Celsior液、HTK液和UW液对心脏保存效果的实验研究

目的 应用Langendorff灌注模型低温灌注离体鼠心 6h ,检验器官保存液Celsior液、HTK液和UW液对心脏保存的效果。方法 实验分为 3组 ,每组 8只Wistar大白鼠。麻醉并抗凝后 ,快速取下鼠心并悬挂在Langendorff灌注模型上灌注 ,测定血流动力学基础值。分别用三种器官保存液灌注离体鼠心 ,在 4℃下低温浸泡保存 6h。重新复温、复灌 ,再次测定血流动力学值和冠状动脉流量 ,留取标本分别测定心肌水含量、心肌酶漏出量、心肌细胞ATP和CP含量和观察心肌细胞超微结构变化。结果 ①血流动力学恢复率 ,Celsior液和HTK液组均优于UW液组。②心肌酶漏出量 ,Celsior液和HTK液组明显低于UW液组。③ATP和CP含量 ,Celsior液和HTK液组高于UW液组。④超微结构变化 ,Celsior液组和HTK液组心肌损害最轻 ,UW液组心肌损害较重。结论 Celsior液、HTK液和UW液对心脏保护的效果均较好 ,均为较合适的心肌保存液。Celsior液和HTK液对心脏保存的效果无显著差异 ,但均优于UW液。

Fas/FasL和Caspase-3在二氮嗪强化Celsior液超时冷保存鼠心移植中的表达及其意义

目的研究心肌线粒体三磷腺苷敏感性钾离子通道(mitochondrial ATP-sensitive potassium channel,MitoKATPC)开放剂二氮嗪(diazoxide,DE)添加入Celsior液中对大鼠供心超时冷保存的效果,并探讨其抗心肌凋亡作用的可能机制。方法SD大鼠112只,随机分成7组,每组16只(供者、受者各8只)。(1)Celsior组:保存液为单纯Celsior液;(2)DE组:保存液为30μmol/LDE+Celsior液;上述两组又以保存时间不同分为5 h、8 h、10 h组。(3)5-HD组:保存液为Celsior液+DE(30μmol/L)+5-HD(100μmol/L),保存时间为5 h。利用改良Heron法建立大鼠颈部异位心脏移植模型,观察移植术后5 min内心脏恢复跳动、心率表现;采用原位末端标记染色法检测心肌细胞凋亡,用免疫组织化学方法检测心肌Fas/FasL和Caspase-3蛋白的表达情况;以及用电镜观察心肌超微结构等。结果(1)除5 h保存时间的心脏外,DE各组心脏移植术后30 s复跳率较相应Celsior液组显著提高;DE组心率明显较Celsior液组快(P<0.05),DE 10 h组与Celsior 5 h组无明显区别(P>0.05);(2)与Celsior液组相比,DE处理明显降低各组心肌细胞凋亡指数(P<0.05),减少Fas/FasL和Caspase-3蛋白的表达(均为P<0.05);DE10 h组与Celsior5 h组各指标比较差异无统计学意义(P>0.05);(3)5-HD可取消上述DE的作用;(4)DE各组和Celsior 5 h组心肌超微结构保护相对较佳:肌纤维排列整齐,肌节清,线粒体肿胀不明显,嵴结构较为清楚;Celsior 10 h组心肌结构尚清楚,但肌纤维疏松,个别区域肌丝肌节溶解,线粒体肿胀较明显,嵴模糊。结论DE强化Celsior液冷保存的鼠供心,可能通过激活MitoKATPC,明显抑制Fas/FasL和Caspase-3蛋白的表达,保护线粒体功能和结构的完整,从而使心肌细胞凋亡减少,减轻缺血再灌注损伤,使得DE强化Celsior液超时(10 h)冷保存的鼠供心移植安全有效。

UW液、Celsior液和HTK液低温保存生物人工肝用L-02细胞的效果比较

目的比较UW液、Celsior液和HTK液4℃常规低温保存生物人工肝用L-02细胞的效果。方法制备好的L-02细胞悬液分以下3组:UW液保存组(UW液组);Celsior液保存组(CS液组);HTK液保存组(HTK液组)。各组细胞于4℃低温72 h后,分别测定细胞存活率及死亡率(流式细胞术),ALT及LDH释放,尿素合成功能及白蛋白分泌功能。结果 UW液较Celsior液和HTK液显著提高了4℃常规低温保存72 h的L-02细胞的存活率[(60.05±4.23)%vs(50.12±3.99)%、(44.20±4.67)%],均P<0.05;降低了细胞死亡率[(39.95±4.23)%vs(49.88±3.99)%、(55.80%±4.67)%],均P<0.05;抑制了ALT、LDH释放(均P<0.05);更好地维持了L-02细胞尿素合成功能[(1.03±0.23)mmol/Lvs(0.80±0.14)mmol/L、(0.48±0.05)mmol/L]和白蛋白分泌功能[(8.36±1.38)mg/Lvs(6.41±1.25)mg/L、(5.19±0.41)mg/L),均P<0.05。结论与Celsior液和HTK液相比,使用UW液4℃常规低温保存L-02肝细胞可以明显提高复温后细胞存活率,降低低温损伤引起的ALT、LDH释放,有效保护肝细胞尿素合成功能和白蛋白分泌功能,但保存时间不应超过72 h。

零下非结冰UW液、Celsior液和HTK液保存C3A细胞的效果比较

目的比较UW液、Celsior液和HTK液零下非结冰(-0.8℃)保存生物人工肝用C3A细胞的效果。方法制备好的C3A细胞悬液分以下3组:UW液保存组(UW液组);Celsior液保存组(CS液组);HTK液保存组(HTK液组)。各组细胞于-0.8℃低温保存72 h后,分别测定细胞存活率及死亡率(流式细胞术)、LDH释放、尿素合成功能及白蛋白分泌功能。结果 UW液及Celsior液比HTK液显著提高了零下非结冰保存72 h的C3A细胞的存活率〔(84.34±4.25)%,(83.53±3.73)%vs(75.65±3.01)%,P<0.001〕和细胞内ATP含量〔(5.54±1.44)μg/106个细胞,(5.51±1.31)μg/106个细胞vs(2.75±1.03)μg/106个细胞,P<0.001〕;抑制了LDH释放(P<0.001);更好地维持了细胞尿素合成功能〔(0.63±0.10)mmol/L,(0.62±0.06)mmol/L vs(0.39±0.04)mmol/L,P<0.001〕和白蛋白分泌功能〔(1.99±0.38)g/L,(1.96±0.24)g/L vs(1.50±0.18)g/L,P<0.05〕。UW液与Celsior液零下非结冰保存C3A细胞的效果无差异。结论同HTK液相比,使用UW液或者Celsior液零下非结冰(-0.8℃)保存C3A细胞可以明显地提高复温后细胞存活率和细胞内ATP含量,降低低温损伤引起的LDH释放,有效地保护肝细胞尿素合成功能和白蛋白分泌功能。UW液同Celsior液零下非结冰保存C3A细胞的效果无差异,保存时间不宜超过72 h。

UW液、Celsior液和HTK液零下非结冰保存生物人工肝用L-02细胞的效果比较

目的:比较零下非结冰(-0.8℃)UW液、Cel-sior液和HTK液保存生物人工肝用L-02细胞的效果.方法:将制备好的L-02细胞悬液分成以下3组:UW液保存组(UW液组);Celsior液保存组(CS液组);HTK液保存组(HTK液组).各组细胞于-0.8℃低温保存72h后,分别使用流式细胞术测定细胞存活率及死亡率,谷丙转氨酶(ALT)及乳酸脱氢酶(LDH)释放,尿素合成功能及白蛋白分泌功能.结果:UW液较Celsior液和HTK液显著提高了零下非结冰保存72h的L-02细胞的存活率(71.10%±4.09%vs65.22%±4.45%,50.48%±5.13%,均P<0.05);降低了细胞死亡率(29.90%±4.09%vs34.78%±4.45%,49.52%±5.13%,均P<0.05);抑制了ALT(6.18U/L±1.36U/L vs8.15U/L±1.14U/L,9.75U/L±2.45U/L,均P<0.05)和LDH(93.82U/L±5.68U/Lvs115.67U/L±8.77U/L,164.92U/L±15.95U/L,均P<0.05)释放;更好地维持了L-02细胞尿素合成功能(1.08mmol/L±0.22mmol/Lvs0.92mmol/L±0.17mmol/L,0.68mmol/L±0.08m m o l/L,均P<0.05)和白蛋白分泌功能(9.33mg/L±1.36mg/L vs7.54mg/L±1.22mmol/L,7.18mg/L±0.93mg/L,均P<0.05).结论:同Celsior液和HTK液相比,使用UW液零下非结冰(-0.8℃)保存肝细胞可以明显提高复温后细胞存活率,降低低温损伤引起的ALT、LDH释放,有效保护肝细胞尿素合成功能和白蛋白分泌功能.

HTK液和Celsior液在肝移植中的应用研究

目前 ,UW液是器官移植中常用的多器官保存液 ,同时临床应用经验和前瞻性研究表明 ,HTK液和Celsior液在肝脏移植中的应用安全有效 ,是UW液可靠的替代选择。实验研究发现 ,上述两种保存液可以减轻低温缺血和再灌注损伤 ,改善器官保存效果。

Celsior液和UW液保存供肝的前瞻性随机对照研究

目的比较Celsior液和UW液保存供肝的效果。方法随机选取拟行肝移植的患者60例,平均分为两组,一组接受以Celsior液灌洗和冷保存的供肝(Celsior液组)移植,另一组接受以UW液灌洗和冷保存的供肝(UW液组)移植,两组在患者年龄、性别构成、肝功能分级以及原发病、肝移植术式等方面的差异无统计学意义。比较两组供肝组织学变化、术后早期肝功能恢复情况及术后3个月内缺血性胆道狭窄的发生率。结果Celsior液组供肝冷缺血时间为(8.83±1.53)h,UW液组为(9.08±1.85)h。差异无统计学意义(P>0.05)。两组术后早期血清丙氨酸转氨酶、天冬氨酸转氨酶、γ-谷氨酰转移酶、胆红素总量、出血时间及胆汁量的差异无统计学意义(P>0.05),术后3个月内,Celsior液组缺血性胆道狭窄发生率为6.7%(2/30),UW液组为13.3%(4/30),差异无统计学意义(P>0.05)。两组移植肝的组织学改变相似。结论在冷缺血时间一致的情况下,Celsior液保存供肝的效果与UW液相同。

Celsior器官保存液及其研究现状

目的 报道Celsior液的组成特点、保存原理以及动物实验和临床应用研究现状。方法 采用国外文献进行分析与评价。结果 Celsior液属于细胞外液型多器官保存液 ,广泛用于心脏、肾脏、肺脏、肝脏、胰腺等脏器的保存。结论 Celsior液对于各种器官的保存是安全有效的 ,具有与UW液同样的效果 ,而且可以实现单独应用一种冷保存液进行腹腔和胸腔内多器官原位灌洗和保存两个步骤。

三种肝保存液低温保存生物人工肝用C3A细胞的效果比较

目的比较UW液、Celsior液和HTK液4℃常规低温保存生物人工肝用C3A细胞的效果。方法制备好的C3A细胞悬液分以下3组:UW液保存组(UW液组);Celsior液保存组(CS液组);HTK液保存组(HTK液组)。各组细胞于4℃低温保存72 h后,分别测定细胞存活率及死亡率(流式细胞术),丙氨酸氨基转移酶(ALT)及乳酸释放,尿素合成功能及清蛋白分泌功能。结果 UW液及Celsior液比HTK液显著提高了4℃低温保存72 h的C3A细胞的存活率(78.56%±4.67%vs 76.03%±3.53%,60.54%±3.18%,P<0.05);抑制了C3A细胞低温保存时ALT释放及乳酸的释放(P<0.05);更好地维持C3A细胞尿素合成功能[(0.52±0.11)mmol/L vs(0.51±0.06)mmol/L,(0.32±0.05)mmol/L,P<0.05]和清蛋白分泌功能[(1.79±0.26)g/L vs(1.75±0.21)g/L,(1.20±0.17)g/L,P<0.05]。UW液同Celsior液4℃低温保存C3A细胞的效果无差异。结论同HTK液相比,使用UW液或者Celsior液4℃保存C3A细胞可以明显的提高复温后细胞存活率,降低低温损伤引起的ALT释放和乳酸释放,有效的保护肝细胞尿素合成功能和清蛋白分泌功能。

常用心脏保存液及其改良方法

心脏移植是治疗终末期心力衰竭的最佳方案,但由于捐献器官的不足,心脏移植手术的开展受到极大限制。心脏保存液的改良对于扩大移植心脏供体池极为关键,该文介绍UW液、HTK液和Celsior液等3种常见的心脏保存液及其改良方法。

二氮嗪对长时程低温保存移植鼠心ATP酶的影响及意义

目的观察线粒体ATP敏感性钾离子通道开放剂二氮嗪(Diazoxide,DE)对移植鼠心心肌细胞膜Na+-K+-ATPase和肌浆网Ca2+-ATPase活性的影响,并探索DE处理后Celsior液对长时程低温保存鼠心的作用。方法SD雄性大鼠192只随机分为4组,即A组(单纯Celsior液保存5h)、B组(30μmol/L DE+Celsior液保存5h)、C组(30μmol/L DE+Celsior液保存8h)、D组(30μmol/L DE+Celsior液保存10h)。利用改良Heron法大鼠颈部异位心脏移植模型,供体鼠心按各组要求保存后移植于受体,观察移植心脏30s内复跳率、心率;检测心肌细胞膜Na+-K+-ATPase和肌浆网Ca2+-ATPase活性;观察心肌超微结构。结果(1)复跳率和心率:心脏移植术后30s复跳率各组均无显著性差异;B组、C组心率明显较A组、D组快,A组、D组心率差异无显著性意义。(2)两酶活性测定:B、C、D3组心肌细胞膜Na+-K+-ATPase活性随着保存时间的延长呈显著递减性降低,但仍高于A组,仅D组与A组差别无显著性意义;B组、C组肌浆网Ca2+-ATPase活性显著高于D组、A组,D组与A组差别无统计学意义。(3)心肌超微结构:各组心肌结构保护均较好,肌纤维排列整齐,肌节清,线粒体肿胀不明显;B、C、D3组线粒体嵴结构较为清楚。(4)D组和A组各指标差别均无显著性意义。结论移植鼠心在长时程冷缺血期间,DE对心肌组织ATP酶活性有较好的保护作用,此作用随着保存时间的延长而减弱。且DE处理后Celsior液冷保存鼠心10h仍与国际公认的Celsior液安全冷保存时间5h效果相当。