癌痛方乙醇提取物对肺癌CGRP/P-CREB信号通路的影响

目的探讨癌痛方乙醇提取物对Lewis肺癌小鼠凋亡、增殖及CGRP/P-CREB信号通路的影响。方法以皮下注射瘤细胞的方法构建C57BL/6小鼠lewis肺癌小鼠模型,随机分为癌痛方乙醇提取物组、模型对照组。各组小鼠给予癌痛方乙醇提取物或等量生理盐水灌胃14天,于第15天处死后称重、剥离肿瘤组织,记录瘤重,计算抑瘤率。HE染色方法观察肿瘤组织细胞的形态学特征,Tunel细胞免疫荧光标记法检测细胞凋亡、Brdu检测细胞增殖水平,Western blot法检测肿瘤组织中相关蛋白表达。结果各组肿瘤质量中,癌痛方乙醇提取物组(0.98±0.21)、与模型对照组(2.2±0.82)有统计学差异(P<0.05)。乙醇组抑瘤率为55.45%。肿瘤组织切片光镜结果表明,模型对照组lewis肺癌小鼠肿瘤肿组织细胞均匀分布,排列紧密;但癌痛方乙醇提取物组lewis肺癌小鼠肿瘤肿组织中细胞肿胀,有多核细胞。在肿瘤细胞凋亡水平上,癌痛方乙醇提取物组能明显提高小鼠肿瘤组织凋亡蛋白表达水平,促进细胞凋亡(P<0.05)。在肿瘤细胞增殖方面,乙醇组能明显抑制小鼠肿瘤组织增殖(P<0.05);蛋白印迹法检测结果显示癌痛方乙醇提取物可明显降低CGRP及P-CREB蛋白的表达水平。结论癌痛方乙醇提取物可诱导小鼠肺癌细胞的凋亡,抑制肺癌细胞的增殖,其作用机制可能是抑制了CGRP/P-CREB信号通路。

“α_2-AR-Gi-AC-cAMP-PKA”信号转导通路与CGRP舒血管效应的机制分析

1降钙素基因相关肽（Colcition gene-rolated pepthde,CGRP）其舒血管效应与病变的研究背景 CGRP是在人和哺乳动物体内存在的一种含37个氨基酸残基的多肽[1]。CGRP是由Amana和Rosenfold等[1,2]于1982年首先发现的,

肠三针介导TRPV1/CGRP信号通路对脓毒症肠道菌群紊乱影响

目的探讨肠三针介导瞬时受体电位香草酸亚型1(TRPV1)/降钙素基因及相关肽(CGRP)信号通路对脓毒症肠道菌群紊乱的影响。方法按随机数字表法将大鼠分为假手术组、模型组、电针组,每组各20只。采用盲肠结扎穿孔术(CLP)制备脓毒症模型,假手术组除不结扎盲肠外,其余手术步骤同其他2组,电针组于术前3 d以及术后6 h给予肠三针干预。收集结肠组织和血液标本,观察肠黏膜病理学变化。检测结肠肠道菌群及血液、淋巴结细菌移位情况,ELISA法检测血清炎症因子水平,Western Blot法检测结肠组织TRPV1、CGRP及Toll样受体-4(TLR-4)表达。结果模型组大鼠肠道菌群多样性降低,电针组较模型组增加(P<0.05);与假手术组比较,模型组大鼠结肠中大肠杆菌含量显著增加,双歧杆菌和乳酸杆菌含量显著减少,血液和淋巴结移位率显著升高,血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素-6(IL-6)水平显著升高,结肠组织TRPV1、CGRP和TLR-4相对表达量显著升高(P<0.05);与模型组比较,电针组大鼠结肠中大肠杆菌含量显著减少,双歧杆菌和乳酸杆菌含量显著增加,血液和淋巴结移位率显著降低,血清TNF-α和IL-6水平显著降低,结肠组织TRPV1、CGRP和TLR-4相对表达量显著降低(P<0.05)。结论肠三针可显著增加脓毒症大鼠肠道菌群多样性及有益菌群含量,减少肠道细菌移位,降低炎症反应,其机制可能与调控TRPV1/CGRP信号通路有关。

基于BDNF/TrkB/p-CREB信号通路探讨血府逐瘀胶囊促进神经再生防治卒中后抑郁的作用及机制

目的探讨血府逐瘀胶囊对卒中后抑郁(post-stroke depression,PSD)大鼠抑郁症状的改善作用,并基于神经再生关键通路脑源性神经营养因子(brain derived neurotrophic factor,BDNF)/酪氨酸激酶受体B(tyrosine kinase receptor,TrkB)/磷酸化环腺苷酸应答元件结合蛋白(phosphorylated cAMP response element-binding protein,p-CREB)探讨其机制。方法采用短暂大脑中动脉梗塞(transient middle cerebral artery occlusion,tMCAO)复合慢性不可预知应激(chronic unpredictable mild stimulation,CUMS)方法复制PSD大鼠模型。大鼠随机分为假手术组、模型组及血府逐瘀低、高剂量(0.43、0.86 g/kg)组和氟西汀(1.8 mg/kg)组,每组18只。连续给予药物干预28 d,利用神经功能评分、糖水偏好实验、旷场实验、强迫游泳实验考察血府逐瘀胶囊对PSD大鼠神经功能损伤以及抑郁症状的改善作用;高效液相色谱-电化学检测法检测额叶皮质及海马神经递质多巴胺(dopamine,DA)和5-羟色胺(5-hydroxytryptamine,5-HT)含量;免疫荧光染色检测海马5-溴脱氧尿嘧啶核苷(5-bromo-2-deoxyuridine,BrdU)、双皮质素(doublecortin,DCX)和巢蛋白(neuroepithelial stem cell protein,Nestin)表达评价神经再生情况;Western blotting检测海马BDNF/TrkB/p-CREB蛋白表达。结果与假手术组比较,模型组大鼠神经功能评分显著提高(P<0.001),糖水偏好率显著下降(P<0.05),强迫游泳不动时间显著增长(P<0.05);前额叶皮质、海马组织DA以及海马组织5-TH含量明显减少(P<0.05);BrdU、DCX阳性细胞数量明显降低(P<0.05、0.01),Nestin阳性细胞数量减少;海马BDNF、TrkB、p-CREB表达显著降低(P<0.05、0.01)。与模型组比较,血府逐瘀胶囊组神经功能评分显著降低(P<0.01),糖水偏好率明显升高(P<0.05),强迫游泳的不动时间明显减少(P<0.05、0.01);前额叶皮质和海马DA、5-TH含量均显著增加(P<0.05、0.01);BrdU、Nestin、DCX阳性细胞数量明显增加(P<0.05、0.01);海马BDNF表达有增加的趋势,TrkB、p-CREB表达均明显增加(P<0.05)。结论血府逐瘀胶囊可通过BDNF/TrkB/p-CREB通路促进神经再生进而发挥治疗PSD作用。

锁阳乙酸乙酯提取物改善慢性应激认知功能障碍MAPK/ERK1/2通路机制

目的探究锁阳乙酸乙酯提取物(ECS)对去势后慢性应激小鼠认知功能障碍MAPK/ERK1/2信号通路中磷酸化的胞外信号调控激酶1/2(P-Erk1/2)和磷酸化的c AMP反应元件蛋白(P-CREB)表达量的影响。方法将实验动物采用随机数字法分为对照组、模型组、ECS组,除对照组外,模型组和ECS组,采用去势后慢性应激造模,ECS组同步灌胃ECS。在造模8周后采用Morris水迷宫检测小鼠空间学习记忆能力,造模成功时取材海马组织检测Western Blot。结果:Morris水迷宫结果显示,模型组较对照组穿越平台次数减少(P<0.01),ECS组较模型组穿越平台次数增加(P<0.01)。Western Blot结果显示,P-Erk1/2蛋白表达量模型组较对照组显著减少(P<0.01),ECS组较模型组显著增加(P<0.01);P-CREB蛋白表达量模型组较对照组显著减少(P<0.05),ECS组较模型组显著增加(P<0.05)。结论 ECS改善去势后慢性应激小鼠认知功能障碍机制之一可能是通过上调MAPK/ERK1/2信号通路中P-Erk1/2与P-CREB的蛋白表达量。

补益脾胃元气方药对SAMP8小鼠学习记忆及海马区PKA/ERK/p-CREB信号通路的影响

目的观察补益脾胃元气类方药人参汤、洗心汤、大补元煎对SAMP8小鼠学习记忆能力和海马区蛋白激酶A(PKA)/细胞外调节激酶(ERK)/磷酸化cAMP反应元件结合蛋白(p-CREB)信号通路的影响,探讨其防治阿尔茨海默病(AD)的作用机制。方法将3月龄SAMP8小鼠随机分为模型组、安理申组、补益脾胃元气类方药组(人参汤组、大补元煎组、洗心汤组),另以3月龄SAMR1小鼠作为对照组,共6组,连续ig给药10周后进行相关指标检测。采用Morris水迷宫实验观察各组小鼠空间学习记忆能力。免疫组化法检测PKA蛋白表达,免疫荧光法检测ERK、p-CREB蛋白表达。蛋白印迹法检测小鼠海马区PKA、p-CREB、ERK蛋白表达。结果与模型组比较,补益脾胃元气类方药各组小鼠逃避潜伏期缩短,在目的象限游泳时间及穿越平台次数增加(P<0.05、0.01);免疫组化结果提示补益脾胃元气类方药各组小鼠海马区PKA蛋白表达量增加;免疫荧光结果提示补益脾胃元气类方药各组小鼠海马区ERK、p-CREB蛋白表达量增加;蛋白印迹实验结果与免疫组化、荧光结果一致(P<0.05、0.01)。结论补益脾胃元气类方药对SAMP8小鼠空间学习记忆有明显的改善作用,其机制可能与改善海马区PKA/ERK/p-CREB信号通路有关。