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基于蛋白质反式剪接在大肠杆菌中表达鲎C因子CES多肽
被引量:
6
1
作者
王影影
齐兴梅
+3 位作者
刘涛
祁静
张春
郭玲玲
《基因组学与应用生物学》
CAS
CSCD
北大核心
2013年第6期707-712,共6页
鲎C因子是鲎血细胞中一种对内毒素具有高亲和力的丝氨酸蛋白酶原,可替代鲎试剂用于内毒素检测。鲎C因子N端Cys-EGF-sushi1-sushi2(CES)片段中的sushi1区域是与内毒素结合的关键部位。本研究在sushi1结构域中的特定位点断开CES与内毒素...
鲎C因子是鲎血细胞中一种对内毒素具有高亲和力的丝氨酸蛋白酶原,可替代鲎试剂用于内毒素检测。鲎C因子N端Cys-EGF-sushi1-sushi2(CES)片段中的sushi1区域是与内毒素结合的关键部位。本研究在sushi1结构域中的特定位点断开CES与内毒素结合的功能片段,然后分别和蛋白质内含肽Ssp DnaX的N端片段(IN)和C端片段(IC)连接,并在大肠杆菌中表达,表达产物经亲和层析纯化、复性以及内毒素去除后,利用蛋白质反式剪接系统,在体外诱导该蛋白质内含肽发生剪接,重新得到C因子的CES蛋白,并检测其活性。实验结果表明此重组CES蛋白具有结合内毒素活性,提示在大肠杆菌系统中开发低成本内毒素检测试剂的可行性。
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关键词
反式剪接
内含
肽
东方鲎C因子
ces多肽
内毒素
荧光检测
下载PDF
职称材料
题名
基于蛋白质反式剪接在大肠杆菌中表达鲎C因子CES多肽
被引量:
6
1
作者
王影影
齐兴梅
刘涛
祁静
张春
郭玲玲
机构
苏州大学基础医学与生物科学学院
苏州大学生命科学学院
苏州分子诊断和治疗技术重点实验室
出处
《基因组学与应用生物学》
CAS
CSCD
北大核心
2013年第6期707-712,共6页
基金
便携式细菌内毒素快速检测仪及检测试剂(ZXY2012011)
苏州市分子诊断和治疗技术重点实验室(ZXJ2-012005)
用rAAV位点特异整合载体建立一株治疗帕金森氏症的分泌神经生长因子(GDNF)的成人脑神经星状前体细胞的细胞株(30970880)共同资助
文摘
鲎C因子是鲎血细胞中一种对内毒素具有高亲和力的丝氨酸蛋白酶原,可替代鲎试剂用于内毒素检测。鲎C因子N端Cys-EGF-sushi1-sushi2(CES)片段中的sushi1区域是与内毒素结合的关键部位。本研究在sushi1结构域中的特定位点断开CES与内毒素结合的功能片段,然后分别和蛋白质内含肽Ssp DnaX的N端片段(IN)和C端片段(IC)连接,并在大肠杆菌中表达,表达产物经亲和层析纯化、复性以及内毒素去除后,利用蛋白质反式剪接系统,在体外诱导该蛋白质内含肽发生剪接,重新得到C因子的CES蛋白,并检测其活性。实验结果表明此重组CES蛋白具有结合内毒素活性,提示在大肠杆菌系统中开发低成本内毒素检测试剂的可行性。
关键词
反式剪接
内含
肽
东方鲎C因子
ces多肽
内毒素
荧光检测
Keywords
Trans-splicing
lntein, Taehypleus tridentatus factor C,
ces
peptide, Endotoxin, Fluorescence detection
分类号
Q953 [生物学—动物学]
下载PDF
职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
基于蛋白质反式剪接在大肠杆菌中表达鲎C因子CES多肽
王影影
齐兴梅
刘涛
祁静
张春
郭玲玲
《基因组学与应用生物学》
CAS
CSCD
北大核心
2013
6
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