PHA激活的脐血T细胞条件培养液对人骨髓CFU-c的抑制

本文研究了PHA刺激18小时收获的脐血T细胞条件培养液(PHA-TCM)对正常人骨髓CFU-c的影响。结果显示PHA-TCM能够显著抑制CFU-c的生长,这种抑制与PHA-TCM浓度有关。并发现经PHA-TCM作用后M型集落比例明显降低。PHA-TCM中未检出IFN和IL-2活性。进一步研究证实,PHA-TCM中CFU-c抑制活性是一种对酸碱敏感对热相对不敏感的蛋白质,其分子量大于10,000道尔顿。

CFU-C培养技术在血液病中的应用

近几年来,CFU-C培养技术已较广泛地应用于临床,并为临床诊断、治疗和预测预后提供了一种检测手段。我院对40例不同类型的血液病患儿做了CFU-C培养的检测,发现不同的血液病CFU-C形成数量有显著差异,现将结果报告如下。本组病例均系住院儿。各类血液病均经骨髓检查确诊,并符合全国血液学术会议制定的有关标准。

粒系造血祖细胞(CFU-C)培养方法的改进

造血祖细胞的培养技术是一门新技术。国内有不少单位将其应用于临床,近几年来,造血祖细胞培养技术在造血机理,病因分析及预后判断等方面取得了可喜的进展。CFU—C 培养技术,国内由于各实验室条件不一,成功率差异很大。鉴于这些情况,我室通过近半年的实践摸索,在葛氏、吴氏的方法上进行综合,基本上建立了一套适应我们条件的培养方法。现介绍于后。材料和方法一、器材37℃恒温箱、超净工作台、30mm

毫米波照射对小鼠外周血像及^(60)Co γ射线照射后骨髓细胞CFU-C生成量的影响

我们用毫米波照射小鼠,观察毫米波对小鼠外周血像及^(60)Coγ射线照射后骨髓细胞CFU—C生成量的影响。发现:①小鼠经36 GHz,1mW/cm^2毫米波照射15或30min,每天1次,连续5d,其外周血中白细胞和淋巴细胞均增加,在正常值以上波动,持续2周以上,只是在第11～13天,淋巴细胞明显下降至正常值以下。②用3mW/cm^2毫米波照射小鼠骨髓悬液30或60min,可见到骨髓CFU—C生成量增加。③对于小鼠经3Gy^(60)Coγ射线照射后,所致之骨髓细胞损伤,该毫米波有使之减轻的作用。

P物质体外对骨髓CFU-GM和CFU-C21的影响

目的：探讨Ｐ物质与造血的关系。方法：采用甲基纤维素半固体造血祖细胞培养法检测正常血浓度的ＳＰ以及不同浓度的ＳＰ对骨髓ＣＦＵ－ＧＭ和ＣＦＵ－Ｃ２１的作用。结果：１０＾－１０ｍｏｌ．Ｌ＾－１和１０＾－１１ｍｏｌ．Ｌ＾－ＳＰ组ＣＦＵ－ＧＭ的产率分别为１９３±１９和２０６±４０，与对照相比具有显著差异；１０＿１６－ｍｏｌ．Ｌ＾－１和１０＾－１１ｍｏｌ．Ｌ＾－１ＳＰ对ＣＦＵ－Ｃ２１也有明显刺激作用。

白细胞减少症骨髓 CFU-C 的测定(摘要)

本文应用体外半固体培养法测定白细胞减少症患者的骨髓单个核细胞的粒系祖细胞(CFU-C)的集落及集丛数,以探讨此病的发病原因。材料和方法一、骨髓来源1.病人骨髓:均采自11例经临床、血象。

人胎肝造血祖细胞(CFU-C)的分离和保存

开展对不同来源造血细胞的分离和低温保存研究[1,2],对于促进临床造血干细胞移植,有着重要的意义。在人和动物的胚胎发育中,肝脏是一个重要的造血器官.

小鼠淋巴细胞培养上清液对CFU-C增殖的放大作用——淋巴细胞造血调控因子的初步探索

淋巴细胞对造血干细胞的增殖有放大作用。这种放大作用,通过活化的淋巴细胞和造血干细胞相互作用过程中产生的某种物质即“淋巴细胞造血调控因子”(Lymphocyte Modulating Factor,LMF)来实现的。

抗胸腺细胞球蛋白对人胎肝及骨髓粒系祖细胞(CFU-C)的毒性比较

本文比较了兔抗人胸腺细胞球蛋白对成年人骨髓和胎儿肝脏粒系祖细胞(CFU—C)和T淋巴细胞的毒性,反映了这二类细胞都存在着相应的细胞表面抗原,而且,它们的反应性随个体发育和细胞的成熟而增强。

补肾生髓Ⅰ号对小鼠实验性再生障碍性贫血的治疗作用

目的 :研究补肾生髓Ⅰ号治疗再生障碍性贫血的可能机制。方法 :利用补肾生髓Ⅰ号治疗 60Co-γ射线照射后所致的再生障碍性贫血小鼠 ,并观察小鼠外周血细胞计数、骨髓有核细胞数、骨髓GM -CFU -c及小鼠IL -1、IL -2和IL -6活性的变化。结果 :补肾生髓Ⅰ号治疗后 ,再生障碍性贫血小鼠的外周血细胞计数、骨髓有核细胞数及骨髓GM -CFU -c显著增高 ,小鼠IL-1和IL-6活性明显增加 ,IL -6水平增高至接近正常 ,且与IL -1呈显著正相关 (r=0.904) ;治疗组IL -2水平虽有所下降但无统计学意义。结论 :补肾生髓Ⅰ号可通过提高外周血三系及骨髓有核细胞数 ,促进骨髓GM -CFU -c的形成 ,并通过调节免疫活性因子IL -1、IL -2和IL -6的活性 ,进而促进骨髓造血重建。

1727份公共库脐带血的质量分析——附23份库存脐带血干细胞解冻质控分析

目的评估公共库存脐带血造血干细胞的质量及脐血库用于质控的血样是否能够正确反应实际血袋内的脐带血造血干细胞的活性和数量。方法分析2009年1月-2010年12月按照Rubinsten标准分离入库保存的1 727例合格脐带血造血干细胞,通过流式细胞术和集落培养法计算造血干细胞数量,血细胞计数仪计数细胞数量、应用气相液氮系统深低温冷冻造血干细胞。分析入库细胞总数(TNC)的影响因素,以及与CD34+总数、集落形成单位(CFU-C)总数的相关性;对冷冻时间>24个月的23份脐带血造血干细胞解冻后,分析解冻前后血袋、冷冻麦管内和冻存管内的细胞数、CFU-C产率、CD34+百分比、活细胞比率,并推算血袋内TNC、CD34+细胞数、CFU-C总数。结果1 727份脐带血平均血量为(96.62±20.41)m L,入库TNC、CD34+总数、CFU-C总数分别为(9.88±2.54)×108个、(2.76±1.85)×106个、(11.05±7.72)×105个,CD34+总数和CFU-C总数与TNC相系数均为0.49,CD34+百分比与CFC产率相关系数为0.80。23份解冻脐带血冷冻前后血袋、冷冻管和冷冻麦管内WBC(×109/L)分别为28.03±8.01、22.55±6.56、20.43±5.23,TNC(×108)为10.74±3.33、58±2.90、7.78±2.28、7.97±2.73、台盼兰拒染率(%)99.0±0、83.04±6.21、78.9±6.56、80.43±6.01(P<0.01);冷冻前和解冻后血袋、冷冻管,冷冻麦管的CFU-C产率(/105)分别为159.9±45.8、149.2±37.4、91.6±35.8、155.0±41.2,冷冻管内CFU-C产率明显下降(P<0.05);冷冻前和解冻后血袋、冷冻管,冷冻麦管的CFU-C总数(×105)分别为159.9±45.8、149.2±37.4、91.6±35.8、155.0±41.2,解冻后冷冻管内CFU-C总数下降明显(P<0.05);血袋、冷冻管和麦管内的小细胞数量(×108)分别为3.92±1.40、3.95±1.77、3.86±1.46、4.05±1.52,CD34+总数(×106)为3.23±1.84、3.02±1.88、3.12±1.85、3.62±3.07。结论公共库入库的1 727份脐带血符合国际通用标准;解冻后检测分析发现,脐带血冷冻后丢失的细胞以成熟的粒细胞为主,冷冻解冻后的脐带血造血干细胞符合临床应用标准。

组织培养用于小鼠胚胎AGM区造血发育的研究

本研究通过建立组织培养方法探讨小鼠胚胎主动脉-性腺-中肾区(AGM)区造血发育规律。选取小鼠胚胎AGM区作为实验对象,体外组织培养2天后,应用集落形成实验观察髓系祖细胞的数量,应用体内移植考察CFU-S11和造血干细胞的发育。结果表明:组织培养后的AGM区细胞仍然具有形成髓系集落的能力;每个胚胎期10.5天(E10.5)AGM区在致死剂量照射的成年小鼠脾脏中可形成10.8±3.5个CFU-S11。更重要的是,经组织培养的E10.5-E11.5 AGM区能高比例(85.7%)、高嵌合〔(51.12±21.17)%〕、长期(>4个月)重建受致死剂量照射的成年小鼠的造血系统,在受鼠的外周血、骨髓、脾脏、胸腺中均能检测到供体来源的淋系或髓系祖细胞嵌合。结论:应用本研究建立的组织培养体系可对正常或基因突变胚胎AGM区中的多种造血起始细胞(尤其是造血干/祖细胞)进行发育动力学研究。

A New Hematopoietic Stimulating Activity Produced by Fetal Liver Cells

Human fetal liver cells were cultured in vitro for 12h and the supernatant(Fetal liver cell conditioned medium,FLCM)was collected.The effects of FLCM ongranulopoiesis were studied.The results show that when combined with colonystimulating factor(CSF),FLCM could significantly stimulate the proliferation of normalmyctoid progenitor cells(CFU-e),and increase ~3H-TdR incorporation into bone mar-row cells.The data suggest that FLCM contains a CSF synergistic activity.

RNA结合蛋白CELF2在小鼠胚胎造血发育中的功能研究

背景与目的在前期研究中我们发现,RNA结合蛋白CELF2在造血干细胞(hematopoietic stem cell,HSC)前体(pre-HSC)阶段高表达。本研究旨在探究Celf2基因敲除是否影响小鼠胚胎造血干/祖细胞(hematopoietic stem progenitor cell,HSPC)的发育。方法基于单细胞转录组测序数据分析,我们选择Celf2基因作为研究靶标,并利用CRISPR/Cas9技术构建了Celf2基因敲除小鼠模型。以胚胎期(Embryo day,E)第11.5 d(简称E11.5)的Celf^(2+/+)或Celf^(2+/-)小鼠胚胎为对照组,Celf^(2-/-)胚胎为实验组进行实验。对主动脉–性腺–中肾(aorta-gonad-mesonephros,AGM)区和卵黄囊(yolk sac,YS)细胞进行体外造血细胞集落培养(colony forming units-culture,CFU-C),计数其产生造血集落的种类和数量。将对照组和实验组小鼠AGM区细胞分别移植到致死剂量辐照的受体小鼠,分别在移植后的4周、8周和12周检测供体来源细胞的外周血嵌合情况。结果与对照组相比,Celf^(2-/-)胚胎AGM及YS区细胞产生造血集落的种类和数量无显著差异(P值分别为0.1065,0.4683)。Celf^(2-/-)胚胎和对照组胚胎AGM区移植后,受体的外周血均发生了造血重建。结论Celf2敲除不影响E11.5时AGM区和YS组织造血干/祖细胞(hematopoietic progenitor cells,HPCs)的数量和功能,且Celf2敲除后AGM区仍能产生功能性的HSC。

辐射后骨髓造血基质细胞对粒系造血祖细胞生长的影响

本文观察了骨髓造血基质细胞贴壁层及细胞悬液对 GM-CFU-C 生长的影响及照射后的变化。实验结果表明,骨髓基质细胞贴壁层及细胞悬液均有增高 GM-CFU-C 产率的作用。这种刺激性影响与基质细胞贴壁层的细胞密度和细胞悬液的浓度没有依赖关系。1～5Gyγ线照射的骨髓基质细胞贴壁层和细胞悬液支持 GM-CFU-C 集落生成的作用明显削弱。文中讨论了造血基质细胞的辐射损伤在放射病骨髓综合征发病机理中的意义。

小鼠胎肝和骨髓造血基质细胞对粒系造血祖细胞增殖的影响

本文应用体外液体培养方法建立小鼠胎肝和骨髓造血基质细胞贴壁层,在贴壁细胞层上做粒系造血祖细胞集落(GM-CFU-C)培养,观察胎肝造血基质细胞和骨髓造血基质细胞对粒系造血祖细胞生长的影响。实验结果表明,培养1～2周的胎肝造血基质细胞贴壁层能抑制 GM-CFU-C 的集落生成,此抑制作用可被消炎痛拮抗。随贴壁培养时间的延长,胎肝造血基质细胞贴壁层转而增加 GM-CFU-C 产率。不同培养时间的骨髓造血基质细胞贴壁层均能明显地促进 GM-CFU-C 的生长。文中讨论了造血基质细胞与造血的关系以及两种来源造血基质细胞作用不同的可能原因。