CELF1通过抑制CDKN1B促进胶质瘤细胞增殖的研究

目的探讨CELF1在胶质瘤细胞增殖中的作用及可能机制。方法采用实时荧光定量PCR(QPCR)和Western blotting检测胶质瘤细胞系U87、U251、SHG44以及人正常星形胶质细胞系HA1800中CELF1 m RNA和蛋白表达;无义核酸NC(NC组)、si CELF1(si CELF1组)和si CELF1&siCDKN1B(si CELF1&siCDKN1B组)转染U87细胞,CCK-8法检测细胞活力,流式细胞术检测细胞周期变化; Western blotting检测CELF1、CDKN1B和Cyclin D1蛋白表达。结果胶质瘤细胞系U87、U251和SHG44中CELF1 m RNA相对表达量分别为3. 1±0. 074、4. 2±0. 137和3. 6±0. 023,均高于人正常星形胶质细胞HA1800的1. 1±0. 054,差异均有统计学意义(P <0. 05)。Western blotting检测CELF1的蛋白表达与m RNA表达一致。沉默CELF1能显著降低U87细胞活力,si CELF1组G0/G1期细胞比例为(63. 5±1. 33)%,显著高于NC组的(39. 4±1. 24)%,而si CELF1组S期细胞比例为(14. 3±0. 095)%,显著低于NC组的(22. 8±1. 97)%(P<0. 05)。si CELF1组CDKN1B蛋白相对表达量为2. 37±0. 088,显著低于NC组的1. 17±0. 101(P<0. 05)。si CELF1组Cyclin D1蛋白相对表达量为0. 274±0. 039,显著低于si CELF1&siCDKN1B组的0. 83±0. 071 (P <0. 05)。si CELF1&siCDKN1B组细胞活力高于si CELF1组(P <0. 05)。si CELF1&siCDKN1B组G0/G1期细胞比例为(42. 1±1. 76)%,显著低于si CELF1组的(62. 4±1. 92)%(P <0. 05);而si CELF1&siCDKN1B组S期细胞比例为(20. 3±0. 077)%,与NC组的(22. 8±1. 97)%差异无统计学意义。结论 CELF1通过抑制CDKN1B,进而介导Cyclin D1表达促进胶质瘤细胞增殖。

甲状腺乳头状癌组织中CELF1表达及其功能研究

目的:探讨CELF1在甲状腺乳头状癌(PTC)组织中表达及对PTC细胞增殖和侵袭力的影响。方法:免疫组化法检测PTC组织和癌旁组织中CELF1蛋白表达,小分子RNA构建CELF1低表达细胞系,实时荧光定量PCR技术检测CELF1表达,CCK-8法和克隆形成实验检测细胞增殖能力,Transwell小室检测细胞侵袭能力。结果:PTC组织中CELF1蛋白阳性表达率较高,且与TNM分期、侵犯被膜和淋巴结转移有关(P<0.05);与对照序列组和空白组相比,CELF1干扰序列组细胞中CELF1 mRNA相对表达量降低(P<0.05),细胞增殖水平降低(P<0.05),侵袭细胞数降低(P<0.05)。结论:CELF1蛋白在PTC组织中呈高表达,特异性下调PTC细胞中CELF1基因表达可减少细胞增殖,抑制细胞侵袭力。

CELF1蛋白在神经胶质瘤组织中的表达及临床意义

目的探讨cELF1在脑胶质瘤中的表达及临床意义。方法采用免疫组织化学技术及westemblot检测62例脑胶质瘤患者CELF1的表达情况，分析cELF1蛋白表达及临床病理特征之间的关联。采用Kaplan-Meier法进行生存分析。结果在脑胶质瘤CELF1表达上调，其表达上调与脑胶质瘤的恶性程度及预后明显相关。结论CELF1可能成为胶质瘤的独立预后因素。

CELF1在女性PTC组织中的表达及其对细胞增殖和侵袭力的影响研究

目的:研究女性甲状腺乳头状癌(PTC)组织中RNA结合蛋白家族1(CELF1)的表达情况及CELF1的临床意义。方法:以福州市长乐区医院2021年1月-2022年6月女性PTC患者86例为研究对象,采用回顾性研究,根据免疫组织化学法检测CELF1蛋白在PTC组织与癌旁组织中的阳性表达率;通过小分子RNA建立CELF1低表达细胞系,并建立空白对照组、阴性对照组和试验组。测定CELF1 mRNA表达情况,分别采用CCK-法与Transwell小室实验检测三组细胞增殖和侵袭能力。结果:CELF1蛋白在PTC组织中的阳性表达率为75.58%(65/86),较癌旁组织的39.53%(34/86)高(χ^(2)=22.87,P<0.01)。试验组PTC细胞中CELF1 mRNA表达量为(1.06±0.09),较空白对照组的(2.21±0.16)和阴性对照组的(2.33±0.13)均下调(F=154.76,P<0.01)。经细胞培养1、2 d后,相比空白对照组和阴性对照组,试验组细胞增殖能力明显减弱(F=47.95、56.72,P<0.01)。相比空白对照组(122.86±15.34)个和阴性对照组(120.57±13.54)个,试验组细胞侵袭数量(84.13±10.04)个较少(F=60.24,P<0.01)。结论:PTC组织中CELF1具有高表达的特点,而通过特异性降低CELF1 mRNA在PTC细胞中的表达量可起到抑制细胞增殖和降低细胞侵袭的作用。

艾司氯胺酮对大鼠气腹肠缺血再灌注损伤的作用及机制

目的:探讨艾司氯胺酮对气腹大鼠Elav样家族成员1(CELF1)/凋亡诱导因子(AIF)通路及肠缺血再灌注(I/R)损伤的影响。方法:100只20周龄Wistar大鼠分为正常对照组、模型组、丙泊酚组(200mg/ml)、艾司氯胺酮低剂量组(1000mg/ml)、高剂量组(2000mg/ml)。丙泊酚组、艾司氯胺酮低、高剂量组分别给予相应药物腹腔注射10min,正常对照组、模型组给予等体积生理盐水腹腔注射10min,然后模型组、丙泊酚组、艾司氯胺酮低、高剂量组大鼠进行气腹肠缺血再灌注120min。最终各组进行腹部撤回反射(AWR)评分评价大肠扩张度、取血清测定IL-2、TNF-α、DAO水平,处死大鼠测定肠湿重/干重比值、肠组织HE染色病理检查、对肠组织行CHiu评分、RT-PCR法及蛋白印记法测定肠组织中CUGBP信号通路的CELF1/AIF的mRNA和蛋白表达水平。结果:各组大鼠CHiu评分、肠湿重/干重比值、肠扩张度、血清IL-2、TNF-α、DAO水平、CELF1、AIF mRNA蛋白表达差异均有统计学意义(P均<0.05),模型组CHiu评分、肠湿重/干重比值、血清IL-2、TNF-α、DAO水平、CELF1、AIF mRNA和蛋白表达高于正常对照组、丙泊酚组、艾司氯胺酮各剂量组,肠扩张度低于正常对照组、丙泊酚组、艾司氯胺酮各剂量组(P均<0.05)。与艾司氯胺酮低剂量比较,艾司氯胺酮高剂量CHiu评分、肠湿重/干重比值、血清IL-2、TNF-α、DAO水平、CELF1、AIF mRNA和蛋白表达降低,肠扩张度升高(P均<0.05);艾司氯胺酮低剂量组CHiu评分、肠湿重/干重比值、血清IL-2、TNF-α、DAO水平、CELF1、AIF mRNA和蛋白表达高于丙泊酚组,肠扩张度低于丙泊酚组(P均<0.05);艾司氯胺酮高剂量组CHiu评分、湿重/干重比值、肠扩张度、血清IL-2、TNF-α、DAO水平、CELF1、AIF mRNA和蛋白表达与丙泊酚组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论:艾司氯胺酮对大鼠气腹肠I/R具有明显保护作用;其机制与艾司氯胺酮在肠I/R损伤中显著抑制CELF1/AIF通路有关。