CD_3^+ CD_(56)^+ NKT细胞在中晚期胃癌治疗中的临床疗效观察

目的:评估CD3+CD56+NK T细胞治疗73例中晚期胃癌的疗效及不良反应。方法:血细胞分离机采集患者外周血单个核细胞,加入细胞因子rhINF-γ、rhIL-2、rhIL-1及CD3McAb培养,10 d后定向诱导成CD3+CD56+NKT细胞,分次回输给患者,每疗程回输细胞总数为(5~10)×109个。治疗4 w后,用流式细胞仪检测患者外周血T细胞亚群状态及细胞因子水平,以评价细胞免疫功能,结合临床指标综合评价疗效,同时观察不良反应。结果:在73例接受治疗的患者中,部分缓解(PR)+微效(MR)为37例(50.68%),稳定(SD)21例(28.76%),进展(PD)15例(20.54%);CD3、CD4、CD8T细胞的百分比在治疗后均较治疗前显著增高(P<0.05),且72.60%(53例)的患者CD4/CD8比例调整至正常;80.82%(59例)的患者治疗后Th1类细胞因子分泌增加,61.64%(45例)的患者Th1/Th2细胞因子比例恢复平衡;治疗后42例食欲增加,51例体力及睡眠改善,23例体重回升大于治疗前体重的5%;输注后的副反应包括寒颤、发热、呕吐、兴奋失眠、皮疹、疲乏,经对症处理后短时缓解,无1例出现毛细血管渗漏综合征(SCLS)及实质脏器的损害。结论:过继性CD3+CD56+NKT细胞输注治疗能显著调整中晚期胃癌患者的免疫功能,改善临床症状,是一种安全、有效的辅助治疗手段。

系统性红斑狼疮患者外周血CD_(3)^(+)CD_(56)^(+)NKT水平与Th1Th2细胞表达的相关性

目的 探讨系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血CD_(3)^(+)CD_(56)^(+)NKT水平与相关机制的关系。方法 选取2019年8月~2020年12月重庆市九龙坡区中医院收治的112例SLE患者(SLE组),按SLEDAI评分分为非活动期72例,活动期40例,另选取同期健康自愿者50例(健康组)。采集受试者血采用流式细胞技术测定CD_(3)^(+)CD_(56)^(+)NKT水平,采用酶联免疫法测定血清中相关细胞因子,分析各指标与病情的相关性。结果 SLE组外周血CD_(3)^(+)CD_(56)^(+)NKT细胞计数及占比均较健康组明显减小,差异有统计学意义(P<0.05);SLE活动期组外周血CD3+CD56+NKT细胞计数及占比、IFN-γ、IFN-γ/IL-4明显低于非活动期组,SLEDAI评分、24 h UPQ、IL-4明显高于非活动期组,差异有统计学意义(均P<0.05);Pearson相关分析结果显示,CD_(3)^(+)CD_(56)^(+)NKT细胞与SLE患者SLEDAI评分、24 hUPQ及IL-4呈负相关(r=0.573、0.682、0.374,P<0.05),而与IFN-γ无显著相关性(r=0.016,P>0.05)。结论 CD_(3)^(+)CD_(56)^(+)NKT细胞参与了SLE免疫调节过程,其表达水平与患者SLEDAI评分呈显著负相关,CD_(3)^(+)CD_(56)^(+)NKT细胞可能通过分泌Th1/Th2细胞相关因子发挥SLE免疫调节作用,值得临床借鉴。

人外周血Vα24 NKT细胞和CD3^+CD56^+CIK细胞生物学特性的比较研究

目的进一步认识Vα24 NKT细胞和CIK细胞在生物学特性的差异。方法从人外周血单个核细胞扩增NKT细胞和CIK细胞;经免疫磁珠纯化获得高纯度的TCRVα24+NKT细胞和CD3+CD56+CIK细胞。运用流式细胞术测定纯化后的NKT细胞和CIK细胞的表型、细胞因子和细胞坏死相关因子的表达情况,并用DIOC18染色及流式细胞术测定纯化后的NKT细胞和CIK细胞的细胞杀伤活性。结果经纯化TCRVα24+Vβ11+NKT细胞和CD3+CD56+CIK细胞的纯度均达到>90%;纯化后的Vα24 NKT细胞多数为CD4+和DN NKT细胞,高表达TCRVα24、Vβ11、CD3、CD161,低表达CD56;而纯化后的CIK细胞则以CD8+T细胞为主,高表达CD3、CD56,低表达CD161,几乎不表达TCRVα24和Vβ11。在抗原刺激下,CD3+CD56+CIK细胞的IFN-γ、TNF-α、Perforin、FasL、TRAIL表达水平均高于NKT细胞,但CD3+CD56+CIK细胞几乎不分泌IL-4,而NKT细胞则分泌高水平的IL-4;CD3+CD56+CIK细胞对肿瘤细胞株K562、U937、Jurkat的杀伤率均远远高于NKT细胞。结论TCRVα24+NKT细胞和CD3+CD56+CIK细胞是两类完全不同的细胞群,在抗肿瘤免疫和免疫调节中可能起着不同的作用。

慢性胃炎粘膜内CD_(3)^(+)细胞,S-100^(+)树突状细胞和n NOS表达与幽门螺旋杆菌感染的关系研究

目的 探讨幽门螺旋杆菌 (Hp)与慢性胃炎粘膜内CD3+ 细胞 ,S 10 0 + 树突状细胞和nNOS表达之间的关系。方法 用免疫细胞化学方法 ,检测Hp+ 和Hp 胃炎患者及正常人的胃窦部活检标本。结果 Hp+ 胃炎组胃窦粘膜内CD3+ 细胞和S 10 0 + 树突状细胞数量明显高于Hp-胃炎和正常组 ,且有显著性差异 (P <0 0 1和P <0 0 5 ) ,而nNOS呈高表达 ,与Hp-胃炎组相比有显著性差异 (P <0 0 1)。结论 Hp+ 胃炎患者胃窦粘膜内CD3+ 细胞和S 10 0 + 树突状细胞的增加是机体对Hp的免疫应答 ,而nNOS在Hp+ 胃炎组的高表达可能与Hp感染有密切关系。

CD3^(+)CD56^(+)NKT细胞及其细胞因子在Graves病患者体内的表达

目的探讨CD3^(+)CD56^(+)NKT细胞(NKT细胞)及其细胞因子[白细胞介素-2(IL-2)、白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-10(IL-10)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)]在毒性弥漫性甲状腺肿[Graves病(GD)]患者体内的表达情况。方法选择19例GD患者作为实验组,另选择19例健康志愿者作为对照组。检测并比较两组甲状腺功能指标[血清游离三碘甲腺原氨酸(FT3)、血清游离甲状腺素(FT4)、促甲状腺激素(TSH)、甲状腺过氧化物酶抗体(TPOAb)]、IL-6、TNF-α及NKT细胞水平,IL-2、IL-10阳性率,探讨FT4、TSH、TPOAb与NKT细胞及细胞因子的相关性。结果实验组FT3、FT4、TPOAb、TNF-α和NKT细胞水平均高于对照组,TSH和IL-6水平均低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。实验组IL-2和IL-10阳性率分别为89.47%、100.00%,均高于对照组的0、0,差异有统计学意义(P<0.05)。IL-2、IL-10、TNF-α、NKT细胞水平与FT4、TSH和TPOAb水平密切相关,IL-6水平与TSH水平密切相关(P<0.05)。以TSH水平为因变量,IL-2、IL-6、IL-10、TNF-α、NKT细胞水平为自变量,采用进入法纳入变量,结果显示IL-10水平与TSH水平呈负相关(P<0.05)。以TPOAb水平为因变量,IL-2、IL-6、IL-10、TNF-α和NKT细胞水平为自变量,采用进入法纳入变量,结果显示IL-10水平与TPOAb水平呈负相关(P<0.05)。结论GD患者外周血NKT细胞水平增加,其相关的细胞因子在GD发病中具有重要意义。

妊娠期Graves病患者体内CD3^(+)CD56^(+)NKT细胞表达与妊娠结局的相关性研究

目的探讨CD3^(+)CD56^(+)NKT细胞在妊娠期Graves病(grave disease,GD)患者体内的表达情况及其与妊娠结局的相关性。方法选取2018年10月至2021年3月东莞东华医院收治的53例妊娠期GD患者作为GD组,同期选取53例正常妊娠者作为对照组。依据随访结果将GD组分为正常结局组、流产组、产后出血组、低出生体重儿组4个亚组。采用流式细胞仪检测CD3^(+)CD56^(+)NKT细胞的数目。抽取外周静脉血检测2组甲状腺激素游离三碘甲状腺原氨酸(free triiodothyronine,FT3)、游离甲状腺素(free thyroxine,FT4)的水平及甲状腺过氧化物酶抗体(thyroid peroxidase antibody,TPOAb)、甲状腺球蛋白抗体(thyroglobulin antibody,TGAb)和促甲状腺素受体抗体(thyrotropin receptor antibody,TRAb)的滴度。比较GD组与对照组间CD3^(+)CD56^(+)NKT细胞的数目与甲状腺激素、甲状腺激素抗体指标水平。分析GD组患者NKT细胞与甲状腺功能指标的相关性,GD组各亚组患者间CD3^(+)CD56^(+)NKT细胞数目差异,并分析细胞数目与妊娠结局的相关性。结果GD组患者外周血中CD3^(+)CD56^(+)NKT细胞的数目明显低于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05);GD组患者血清中FT_(3)、FT_(4)、TPOAb、TGAb和TRAb水平明显高于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05)。相关性分析显示,GD组患者血清中FT_(3)、FT_(4)、TPOAb、TGAb和TRAb水平与外周血中CD3^(+)CD56^(+)NKT细胞的数目呈负相关,差异具有统计学意义(P<0.05)。流产组、产后出血组、低出生体重儿组患者血清中CD3^(+)CD56^(+)NKT细胞的平均数目均低于正常结局组,差异具有统计学意义(P<0.05);调控年龄、BMI等因素后,CD3^(+)CD56^(+)NKT细胞的数目仍然是流产等不良妊娠结局的独立危险因素。结论CD3^(+)CD56^(+)NKT细胞在妊娠期Graves病患者体内表达降低,并与Graves病严重程度及不良妊娠结局具有一定的相关性,积极检测妊娠期Graves病患者CD3^(+)CD56^(+)NKT细胞表达水平具有重要的临床应用价值。

加速康复外科措施对结直肠癌患者术后CD_(3)^(+)、CD_(4)^(+)、CD_(8)^(+)、CD_(4)^(+)/CD_(8)^(+)水平与预后的影响

目的:探究加速康复外科措施对结直肠癌患者术后CD_(3)^(+)、CD_(4)^(+)、CD_(8)^(+)、CD_(4)^(+)/CD_(8)^(+)水平与预后的影响。方法:选取2019年1~12月行手术治疗的43例结直肠癌患者为研究对象,采用随机数字表法将其分为常规组(21例)和研究组(22例)。常规组采用常规护理措施,而研究组在常规护理基础上采用加速康复外科措施,比较两组术前1 d和术后7 d的免疫功能、术后恢复指标和并发症发生率。结果:术后7 d,研究组的CD_(3)^(+)、CD_(4)^(+)、CD_(4)^(+)/CD_(8)^(+)均明显高于常规组,差异有统计学意义(P<0.05),而两组的CD_(8)^(+)差异无统计学意义(P>0.05);同时,研究组的首次肛门排气时间、首次下床活动时间、首次进食时间和首次排便时间均明显短于常规组,差异有统计学意义(P<0.05);研究组的术后并发症发生率(4.55%)明显低于常规组(28.57%),差异有统计学意义(P<0.05)。结论:予以结直肠癌患者采用加速康复外科措施,能有效改善其术后免疫功能,并加快术后恢复,减少并发症发生概率。

COPD合并肺部真菌感染外周血(1-3)-β-D葡聚糖和淋巴细胞CD_(3)^(+)CD_(4)^(+)、CD_(3)^(+)CD8^(+)水平变化

目的分析慢性阻塞性肺病(COPD)合并肺部真菌感染(PFIH)外周血(1-3)-β-D葡聚糖和淋巴细胞CD_(3)^(+)CD_(4)^(+)、CD_(3)^(+)CD_(8)^(+)水平变化。方法选取2019年5月-2021年5月在湖州市中心医院就诊的56例COPD合并PFIH患者为感染组,另随机选取同期医院就诊的56例COPD未合并PFIH患者为未感染组。分析感染组痰液培养菌种分布,比较两组临床资料,采用Logistic回归分析影响COPD合并PFIH的危险因素,采用受试者工作特征(ROC)曲线分析COPD患者外周血(1-3)-β-D葡聚糖和淋巴细胞CD_(3)^(+)CD_(4)^(+)、CD_(3)^(+)CD_(8)^(+)水平与PFIH的关系。结果56例COPD合并PFIH患者共分离出83株病原菌,以白假丝酵母(43.37%)为主。Logistic回归分析显示,有糖尿病史、合并低蛋白血症、有机械通气均为影响COPD并发PFIH的危险因素(P<0.05)。感染组患者(1,3)-β-D葡聚糖、CD_(3)^(+)CD_(8)^(+)水平高于未感染组,CD_(3)^(+)CD_(4)^(+)、CD_(3)^(+)CD_(4)^(+)/CD_(3)^(+)CD_(8)^(+)水平低于未感染组,差异均有统计学意义(P<0.05)。ROC曲线结果显示,外周血(1,3)-β-D葡聚糖和淋巴细胞CD_(3)^(+)CD_(4)^(+)、CD_(3)^(+)CD_(8)^(+)水平诊断COPD并发PFIH的曲线下面积分别为0.885、0.866、0.876。结论外周血(1,3)-β-D葡聚糖、淋巴细胞CD_(3)^(+)CD_(4)^(+)、CD_(3)^(+)CD_(8)^(+)可作为早期诊断COPD患者发生PFIH感染的重要指标。

CD3^-CD56^+NK细胞及CD3^+CD56^+NKT样淋巴细胞在急性白血病患者中的变化

目的通过分析急性白血病患者发病时以及缓解时外周血CD3^-CD56^+NK细胞及CD3^+CD56^+NKT样淋巴细胞的数量以及功能变化,进一步了解急性白血病患者免疫功能状态。方法使用流式细胞分析外周血CD3^-CD56^+NK细胞及CD3^+CD56^+NKT样淋巴细胞的数量,同时分析上述两群细胞内的干扰素表达水平来评估细胞的功能。结果CD3^+CD56^+NKT样淋巴细胞数量在急性白血病发病时显著增加,经化疗获得完全缓解后数量又下降到正常健康人水平,并且无论在发病时还是缓解时CD3^+CD56^+NKT样淋巴细胞内干扰素水平均明显下降。CD3^-CD56^+NK细胞的变化有所不同,在发病时数量以及功能改变均不明显,而在疾病缓解时,急性淋巴细胞白血病患者CD3^-CD56^+NK细胞的数量下降明显,急性髓系白血病患者CD3^-CD56^+NK细胞的功能下降明显。结论急性白血病患者发病时可能产生免疫反应,但免疫细胞功能缺陷可能参与疾病的发生进展,其中CD3^+CD56^+NKT样淋巴细胞的变化可能与疾病的关系更密切,且急性髓系白血病患者免疫细胞功能异常更明显。

益气清解方治疗气虚毒滞型桥本甲状腺炎的疗效观察及对T细胞亚群的影响

目的:观察益气清解方治疗气虚毒滞型桥本甲状腺炎甲状腺功能正常患者的疗效及对T淋巴细胞亚群的影响。方法:选取80例气虚毒滞型桥本曱状腺炎甲状腺功能正常患者进行随机分组,每组40例。观察组予益气清解方治疗,对照组予硒维尔治疗,治疗12周后评价疗效,观察两组治疗前及治疗12周后的中医证候积分、甲状腺功能、自身免疫抗体滴度水平、T淋巴细胞亚群水平变化。结果:治疗12周后,观察组中医证候总有效率高于对照组(P<0.05);两组甲状腺球蛋白抗体(TG-Ab)、甲状腺过氧化物酶抗体(TPO-Ab)水平均较治疗前下降(P<0.05),观察组下降幅度大于对照组(P<0.05);两组患者外周血调节T细胞CD_(4)^(+)CD_(25)^(+)Foxp3^(+)Tregs占CD_(4)^(+)T比值(CD_(4)^(+)CD_(25)^(+)Foxp3^(+)Tregs/CD_(4)^(+)T比值)、CD_(4)^(+)CD_(25)^(+)Foxp3 mRNA表达量较治疗前明显升高(P<0.05),CD_(4)^(+)/CD+8比值较治疗前下降(P<0.05);观察组变化幅度大于对照组(P<0.05)。结论:益气清解方能有效改善气虚毒滞型桥本曱状腺炎甲状腺功能正常患者的中医证候,下调甲状腺自身免疫性抗体,改善机体免疫功能。

外周血CD_(8)^(+)CD_(28)^(-)T细胞Foxp3 mRNA表达与老年肺部感染的关系

目的分析外周血CD_(8)^(+)CD_(28)^(-)T细胞叉头框蛋白p3(Foxp3)mRNA表达与老年肺部感染的关系。方法选择2019年12月-2021年12月乌鲁木齐市友谊医院收治的老年慢性支气管炎患者200例,根据患者是否合并肺部感染分为感染组(n=135)和未感染组(n=65),比较感染组和未感染组患者及不同肺部感染程度患者外周血CD_(8)^(+)CD_(28)^(-)T细胞水平和Foxp3 mRNA表达水平,检测感染组和未感染组患者血清炎性因子[白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-10(IL-10)、干扰素-γ(IFN-γ)和转化生长因子-β1(TGF-β1)]水平,分析老年肺部感染患者外周血CD_(8)^(+)CD_(28)^(-)T细胞水平和Foxp3 mRNA表达水平与血清炎性因子水平、临床肺部感染评分(CPIS)的关系。结果感染组患者外周血CD_(8)^(+)CD_(28)^(-)T细胞水平和Foxp3 mRNA表达水平均高于未感染组患者(P<0.05);不同肺部感染程度患者外周血CD_(8)^(+)CD_(28)^(-)T细胞水平和Foxp3 mRNA表达水平比较,差异具有统计学意义(P<0.05),中、重度感染组高于轻度感染组(P<0.05),重度感染组高于中度感染组(P<0.05);感染组患者血清IL-6、IFN-γ水平均高于未感染组患者(P<0.05),IL-10、TGF-β1水平均低于未感染组患者(P<0.05);Pearson相关检验结果显示,CD_(8)^(+)CD_(28)^(-)T细胞水平和Foxp3 mRNA表达水平与血清IL-6、IFN-γ水平、CPIS评分呈正相关(P<0.05),与IL-10、TGF-β1水平呈负相关(P<0.05)。结论老年肺部感染患者外周血CD_(8)^(+)CD_(28)^(-)T细胞Foxp3 mRNA表达显著上调,且与肺部感染程度存在密切关系。

系统性红斑狼疮患者血清TNF-α表达与T淋巴细胞亚群的关系

目的探讨系统性红斑狼疮(SLE)患者血清肿瘤坏死因子⁃α(TNF⁃α)表达与T淋巴细胞亚群的关系。方法选取淮安市第一人民医院2019年1月至2022年1月收治的94例SLE患者(狼疮组)及同期年龄、性别匹配的60名健康体检者(对照组)作为研究对象,根据SLE活动性指数(SLEDAI)评分将研究组分为活动组(53例)和非活动组(41例),检测所有受试者的外周血T淋巴细胞亚群(CD_(3)^(+)、CD_(4)^(+)、CD_(8)^(+))、CD_(4)^(+)/CD_(8)^(+)及血清TNF⁃α表达水平,分析不同组别上述指标表达水平,采用Spearman相关性分析血清TNF⁃α表达水平与CD_(3)^(+)、CD_(4)^(+)、CD_(8)^(+)、CD_(4)^(+)/CD_(8)^(+)的相关性。结果狼疮组的CD_(3)^(+)、CD_(4)^(+)、CD_(4)^(+)/CD_(8)^(+)低于对照组,CD_(8)^(+)、TNF⁃α高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。SLE患者中活动组的CD_(3)^(+)、CD_(4)^(+)、CD_(4)^(+)/CD_(8)^(+)低于非活动组,CD_(8)^(+)、TNF⁃α高于非活动组,差异有统计学意义(P<0.05)。狼疮组中血清TNF⁃α水平与CD_(3)^(+)、CD_(4)^(+)、CD_(4)^(+)/CD_(8)^(+)呈负相关,r值分别为-0.586、-0.611、-0.656(P<0.05),与CD_(8)^(+)呈正相关,r值为0.564(P<0.05)。TNF⁃α评估SLE病情严重程度曲线下面积(AUC)为0.758,最佳截点为4.35(pg/mL),此时诊断敏感度为81.13%,特异性为65.85%。结论SLE患者存在TNF⁃α及T淋巴细胞亚群表达异常,在疾病活动期患者中更为明显,且SLE患者中TNF⁃α表达水平与T淋巴细胞亚群水平关系密切,通过检测TNF⁃α水平,提示其与SLE患者的疾病活动度具有相关性。

雷公藤甲素通过miR-23a-3p/PTEN/PI3K/AKT/mTOR改善强直性脊柱炎滑膜成纤维细胞作用机制

目的:探索雷公藤甲素(TPT)通过miR-23a-3p/PTEN/PI3K/AKT/mTOR改善强直性脊柱炎(AS)滑膜成纤维细胞(FLS)作用机制。方法:Transwell小室培养CD_(4)^(+)T细胞与AS-FLS,TPT作用24、48和72 h后,采用CCK-8法检测细胞的变化并选取最佳浓度;RT-qPCR和Western Blot分别检测miR-23a-3p、PTEN、PI3K、AKT、mTOR,ELISA法检测IL-1β、IL-6、IL-10、TNF-α表达水平。结果:TPT为100μg/mL其抑制细胞活力的作用最为明显。用TPT处理后导致miR-23a-3p RNA,PI3K、AKT、mTOR基因及蛋白水平,p-PI3K、p-AKT、p-mTOR蛋白水平表达,TNF-α、IL-1β、IL-6显著降低,PTEN基因及蛋白,IL-10显著升高(P<0.01)。在过表达miR-23a-3p的情况下,TPT素干预后miR-23a-3p、PI3K、AKT、mTOR基因及蛋白水平,p-AKT、p-mTOR蛋白水平表达显著降低,PTEN基因及蛋白,IL-10显著升高(P<0.01)。结论:TPT可抑制AS-FLS活力,并可改善细胞炎症,其机制可能与下调mi R-23a-3p/PTEN/PI3K/Akt/m TOR信号通路有关。

新型LTT优化试验诊断抗结核药物超敏反应的临床价值

目的 研究新型淋巴细胞转化试验(LTT)在诊断抗结核药物超敏反应中的临床价值。方法 选择2018年10月-2019年3月于怀化市第一人民医院确诊的初治结核病和肺外结核病患者90例,以临床药物激发试验(DPT)检测为判定超敏反应的金标准。采集患者外周静脉血进行传统LTT和新型LTT,比较两种方法的体外刺激指数(S.I),检测灵敏度、特异度、假阳性率、假阴性率、阳性预测值和阴性预测值。结果 在DPT阳性患者中,新型LTT的刺激指数均高于传统LTT(P<0.05);DPT共检测出53例抗结核药物所致的超敏反应,新型LTT共检测出阳性例数41例,传统LTT共检测出阳性例数29例,新型LTT检测的阳性例数高于传统LTT检测例数(F=3.572,P=0.007);新型LTT对不同药物导致超敏反应的检测灵敏度均高于传统LTT,假阴性率低于传统LTT。结论 新型LTT可显著提高传统LTT的灵敏度,降低假阴性率,可在抗结核药物超敏反应的临床诊断中推广应用。