CFL1与头颈鳞状细胞癌预后不良及免疫检查点阻断疗法耐受相关

目的探究丝切蛋白1(Cofilin1,CFL1)是否与头颈鳞状细胞癌(HNSCC)预后不良及免疫检查点阻断疗法耐受相关。方法下载并分析来自不同公共数据库的HNSCC转录组和临床数据,通过生物信息学分析研究CFL1与HNSCC预后、潜在致病机制、免疫浸润、免疫检查点和免疫治疗反应的关系。结果CFL1与HNSCC患者不良预后相关,进一步分析发现CFL1过表达与免疫细胞浸润相关,参与肿瘤免疫逃逸,并且导致HNSCC患者肿瘤免疫功能障碍和排斥的评分升高。结论CFL1表达升高与HNSCC的不良预后、免疫浸润和免疫检查点逃逸相关,并导致HNSCC患者对免疫查点阻断疗法耐受。

CFL1的表达对前列腺癌进展影响的研究

目的:探讨CFL1在前列腺癌中的表达情况,并明确其对前列腺癌进展的影响。方法:采用免疫组化、qPCR及Western blot检测CFL1的表达情况,采用Transwell实验检测细胞的迁移及侵袭能力,CCK-8实验检测细胞的增殖能力。结果:在恶性程度高的前列腺癌中,CFL1的蛋白及mRNA表达水平最高,恶性程度低的次之,良性前列腺增生最低(P<0.05);Transwell实验表明si-CFL1组较si-NC组,其迁移和侵袭能力均降低(均P<0.05);CCK-8实验显示敲低CFL1后,前列腺癌细胞的增殖能力降低(P<0.05)。结论:CFL1在前列腺癌中高表达,而减低其表达水平可以抑制前列腺癌的进展。

CFL1RNAi慢病毒的构建及其对人脐静脉内皮细胞的增殖抑制作用

目的观察干扰CFL1对HUVEC的增殖抑制作用。方法以cfl1基因为模板,设计RNA干扰靶点,构建cfl1基因RNAi慢病毒;慢病毒感染人脐静脉内皮细胞HUVEC后采用realtimePCR鉴定CFL1RNAi慢病毒感染效果,采用CCK-8法检测HUVEC细胞的增殖抑制情况。结果 CFL1RNAi慢病毒干扰HUVEC细胞后realtimePCR证实CFL1 RNAi慢病毒可下调cfl1基因的表达;CCK-8法证实cfl1基因表达下调可抑制HUVEC细胞的增殖。结论 CFL1 RNAi慢病毒感染HUVEC细胞后可明显抑制cfl1基因表达,抑制HUVEC细胞增殖。

白假丝酵母CFL1基因通过转录调控参与氧化压力应答

【背景】CFL1基因是白假丝酵母高铁还原酶基因,介导胞外铁离子的还原,在白假丝酵母胞内铁稳态的维持方面发挥着重要作用。【目的】研究CFL1基因调节氧化压力应答的分子机制。【方法】采用液体培养及巨噬细胞模型,测定CFL1缺失对氧化压力耐受性和杀伤巨噬细胞能力的影响;使用羟基自由基清除剂二甲基亚砜(DMSO)分析其对缓解氧化压力敏感性的影响;采用实时荧光定量PCR分析CFL1缺失对氧化压力应答基因表达的影响;采用过氧化氢酶(CAT)活性测定方法研究CFL1缺失对CAT1基因表达的影响;通过构建WT-CAT1-GFP和cfl1Δ/Δ-CAT1-GFP菌株分析过氧化氢酶基因过表达对cfl1Δ/Δ氧化压力敏感性的影响。【结果】白假丝酵母CFL1基因的缺失会造成杀伤巨噬细胞能力的减弱,氧化压力应答基因表达的下降。过氧化氢酶基因的过表达则能恢复与野生型几乎一致的氧化压力水平。【结论】CFL1基因通过转录调控参与白假丝酵母氧化压力应答过程。

AAMP通过调节YAP信号通路促进骨肉瘤细胞转移的机制研究

目的研究AAMP在骨肉瘤细胞中的作用,探索AAMP通过YAP信号通路调节骨肉瘤细胞侵袭转移的机制。方法利用公共测序数据分析AAMP与骨肉瘤的相关性,q-PCR、Western blot、免疫组织化学检测骨肉瘤细胞中相关分子表达水平,CCK-8检测细胞增殖能力,Trans-well、划痕实验检测骨肉瘤细胞的侵袭、转移能力,免疫荧光检测相关分子的细胞定位及表达。结果AAMP高表达与骨肉瘤患者预后负相关(P<0.05),AAMP在转移性骨肉瘤患者中表达水平升高(P<0.05)。与对照组相比,敲低AAMP后骨肉瘤细胞的迁移、侵袭和EMT活性明显下降(P<0.05)。敲低AAMP后p-CFL1表达水平减低,且细胞板状伪足明显减少(P<0.05)。AAMP和YAP在骨肉瘤细胞中表达呈正相关(P<0.05)。进一步验证了干扰YAP表达可以影响骨肉瘤细胞的迁移和侵袭能力。结论AAMP通过调节YAP信号通路促进骨肉瘤细胞转移,提示AAMP可能为促进骨肉瘤侵袭转移的关键分子。

下调磷酸甘油酸激酶1对胶质瘤U373细胞的放疗增敏作用及其机制的研究

目的研究下调磷酸甘油酸激酶1(PGK1)对U373细胞的放疗增敏作用;探讨PGK1参与的放疗增敏的可能机制。方法建立放射抵抗U373(RR-U373)细胞;采用Lipofectamine^(TM) 2000将shRNA-PGK1转染至U373细胞;对照组为0 Gy,处理组为5 Gy放射治疗。应用MTT法、划痕实验、Matrigel侵袭实验分别检测放疗前后各组细胞的增殖能力、迁移能力和侵袭能力; Western-Blot法检测各组细胞PGK1、CIN(chronophin)和丝切蛋白1(cofilin 1,CFL1)蛋白表达量。结果在U373细胞和RR-U373细胞中,相对于对照组,下调PGK1的细胞在放疗前后的增殖、迁移及侵袭能力均减弱;下调PGK1表达后,CIN、CFL1蛋白表达水平降低。结论下调U373细胞中PGK1的表达对胶质瘤U373细胞有放疗增敏作用。PGK1可能通过调节CIN、CFL1蛋白表达影响胶质瘤细胞对放射的敏感性。