生的早期事件,pl6INK4a在HPV阳性的宫颈上皮内瘤样病变,宫颈腺上皮内病变,宫颈鳞癌及腺癌(ADCA)中呈高表达,且随着病变加重表达增强,而正常宫颈上皮、间质、化生和炎性细胞pl6INK4a表达呈阴性,这一特性使得其在检测宫颈癌及其癌前病变、预测病变进展及判断预后等方面有潜在的临床应用价值。

胆管癌中p14ARF甲基化分析及其与p53表达相关性研究

细胞周期调控异常可导致恶性肿瘤的形成，人类最主要的细胞周期调控通路有两条即Rb（p16-Rb）和p53（p14ARF—p53）通路。p14ARF能稳定和提高细胞p53水平，增强p53在G1—S期和G2-M期的限制点效应，最终使细胞阻滞于G，期和G2期，具有显著的细胞周期负调控作用。本研究采用甲基化聚合酶链反应（PCR）和免疫组织化学技术检测胆管癌中p14ARF启动子甲基化和p53蛋白表达状况，旨在探讨p14ARF和p53基因在胆管癌发生、发展中的作用及相互关系。