强精煎对实验性大鼠睾丸c-kit蛋白和CFTR蛋白表达的影响

目的观察强精煎对实验性大鼠睾丸c-kit蛋白和CFTR蛋白表达的影响。方法 75只雄性成年SD大鼠分5组,除空白组外,采用环磷酰胺诱导少、弱精子症大鼠模型。空白组和模型组大鼠予生理盐水,黄精赞育胶囊组给予黄精赞育胶囊1.11 g/(kg·d),强精煎低剂量组予强精煎免煎颗粒6 g/(kg·d),强精煎高剂量组予12 g/(kg·d)。采用免疫组化技术检测睾丸c-kit蛋白和CFTR蛋白表达。结果 c-kit光密度值分别为模型组13.70±3.61,空白组59.40±12.29,黄精赞育胶囊组50.11±4.86,强精煎低剂量组26.90±3.74,强精煎高剂量组52.44±5.11,除黄精赞育胶囊组和强精煎高剂量组外,其余各组间光密度值比较均有统计学意义;各组CFTR光密度值分别为模型组3.26±1.07,空白组59.24±11.33,黄精赞育胶囊组35.78±8.78,强精煎低剂量组26.61±3.59,强精煎高剂量组40.17±14.81。分别经强精煎和黄精赞育胶囊干预后,c-kit和CFTR蛋白表达均明显上调,除黄精赞育胶囊组和强精煎高剂量组外,其余各组间光密度值比较均有统计学意义。结论强精煎和黄精赞育胶囊均不同程度上调了c-kit蛋白表达,可能通过这一途径促进了精原细胞的分化,促进精子发生,改善生精障碍;上调了CFTR蛋白表达,调控精子发生,调节精子获能,提高受精能力,以上可能是其治疗少、弱精子症的机制之一。

强精煎对少、弱精子症大鼠CFTR蛋白表达的影响

目的:观察强精煎对少、弱精子症大鼠睾丸及附睾精子CFTR蛋白表达的影响。方法:75只雄性成年SD大鼠随机分为模型组、正常组、黄精赞育胶囊组、强精煎低剂量组、强精煎高剂量组,除正常组外,采用环磷酰胺诱导少、弱精子症大鼠模型。正常组和模型组大鼠给予生理盐水;黄精赞育胶囊组给予黄精赞育胶囊;强精煎低、高剂量组给予强精煎免煎颗粒低、高剂量。采用Western blot检测睾丸CFTR蛋白表达,细胞间接免疫荧光检测附睾精子CFTR表达率。结果:模型组、正常组、黄精赞育胶囊组、强精煎低剂量组、强精煎高剂量组睾丸组织CFTR蛋白相对表达量分别为(0. 31±0. 03)、(1. 63±0. 05)、(1. 28±0. 03)、(0. 52±0. 03)、(1. 30±0. 09);附睾精子CFTR蛋白表达率(%)分别为:(0. 199±0. 079)、(0. 770±0. 075)、(0. 609±0. 068)、(0. 293±0. 086)、(0. 653±0. 089)。与模型组相比,强精煎低、高剂量组和黄精赞育胶囊组CFTR蛋白在睾丸、附睾精子的表达均显著上调(P <0. 05),强精煎高剂量组和黄精赞育胶囊组表达水平无显著差异(P> 0. 05)。结论:强精煎不同剂量均可不同程度增加了CFTR蛋白表达,调控精子发生,调节精子获能,提高受精能力,以上可能为其治疗少、弱精子症的机制之一。

先天性双侧输精管缺如患者睾丸组织中CFTR蛋白的表达及意义

目的通过观察中国CBAVD患者CFTR蛋白在睾丸组织中的表达水平,探讨其与睾丸生精功能之间的关系。方法免疫组化检测66例中国先天性双侧输精管缺如患者睾丸组织CFTR蛋白表达水平并对睾丸生精功能进行评分,探讨先天性双侧输精管缺如患者CFTR蛋白的表达情况以及其与睾丸生精功能的关系。结果免疫组化结果显示CFTR蛋白可表达于睾丸内支持细胞及生精上皮细胞,以细胞膜和细胞浆为主;CFTR蛋白在CBAVD患者睾丸生精上皮及支持细胞的表达以阳性和弱阳性为主,比例分别为50%(33/66)和37.87%(25/66),部分患者可见阴性表达,比例为4.54%(3/66);睾丸生精Johnsen评分7~10分的比例分别为4.45%(3/66)、40.9%(27/66)、42.42%(28/66)和12.23%(8/66)。部分患者存在生精功能障碍。CFTR蛋白在睾丸组织中的表达与生精功能强正相关性,相关系数为0.785(P<0.01)。结论BAVD患者睾丸内的CFTR蛋白表达以阳性和弱阳性为主;部分CBAVD患者存在生精功能障碍,CFTR蛋白在睾丸组织中的表达水平与生精功能存在强正相关性。

CFTR蛋白在鼻息肉和正常下鼻甲黏膜中的表达

目的:探讨囊性纤维跨膜转运调节因子(CFTR)在鼻息肉发病机制中的作用。方法:采用免疫组织化学SP法检测28例慢性鼻窦炎患者鼻息肉组织(鼻息肉组)和7例正常下鼻甲黏膜(下鼻甲组)中CFTR蛋白的表达情况。结果:①CFTR在上述2组组织均有表达,主要表达于上皮细胞和分泌细胞,并且优势表达于鼻息肉。CFTR在正常下鼻甲黏膜呈较为单一的顶上膜表达,而在鼻息肉中呈顶上膜表达和细胞质表达并存;②鼻息肉组CFTR的黏膜上皮阳性细胞顶上膜表达的强度值(1.921±0.310)显著高于下鼻甲组(0.971±0.214)(P<0.05)。鼻息肉组CFTR的上皮阳性细胞质表达的强度值(2.036±0.439)亦显著高于下鼻甲组(0.550±0.366)(P<0.05)。结论:氯离子通道CFTR蛋白的过度表达和异常表达可能在鼻息肉的发病机制中起重要的作用。

茶多酚对十二指肠溃疡模型黏膜碳酸氢盐转运蛋白的作用

目的研究茶多酚对十二指肠溃疡黏膜碳酸氢盐转运蛋白的影响,并探讨其作用机制。方法收集正常人群和十二指肠溃疡患者十二指肠组织,采用Western印迹、免疫组化和RT-聚合酶链反应(PCR)检测组织中碳酸氢盐转运蛋白囊性纤维化跨膜传导调节因子(CFTR)和离子交换体(SLC)26A3的变化。将40只SD大鼠随机分为对照组、模型组、低剂量组(茶多酚100 mg/kg)及高剂量组(茶多酚300 mg/kg)各10只。采用盐酸半胱胺(300 mg/kg)皮下注射法建立十二指肠溃疡模型,造模后48 h,各给药组采用灌胃法给药,对照组和模型组给予同等剂量生理盐水。观察大鼠的进食、体重等情况,连续给药4 w后处死大鼠,选取十二指肠溃疡处标本,采用苏木素-伊红(HE)染色法观察不同组溃疡变化情况,采用Western印迹、免疫组化和RT-PCR检测组织中碳酸氢盐转运蛋白CFTR和SLC26A3的变化。结果与正常组织比较,十二指肠溃疡组织十二指肠黏膜组织碳酸氢盐转运蛋白CFTR和SLC26A3蛋白及mRNA含量降低,差异有统计学意义(P<0.05)。与模型组相比,低、高剂量组十二指肠黏膜中CFTR和SLC26A3蛋白及mRNA表达增加,差异有统计学意义(P<0.05)。结论茶多酚能提高十二指肠溃疡模型十二指肠溃疡黏膜碳酸氢盐转运蛋白CFTR和SLC26A3的表达,增加碳酸氢盐的分泌,保护十二指肠黏膜。

定量检测囊性纤维化跨膜传导调节因子BA-ELISA方法的建立与评价

目的：建立一种定量检测囊性纤维化跨膜传导调节因子（CFTR）的生物素-亲和素ELISA（BA-ELISA）方法并评价其可靠性。方法：优选设计CFTR三个表位的大肠杆菌表达抗原,免疫新西兰白兔获得CFTR多克隆抗体,用纯化后的抗体包被酶标板,并用生物素对其标记,从人精子提取CFTR作为抗原,用辣根过氧化物酶偶联的亲和素检测,优化两种抗体浓度及实验参数,建立可定量检测CFTR蛋白的双抗体夹心BA-ELISA方法;用临床精子标本评估所建立方法的重复性、特异性等。结果：CFTR包被抗体和生物素化CFTR抗体最适浓度分别为4μg/ml和10μg/ml,最佳封闭液为1%BSA-PBST,抗原与包被抗体最佳反应时间60 min,底物显色最佳时间15 min。批内、批间变异系数分别为2.16%~9.23%和2.29%~11.71%,包被的CFTR抗体与精子胞浆蛋白无交叉反应,最低检出下限为0.15 ng/ml,标准反应曲线具有良好的线性关系R2=0.962。结论：成功创建了定量检测CFTR蛋白的ELISA方法,具有特异性强、灵敏度高等特点。

鱼类离子细胞及离子通道的研究进展

渗透压调节与鱼类生命活动密切相关,离子细胞与离子通道是渗透压调节的重要细胞和通路。本文结合近期国内外在渗透压调节方面的研究热点,论述鱼类离子细胞与离子通道的研究进展,并做出展望。主要从离子细胞的命名演变及离子细胞亚型的类型和两种离子通道的研究进展进行论述。离子细胞的命名从"氯细胞(chloride cells,CCs)"、"线粒体丰富的细胞(mitochondrion-rich cells,MRCs或MR)"发展到"离子细胞(ionocytes)",其中还有PNA+、PNA-、Ⅰ型MR细胞、Ⅱ型MR细胞、Ⅲ型MR细胞、Ⅳ型MR细胞相继因不同的功能而被独立进行命名。两种离子转运通道是:囊性纤维化跨膜传导调节蛋白(cystic fibrosis transmembrane conductance regulator,CFTR)和Na+/K+/2Cl-协同转运蛋白(NKCC),CFTR在离子细胞的尖端处表达,而NKCC则在离子细胞基底进行表达调控,两者在渗透压调节中处于下游层次,可直接反应离子调控的水平。

tezacaftor／ivacaftor联合治疗携带双拷贝F508del突变囊性纤维化的Ⅲ期临床试验报告

囊性纤维化（CF）是由囊性纤维化跨膜电导调节因子（CFTR）基因突变导致CFTR蛋白功能缺陷或缺失所致的罕见遗传性疾病，目前已发现的CFTR基因突变大约有2000个，其中F508del突变是导致CF的最常见病因；tezacaflor和ivacaftor是两个靶向药物，

新型囊性纤维化治疗药Ivacaftor在美国获准上市

美国FDA近期已批准Vertex制药公司开发的首个针对囊性纤维化（CF）病因——cF跨膜转导调节蛋白（CFTR）基因突变的新型口服CF治疗药ivacaftor（Kalydeco）用于CFTR基因发生G55lD突变的6岁或以上年龄的CF患者。CF为一种致死性遗传疾病，可引发慢性肺部感染及进行性肺损伤，并累及其他器官，最终可导致患者过早死亡。