SCL基因反义寡核苷酸对K562和CEM细胞系的作用

干细胞白血病 (SCL)基因是新发现的与白血病发生有关的癌基因。为进一步探讨SCL反义寡核苷酸对白血病细胞的作用 ,本研究应用SCL基因的反义硫代磷酸寡脱氧核苷酸 (AS PS ODN)分别与K562和CEM白血病细胞系作用 ,观察细胞生长、分化、凋亡和SCLmRNA变化。结果显示 :(1 )AS PS ODN对K562和CEM细胞的生长有不同程度的抑制作用 ,并呈量效和时效关系 ;(2 )AS PS ODN作用后K562细胞联苯胺染色阳性率明显增加 ;(3)AS PS ODN作用后K562细胞发生凋亡现象 ,但未观察到CEM细胞凋亡 ;(4)AS PS ODN作用后K562细胞和CEM细胞SCLmRNA表达水平减低 ,同时CEM细胞SIL SCLmRNA表达水平也减低。结论 :AS PS ODN能特异性抑制K562和CEM细胞的增殖 ,减低SCLmRNA和SIL SCLmRNA表达水平 ,同时促进红系分化 。

细胞周期蛋白D3反义寡脱氧核苷酸对白血病细胞系CEM的生长抑制作用

为了研究细胞周期蛋白D3(cyclin D3)过度表达在白血病细胞增殖和白血病发生中所起的作用,选用过度表达cyclin D3的人T细胞白血病细胞系CEM,利用cyclin D3特异的反义寡脱氧核苷酸作用于CEM细胞,观察对CEM细胞生长的影响。经流式细胞术检测,cyclinD3的表达水平明显下降,同时CEM细胞生长明显受到抑制,G_0/G_1期细胞所占比例增大。实验结果说明cyclin D3过度表达在促进白血病细胞增殖中起着重要作用。

肿瘤坏死因子凋亡诱导配体诱导白血病细胞凋亡中抵抗机制的初步探讨

目的初步探讨肿瘤坏死因子凋亡诱导配体(TRAIL)诱导白血病细胞发生凋亡过程中可能存在的抵抗机制。方法用流式细胞仪检测经 TRAIL 处理后,白血病细胞系 K562、CEM 凋亡情况及线粒体跨膜电位的改变;采用 Western blot 检测 TRAIL 处理后细胞凋亡相关蛋白 Bcl-xL、Bax 及内源性半胱天冬酶(caspase)-8表达情况;并用 ELISA 法检测核转录因子(NF)-kB 活性变化。结果经TRAIL 处理后,K562、CEM 细胞出现不同程度的凋亡,其凋亡指数分别为29.98%、14.1%,后者显著低于前者(P<0.001);线粒体跨膜电位下降,分别为73.25%、25.4%(P<0.01);CEM 细胞中内源性caspase-8的表达水平低于 K562细胞,并且两者均表现出 Bcl-xL 表达上升、Bax 表达下降,在 CEM 细胞中 Bcl-xL/Bax 比例为18.8,显著高于 K562细胞 Bcl-xL/Bax 的比值(5.1);并且在 TRAIL 处理 CEM细胞后早期(2 h)即表现出 NF-kB 活性增加(0.48 μmol·L^(-1)·mg^(-1)蛋白),高于 K562细胞(0.326μmol·L^(-1)·mg^(-1)蛋白(P<0.001)。结论 TRAIL 诱导白血病细胞凋亡过程中,CEM 细胞对药物抵抗原因可能与 CEM 细胞内源性 caspase-8表达水平较低、线粒体内膜敏感程度降低、NF-kB 活性早期增加以及 Bcl-2家族蛋白的表达变化有关。