CFSE标记技术的研究进展

羧基荧光素乙酰乙酸（CFSE）标记细胞与流式细胞仪相结合的技术在免疫学领域应用越来越广泛。该技术已经由淋巴细胞扩展到应用于肿瘤细胞、干细胞、自然杀伤细胞（NK细胞）甚至是细菌的研究,由检测细胞增殖拓展到体内示踪等研究。此外,对于该项技术的热点还集中在对其数据的分析、与传统方法的比较以及标记的方法的研究。尤其是对细胞增殖的结果的定量分析已经成为生物数学领域的一个热点,也为机制研究提供了更丰富的信息。羧基荧光素乙酰乙酸具有动态检测细胞增殖动力学,在单细胞水平上供信息等优势,有替代传统方法（如^3H掺入法、MTT法等）的趋势。

比较不同浓度CFSE荧光标记脐血细胞后存活率的实验研究

目的比较使用CFSE作为荧光标记物标记脐血细胞后各组细胞存活率的实验研究。方法使用5μmol/L、10μmol/L、15μmol/L、20μmol/L、25μmol/L、30μmol/L浓度的CFSE工作液对脐血细胞进行标记并计算每组细胞的细胞存活率,进行统计分析。结果 6组不同CFSE终浓度之间的细胞存活率存在显著性差异(P<0.05),且随着CFSE终浓度的增加,细胞存活率有一定程度的下降。不同时间之间的细胞存活率存在显著差异(P<0.01),随着时间的推移,细胞存活率不断下降,且时间差异要比浓度之间的差异显著。结论 CFSE标记的脐血细胞随培养时间延长存活率下降,而浓度对细胞存活率影响较时间小。

大鼠骨髓间充质干细胞与Sertoli细胞体外共培育的免疫负调作用

目的探讨骨髓间充质干细胞(BMSCs)与Sertoli细胞(SCs)体外共培育时对免疫应答的调节作用,为两者联合应用于移植修复提供线索。方法用密度梯度离心法分离SD大鼠脾脏单个核细胞(简称L),羧基荧光素二醋酸盐琥珀酰亚胺酯(CFSE)标记细胞后,将其加入按照不同的比例混合的BMSCs与SCs共培育体系,设立L细胞为对照组,L+刀豆蛋白A(ConA)、BMSCs+L+ConA、SCs+L+ConA、BMSCs+SCs+L+ConA四大组细胞为实验组。培养4 d,通过流式细胞术分析T淋巴细胞的增殖情况。结果单个核细胞培养体系中加入ConA可以显著刺激T淋巴细胞增殖。BMSCs、SCs均可抑制淋巴细胞增殖,抑制作用随加入BMSCs和SCs的比例增加而增强,BMSCs和SCs混合培养后对淋巴细胞增殖抑制作用进一步增强,且在某些浓度时呈现协同性。结论 BMSCs与SCs体外共培育时可增强免疫抑制作用。