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CFDA—SE和Hoechst两种荧光标记技术在嗅鞘细胞移植修复脊髓损伤中的应用 被引量:1
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作者 刘劲松 李溪 +3 位作者 吴仕峰 赵峻 李彪 龚跃昆 《昆明医学院学报》 2007年第5期1-4,16,共5页
目的将CFDA-SE和Hoechst两种常用的细胞荧光标记技术在嗅鞘细胞移植修复脊髓损伤中的应用进行比较,选出一种更适合的方法进行推广.方法取20只脊髓完全横断的SD大鼠,其中10只移植用CFDA—SE标记的嗅鞘细胞,另10只移植用Hoechst标记的嗅... 目的将CFDA-SE和Hoechst两种常用的细胞荧光标记技术在嗅鞘细胞移植修复脊髓损伤中的应用进行比较,选出一种更适合的方法进行推广.方法取20只脊髓完全横断的SD大鼠,其中10只移植用CFDA—SE标记的嗅鞘细胞,另10只移植用Hoechst标记的嗅鞘细胞。结果两种标记方法都能成功标记上,但Hoechst对移植后组织的污染率较高,CFDA—SE染色清楚,对受区组织干扰较少.结论CFDA—SE相比Hoechst在嗅鞘细胞移植修复脊髓损伤中进行荧光标记更清楚、更准确,值得推广。 展开更多
关键词 羧基荧光素乙酰乙酸 双苯亚甲胺 嗅鞘细胞 脊髓损伤 荧光标记
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活体染料CFDA-SE在淋巴细胞增殖研究中的应用 被引量:53
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作者 肇静娴 曾耀英 +3 位作者 何贤辉 王南 狄静芳 曾山 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第2期109-111,共3页
目的 :探讨活体染料CFDA SE在淋巴细胞增殖研究中的应用价值。方法 :利用CFDA SE染色、荧光抗体标记和流式细胞术 ,检测淋巴细胞及其亚群在多克隆刺激剂作用下荧光强度的变化 ,并应用相关软件分析其增殖情况。结果 :PDB +ion omycin或C... 目的 :探讨活体染料CFDA SE在淋巴细胞增殖研究中的应用价值。方法 :利用CFDA SE染色、荧光抗体标记和流式细胞术 ,检测淋巴细胞及其亚群在多克隆刺激剂作用下荧光强度的变化 ,并应用相关软件分析其增殖情况。结果 :PDB +ion omycin或ConA刺激 4 8h后均出现淋巴细胞分裂 ,表现为CFSE荧光强度的系列减半。环孢菌素A(CsA)可抑制ConA促进淋巴细胞增殖的作用 ,CFSE荧光无减半。ConA刺激4 8h后 ,出现CD4 + T细胞和CD8+ T细胞增殖不同步的现象 ,72h后这一现象更加明显。经ModFitTM 软件拟合后 ,得到的各项增殖指标显示 ,ConA对CD8+ T细胞的促增殖作用强于对CD4 + T细胞的作用。结论 :CFDA SE染色结合荧光抗体标记和流式细胞术 。 展开更多
关键词 活体染料羧基荧光素乙酰乙酸 cfda-se 淋巴细胞 细胞增殖 荧光抗体标记 流式细胞术
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联合应用活体染料CFDA-SE和SNARF-1检测混合淋巴细胞反应 被引量:8
3
作者 肇静娴 曾耀英 +1 位作者 刘毅 何贤辉 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第3期382-384,387,共4页
目的建立一种能够对单向混合淋巴细胞反应中应答细胞的应答强度进行更全面评价的增殖检测方法。方法BALB/cJ小鼠淋巴结细胞经CFDA-SE标记后作为应答细胞,BALB/cJ或C57BL/6小鼠脾细胞经丝裂霉素C处理后再用SNARF-1标记,作为刺激细胞,进... 目的建立一种能够对单向混合淋巴细胞反应中应答细胞的应答强度进行更全面评价的增殖检测方法。方法BALB/cJ小鼠淋巴结细胞经CFDA-SE标记后作为应答细胞,BALB/cJ或C57BL/6小鼠脾细胞经丝裂霉素C处理后再用SNARF-1标记,作为刺激细胞,进行混合培养。混合培养96h后收获细胞,用流式细胞术进行检测,分析SNARF-1-CFSE+应答细胞的增殖情况,并用ModFitTM软件拟和以获得更多增殖相关指数。结果随着应答细胞分裂代数的增加,CFSE荧光强度逐渐减弱直至与刺激细胞无法分开,通过划除SNARF-1阳性细胞以确定应答细胞,解决了这一问题。应用ModFitTM软件,获得应答细胞的前体频率和增殖指数等多项重要的增殖相关指标。结论联合应用CFSE和SNARF-1染色,结合流式细胞术,可作为评价混合淋巴细胞反应中应答细胞的应答强度的有力工具。 展开更多
关键词 cfda-se SNARF-1 混合淋巴细胞反应 增殖
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视网膜色素上皮细胞移植中CFDA-SE及免疫组化研究 被引量:3
4
作者 刘春艳 孙大卫 +1 位作者 宁静 彭绍民 《眼科新进展》 CAS 2006年第5期321-323,共3页
目的探讨新型染料羧基荧光素乙酰乙酸[5-(and-6)-carboxyfluresceindiacetate,succinimidylester,CFDA-SE]与免疫组化方法相结合在视网膜色素上皮细胞(retinalpig-mentepithelialcells,RPECs)移植中应用的可行性。方法用CFDA-SE(10μmol... 目的探讨新型染料羧基荧光素乙酰乙酸[5-(and-6)-carboxyfluresceindiacetate,succinimidylester,CFDA-SE]与免疫组化方法相结合在视网膜色素上皮细胞(retinalpig-mentepithelialcells,RPECs)移植中应用的可行性。方法用CFDA-SE(10μmol·L-1)标记供体RPECs,37℃下孵育1min,通过玻璃体视网膜显微手术将细胞悬液植入同种异体青紫蓝兔视网膜下腔,分别在30d和60d时处死实验兔,荧光显微镜下观察标记的供体细胞,同时作紧密连接的结构蛋白ZO-1和细胞骨架蛋白Actin的免疫组化分析。结果荧光显微镜下观察到标记的供体RPECs可嵌插于宿主RPECs之间,铺成单层结构,并形成新的细胞间紧密连接,ZO-1、Actin的免疫组化结果经统计分析表明与原位RPECs之间的表达无显著差异(ZO-1:︱t︱=2.05,P<0.05;Actin:︱t︱=2·14,P<0.05)。结论CFDA-SE是一种快捷、稳定、安全的活体细胞染料,可作为理想的标记物应用于RPECs移植中。 展开更多
关键词 视网膜色素上皮细胞 羧基荧光素乙酰乙酸 移植 免疫组化
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干酪乳杆菌Lactobacillus casei 393在鼠消化道内定植能力及分布规律的研究 被引量:4
5
作者 徐义刚 崔丽春 +2 位作者 唐丽杰 赵丽丽 李一经 《中国乳品工业》 CAS 北大核心 2007年第4期20-22,共3页
研究了干酪乳杆菌Lactobacillus casei 393在小鼠肠道中定植能力及分布规律。利用羧基荧光素二乙酸琥珀酰亚胺酯分子探针对干酪乳杆菌Lactobacillus casei 393进行标记,以每只1010mL-1的量,口服途径喂给BALB/c鼠,分别于口服后的第1,3,5,... 研究了干酪乳杆菌Lactobacillus casei 393在小鼠肠道中定植能力及分布规律。利用羧基荧光素二乙酸琥珀酰亚胺酯分子探针对干酪乳杆菌Lactobacillus casei 393进行标记,以每只1010mL-1的量,口服途径喂给BALB/c鼠,分别于口服后的第1,3,5,6 d取其十二指肠、空肠、回肠、结肠等肠段,通过流式细胞仪检测肠内的标记阳性菌。实验结果显示:经口服后第5 d,干酪乳杆菌Lactobacillus casei 393开始在BALB/c鼠肠道中定植,在十二指肠、空肠、回肠、结肠的定植率分别为28.70%,29.77%,15.63%,26.17%,第6 d标记的阳性菌出现明显的生长趋势,阳性检出率分别为71.77%,57.31%,65.44%,53.13%。研究表明干酪乳杆菌Lactobacillus casei 393具有良好的肠道定植能力。 展开更多
关键词 干酪乳杆菌 定植能力 羧基荧光素二乙酸琥珀酰亚胺酯
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氧化苦参碱对刀豆蛋白A刺激的小鼠淋巴细胞增殖影响的研究 被引量:1
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作者 伍斌 蔡小嫦 +3 位作者 曾耀英 王通 王希朝 曾翔凤 《中国现代医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第7期1005-1008,共4页
目的应用荧光染料C FD A-SE(C arboxyfluorescein diacetate,succinim idyl ester)染色检测氧化苦参碱(O xym atrine,O M T)对刀豆蛋白A(C on A)刺激的小鼠淋巴细胞增殖的影响。方法利用C FD A-SE染色,流式细胞术检测小鼠T淋巴细胞在多... 目的应用荧光染料C FD A-SE(C arboxyfluorescein diacetate,succinim idyl ester)染色检测氧化苦参碱(O xym atrine,O M T)对刀豆蛋白A(C on A)刺激的小鼠淋巴细胞增殖的影响。方法利用C FD A-SE染色,流式细胞术检测小鼠T淋巴细胞在多克隆刺激剂C on A和O M T的共同作同下荧光强度的变化,并应用相关软件分析O M T对小鼠淋巴细胞增殖的影响程度。结果培养48h,流式细胞仪检测的淋巴细胞C FSE荧光强度,对照组未出现子代峰,即淋巴细胞没有增殖。C on A组明显的出现3个峰,说明C on A刺激后48h细胞出现了明显的细胞增殖,与对照组相比荧光强度减半明显。在C on A+O M T各剂量组中,高剂量组即O M T500μg/m L组,原代峰显著高于C on A组,各子代峰显著低于C on A组,但与对照组比较差异无显著性,说明O M T明显抑制了淋巴细胞的增殖,中剂量组即O M T125μg/m L组和高剂量组结果一致,说明这一剂量的O M T仍然明显抑制小鼠淋巴细胞的增值,O M T低剂量组即O M T31μg/m L组和C on A组比较差异没有显著性,和对照组比较,各代细胞荧光强度差异有显著性,即这一剂量的O M T对淋巴细胞增殖抑制作用不明显。培养72h后,各组之间荧光强度变化情况与48h的情况基本一致。经C ELLQ uest软件拟合后得到各项增殖指标显示,O M T在500? 展开更多
关键词 cfda—se OMT 淋巴细胞 增殖
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人表皮黑素细胞与角质形成细胞共培养体外模型中黑素小体转运的观察 被引量:15
7
作者 解士海 陈志强 +6 位作者 马鹏程 卜今 周武庆 崔盘根 高建明 李玲珺 范卫新 《临床皮肤科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第5期286-288,共3页
目的:建立人表皮黑素细胞与角质形成细胞共培养的体外模型,并且在模型中观察黑素小体的转运。方法:分别培养人表皮黑素细胞和角质形成细胞,用二乙酰羧基荧光素-琥珀酰亚胺酯(CFDA-SE)标记黑素细胞内黑素小体,然后将两种细胞共培养,并在... 目的:建立人表皮黑素细胞与角质形成细胞共培养的体外模型,并且在模型中观察黑素小体的转运。方法:分别培养人表皮黑素细胞和角质形成细胞,用二乙酰羧基荧光素-琥珀酰亚胺酯(CFDA-SE)标记黑素细胞内黑素小体,然后将两种细胞共培养,并在倒置显微镜和共聚焦显微镜下观察共培养模型中黑素小体由黑素细胞向角质形成细胞的转运。结果:培养至第3天和第7天可在倒置显微镜下观察到黑素细胞与角质形成细胞共同存活,并通过树突发生联系,在共聚焦显微镜下可直接观察到黑素小体由黑素细胞向角质形成细胞的转运。结论:成功建立黑素细胞与角质形成细胞共培养的体外模型,并利用CFDA-SE标记,在共聚焦显微镜下直接观察到黑素向角质形成细胞的转运。 展开更多
关键词 黑素细胞 角质形成细胞 共培养 二乙酰羧基荧光素-琥珀酰亚胺酯
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氧化苦参碱对小鼠淋巴结T细胞增殖的双向作用(英文) 被引量:7
8
作者 伍斌 谢红付 +2 位作者 李罗丝 张江林 李建国 《中国现代医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第4期492-496,500,共6页
目的检测氧化苦参碱(Oxymatrine,OMT)对刀豆蛋白A(ConA)刺激的小鼠淋巴结T细胞增殖的影响,探讨OMT对免疫系统的作用机制,为临床用OMT治疗免疫相关性疾病提供理论和实验依据。方法利用CFDA-SE染色,流式细胞术检测淋巴细胞在多克隆刺激剂C... 目的检测氧化苦参碱(Oxymatrine,OMT)对刀豆蛋白A(ConA)刺激的小鼠淋巴结T细胞增殖的影响,探讨OMT对免疫系统的作用机制,为临床用OMT治疗免疫相关性疾病提供理论和实验依据。方法利用CFDA-SE染色,流式细胞术检测淋巴细胞在多克隆刺激剂ConA和OMT的共同作同下荧光强度的变化,并应用CELLQuest软件分析OMT对小鼠淋巴结T细胞增殖的影响程度。结果500、125和31μg/mLOMT对小鼠淋巴结T细胞增殖呈剂量依赖性抑制,而16、8、4、2μg/mLOMT对小鼠淋巴结T细胞增殖起促进作用,但其剂量依赖关系不明显。结论CFDA-SE染色和流式细胞术是分析淋巴细胞增殖的有力工具;OMT对小鼠淋巴结T细胞的增殖呈双向作用。 展开更多
关键词 cfda-se 氧化苦参碱 淋巴细胞 增殖
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牛大力多糖对小鼠T淋巴细胞增殖的双向调节作用 被引量:30
9
作者 郑元升 蒲含林 麻建军 《广东药学院学报》 CAS 2008年第1期58-61,共4页
目的从牛大力(Millettia Speciosa Champ.)提取纯化多糖,流式细胞术检测多糖对刀豆蛋白A(Con A)刺激引起的小鼠T淋巴细胞增殖的影响,探讨牛大力多糖对免疫系统的调节作用机制,为临床用牛大力治疗多种慢性疾病提供理论和实验依据。方法... 目的从牛大力(Millettia Speciosa Champ.)提取纯化多糖,流式细胞术检测多糖对刀豆蛋白A(Con A)刺激引起的小鼠T淋巴细胞增殖的影响,探讨牛大力多糖对免疫系统的调节作用机制,为临床用牛大力治疗多种慢性疾病提供理论和实验依据。方法提取、纯化牛大力多糖,利用CFDA-SE染色,流式细胞术检测多糖对Con A刺激引起的小鼠T淋巴细胞增殖的影响。结果终浓度为160μg/mL、800μg/mL、4 mg/mL、20 mg/mL的多糖对小鼠T淋巴细胞增殖呈剂量依赖性抑制,而终浓度为5、25、50、125μg/mL的多糖对小鼠T淋巴细胞增殖起促进作用,剂量依赖关系不明显。结论牛大力多糖对小鼠T淋巴细胞的增殖呈双向调节作用。 展开更多
关键词 牛大力 多糖 T淋巴细胞 cfda-se
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氧化苦参碱抑制二硝基氟苯所致小鼠接触性皮炎及淋巴细胞增殖(英文) 被引量:6
10
作者 陈明亮 伍斌 +4 位作者 谢红付 张江林 杜乾君 李建国 李罗丝 《中国现代医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第24期3685-3689,3693,共6页
目的探讨氧化苦参碱(OMT)对二硝基氟苯(DNFB)所致小鼠变应性接触性皮炎(ACD)的抑制作用及小鼠淋巴细胞增殖的影响。方法建立DNFB所致小鼠ACD模型,以不同剂量的OMT、PBS、氢化可的松(HCT)进行腹腔注射,检测小鼠耳廓肿胀度变化;利用羧基... 目的探讨氧化苦参碱(OMT)对二硝基氟苯(DNFB)所致小鼠变应性接触性皮炎(ACD)的抑制作用及小鼠淋巴细胞增殖的影响。方法建立DNFB所致小鼠ACD模型,以不同剂量的OMT、PBS、氢化可的松(HCT)进行腹腔注射,检测小鼠耳廓肿胀度变化;利用羧基荧光素乙酰乙酸(CFDA-SE)染色,流式细胞术检测OMT对小鼠淋巴细胞增殖的影响。结果OMT对DNFB所致小鼠ACD呈剂量依赖性抑制作用,且与同等剂量HCT作用效果相似,但副作用明显减小;体外实验证明,在500、125和31μg/mL组OMT对小鼠淋巴细胞增殖呈剂量依赖性抑制。结论OMT对DNFB所致小鼠ACD有显著的抑制作用,而且抑制小鼠淋巴细胞增殖;OMT是一种免疫抑制剂。 展开更多
关键词 二硝基氟苯变应性接触性皮炎 氧化苦参碱 羧基荧光素乙酰乙酸 淋巴细胞 增殖
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人脐血单个核细胞移植在急性肝损伤小鼠肝脏中的定植能力研究
11
作者 袁璐萍 王驹 马炬明 《浙江中医药大学学报》 CAS 2013年第5期497-501,510,共6页
[目的]研究人脐带血单个核细胞(huMNCs)在急性肝损伤小鼠肝脏中定植能力。[方法]将小鼠随机分为肝损伤A549移植组,肝损伤huM-NCs移植组,正常小鼠A549移植组,正常小鼠huMNCs移植组和肝损伤盐水对照组。用羧基荧光素二乙酸盐琥珀酰亚胺酯(... [目的]研究人脐带血单个核细胞(huMNCs)在急性肝损伤小鼠肝脏中定植能力。[方法]将小鼠随机分为肝损伤A549移植组,肝损伤huM-NCs移植组,正常小鼠A549移植组,正常小鼠huMNCs移植组和肝损伤盐水对照组。用羧基荧光素二乙酸盐琥珀酰亚胺酯(CFDA SE)标记细胞,将染色细胞经动物脾脏注入,细胞移植后不同时间点取标本检测荧光信号值并计算相应脏器所占注入细胞总量的百分比。[结果]6h、12h肝损伤huMNCs移植组肝脏中染色细胞滞留百分比高于肝损伤动物对照细胞A549移植组和正常小鼠huMNCs移植组(P<0.05)。[结论]huMNCs能够在受损肝脏中有一定程度的定植,但定植时间短暂,细胞输入12小时后在肝脏中的滞留情况不再有差异。 展开更多
关键词 cfdase A549 人脐带血单个核细胞 肝损伤
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羧基荧光素琥珀酰亚胺酯标记肿瘤细胞的条件优化
12
作者 夏爽 秦箐 +3 位作者 高明星 刘全军 王闻楚 邝晓聪 《现代医药卫生》 2011年第5期649-651,共3页
目的:探讨化学染料羧基荧光素二乙酸盐琥珀酰亚胺酯(CFDA-SE)标记肿瘤细胞的可行性和最适条件。方法:用不同标记时间、不同浓度、不同培养浓度的CFDA-SE标记肿瘤细胞TCA(舌癌)。结果:20 min内荧光强度与标记时间成正比;荧光强度的持续... 目的:探讨化学染料羧基荧光素二乙酸盐琥珀酰亚胺酯(CFDA-SE)标记肿瘤细胞的可行性和最适条件。方法:用不同标记时间、不同浓度、不同培养浓度的CFDA-SE标记肿瘤细胞TCA(舌癌)。结果:20 min内荧光强度与标记时间成正比;荧光强度的持续时间与标记时间成正比,但标记时间超过20 min后,荧光持续时间无明显变化;提高标记时染料浓度,可适当延长荧光持续时间;将试剂盒浓度1/4染料加入培养基中,荧光持续效果最好。结论:CFSE标记肿瘤细胞的影响因素较多,不可用于肿瘤细胞长时间培养的实验;但可用于短时肿瘤细胞标记,确定最佳标记时间为10 min,标记浓度为试剂盒所示浓度,共培养时将试剂盒浓度1/4的染料加入培养基中荧光持续效果最好,且实验操作简单,结果易观察。 展开更多
关键词 cfda-se 肿瘤细胞 最适条件
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建立SD大鼠胃左动脉肝细胞移植的动物模型
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作者 冯渊 彭勇 +1 位作者 杨均均 段文涛 《西部医学》 2020年第7期976-979,共4页
目的建立经SD大鼠颈动脉途径胃左动脉插管移植肝细胞的动物模型。方法将20只SD大鼠经颈动脉插管进入腹腔干,临时阻断脾动脉及肝总动脉,将亚甲蓝注入胃左动脉,观察亚甲美蓝的分布;将CFDA SE标记的肝细胞注入胃左动脉,通过荧光显微镜观察... 目的建立经SD大鼠颈动脉途径胃左动脉插管移植肝细胞的动物模型。方法将20只SD大鼠经颈动脉插管进入腹腔干,临时阻断脾动脉及肝总动脉,将亚甲蓝注入胃左动脉,观察亚甲美蓝的分布;将CFDA SE标记的肝细胞注入胃左动脉,通过荧光显微镜观察肝细胞在胃的分布情况。结果亚甲美蓝染胃成蓝色;荧光显微镜发现CFDA SE标记的肝细胞在胃壁显示。结论经胃左动脉移植CFDA SE标记的肝细胞成功分布于胃壁的肌层及黏膜下层,成功建立经SD大鼠颈动脉途径插管经胃左动脉的动物模型,为研究肝细胞移植提供一种新的动物模型。 展开更多
关键词 颈动脉 胃左动脉 肝细胞移植 动物模型 cfda se
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IL-13Rα2致敏的DC—CTL对人胶质瘤干细胞的体外杀伤效应 被引量:2
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作者 沈国良 郑伟明 +5 位作者 孙顺进 苏志鹏 朱丹化 叶盛 涂明 唐建平 《中华神经外科杂志》 CSCD 北大核心 2012年第5期490-494,共5页
目的比较IL-13Rα2致敏的DC—CTL对人胶质瘤干细胞和普通胶质瘤细胞的体外杀伤效应。方法用神经干细胞无血清培养法培养出U251胶质瘤干细胞并进行免疫荧光鉴定,GM—CSF、IL-4体外诱导成树突状细胞(DCs),与人工合成的IL-13Rα2(345-... 目的比较IL-13Rα2致敏的DC—CTL对人胶质瘤干细胞和普通胶质瘤细胞的体外杀伤效应。方法用神经干细胞无血清培养法培养出U251胶质瘤干细胞并进行免疫荧光鉴定,GM—CSF、IL-4体外诱导成树突状细胞(DCs),与人工合成的IL-13Rα2(345-354)多肽孵育后再激活T淋巴细胞,CFDA—SE/PI双荧光染料标记的流式细胞计数法检测其对U251胶质瘤干细胞和普通U251胶质瘤细胞的体外杀伤作用。结果IL-13Rα2(345-354)抗原肽致敏的Dc—CTL对U251胶质瘤干细胞的杀伤率为(18.59±1.42)%,高于未用抗原肽致敏的DC—CTL及CIK对胶质瘤干细胞的杀伤率,其杀伤率分别为(10.35±0.98)%和(7.15±0.58)%,差异具有统计学意义(P〈0.001)。同时,IL-13Rα2(345-354)抗原肽致敏的DC—CTL对U251胶质瘤干细胞的杀伤率也高于其对普通U251细胞(11.53±0.65)%的杀伤率(P=0.001)。结论IL-13Rα2(345-354)致敏的Dc—CTL在体外对胶质瘤干细胞具有杀伤作用,且杀伤率高于对普通的胶质瘤细胞。 展开更多
关键词 IL-13RΑ2 胶质瘤干细胞 树突状细胞 cfda—se/PI
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柔嫩艾美耳球虫DF-1细胞培养体系的建立及应用 被引量:10
15
作者 姜连连 林矫矫 +7 位作者 韩红玉 董辉 赵其平 朱顺海 马卫娇 程军 曾艳波 黄兵 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2011年第6期551-556,共6页
为了建立柔嫩艾美耳球虫的鸡胚成纤维传代细胞(DF-1)培养体系,并应用于柔嫩艾美耳球虫子孢子的细胞入侵活力检测,将CFDA-SE标记的子孢子接入DF-1细胞,利用流式细胞仪测定子孢子的细胞入侵活力。比较了37℃和41℃培养温度下,子孢子对DF-1... 为了建立柔嫩艾美耳球虫的鸡胚成纤维传代细胞(DF-1)培养体系,并应用于柔嫩艾美耳球虫子孢子的细胞入侵活力检测,将CFDA-SE标记的子孢子接入DF-1细胞,利用流式细胞仪测定子孢子的细胞入侵活力。比较了37℃和41℃培养温度下,子孢子对DF-1、MDBK、Vero、BHK、MDCK五种细胞的入侵活力。优化了在子孢子入侵活力检测时,DF-1细胞最佳培养条件。结果表明,柔嫩艾美耳球虫子孢子在DF-1细胞中可发育为第一代裂殖子。在不同培养温度下,子孢子对DF-1细胞的入侵活力均高于其他细胞。优化后的DF-1细胞培养体系的培养程序为:用含100mL/L胎牛血清的DMEM稀释DF-1细胞,以每孔1×105个细胞铺被24孔板,37℃、50mL/L CO2培养24h后,用含50mL/L胎牛血清的DMEM换液后,每孔接入3×105个子孢子,41℃、50mL/L CO2培养8~12h,收集细胞进行检测。 展开更多
关键词 柔嫩艾美耳球虫 鸡胚成纤维细胞 入侵活力 cfda-se
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白脉散有效成分组调控神经干细胞增殖的实验研究 被引量:2
16
作者 刘庆山 陈小玉 +1 位作者 庄述娟 李克琴 《中国中药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第21期3776-3781,共6页
神经干细胞(NSCs)具有替代及修复受损神经组织的作用,研究发现能够通过调控NSCs内环境诱导其增殖分化,重塑神经功能,从而修复脑卒中神经病变等神经系统损伤。本实验研究了蒙药白脉散有效成分组(BMECG)激活NSCs增殖的药理学作用。通过建... 神经干细胞(NSCs)具有替代及修复受损神经组织的作用,研究发现能够通过调控NSCs内环境诱导其增殖分化,重塑神经功能,从而修复脑卒中神经病变等神经系统损伤。本实验研究了蒙药白脉散有效成分组(BMECG)激活NSCs增殖的药理学作用。通过建立体内外2种损伤模型,模拟脑卒中神经病变,分别利用流式细胞术、行为学检测、Nestin免疫组化等方法研究BMECG的脑保护作用机制。结果表明,BMECG能够显著提高体外培养NSCs增殖能力,有助于小鼠的行为学功能恢复,明显改善模型小鼠大脑皮层NSCs增殖能力。因此BMECG直接针对NSCs增殖存活能力发挥作用,可能是治疗脑卒中神经病变的机制之一,该药物具有重要的研究意义和广阔的应用前景。 展开更多
关键词 白脉散 有效成分组 神经干细胞 脑卒中 羧基荧光素乙酰乙酸琥珀酰亚胺酯染色法
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TNF-α在体外具有促进猪卵泡内膜细胞增殖的作用 被引量:1
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作者 洪岭 滕晓明 +5 位作者 李昆明 龚瑶 张燕 杨芳 张博 童晓文 《华西医学》 CAS 2010年第1期46-48,共3页
目的:研究肿瘤坏死因子(TNF-α)对猪卵泡内膜细胞增殖情况的影响,探讨TNF-α在多囊卵巢综合征(P-COS)发病机制中的作用。方法:在体外培养的猪卵泡内膜细胞培养液中加入TNF-α(10、100和1000 pg/mL),采用CFDA SE细胞增殖检测试剂盒和流... 目的:研究肿瘤坏死因子(TNF-α)对猪卵泡内膜细胞增殖情况的影响,探讨TNF-α在多囊卵巢综合征(P-COS)发病机制中的作用。方法:在体外培养的猪卵泡内膜细胞培养液中加入TNF-α(10、100和1000 pg/mL),采用CFDA SE细胞增殖检测试剂盒和流式细胞仪观察TNF-α对卵泡内膜细胞增殖情况的影响。结果:72 h后TNF-α(100和1000 pg/mL)组卵泡内膜细胞平均荧光强度(MFI)明显低于对照组,有统计学差异。结论:TNF-α具有促进卵泡膜细胞增殖的作用,这个现象可能与PCOS患者发生卵巢白膜增厚、卵泡膜细胞增生病变有关。 展开更多
关键词 TNF-Α PCOS cfda se 卵泡内膜细胞
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