IL-10＋CDl9＋调节性B淋巴细胞在慢性乙型肝炎患者外周血中的表达

目的分析慢性乙型肝炎患者外周血中IL-10＋CDl9＋调节性B淋巴细胞（Breg）的表达及其免疫调节机制。方法病例对照研究。收集2011年6月-2012年10月常熟市第二人民医院住院患者，急性乙型肝炎（AHB）患者28例，慢性乙型肝炎（CHB）患者31例和健康对照25名。分离外周血单个核细胞（PBMC），经含CpG序列的寡脱氧核苷酸CpGODN2006和佛波醇酯（PMA）体外作用后，流式细胞术分析IL-10＋CD19＋Breg、CD4＋CD25high调节性T淋巴细胞（Treg）的表达及其相关性，ELISA分析培养上清IL-10水平。Mann—WhitneyU检验分析两组问差异，Spearman相关分析两组连续变量问的相关性。结果CHB组外周血Breg[1．28％（1．05％～2．20％）]高于AHB组[0．87％（0．55％一1．22％）]和HCs组[0．89％（0．51％-1．37％）]（P值分别为0．001和0．006），AHB和HCs组间差异无统计学意义（P=0．669）。CpGODN2006和PMA作用后CHB组Bregl14．30％（10．70％-16．70％）]较AHB组[10．30％（7．05％～13．30％）]和HCs组[10．40％（6．85％～12．60％）]显著升高（P值分别为0．003和0．001）；CHB组Treg[5．80％（4．20％～9．10％）]较AHB组[4．05％（2．53％～5．40％）]和14Cs组[4．50％（2．55％～5．50％）]也显著增高（P值分别为〈0．001和0．005）。AHB和HCs组间差异均无统计学意义（Breg：P=0．796；Treg：P=0．227）。Spenrman相关性分析发现CHB组Breg与Treg存在正相关关系（r=0．50，P=0．004），而AHB和HCs组无此相关性（r=-0．15，P=0．462；r=0．09，P=0．669）。CHB组IL-10表达高于AHB和HCs组（P〈0．001）。AHB和HCs组间差异无统计学意义（P=0．341），Spearman相关性分析表明CHB组IL-10与Breg存在正相关关系（r=0．409，P=0．005）。结论B淋巴细胞Breg和调节性T淋巴细胞在慢性乙型肝炎患者中表达升高，Breg可能通过IL—10的分泌在HBV慢性感染过程中发挥免疫调节作用。（中华检验医学杂志．2014。37：100—104）

淋巴细胞活化在系统性红斑狼疮发病中的意义

目的 : 探讨系统性红斑狼疮 (SLE)患者外周血淋巴细胞HLA -DR以及植物凝集素 (PHA)刺激下的CD3+ CD4 + 、CD3+ CD8+ 、CD19+ 淋巴细胞的早期活化标志CD6 9的表达。方法 : 应用三色荧光标记流式细胞术检测活动期和非活动期SLE患者外周血CD3+ 、CD3+ CD4 + 、CD3+ CD8+ 淋巴细胞晚期活化标志HLA -DR以及在PHA刺激 4h后CD3+ CD4 + 、CD3+ CD8+ 、CD19+ 淋巴细胞的早期活化标志CD6 9的表达。结果 : ①PHA刺激 4小时后 ,活动期SLECD3+ CD4 + 、CD3+ CD8+ 细胞CD6 9的表达明显低于正常对照组 (P <0 .0 5 ) ;而非活动期SLE与正常对照组之间CD6 9表达无显著性差异 (P >0 .0 5 )。②PHA刺激前SLE活动组CD19+ 细胞表达CD6 9较正常对照组和SLE非活动期明显升高 (P <0 .0 5 ) ,PHA刺激 4小时后 ,活动期SLECD19+ 细胞表达CD6 9低于正常对照组和非活动期SLE ,存在显著性差异 (P <0 .0 5 ) ,而非活动期SLE与正常对照组之间CD19+ CD6 9+ 表达无明显差异 (P >0 .0 5 )。③活动期SLECD3+ HLA -DR+细胞明显高于正常对照组 (P <0 .0 1)和非活动期SLE(P <0 .0 1) ,CD3+ CD4 + HLA -DR+ 细胞、CD3+ CD8+HLA -DR+ 细胞明显高于正常对照组 (P <0 .0 5 ) ,而非活动期SLE与正常对照组之间 ,HLA -DR表达无显著性差异 (P >0 .0

中药狼疮静颗粒对狼疮性BXSB小鼠外周血CD_4、CD_8、CD_(19)细胞的影响

目的:研究中药狼疮静颗粒对BXSB狼疮性小鼠外周血CD_4、CD_8、CD_(19)细胞分布的影响,探讨其免疫调节机理。方法:运用微量全血免疫双荧光染色法及流式细胞仪进行检测。结果:中药狼疮静颗粒可升高BXSB狼疮鼠外周血CD_4、CD_8细胞及降低外周血CD_(19)细胞分布。结论:中药狼疮静颗粒通过调节T淋巴细胞功能紊乱,降低B细胞分布,抑制了B细胞的异常增生活化,使自身抗体产生减少而达到治疗SLE的目的。

系统性红斑狼疮与CD19基因多态性的相关性研究

目的研究CD19基因第4外显子705位点(以下简称CD19基因705位点)多态性在中国南方地区汉族人群中的分布及其与系统性红斑狼疮(SLE)和狼疮肾炎(LN)的相关性。方法103例患者诊断均符合1982年美国风湿病学会修订的SLE分类标准,男13例,女90例,其中62例伴有LN。正常对照组110例,男21例,女89例。全部研究对象均为无血缘关系的中国南方地区汉族人群。应用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)方法,对所有SLE患者和正常对照者进行CD19基因705位点多态性检测。结果CD19基因705位点多态性在中国南方地区汉族人群中普遍存在。SLE患者CD19基因705位点基因型和等位基因频率分布与正常对照组比较差异无统计学意义(P>0.05);CD19基因705位点基因型和等位基因频率分布,按性别分层后,男性和女性SLE患者分别与正常对照组比较及LN患者和正常对照组比较以及伴有LN患者与未伴有LN的SLE患者间比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。结论CD19基因705位点多态性与SLE及LN无相关性。

外周血CD19^+CD23^+、补体活化产物C5a对川崎病发病及预后的影响

目的通过检测川崎病外周血CD19^+CD23^+、补体活化物C5a的水平,分析其与川崎病发病的关系,为川崎病的治疗提供一定的指导。方法实验组选取2010年5月至2013年5月在西安市儿童医院心血管内科确诊的川崎病患儿30名,根据B超检查进一步分为冠脉扩张组与无冠脉扩张组。对照组选取同一时期无免疫系统疾病及血管炎性疾病患儿30名。在丙种球蛋白使用前后,检测活化的B淋巴细胞CD19^+CD23^+、补体活化产物C5a及外周血抗体IgG、IgA、[gM的水平。结果丙球使用前后,实验组CD19^+CD23^+、C5a含量均高于对照组,存在统计学差异(丙球使用前:t值分别为12.40和14.10,均P<0.05;丙球使用后:t值分别为10.90和11.60,均P<0.05)。丙球使用前,CD19^+CD23^+,C5a在冠脉扩张组与无冠脉扩张组之间存在统计学差异(t值分别为18.78和12.80,均P<0.05);丙球使用后,CD19^+CD23^+、C5a在冠脉扩张组与无冠脉扩张组之间相比也存在统计学差异(t值分别为18.11和10.50,均P<0.05)。结论 B淋巴细胞活化,补体C5a水平增高参与了川崎病的发生,C5a可以作为预测川崎病冠脉损伤的依据。

脾脏CD4^+T、CD19^+B淋巴细胞凋亡在狼疮性BXSB小鼠发病机制中的意义

目的对♀、♂狼疮性BXSB小鼠外周血T、B淋巴细胞分布及脾脏T、B淋巴细胞凋亡进行比较探讨脾脏CD4+T、CD19+B淋巴细胞凋亡在狼疮性BXSB小鼠发病机制中的意义。方法运用流式细胞术、免疫双荧光染色法检测外周血CD4+T、CD8+T、CD19+B细胞分布及脾脏CD4+T、CD19+B细胞凋亡;直接免疫荧光法观察♀、♂狼疮性BXSB小鼠肾脏免疫组化。结果与♀BXSB小鼠比较,♂BXSB小鼠外周血CD4+T、CD8+T细胞分布明显降低(P<0.01),外周血CD19+B细胞分布及脾脏CD4+T、CD19+B凋亡率明显升高(P<0.01);♂BXSB小鼠绝大多数肾小球毛细血管襻上可见大量IgG呈片状沉积,而♀BXSB小鼠肾脏几乎无IgG沉积。结论♂BXSB小鼠发病较♀BXSB小鼠重,细胞凋亡在BXSB小鼠发病机制中具有重要意义。

结核患者CD19^+ CD5^+ CD1d^+ B细胞表达及其对Th17细胞的影响

目的:分析结核患者Th17应答与CD19+CD5+CD1d+B细胞频率的相关性。方法:应用流式细胞术检测健康对照、结核潜伏感染者、结核患者外周血中Th17应答水平及CD19+CD5+CD1d+B细胞频率。结果:结核患者Th17应答水平为(3.34±1.35)%,显著低于健康对照(4.60±1.56)%(q=6.56,P<0.001)和结核菌潜伏感染者(4.13±1.91)%(q=2.96,P<0.05);结核患者CD19+CD5+CD1d+B细胞频率为(28.29±11.03)%,显著高于健康对照(21.05±10.86)%(q=3.69,P<0.05)和潜伏感染者(20.46±9.88)%(q=3.59,P<0.05);结核患者Th17应答与CD19+CD5+CD1d+B细胞频率呈负相关性(r=-0.467 3,P<0.05)。结论:活动性结核病患者Th17细胞应答受抑制,这种抑制可能与CD19+CD5+CD1d+B细胞频率的增多有关。

胃癌外周血淋巴细胞亚群表达水平对患者生存率的影响

目的探讨胃癌患者外周血淋巴细胞亚群表达与生存率的关系。方法用流式细胞仪检测833例胃癌首诊患者外周血的淋巴细胞亚群CD3^＋、CD4^＋、CD8^＋、CD4^＋／CD8^＋、CD19^＋、CD25^＋、CD44^＋及NK^＋细胞．并根据96名健康对照者的平均检测值分为高表达组和低表达组．比较各亚群高表达组与低表达组患者的生存率。结果与健康对照者相比．胃癌患者CD3^＋、CD8^＋低表达。而CD4^＋,CDl9^＋,CD25^＋、CD4^＋／CD8^＋、CD44^＋,NK^＋高表达（P〈0．05）。CD19^＋高表达与低表达者分别为444例和389例，3年生存率为36．4％和18．5％，差异有统计学意义（P〈0．05）：而其他7种淋巴细胞亚群表达水平则与患者生存率无关（均P〉0．05）。结论与健康人群相比，胃癌患者外周血淋巴细胞亚群发生显著变化．其中CDl9^＋高表达患者具有明显的生存优势。

包裹外毒素Ⅲ的抗CD19脂质体靶向杀伤人B淋巴瘤

目的利用包裹绿脓杆菌外毒素单元Ⅲ的抗CD19-免疫脂质体于体内外靶向杀伤淋巴瘤细胞。方法通过结合实验,验证抗CD19免疫脂质体对B淋巴瘤细胞具有特异结合能力。运用体外细胞毒实验(MTT)方法,检测外毒素单元Ⅲ及免疫脂质体包裹的单元Ⅲ对淋巴瘤细胞的杀伤作用。采用小鼠荷人B淋巴瘤模型,于体内运用免疫脂质体包裹的单元Ⅲ靶向杀伤肿瘤细胞。结果在去除外毒素单元Ⅰ和Ⅱ后发现,单元Ⅲ的细胞毒作用消失。当将其包裹入耦联抗CD19的免疫脂质体后发现,脂质体明显提高单元Ⅲ的细胞毒性。用此脂质体治疗,可延长荷B淋巴瘤小鼠的寿命。结论耦联抗CD19的免疫脂质体可特异性地识别B淋巴瘤细胞,并作为良好载体将无毒绿脓杆菌外毒素单元Ⅲ带入细胞。外毒素单元Ⅲ的此种剂型,可成为杀灭肿瘤细胞的有效物质。

HIV／AIDS的免疫学指标与病毒载量的分层分析

目的探讨病毒载量与CD8／CD25、CD8／CD38、CD8／CD95、CD14、CD19、CD56等指标的相关性。方法选用相应的抗体用流式细胞仪进行检测。结果CD8／CD38、CD8／CD25、CD14、CD19在低层病毒载量（〈1000copies／ml）低于高层病毒载量（〉1000copies／ml），有在统计学意义（P〈0．05）；CD56、CD8／CD95在低层病毒载量（〈1000copies／ml）高于高层病毒载量（〉1000copies／ml），并有统计学意义（P〈0．05）。结论CD8／CD38、CD8／CD25、CD14、CD19与病毒载量呈正相关性，CD56、CD8／CD95与病毒载量呈负相关性。

CD19^+CD24^(hi)CD38^(hi) B细胞亚群在系统性红斑狼疮患者外周血中的表达

目的探讨CD19+CD24hi CD38hi B细胞亚群在系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血中的表达及临床意义。方法流式细胞术检测SLE患者(S组,36例)和正常对照组(C组,20例)CD19+CD24hi CD38hi、CD19+CD24int CD38int、CD19+CD24hi CD38-B细胞亚群百分比水平。S组中,20例为SLE活动(S1组),16例为SLE稳定(S2组)。结果 S组CD19+CD24hi CD38hi B细胞亚群百分比显著高于C组[(10.93±6.30)%vs.(7.51±2.73)%](P<0.05),且S1组高于S2组(P<0.05)。S组CD19+CD24hi CD38-B细胞亚群百分比显著低于C组[(15.52±9.54)%vs.(26.46±11.07)%](P<0.05)。S组CD19+CD24hi CD38hi B细胞亚群表达水平与SLE疾病活动指数(SLEDAI)积分正相关(P<0.05)。结论 CD19+CD24hi CD38hi B细胞亚群对效应T细胞分泌促炎症因子缺乏抑制功能与其存在功能缺陷有关,而非因其数量不足。CD19+CD24hi CD38hi B细胞亚群在SLE患者外周血中的表达水平可能与疾病活动相关。