粒单系造血祖细胞CFU-GM琼脂半固体培养的原位固定及鉴定染色

用粒单系造血祖细胞 (CFU- GM)体外琼脂半固体培养法 ,琼脂块原位固定 ,Wright染色与细胞化学和免疫细胞化学技术 ,对培养人的骨髓 CFU- GM进行集落性质鉴定。结果表明 :Wright染色能区别集落的性质及细胞的分化程度 :CFU-GM的细胞中 PAS、POX呈阳性反应 ;CD14、CD15分别在单核细胞和粒细胞的胞浆或胞膜上表达。该方法对鉴定细胞集落类型、集落中细胞的分化与成熟程度是简便可靠的手段。

二羧乙基锗三氧化物体外对正常人CFU-GM产率的影响

利用CFU-GM培养技术,探讨了Ge-132在体外对正常人CFU-GM产率的影响.结果表明,Ge-132在体外能显著增加CFU-GM产率,而且有效剂量范围大;去除贴壁细胞对Ge-132的造血刺激作用无明显影响,但除去T淋巴细胞,这种促进作用消失.把Ce-132直接加入无集落刺激活性(CSA)的培养体系中,未见集落生长.这些结果表明,Ge-132并非直接作用于粒-单祖细胞.

放射损伤小鼠骨髓VEGF、CFU-GM、CFU-F的变化及川芎嗪对其影响的研究

目的:探讨放射损伤小鼠骨髓血管内皮细胞生长因子(VEGF)、骨髓粒巨噬细胞集落形成单位(GFU-GM)数和骨髓成纤维细胞集落成单位(CFU-F)的变化意义及川芎嗪对其的影响。方法:健康昆明小鼠经6.0Gy60Coγ照射后,立即喂饲川芎嗪并设对照组和正常组,分别于第3、7、14、21天检测其骨髓VEGF、CFU-GM和CFU-F的变化。结果:照射后第3、7、14 d骨髓VEGF表达水平显著降低,但川芎嗪组高于对照组;随着时间推移骨髓VEGF表达水平逐渐恢复,照射后第21 d川芎嗪组已恢复正常(P>0.05),而照射组仍低于正常组。照射后骨髓CFU-GM和CFU-F明显受到抑制,但川芎嗪组显示了良好的保护作用。结论:放射损伤后小鼠骨髓VEGF的表达变化在造血功能的恢复过程中起重要作用;川芎嗪具有改善骨髓造血功能的作用。

四物汤及各单味药的含药血清对粒系-巨系造血祖细胞集落(CFU-GM)的影响

目的 :研究四物汤及各单味药对粒系 -巨系造血祖细胞集落 (CFU - GM)的影响 ,更近于真实地反映药物在体内作用的实际情况 ,以进一步探讨四物汤补血作用的配伍机制。方法 :采用血清药理学体外实验法。结果 :四物汤能明显促进造血祖细胞的增殖 ,单味药当归的作用最强 ,单味药熟地黄、川芎的作用也较正常对照组有增强趋势 ,而单味药白芍对 CFU - GM的增殖似无作用。几种受试药的作用强弱顺序可排列如下 :当归 >四物汤 >川芎 >熟地黄 >白芍。结论 :上述结果提示在促进 CFU - GM的增殖方面 ,四物汤的生血补血作用源于当归 ,川芎与熟地黄似有一定的协同作用 ,而白芍不表现协同作用。

抗急非淋M_2和M_5型白血病单抗对骨髓粒-单核细胞集落形成(CFU-GM)的影响

为了使单抗用于骨髓净化和导向药物的研究,应用分泌抗急非淋M_2和M_5型单抗1D_1和1A_1,观察对正常骨髓粒-单核细胞集落形成单位(CFU-GM)的影响。结果实验组与对照组比较无显著性差异,说明单抗对CFU-GM没有影响,不损伤正常骨髓造血干细胞,为M_2和M_5型单抗用于骨髓净化和导向药物的研究提供实验依据。

小鼠胎肝造血基质细胞系对CFU-GM生长的调控作用

利用本实验室建立的小鼠胎肝造血基质细胞系(MFLSC)研究了造血基质细胞对粒-巨噬系造血祖细胞(CFU-GM)生长的影响。实验结果表明,MFLSC对CFUGM集落的生成有双向调控作用,即既有刺激性作用,又有抑制性影响。这种调控有体液因子之中介,亦有细胞与细胞间近距离的效应。文中讨论了MFLSC双向调控CFUGM生长的意义及其机理。

G-CSF和GM-CSF体外对骨髓增生异常综合征患者CFU-GM和CFU-E的作用

用造血祖细胞体外培养方法观察G－CSF和GM－CSF对36例MDS患者造血相细胞的作用，结果发现：①MDS患者CFU－E、CFU－GM明显低于非血液病对照患者；②RA型患者CFU－GM数量明显低于RAEB、RAEB－T型；③G－CSF和GM－CSF体外可明显刺激非血液病对照患者和MDS患者CFU－GM数量增加，在一定范围内作用与剂量呈正相关；④患者自身的CFU－GM增殖能力愈差，对小剂量G－CSF或GM－CSF的反应愈差，但大剂量时这种差异不明显。以上结果提示G－CSF和GM－CSF可成为治疗MDS伴粒细胞减少的有效药物。

小鼠粒一单系祖细胞(CFU-GM)培养中几个影响因素的观察分析

目的 :观察分析影响小鼠粒单系祖细胞 (ColonyFormUnit GranulocyteandMonocyte ,CFU GM )在体外生长的因素 ,建立本实验室常规 ,稳定的CFU—GM培养方法。方法 :在含血清、刺激因子、培养液、琼脂和骨髓有核细胞 (BoneMarrowCell,BMC)的培养体系中 ,分别变换血清种类、刺激因子来源、琼脂配制方法和BMC浓度 ,计数、比较祖细胞集落。结果 :在其它条件相同时 ,马血清和新生小牛血清组的集落产率分别为 72± 12 9和 34± 4 78,P <0 0 1;第一次培养的鼠肌条件培养液和第二次培养的鼠肌条件培养液作为刺激因子组的集落产率分别为 5 8 2 5± 11 6 8和 44 5± 7 46 ,P <0 0 1,经冻存并自然融化后去除上清液的鼠肌条件液和未去除上清液的鼠肌条件液作为刺激因子组的集落产率分别为 42± 2 13和 6 0± 12 6 49;P <0 0 1,以三蒸水配制的琼脂和D -Hank’s液配制的琼脂作为支撑物 ,集落产率分别为 18 5 7±3 33和 42 5± 1 93 ,P <0 0 1;在含马血清、第一次培养的鼠肌条件液和D Hank’s液配制的琼脂的体系中 ,集落产率与所种入BMC的浓度的相关系数r =0 .91。结论 :在BMC浓度和培养液不变的条件下 ,以马血清为血清 ,第一次培养的肌条件液为刺激因子 ,D Hank’s液配制的琼脂为支撑物 ,集落产率最高 ,且方法稳?

rhG-CSF和rhSCF对正常猴外周血白细胞和CFU-GM数的影响

为了观察重组人干细胞因子 (rhSCF)和 (或 )粒细胞集落刺激因子 (rhG CSF)动员外周血干细胞的效果 ,本研究将 15只正常成年猕猴分成 3组 ,每天 1次 ,连续 14天分别皮下注射赋形剂、rhG CSF 10 μg/ (kg·d)和rhSCF5 0 μ/ (kg·d) +rhG CSF 10 μ/ (kg·d)。结果表明 ,单独给rhG CSF组的外周血白细胞数最高值在给药后第 7天出现 ,为给药前值的 4 11% ,其后很快下降。联合给药组外周血白细胞数最高值在第 9天出现 ,为给药前值的 5 38% ,第 7至第 9天的外周血白细胞数在 5 35 % - 5 38%之间。单独给药组外周血CFU GM最高值在给药后第 5天为给药前值的 937% ,联合给药组在第 9天为 1175 %。结论 :rhG CSF对外周血干 /祖细胞有明显的动员作用 ,rhSCF +rhG CSF联合动员的效果优于rhG

rhIL-2对人骨髓CFU-GM与CFU-E和BFU-E的影响

目的:为了探索rhIL-2对人骨髓造血干祖细胞体外增殖的影响。方法:本文采用甲基纤维素体外半固体培养法。结果:证明了50～1000U/ml rhIL-2单用时对人骨髓造血祖细胞的CFU-GM、CFU-E及BFU-E无直接刺激增生作用,当与GM-CSF联合应用时,100～400U/ml rhIL-2其CFU-GM集落形成率明显高于单用GM-CSF(100U/ml)的对照组(P<0.05),当与EPO(2U/mi)联合应用时其CFU-E,及BFU-E集落形成率也明显高于单用EPO对照组(P<0.05),而1000U/ml rhIL-2其三种集落形成数目呈下降趋势,可能有抑制作用。结论:以上结果说明100～400U/ml rhIL-2可应用于协同GM-CSF及EPO体外扩增骨髓干/祖细胞来进行骨髓移植。

国产rhG-CSF对骨髓细胞培养CFU-GM的影响

目的 观察国产重组人粒细胞集落刺激因子 (rh G- CSF)对人和小鼠骨髓细胞生长的影响。 方法 将国产rh G- CSF10、5 0、10 0 ng/ ml分别加入已制备的人和小鼠的骨髓有核细胞 ,进行 CFU- GM定向培养后 ,分别统计集落数。 结果 rh G- CSF对人和小鼠骨髓来源的 CFU- GM集落数均有不同程度刺激生长的活性 ,且呈剂量依赖关系 ,其作用与日本生产的惠尔血相似。 结论 国产重组人粒细胞集落刺激因子 (rh G- CSF)

用CFU-GM Do值推断人体辐射敏感性

本文研究了动物与人体CFU-GM辐射敏感性与整体辐射敏感性的关系。结果表明,给小鼠全身1次照射不同剂量后取骨髓培养CFU-GM,与体外直接照射骨髓细胞的结果相比较,它们的D_O值分别为1.33Gy和1.23Gy,二者十分相近。通过对小鼠与人体各个个体CFU-GM辐射敏感性的测定,它们的D_O值差异很大,最大值与最低值相差2倍多。在慢性粒细胞白血病病人经全身^(60)Coγ—射线照射治疗的经过中,以及在骨髓移植的病例中,都观察到CFU-GM D_0值的大小能反映出全身照射后的辐射效应。

前列腺素F2α对小鼠骨髓细胞CFU-GM增殖的双向调控作用

通过体外半固体琼脂培养分别观察PGF_(2α)对小鼠骨髓细胞CFU-GM增殖和骨髓细胞DNA合成的影响。测定结果表明,PGF_(2α)对CFU-GM及骨髓细胞具有双向调控作用。PGF_(2α)浓度在10^(-10)～10^(-8)mol/L时表现为刺激增殖作用,PGF_(aα)浓度在10^(-9)mol/L时刺激作用最强,集落形成比对照组多34.1%,~3H-TdR掺入率增加44.5%,而PGF_(2α)大于10^(-7)mol/L时则表现为抑制作用。集落形成与~3H-TdR掺入率的50%抑制率的PGF_(2α)浓度均接近于10^(-5)mol/L。同时,~3H-TdR掺入率的改变提示PGF_(2α)对CFU-GM增殖的调节是通过影响细胞内DNA合成来实现的。集落形态学分类结果表明,PGF_(2α)对粒系,巨噬系、粒单混合系三类型集落形成都表现为双向调控作用,而粒系对PGF_(2α)反应最为敏感。

单抗免疫导向药物3Al-DM对CFU-GM的效应试验

应用抗Ｔ淋巴细胞单抗（ＭｃＡｂ）３Ａｌ－柔霉素（ＤＭ）免疫结合物，在体外对骨髓粒－单 核细胞集落形成单位（ＣＦＵ－ＧＭ）进行导向杀伤效应试验。结果与Ｂ细胞单抗－ＤＭ结合物十分近 似。说明单抗３Ａｌ－ＤＭ对ＣＦＵ－ＧＭ没有影响，不损伤正常骨髓造血干细胞，为３Ａｌ－ＤＭ用于体外 骨髓净化提供实验依据。

Graves病粒细胞减少患者骨髓CFU-GM生长的研究

目的 :体外研究Graves病 (GD)患者骨髓CFU -GM的生长情况。方法 :11名正常对照 ,16名GD患者(11名为白细胞减少 ,5名为粒细胞缺乏 ) ,进行外周血检测 ,骨髓检查和CFU -GM的体外培养。结果 :GD粒细胞缺乏患者CFU -GM体外生成率显著低于正常对照组 ,而白细胞减少组患者CFU -GM的生成率与对照组比较无显著差异。结论 :GD患者出现白细胞减少时 ,虽然外周血中白细胞数目和粒细胞比例已明显降低 ,但处于这一时期的患者骨髓尚有一定的代偿能力。在粒细胞缺乏阶段 ,骨髓功能受到严重影响 ,CFU -GM明显减少。

再生障碍性贫血患者骨髓CFU-GM及血清细胞毒试验18例临床分析

目的 :探讨再生障碍性贫血 (简称再障 )的体液免疫抑制发病机理。方法 :对 18例再障患者 (急性再障 6例、慢性再障 12例 )进行骨髓CFU GM培养及血清细胞毒试验。结果 :16例骨髓CFU GM培养集落数明显低于正常对照组(P <0 0 1) ,15例存在有造血干细胞缺陷、细胞和体液免疫异常及微环境异常 ,病人血清经 5 6℃ 30min水浴灭活前后对正常骨髓CFU GM的刺激作用明显不一 ,而且在同属于造血干细胞缺陷的病例中急性再障与慢性再障比较也有显著性差异。结论 :骨髓CFU GM及血清细胞毒试验在对再障体液免疫抑制发病机理研究中起有协同作用。

用流式细胞光度术研究PGE_2对小鼠骨髓CFU-GM细胞周期的影响

在一定PGE_2浓度(4.8×10^(-9)mol/L)作用下,小鼠骨髓细胞CFU-GM经4.5d和7d培养后,其增殖状态下的细胞G_n/G_r期细胞数均比对照组增加,S期细胞数减少,G_2+M期细胞数也有下降,但不明显。在不同PGE_2浓度(2.8×10^(-9)～2.8×10^(-6)mol/L)作用下,经4d培养,随着PGE_2浓度增加,G_n/G_1期细胞数递增,而S期细胞数却随PGE_2浓度增加而减少,G_2+M细胞数也减少,但与PGE_2剂量关系不明显。以上实验结果提示,PGE_2主要抑制G_1期细胞向S期细胞的转化,阻断S期细胞生长。 此外,通过流式细胞光度术(FCM)对小鼠骨髓细胞CFU-GM集落细胞的前向角和90°散射光测定,与对照组比较,前者无变化,后者变化较明显。此结果表明,PGE_2对细胞内部颗粒的折光度有影响。

姜黄素对小鼠CFU-GM及WEHI-3B细胞增殖的影响(英文)

用体外半固体集落培养方法 ,观察不同浓度姜黄素 ( 10 - 8～ 10 - 4 mol·L- 1 )对BALB/c小鼠骨髓粒 巨噬系祖细胞 (CFU GM)及骨髓单核系白血病干细胞 (WEHI 3B细胞系 )增殖的影响。结果显示 ,姜黄素呈剂量依赖性抑制CFU GM和WEHI 3B细胞增殖 ,其半抑制剂量 (IC5 0 )分别为 1.0 36× 10 - 5 mol·L- 1 和 1.2 2 0× 10 - 6 mol·L- 1 。表明姜黄素对WEHI 3B白血病细胞的抑制作用强于对CFU

Inhibitory effect of IFN on CFU-GM antagonized by some hemopoietic stimulators

The PE of murine CFU-GM effected by three types of CSF,HCS,Li2CO3 and Na2SeO4,all of which used to be able tO reverse the inhibitory effectof IFN on CFU-GM,were reported in this paper.The results were as follows:The three types of CSF could antagonize partially the inhibitory effect of IFN onCFU-GM,trace Na2SeO4 and Li2CO3 could stimulate the proliferation ofCFU-GM,and increase more than 200% of the PE inhibited by IFN,trace HCSalso could reverse partially the inhibition of IFN on CFU-GM.

N-2-羟乙基哌嗪-N'-2-乙磺酸液缓冲的培养基培养CFU-GM的优化选择

研究了标准培养条件下不同浓度Ｎ－２－羟乙基哌嗪－Ｎ’－２－乙磺酸（ＨＥＰＥＳ）液配制的培养体系对在体外温育不同时间的粒细胞单核细胞系统造血祖细胞（ＣＦＵ－ＧＭ）增殖和分化的影响。结果表明：随温育时间的延长，培养体系的ｐＨ值增加，ＣＦＵ－ＧＭ产率减少；培养体系中加入适量ＨＥＰＥＳ液可稳定ＣＦＵ－ＧＭ的产率；实验前未调ｐＨ的培养体系中，可提高ＣＦＵ－ＧＭ的产率；ＨＥＰＥＳ液还影响集落的类型，提示配制ＣＦＵ－ＧＭ培养体系以加ＨＥＰＥＳ液者为优。